涉及由多能干细胞向血细胞分化的培养方法与流程

文档序号:11837559阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,包括以下工序:将能够向造血祖细胞或红系祖细胞进行分化的细胞在氧分压上升的环境中进行细胞培养。

2.根据权利要求1所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其中,所述氧分压上升的环境是包括在低氧分压下进行细胞培养的工序的环境。

3.根据权利要求2所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其中,所述低氧分压为0.1~10%。

4.根据权利要求2或3所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其特征在于,所述低氧分压是如下的氧分压:在该分压下进行培养时,与在其它分压下的培养相比,低氧应答性的基因表达。

5.根据权利要求2~4中任一项所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其中,在所述低氧分压下从细胞培养开始进行一定期间的细胞培养后,在更高的氧分压下进一步进行细胞培养。

6.根据权利要求5所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其中,所述一定期间为4~10天。

7.根据权利要求5或6所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其中,所述一定期间是到呈现KDR阳性、CD34阳性、CD43阳性的细胞出现为止。

8.根据权利要求5~7中任一项所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其特征在于,改变至所述更高的氧分压下的时期是成为中内胚层诱导的指标的基因表达的时期、成为造血祖细胞诱导的指标的基因的表达开始的时期、成为分化增殖性细胞因子的指标的基因的表达开始的时期、或者成为血细胞诱导的指标的基因的表达开始的时期。

9.根据权利要求5~8中任一项所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其中,所述更高的氧分压为11~30%的氧分压。

10.根据权利要求1~9中任一项所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其中,能够向所述造血祖细胞或红系祖细胞进行分化的细胞为多能干细胞。

11.根据权利要求1~10中任一项所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其特征在于,所述造血祖细胞或红系祖细胞是从网状结构或拟胚体取得的。

12.根据权利要求1~11中任一项所述的造血祖细胞或红系祖细胞的制备方法,其特征在于,在进行所述细胞培养的培养基中不添加VEGF。

13.一种造血祖细胞或红系祖细胞,是由权利要求1~12中任一项所述的方法制得的。

14.一种血细胞,是将权利要求13所述的造血祖细胞或红系祖细胞进一步培养而制得的。

15.一种医药制剂,包含权利要求14所述的血细胞。

16.一种筛选促进或阻碍向造血祖细胞或红系祖细胞进行分化的物质的方法,其特征在于,使用权利要求1所述的制备方法。

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