米诺地尔分子印迹聚合物及其制备方法以及米诺地尔固相萃取柱和分离纯化米诺地尔的方法与流程

本发明涉及米诺地尔检测技术领域，是一种米诺地尔分子印迹聚合物及其制备方法以及米诺地尔固相萃取柱和使用该米诺地尔固相萃取分离纯化米诺地尔的方法。

背景技术：

米诺地尔是20世纪70年代研制的一种钾通道开放剂，主要用于治疗顽固性高血压。米诺地尔是一种二型的5a还原酶抑制剂。因为米诺地尔在高血压的治疗中发现其具有使毛发变长变粗的作用，所以目前它被开发应用作为治疗男性秃发的外用药物。到目前为止，米诺地尔引起头发生长的机制仍然没有完全解释清楚，认为其中包含了多种途径。1988年美国FDA批准米诺地尔可用于治疗男性雄激素性脱发。随着人们生活水平的提高，用药的天然性越来越受到追捧，严密监测米诺地尔产品的含量对于患者用药安全具有重要意义，而随着科学技术的发展，米诺地尔的定量方法也由原质量标准中的分光光度法提高为高效液相色谱法，目前高效液相测定含有米诺地尔的产品中的米诺地尔需要对测定样品进行前处理，具体为：例如：称取0.5g(精确至0.01g)试样于10mL干燥具塞比色管中,加入10mL质量分数为1％三氯乙酸,超声提取10min,再涡旋振荡提取1min,以4 000r/min离心5min,上清液待净化，若样品中油脂含量较高,可用质量分数为1％三氯乙酸溶液饱和的正己烷先除脂,再用SPE柱净化，准确吸取1.0mL待净化液,移至已活化的MCX固相萃取柱中,依次用3mL水、3mL甲醇洗涤,弃去流出液，再用10mL质量分数为5％氨化甲醇洗脱,收集洗脱液，洗脱液于50℃水浴中用氮气吹干后,用甲醇定容至1.0mL，涡旋振荡摇匀,过0.22μm滤膜供HPLC测定。由此可以看出，目前测定产品中的米诺地尔的方法前处理手段操作复杂，并且该前处理手段对样品中米诺地尔的纯化度不高，使得其后续采用高效液相色谱测定时，对样品存在较大的干扰。

技术实现要素：

本发明提供了一种米诺地尔分子印迹聚合物及其制备方法，根据本发明方法得到的米诺地尔分子印迹聚合物对米诺地尔具有较高的亲和性，本发明还提供了一种米诺地尔固相萃取柱以及使用该米诺地尔固相萃取柱进行萃取分离纯化米诺地尔的方法，采用本发明的米诺地尔固相萃取柱进行萃取分离纯化米诺地尔的方法，有效解决了目前测定市售的含有米诺地尔的生发产品中米诺地尔时前处理手段操作复杂、样品干扰大的问题。

本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种米诺地尔分子印迹聚合物，按下述方法得到：

第一步，首先用无机酸对球形硅胶进行回流清洗18小时至24小时得到活化后的硅胶，然后用水将活化后的硅胶洗至中性后烘干至恒重，其中，无机酸与球形硅胶的质量比为5:1至10:1；

第二步，按重量份数计将1份活化后的硅胶分散于10份至25份的有机试剂Ⅰ中得到硅胶分散溶液，接着向其中加入3-氨丙基三乙氧基硅烷对球形硅胶进行硅烷化，硅烷化的反应条件为氮气环境下110℃至150℃反应18小时至24小时，球形硅胶与3-氨丙基三乙氧基硅烷的质量比为1:1至1:1.5，硅烷化反应完成后得到硅烷化硅胶，用有机试剂Ⅱ洗涤硅烷化硅胶除去未反应完的3-氨丙基三乙氧基硅烷，然后将硅烷化硅胶干燥至恒重；

第三步，按1g干燥后的硅烷化硅胶溶解于10ml至20ml甲醇的比例将干燥后的硅烷化硅胶溶解于甲醇中得到硅烷化硅胶甲醇溶液，按干燥后的硅烷化硅胶：4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)：对二甲氨基吡啶：二环己基碳二亚胺的质量比为454.5:11.36:1:8.38至454.5:12.2:1:9.8的比例向硅烷化硅胶甲醇溶液中加入4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)、对二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺，采用超声混合均匀并溶解，在氮气环境下80℃至85℃反应18小时至24小时得到表修饰硅胶混合物，将表修饰硅胶混合物进行过滤后的滤饼用有机试剂Ⅲ进行清洗除去未反应完的4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)、对二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺得到表面修饰硅胶，然后将表面修饰硅胶干燥至恒重；

第四步，将功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔采用超声方式进行混合均匀并溶解得到混合溶液，其中，原料中：印迹分子米诺地尔与功能单体之间物质的量之比为0.005:1至5:1，交联剂与功能单体物质的量之比为0.5:1至20：1，表面修饰硅胶与功能单体物质的量之比为1:1至1：1.5，致孔剂的用量为功能单体、交联剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔总体积的30％至75％，引发剂的用量为功能单体、交联剂、致孔剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔总体积的2％至4％；

第五步，将混合溶液进行聚合得到聚合物；

第六步，将聚合物先进行过滤弃去滤液得到滤饼，然后用有机试剂Ⅳ冲洗滤饼除去其中的没有参加反应的功能单体、交联剂和引发剂，再用有机混合溶液洗脱除去滤饼中的印迹分子米诺地尔得到无印迹分子的聚合物；

第七步，将无印迹分子的聚合物用有机试剂Ⅴ洗至中性，在真空下干燥至恒重得到米诺地尔分子印迹聚合物。

下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：

上述第五步中的聚合采用热引发聚合，热引发聚合的温度为60℃至90℃，聚合反应时间为6小时至48小时；或，第五步中的聚合采用光引发聚合，光引发聚合的条件为：高压汞灯的功率为125W或150W，聚合时间为0.5小时至48小时。

上述第二步中，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用苯洗涤2次至3次，再用丙酮洗涤2次至3次；或，第二步中，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用甲苯洗涤2次至3次，再用乙醚洗涤2次至3次；或，第二步中，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用乙酸乙酯洗涤2次至3次，再用甲醇洗涤2次至3次；或，第六步中的有机混合溶液为甲醇与乙酸按体积比9:1至4:1混合后得到的有机混合溶液；或，第六步中的有机混合溶液为乙腈与乙酸按体积比9:1至4:1混合后得到的有机混合溶液。

上述当印迹分子米诺地尔呈酸性时功能单体选用酰胺类的单体，当印迹分子米诺地尔呈碱性时功能单体选用吡啶类的单体或丙烯酸类的单体，酰胺类的单体为丙烯酰胺或二丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸，吡啶类的单体为2,6-二氨基吡啶或4-乙烯基吡啶(4-VP)或2-乙烯基吡啶，丙烯酸类单体为丙烯酸或甲基丙烯酸或三氯甲基丙烯酸或甲基丙烯酸甲酯或甲基丙烯酸羟乙基酯或甲基丙烯酸二乙胺乙基酯；或/和，交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯或N,N-亚甲基二丙烯酰胺或乙二醇二甲基丙烯酸酯或二乙烯基苯；或/和，致孔剂为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲醇、异丙醇中的一种；或/和，引发剂为有机过氧类或偶氮类化合物；或/和，第一步中，无机酸为盐酸或硝酸，盐酸或硝酸的体积百分数浓度为5％至10％；或/和，第二步中，有机试剂Ⅰ为苯或甲苯或乙酸乙酯；或/和，第三步中，采用有机试剂Ⅲ进行清洗时先用甲醇冲洗2次至3次，再用石油醚冲洗2次至3次；或/和，第六步中的有机试剂Ⅳ为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲、异丙醇中的一种；或/和，第七步中的有机试剂Ⅴ为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲醇、异丙醇中的一种。

本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种米诺地尔分子印迹聚合物的制备方法，按下述步骤进行：第一步，首先用无机酸对球形硅胶进行回流清洗18小时至24小时得到活化后的硅胶，然后用水将活化后的硅胶洗至中性后烘干至恒重，其中，无机酸与球形硅胶的质量比为5:1至10:1，球形硅胶为300目至400目的球形硅胶；

第二步，按重量份数计将1份活化后的硅胶分散于10份至25份的有机试剂Ⅰ中得到硅胶分散溶液，接着向其中加入3-氨丙基三乙氧基硅烷对球形硅胶进行硅烷化，硅烷化的反应条件为氮气环境下110℃至150℃反应18小时至24小时，球形硅胶与3-氨丙基三乙氧基硅烷的质量比为1:1至1:1.5，硅烷化反应完成后得到硅烷化硅胶，用有机试剂Ⅱ洗涤硅烷化硅胶除去未反应完的3-氨丙基三乙氧基硅烷，然后将硅烷化硅胶干燥至恒重；

第三步，按1g干燥后的硅烷化硅胶溶解于10ml至20ml甲醇的比例将干燥后的硅烷化硅胶溶解于甲醇中得到硅烷化硅胶甲醇溶液，按干燥后的硅烷化硅胶：4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)：对二甲氨基吡啶：二环己基碳二亚胺的质量比为454.5:11.36:1:8.38至454.5:12.2:1:9.8的比例向硅烷化硅胶甲醇溶液中加入4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)、对二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺，采用超声混合均匀并溶解，在氮气环境下80℃至85℃反应18小时至24小时得到表修饰硅胶混合物，将表修饰硅胶混合物进行过滤后的滤饼用有机试剂Ⅲ进行清洗除去未反应完的4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)、对二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺得到表面修饰硅胶，然后将表面修饰硅胶干燥至恒重；

第四步，将功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔采用超声方式进行混合均匀并溶解得到混合溶液，其中，原料中：印迹分子米诺地尔与功能单体之间物质的量之比为0.005:1至5:1，交联剂与功能单体物质的量之比为0.5:1至20：1，表面修饰硅胶与功能单体物质的量之比为1:1至1：1.5，致孔剂的用量为功能单体、交联剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔总体积的30％至75％，引发剂的用量为功能单体、交联剂、致孔剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔总体积的2％至4％；

第五步，将混合溶液进行聚合得到聚合物；

第六步，将聚合物先进行过滤弃去滤液得到滤饼，然后用有机试剂Ⅳ冲洗滤饼除去其中的没有参加反应的功能单体、致孔剂、交联剂和引发剂，再用有机混合溶液洗脱除去滤饼中的印迹分子米诺地尔得到无印迹分子的聚合物；

第七步，将无印迹分子的聚合物用有机试剂Ⅴ洗至中性，在真空下干燥至恒重得到米诺地尔分子印迹聚合物。

下面是对上述发明技术方案之二的进一步优化或/和改进：

上述第五步中的聚合采用热引发聚合，热引发聚合的温度为60℃至90℃，聚合反应时间为6小时至48小时；或，第五步中的聚合采用光引发聚合，光引发聚合的条件为：高压汞灯的功率为125W或150W，聚合时间为0.5小时至48小时。

上述第二步中，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用苯洗涤2次至3次，再用丙酮洗涤2次至3次；或，第二步中，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用甲苯洗涤2次至3次，再用乙醚洗涤2次至3次；或，第二步中，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用乙酸乙酯洗涤2次至3次，再用甲醇洗涤2次至3次；或，第六步中的有机混合溶液为甲醇与乙酸按体积比9:1至4:1混合后得到的有机混合溶液；或，第六步中的有机混合溶液为乙腈与乙酸按体积比9:1至4:1混合后得到的有机混合溶液。

上述当印迹分子米诺地尔呈酸性时功能单体选用酰胺类的单体，当印迹分子米诺地尔呈碱性时功能单体选用吡啶类的单体或丙烯酸类的单体，酰胺类的单体为丙烯酰胺或二丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸，吡啶类的单体为2,6-二氨基吡啶或4-乙烯基吡啶(4-VP)或2-乙烯基吡啶，丙烯酸类单体为丙烯酸或甲基丙烯酸或三氯甲基丙烯酸或甲基丙烯酸甲酯或甲基丙烯酸羟乙基酯或甲基丙烯酸二乙胺乙基酯；或/和，交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯或N,N-亚甲基二丙烯酰胺或乙二醇二甲基丙烯酸酯或二乙烯基苯；或/和，致孔剂为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲醇、异丙醇中的一种；或/和，引发剂为有机过氧类或偶氮类化合物；或/和，第一步中，无机酸为盐酸或硝酸，盐酸或硝酸的体积百分数浓度为5％至10％；或/和，第二步中，有机试剂Ⅰ为苯或甲苯或乙酸乙酯；或/和，第三步中，采用有机试剂Ⅲ进行清洗时先用甲醇冲洗2次至3次，再用石油醚冲洗2次至3次；或/和，第六步中的有机试剂Ⅳ为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲、异丙醇中的一种；或/和，第七步中的有机试剂Ⅴ为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲醇、异丙醇中的一种。

本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种使用米诺地尔分子印迹聚合物得到的米诺地尔固相萃取柱，按下述方法得到：将米诺地尔分子印迹聚合物填充到注射器中制得米诺地尔固相萃取柱。

本发明的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种使用米诺地尔固相萃取柱进行分离纯化米诺地尔的方法，按下述方法进行：第一步，按体积份数计，分别取1份至2份市售含有米诺地尔的生发产品、3份至5份的水、3份至5份的甲醇、3份至5份的甲醇和乙酸按体积比9:1混合的混合洗脱液；第二步，按1.5g至2g米诺地尔分子印迹聚合物处理1mL至2mL市售含有米诺地尔的生发产品计，选择合适规模的米诺地尔固相萃取柱；第三步，将市售含有米诺地尔的生发产品加入到米诺地尔固相萃取柱中，先依次用水和甲醇进行冲洗，再用混合洗脱液进行洗脱，收集洗脱成分。

本发明方法得到的米诺地尔分子印迹聚合物对米诺地尔具有较高的亲和性，采用本发明的米诺地尔分子印迹聚合物制备得到的米诺地尔固相萃取柱进行萃取分离纯化米诺地尔的方法，使得测定市售的含有米诺地尔的生发产品中米诺地尔时前处理手段操作简单，便于实施，并且，采用对米诺地尔具有较高亲和性的米诺地尔分子印迹聚合物分离纯化待测样品，有效提高待测样品的纯度，有效减少高效液相色谱测定待测样品时对样品的干扰。

附图说明

附图1为本发明溶液中米诺地尔的浓度变化与单位质量聚合物微球对底物的吸附量的关系曲线图。

具体实施方式

本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本发明中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明，均为现技术中公知公用的化学试剂和化学用品；本发明中的百分数如没有特殊说明，均为质量百分数；本发明中的水如没有特殊说明，为自来水或纯净水；本发明中的溶液若没有特殊说明，均为溶剂为水的水溶液，例如，盐酸溶液即为盐酸水溶液；本发明中的常温一般指15℃到25℃的温度，一般定义为25℃。

下面结合实施例及附图对本发明作进一步描述：

实施例1，该米诺地尔分子印迹聚合物，按下述制备方法得到：

第一步，首先用无机酸对球形硅胶进行回流清洗18小时至24小时得到活化后的硅胶，然后用水将活化后的硅胶洗至中性后烘干至恒重，其中，无机酸与球形硅胶的质量比为5:1至10:1，球形硅胶为300目至400目的球形硅胶；

第二步，按重量份数计将1份活化后的硅胶分散于10份至25份的有机试剂Ⅰ中得到硅胶分散溶液，接着向其中加入3-氨丙基三乙氧基硅烷对球形硅胶进行硅烷化，硅烷化的反应条件为氮气环境下110℃至150℃反应18小时至24小时，球形硅胶与3-氨丙基三乙氧基硅烷的质量比为1:1至1:1.5，硅烷化反应完成后得到硅烷化硅胶，用有机试剂Ⅱ洗涤硅烷化硅胶除去未反应完的3-氨丙基三乙氧基硅烷，然后将硅烷化硅胶干燥至恒重；

第三步，按1g干燥后的硅烷化硅胶溶解于10ml至20ml甲醇的比例将干燥后的硅烷化硅胶溶解于甲醇中得到硅烷化硅胶甲醇溶液，按干燥后的硅烷化硅胶：4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)：对二甲氨基吡啶：二环己基碳二亚胺的质量比为454.5:11.36:1:8.38至454.5:12.2:1:9.8的比例向硅烷化硅胶甲醇溶液中加入4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)、对二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺，采用超声混合均匀并溶解，在氮气环境下80℃至85℃反应18小时至24小时得到表修饰硅胶混合物，将表修饰硅胶混合物进行过滤后的滤饼用有机试剂Ⅲ进行清洗除去未反应完的4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)、对二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺得到表面修饰硅胶，然后将表面修饰硅胶干燥至恒重；

第四步，将功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔采用超声方式进行混合均匀并溶解得到混合溶液，其中，原料中：印迹分子米诺地尔与功能单体之间物质的量之比为0.005:1至5:1，交联剂与功能单体物质的量之比为0.5:1至20：1，表面修饰硅胶与功能单体物质的量之比为1:1至1：1.5，致孔剂的用量为功能单体、交联剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔总体积的30％至75％，引发剂的用量为功能单体、交联剂、致孔剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔总体积的2％至4％；

第五步，将混合溶液进行聚合得到聚合物；

第六步，将聚合物先进行过滤弃去滤液得到滤饼，然后用有机试剂Ⅳ冲洗滤饼除去其中的没有参加反应的功能单体、致孔剂、交联剂和引发剂，再用有机混合溶液洗脱除去滤饼中的印迹分子米诺地尔得到无印迹分子的聚合物；

第七步，将无印迹分子的聚合物用有机试剂Ⅴ洗至中性，在真空下干燥至恒重得到米诺地尔分子印迹聚合物。根据本发明方法得到的米诺地尔分子印迹聚合物对米诺地尔具有较高的亲和性。

实施例2，该米诺地尔分子印迹聚合物按下述制备方法得到：第一步，首先用无机酸对球形硅胶进行回流清洗18小时或24小时得到活化后的硅胶，然后用水将活化后的硅胶洗至中性后烘干至恒重，其中，无机酸与球形硅胶的质量比为5:1或10:1，球形硅胶为300目或400目的球形硅胶；

第二步，按重量份数计将1份活化后的硅胶分散于10份或25份的有机试剂Ⅰ中得到硅胶分散溶液，接着向其中加入3-氨丙基三乙氧基硅烷对球形硅胶进行硅烷化，硅烷化的反应条件为氮气环境下110℃或150℃反应18小时或24小时，球形硅胶与3-氨丙基三乙氧基硅烷的质量比为1:1或1:1.5，硅烷化反应完成后得到硅烷化硅胶，用有机试剂Ⅱ洗涤硅烷化硅胶除去未反应完的3-氨丙基三乙氧基硅烷，然后将硅烷化硅胶干燥至恒重；

第三步，按1g干燥后的硅烷化硅胶溶解于10ml或20ml甲醇的比例将干燥后的硅烷化硅胶溶解于甲醇中得到硅烷化硅胶甲醇溶液，按干燥后的硅烷化硅胶：4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)：对二甲氨基吡啶：二环己基碳二亚胺的质量比为454.5:11.36:1:8.38或454.5:12.2:1:9.8的比例向硅烷化硅胶甲醇溶液中加入4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)、对二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺，采用超声混合均匀并溶解，在氮气环境下80℃-85℃反应18小时或24小时得到表修饰硅胶混合物，将表修饰硅胶混合物进行过滤后的滤饼用有机试剂Ⅲ进行清洗除去未反应完的4，4′-偶氮-二(4-氰基戊酸)、对二甲氨基吡啶和二环己基碳二亚胺得到表面修饰硅胶，然后将表面修饰硅胶干燥至恒重；

第四步，将功能单体、交联剂、致孔剂、引发剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔采用超声方式进行混合均匀并溶解得到混合溶液，其中，原料中：印迹分子米诺地尔与功能单体之间物质的量之比为0.005:1或5:1，交联剂与功能单体物质的量之比为0.5:1或20：1，表面修饰硅胶与功能单体物质的量之比为1:1或1：1.5，致孔剂的用量为功能单体、交联剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔总体积的30％或75％，引发剂的用量为功能单体、交联剂、致孔剂、表面修饰硅胶和印迹分子米诺地尔总体积的2％或4％；

第五步，将混合溶液进行聚合得到聚合物；

第六步，将聚合物先进行过滤弃去滤液得到滤饼，然后用有机试剂Ⅳ冲洗滤饼除去其中的没有参加反应的功能单体、致孔剂、交联剂和引发剂，再用有机混合溶液洗脱除去滤饼中的印迹分子米诺地尔得到无印迹分子的聚合物；

第七步，将无印迹分子的聚合物用有机试剂Ⅴ洗至中性，在真空下干燥至恒重得到米诺地尔分子印迹聚合物。

实施例3，作为上述实施例的优化，第五步中的聚合采用热引发聚合，热引发聚合的温度为60℃至90℃，聚合反应时间为6小时至48小时；或，第五步中的聚合采用光引发聚合，光引发聚合的条件为：高压汞灯的功率为125W或150W，聚合时间为0.5小时至48小时。

实施例4，作为上述实施例的优化，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用苯洗涤2次至3次，再用丙酮洗涤2次至3次；或，第二步中，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用甲苯洗涤2次至3次，再用乙醚洗涤2次至3次；或，第二步中，用有机试剂Ⅱ洗涤的具体方法为：先用乙酸乙酯洗涤2次至3次，再用甲醇洗涤2次至3次；或，第六步中的有机混合溶液为甲醇与乙酸按体积比9:1至4:1混合后得到的有机混合溶液；或，第六步中的有机混合溶液为乙腈与乙酸按体积比9:1至4:1混合后得到的有机混合溶液。

实施例5，作为上述实施例的优化，当印迹分子呈酸性时功能单体选用酰胺类的单体，当印迹分子呈碱性时选用吡啶类的单体或丙烯酸类的单体，酰胺类的单体为丙烯酰胺或二丙烯酰胺-2-甲基-1-丙磺酸，吡啶类的单体为2,6-二氨基吡啶或4-乙烯基吡啶(4-VP)或2-乙烯基吡啶，丙烯酸类为丙烯酸或甲基丙烯酸或三氯甲基丙烯酸或甲基丙烯酸甲酯或甲基丙烯酸羟乙基酯或甲基丙烯酸二乙胺乙基酯；或/和，交联剂为三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯或N,N-亚甲基二丙烯酰胺或乙二醇二甲基丙烯酸酯或二乙烯基苯；或/和，致孔剂为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲醇、异丙醇中的一种；或/和，引发剂为有机过氧类或偶氮类化合物；或/和，第一步中，无机酸为盐酸或硝酸，盐酸或硝酸的体积百分数浓度为5％至10％；或/和，第二步中，有机试剂Ⅰ为苯或甲苯或乙酸乙酯；或/和，第三步中，采用有机试剂Ⅲ进行清洗先用甲醇冲洗2次至3次，再用石油醚冲洗2次至3次；或/和，第六步中的有机试剂Ⅳ为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲醇、异丙醇中的一种；或/和，第七步中的有机试剂Ⅴ为二氯甲烷、氯仿、丙酮、乙腈、甲醇、异丙醇中的一种。

实施例6，该使用米诺地尔分子印迹聚合物得到的米诺地尔固相萃取柱，按下述方法得到：将米诺地尔分子印迹聚合物填充到注射器中制得米诺地尔固相萃取柱。

实施例7，该使用米诺地尔固相萃取柱进行分离纯化米诺地尔的方法，按下述方法进行：第一步，按体积份数计，分别取1份至2份市售含有米诺地尔的生发产品、3份至5份的水、3份至5份的甲醇、3份至5份的甲醇和乙酸按体积比9:1混合的混合洗脱液；第二步，按1.5g至2g米诺地尔分子印迹聚合物处理1mL至2mL市售含有米诺地尔的生发产品计，选择合适规模的米诺地尔固相萃取柱；第三步，将市售含有米诺地尔的生发产品加入到米诺地尔固相萃取柱中，先依次用水和甲醇进行冲洗，再用混合洗脱液进行洗脱，收集洗脱成分。采用本发明的米诺地尔固相萃取柱进行萃取分离纯化米诺地尔的方法，使得测定市售的含有米诺地尔的生发产品中米诺地尔是前处理手段操作简单，便于实施，并且，采用对米诺地尔具有较高亲和性的米诺地尔分子印迹聚合物分离纯化待测样品，有效提高待测样品的纯度，有效减少高效液相色谱测定待测样品时对样品的干扰。

将采用本发明上述实施例得到的米诺地尔分子印迹聚合物作为MIPs(P1)；采用本发明上述实施例的方法，但不添加印迹分子米诺地尔，制备空白印迹分子聚合物NIPs(P2)。

称取一组等量的MIPs(P1)和NIPs(P2)各30mg，分别置于离心管中，加入0mmol/L至2mmol/L米诺地尔乙腈溶液5mL，于恒温震荡器上20℃180rpm振荡24h，然后9000r/min离心10min，取吸附液稀释至一定体积，用紫外分光光度计测定平衡吸附液中米诺地尔的浓度，根据结合前后溶液中米诺地尔的浓度变化计算单位质量聚合物微球对底物的吸附量，见图1。由图1可以看出，MIPs(P1)的吸附量明显高于NIPs(P2)对米诺地尔的吸附性能，说明MIPs(P1)具有较高的亲和性。

以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。