一种VDR‑His融合蛋白及其DNA序列、表达和应用的制作方法

文档序号:12104066阅读:来源:国知局

技术特征:

1. 一种VDR-His融合蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

2. 权利要求1所述VDR-His融合蛋白的DNA序列,其DNA序列如SEQ ID No.1所示。

3.一种含有权利要求2所述VDR-His融合蛋白的DNA序列的表达载体。

4.根据权利要求3所述的表达载体,其特征在于:所述表达载体为真核表达载体。

5.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于:所述的真核表达载体为pcDNA3.1/His质粒。

6.一种含有权利要求2所述VDR-His融合蛋白的DNA序列或权利要求3所述表达载体的宿主菌。

7.根据权利要求6所述的宿主菌,其特征在于:所述宿主菌为大肠杆菌。

8.一种权利要求1所述的VDR-His融合蛋白的表达方法,其特征在于:包括以下步骤:

(1)设计扩增人VDR的cDNA序列的上、下游引物,通过PCR扩增程序获得人VDR的cDNA片段;

(2)利用重组技术将人VDR的cDNA片段与6×His tag的cDNA实现连接,其间插入12个甘氨酸cDNA序列,构建真核表达载体;

(3)将步骤(2)得到的表达载体转染到真核细胞中进行表达、纯化。

9.根据权利要求8所述的VDR-His融合蛋白的表达方法,其特征在于:步骤(2)所述的表达载体为pcDNA3.1/His质粒。

10.一种权利要求1所述的VDR-His融合蛋白在维生素D药物的筛选、鉴定以及活性评估的应用。

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