技术总结
本发明提供了一种热稳定性提高的脂肪氧合酶突变体及其构建方法,其中脂肪氧合酶突变体具有如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6中任一种所示的氨基酸序列;构建方法为首先确定鱼腥藻脂肪氧合酶突变位点,然后以重组质粒为模板,在突变位点处利用NNK代替原有密码子设计简并引物,进行全质粒PCR反应,构建3个定点饱和突变库,然后通过转化大肠杆菌和抗性筛选得到3个饱和突变库;最后对3个饱和突变库进行抗性筛选和诱导突变,通过进一步纯化得到纯的脂肪氧合酶突变体。本发明的脂肪氧合酶突变体的热稳定性获得了提高,具有较高的实际应用价值和广阔的市场前景。
技术研发人员:吕凤霞;钱辉;陆兆新;张充;别小妹;赵海珍
受保护的技术使用者:南京农业大学
文档号码:201611019626
技术研发日:2016.11.21
技术公布日:2017.05.31