一株鱼腥藻来源的苯丙氨酸脱氨酶的突变体的制作方法

文档序号:12108707研发日期:2016年阅读:380来源:国知局
技术特征:

1.一种苯丙氨酸脱氨酶突变体,其特征在于,由SEQ ID NO.1所示核苷酸序列编码。

2.编码权利要求1所述的苯丙氨酸脱氨酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的载体或细胞。

4.一种重组表达权利要求1所述苯丙氨酸脱氨酶突变体的重组菌,其特征在于,以大肠杆菌BL21为宿主,以pET28a为表达载体。

5.一种重组表达权利要求1所述苯丙氨酸脱氨酶突变体的方法,其特征在于,是以大肠杆菌BL21为宿主,以pET28a为表达载体,将所得重组菌的种子液接种于含卡那霉素的2YT表达培养基中,37℃、200r/min振荡培养至OD600至0.8-1.0时,加入诱导剂IPTG至0.1mM,于20℃诱导16-18h苯丙氨酸脱氨酶突变体的表达;所述2YT表达培养基为蛋白胨16g/L、酵母提取物10g/L、NaCl 5g/L。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,还包括将重组菌体破碎后,收集上清,上清膜过滤后,用His Trap HF柱分离得到苯丙氨酸脱氨酶突变体。

7.权利要求1所述的苯丙氨酸脱氨酶突变体在制备用于治疗苯丙酮尿症的药物中的应用。

8.权利要求3所述的载体或细胞在制备用于治疗苯丙酮尿症的药物中的应用。

9.权利要求4所述的重组菌在制备用于治疗苯丙酮尿症的药物中的应用。

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