1.一种应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，包括盒体，盒体的顶面上设置进样口，其特征在于：还设置文库转移口，进样口、文库转移口上设置可左右滑动以封闭或打开进样口、文库转移口的密封盖，盒体底部分别设置1个文库收集池、1个样品池、9个试剂仓、1个废液槽，其中，样品池与进样口相对设置，文库收集池与文库转移口相对设置，盒体内分别设置螺杆、取样针，所述螺杆左、右两端分别经轴承三、轴承四与盒体相应侧转动连接，螺杆水平设置，螺杆的右端伸出盒体与螺杆旋钮相连，螺杆上设置连接件，该连接件与螺杆通过螺纹相连，连接件的顶面上设置有取样针容置孔，取样针容置孔的中心轴与螺杆的中心轴垂直，取样针容置孔底部固定设置第一弹簧，第一弹簧与取样针容置孔通轴设置，第一弹簧由取样针容置孔底部向上延伸并伸出取样针容置孔，取样针套设在第一弹簧内，取样针通过管道与负压发生器连通，负压发生器包括壳体、活塞和活塞杆，活塞杆上套有第二弹簧，活塞杆的自由端固定连接压杆针的左端，压杆针的右端伸出盒体，用于推进活塞杆，取样针的上方设置有压板，压板包括压板本体及与压板本体连接的压板轴，其中，压板轴与螺杆平行设置，压板轴的左端通过轴承一与盒体转动连接，压板轴的右端通过轴承二与盒体转动连接， 压板轴的右端伸出盒体与压板旋转相连，
应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置测序方法，包括以下步骤：
将RNA文库构建所用到所有试剂都预先放入盒体底部的试剂仓中，RNA样品经反转录为cDNA、DNA片段化、末端修复、加接头、PCR扩增并纯化后，取样针把构建好的文库转移至文库收集池中，将盒体顶部的密封盖打开，通过文库转移口取出构建好的文库，然后就放到测序平台上进行测序。
2.根据权利要求1所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：文库制备所需的所有试剂分别置于试剂仓中，文库收集池、废液槽、试剂仓的开口端由锡箔纸封闭。
3.根据权利要求2所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：文库收集池、样品池、试剂仓、废液槽的上方设置多孔板，多孔板左、右端分别与盒体内壁固定设置，多孔板上的孔与试剂仓、废液槽、样品池、文库收集池的开口端分别对应。
4.根据权利要求3所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：盒体内壁设有限定压板轴旋转角度的压板限位板，压板限位板位于压板本体下方，压板限位板的中心轴与压板轴垂直。
5.根据权利要求4所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：轴承三、轴承四安装处均安装密封垫。
6.根据权利要求1-5任一所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：试剂仓1-9中分别盛放的试剂为试剂组合一或试剂组合二，其中，
试剂组合一为：
试剂仓一：RNA反转录试剂混合液；
试剂仓二：DNA片段化试剂混合液；
试剂仓三： EDTA 溶液；
试剂仓四：无DNase、RNase水；
试剂仓五：CMPμre Beads；
试剂仓六：乙醇溶液；
试剂仓七：DNA末端修复及加A试剂混合液；
试剂仓八：Adaptor连接反应试剂混合液；
试剂仓九：PCR扩增试剂混合液，
试剂组合二为：
试剂仓一：RNA反转录试剂混合液，
试剂仓二：DNA片段化试剂混合液；
试剂仓三： EDTA 溶液；
试剂仓四：Nuclease-free Water；
试剂仓五：AMPμre Beads；
试剂仓六：乙醇溶液；
试剂仓七：DNA末端修复及加A试剂混合液；
试剂仓八：Adaptor连接反应试剂混合液；
试剂仓九：PCR扩增试剂混合液。
7.根据权利要求6所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：试剂仓1-9中分别盛放的试剂为试剂组合一或试剂组合二，其中，
试剂组合一为：
试剂舱一：RNA反转录试剂混合液4 μl；
试剂舱二：DNA片段化试剂混合液4.2 ul，主要成分：10X dsDNA Fragmentase Reaction Bμffer 2 μl、100X 100 mg/ml 的BSA 0.2 μl、dsDNA Fragmentase 2 μl；
试剂舱三：0.5M 的EDTA 10-20 μl；
试剂舱四：无DNase、RNase水 310-350 μl；
试剂舱五：CMPμre Beads 310-350 μl；
试剂舱六：80%乙醇 900-1100 μl；
试剂舱七：DNA末端修复及加A试剂混合液8.5 μl，主要成分：10x End Repair Reaction Buffer 6.5 μl、End Prep Enzyme Mix 2 μl，
试剂舱八：Adaptor连接反应试剂混合液18.5 μl，主要成分：T4 DNA ligase buffer 14 μl、T4 DNA ligase 2 μl、Adaptor 2.5 μl；
试剂舱九：PCR扩增试剂混合液27 μl，主要成分：HiFidelity 2X PCR Master Mix 25 μl、univesial primer 1μl、Index primer 1μl，
试剂组合二为：
试剂舱一：RNA反转录试剂混合液4 μl；
试剂舱二：DNA片段化试剂混合液4.2 μl，其为10X dsDNA Fragmentase Reaction Bμffer 2 μl、100X 100 mg/ml 的BSA 0.2 μl、dsDNA Fragmentase 2 μl；
试剂舱三：0.5M 的EDTA 10-20 μl；
试剂舱四： Nuclease-free Water 210-235 μl；
试剂舱五：AMPμre Beads 215-230 μl；
试剂舱六：80%乙醇 1120-1200 μl；
试剂舱七：DNA末端修复及加A试剂混合液18 ul，其为NEXTflex™ End-Repair & Adenylation Buffer Mix 15 μl、NEXTflex™ End-Repair & Adenylation Enzyme Mix 3 μl；
试剂舱八：Adaptor连接反应试剂混合液50 ul，其为NEXTflex™ Ligase Enzyme Mix 47.5 μl、Adaptor 2.5 μl；
试剂舱九：PCR扩增试剂混合液14 ul，其为NEXTflex™ PCR Master Mix 12μl、NEXTflex™ Primer Mix 2 μl。
8.根据权利要求6所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：当选用试剂组合一时，测序方法具体包括以下步骤：
文库制备样本：纯化的单链RNA，溶于超纯水中，RNA浓度150-300 ng/μl，RNA纯度：OD260/OD280=1.78-2.0，
试剂舱1-9中分别盛放试剂，
文库制备流程如下：
以1 μg RNA样本进行文库制备，用移液器吸取10-15 μl样本通过进样口加入到样品池中，封闭进样口，
1、RNA反转录为cDNA
外部机械操控盒体内部的小型移液器将样品池中3.3-6.7 μl的RNA样本转移至试剂舱一中，同时从试剂舱四中转移无DNase、RNase水9.3-12.7 μl至试剂舱一中，保证总体积为20 μl，与试剂舱一中的反转录试剂混合液发生反应，反应条件如下：37℃ 15 min；85℃ 5 seconds；4℃保持，
2、DNA片段化反应
外部机械操控盒体内部的小型移液器将试剂舱一中的cDNA溶液15 μl转移到试剂舱二中，同时从试剂舱四中转移无DNase、RNase水0.8 μl到试剂舱二中，使反应总体积为20 μl，与试剂舱二中的DNA片段化试剂混合液发生反应，
反应条件：35-38℃ 温育25-30分钟，
然后从试剂舱三中吸取5 μl的0.5 M EDTA加入试剂舱一，终止酶促反应，
3、DNA片段纯化
1）通过盒体内部小型移液器上下吸打10-15次将试剂舱五中的CMPure磁珠彻底混匀，然后转移25 μl的磁珠液放到试剂舱二中；
2）盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀，室温静置5-10分钟；
3）控制外部机械的磁力架装置上升至试剂舱二位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离；
4）盒体内部小型移液器吸取试剂舱二中的上清，转移至废液槽；
5）将磁力架降低，吸取试剂舱六中的80%乙醇60 μl至试剂舱二中，静置30-60秒；
6）将磁力架上升至试剂舱二位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离，吸取试剂舱二中的上清，转移至废液槽；
7）重复步骤5、6；
8）室温静置10-15分钟，使磁珠在空气中干燥；
9）将磁力架降低，吸取试剂舱四中的无DNase、RNase水35-40 μl至试剂舱一中，利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀，室温静置5-10分钟；
10）将磁力架上升至试剂舱二位置，使磁珠与PCR产物分离，
4、DNA末端修复反应及加A反应：
1）转移试剂舱二中的cDNA纯化溶液25 μl至试剂舱七中，然后转移试剂舱四中的无DNase、RNase水31.5 μl至试剂舱七，利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀，与试剂舱七中的DNA末端修复反应及加A反应混合液进行反应；
2）反应程序如下：12-15℃ 15-20 min；35-37℃ 15-20 min；70-72℃ 20-25 min；4℃保持，
5、末端修复DNA的纯化
1）通过盒体内部小型移液器上下吸打10-15次将试剂舱五中的CMPure磁珠彻底混匀，然后转移65 μl的磁珠液放到试剂舱七中；
2）盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀，室温静置5-10分钟；
3）将磁力架上升至试剂舱七位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离；
4）吸取试剂舱七中的上清，转移至废液槽；
5）将磁力架降低，吸取试剂舱六中的80%乙醇100 μl至试剂舱七中，静置30-60秒；
6）将磁力架上升至试剂舱七位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离，吸取试剂舱七中的上清，转移至废液槽；
7）重复步骤5、6；
8）室温静置10-15分钟，使磁珠在空气中干燥；
9）将磁力架降低，吸取试剂舱四中的无DNase、RNase水75 μl至试剂舱七中，利用小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
10）将磁力架上升至试剂舱七位置，使磁珠与洗脱的cDNA分离，
6、连接adaptor
吸取试剂舱七中的cDNA纯化溶液65 μl 至试剂舱八中，与试剂舱八中的Adaptor连接反应试剂混合液反应；
利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀；
反应条件：20-25℃温育15-20分钟，
7、连接adaptor的DNA片段选择性回收
1）通过盒体内部小型移液器上下吸打10-15次将试剂舱五中的CMPure磁珠彻底混匀，然后转移83.5 μl的磁珠液放到试剂舱八中；
2）利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
3）将磁力架上升至试剂舱八位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离；
4）吸取试剂舱八中的上清，转移至废液槽；
5）将磁力架降低，吸取试剂舱六中的80%乙醇100 μl至试剂舱八中，静置30-60秒；
6）将磁力架上升至试剂舱八位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离，吸取试剂舱八中的上清，转移至废液槽；
7）重复步骤5、6；
8）室温静置10-15分钟，使磁珠在空气中干燥；
9）将磁力架降低，吸取试剂舱四中的无DNase、RNase水30 μl至试剂舱八中，利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
10）将磁力架上升至试剂舱八位置，使磁珠与洗脱的cDNA分离，
8、PCR扩增
吸取试剂舱八中的连接adaptor后的cDNA选择性回收片段23 μl，转移至试剂舱九中，与试剂舱九中的PCR扩增试剂混合液反应，
反应程序如下：预变性 95-98℃ 30-45 s；变性 95-98℃ 10-15 s；退火 60-65℃ 30-40 s；延伸 70-72℃ 30-40 s；6-10个循环；终延伸 70-72℃ 4-5 min，
9、PCR产物纯化
1）通过盒体内部小型移液器上下吸打10-15次将试剂舱五中的CMPure磁珠彻底混匀，然后转移50 μl的磁珠液放到试剂舱九中；
2）利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
3）将磁力架上升至试剂舱九位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离；
4）吸取试剂舱九中的上清，转移至废液槽；
5）将磁力架降低，吸取试剂舱六中的80%乙醇60 μl至试剂舱九中，静置30-60秒；
6）将磁力架上升至试剂舱九位置，使磁珠和上清溶液分离，静置5-10分钟，吸取试剂舱九中的上清，转移至废液槽；
7）重复步骤5、6；
8）室温静置10分钟，使磁珠在空气中干燥；
9）将磁力架降低，吸取试剂舱四中的无DNase、RNase水35-40 μl至试剂舱九中，利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
10）将磁力架上升至试剂舱九位置，使磁珠与PCR产物分离，
10、取出PCR产物
将试剂舱九中的PCR纯化溶液25-30 μl转移至文库收集池，通过文库转移口从外部将PCR纯化cDNA溶液移出盒体，即可拿到测序平台上进行簇生成和测序，也可将cDNA文库存放在-20℃保存。
9.根据权利要求6所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：当选用试剂组合二时，测序方法具体包括以下步骤：
文库制备样本：纯化的单链RNA，溶于超纯水中，RNA浓度150-300 ng/μl，RNA纯度：OD260/OD280=1.78-2.0，
试剂舱1-9中分别盛放的试剂，
文库制备流程如下：
以1 μg RNA样本进行文库制备，用移液器吸取10-15 μl样本通过进样口加入到样品池中，封闭进样口，
1、RNA反转录为cDNA
外部机械操控盒体内部的小型移液器将样品池中3.3-6.7 μl的RNA样本转移至试剂舱一中，同时从试剂舱四中转移Nuclease-free Water 9.3-12.7 μl至试剂舱一中，保证总体积为20 μl，与试剂舱一中的反转录试剂混合液发生反应，反应条件如下：37℃ 15 min；85℃ 5 seconds；4℃保持，
2、DNA片段化反应
外部机械操控盒体内部的小型移液器将样品池中的15 μl cDNA溶液转移到试剂舱二中，同时从试剂舱四中转移Nuclease-free Water 0.8 μl到试剂舱二中，使反应总体积为20 μl，与试剂舱二中的DNA片段化试剂混合液发生反应，
反应条件：35-38℃ 温育30-40分钟，
然后从试剂舱三中吸取5 μl的0.5 M EDTA加入试剂舱二，终止酶促反应，
3、DNA片段纯化
1）通过盒体内部小型移液器上下吸打10-15次将试剂舱五中的AMPure磁珠彻底混匀，然后转移35 μl的磁珠液放到试剂舱二中；
2）盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀，室温静置5-10分钟；
控制外部机械的磁力架装置上升至试剂舱二位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离；
3）盒体内部小型移液器吸取试剂舱二中的上清，转移至废液槽；
将磁力架降低，吸取试剂舱六中的80%乙醇60 μl至试剂舱二中，静置30-60秒；
4）将磁力架上升至试剂舱二位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离。吸取试剂舱二中的上清，转移至废液槽；
5）重复步骤5、6；
6）室温静置10-15分钟，使磁珠在空气中干燥；
7）将磁力架降低，吸取试剂舱四中的 Nuclease-free Water 30-35 μl至试剂舱二中，利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀，室温静置5-10分钟；
8）将磁力架上升至试剂舱二位置，使磁珠与洗脱的cDNA分离，
4、DNA末端修复反应及加A反应：
1）转移试剂舱二中的cDNA纯化溶液20 μl至试剂舱七中，利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀，与试剂舱七中的DNA末端修复反应及加A反应混合液进行反应；
反应程序如下：22-25℃ 18-22 min；70-72℃ 20-25 min；4℃保持，
5、末端修复DNA的纯化
1）通过盒体内部小型移液器上下吸打10-15次将试剂舱五中的AMPure磁珠彻底混匀，然后转移80 μl的磁珠液放到试剂舱七中；
2）盒体内部小型移液器上下吸打5-10次混匀，室温静置5-10分钟；
3）将磁力架上升至试剂舱七位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离；
4）吸取试剂舱七中的上清，转移至废液槽；
5）将磁力架降低，吸取试剂舱六中的80%乙醇100 μl至试剂舱七中，静置30-60秒；
6）将磁力架上升至试剂舱七位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离，吸取试剂舱七中的上清，转移至废液槽；
7）重复步骤5、6；
8）室温静置10-15分钟，使磁珠在空气中干燥；
9）将磁力架降低，吸取试剂舱四中的 Nuclease-free Water 60 μl至试剂舱七中，利用小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
将磁力架上升至试剂舱七位置，使磁珠与洗脱的DNA分离，
6、连接adaptor
吸取试剂舱七中的cDNA纯化溶液50 μl 至试剂舱八中，与试剂舱八中的Adaptor连接反应试剂混合液反应；
利用盒体内部小型移液器上下吸打10-15次混匀；
反应条件：22-25℃温育15-20分钟，
7、连接adaptor的DNA片段选择性回收
1）通过盒体内部小型移液器上下吸打10-15次将试剂舱五中的AMPure磁珠彻底混匀，然后转移60 μl的磁珠液放到试剂舱八中；
2）利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
3）将磁力架上升至试剂舱八位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离；
4）吸取试剂舱八中的上清，转移至废液槽；
5）将磁力架降低，吸取试剂舱六中的80%乙醇200 μl至试剂舱八中，静置30-60秒；
6）将磁力架上升至试剂舱八位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离，吸取试剂舱八中的上清，转移至废液槽；
7）重复步骤5、6；
8）室温静置5-10分钟，使磁珠在空气中干燥；
9）将磁力架降低，吸取试剂舱四中的 Nuclease-free Water 30 μl至试剂舱八中，利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
10）将磁力架上升至试剂舱八位置，使磁珠与洗脱的cDNA分离，
8、PCR扩增
吸取试剂舱八中的连接adaptor后的cDNA选择性回收片段20 μl，转移至试剂舱九中，与试剂舱九中的PCR扩增试剂混合液反应，
反应程序如下：预变性 95-98℃ 2-2.5 min；变性 95-98℃ 30-40 s；退火 60-65℃ 30-40 s；延伸 70-72℃ 60-90 s；4-10个循环；终延伸 70-72℃ 4-5 min，
9、PCR产物纯化
1）通过盒体内部小型移液器上下吸打10-15次将试剂舱五中的AMPure磁珠彻底混匀，然后转移40 μl的磁珠液放到试剂舱九中；
2）利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
3）将磁力架上升至试剂舱九位置，静置5-10分钟，使磁珠和上清溶液分离；
4）吸取试剂舱九中的上清，转移至废液槽；
5）将磁力架降低，吸取试剂舱六中的80%乙醇200 μl至试剂舱九中，静置30-60秒；
6）将磁力架上升至试剂舱九位置，使磁珠和上清溶液分离，静置5-10分钟，吸取试剂舱九中的上清，转移至废液槽；
7）重复步骤5、6；
8）室温静置5-10分钟，使磁珠在空气中干燥；
9）将磁力架降低，吸取试剂舱四中的 Nuclease-free Water 35-40μl至试剂舱九中，利用盒体内部小型移液器上下吸打5-10次，室温静置5-10分钟；
10）将磁力架上升至试剂舱九位置，使磁珠与PCR产物分离，
10、取出PCR产物
将试剂舱九中的PCR纯化溶液25-30 μl转移至文库收集池，通过文库转移孔从外部将PCR纯化溶液移出盒体，即可拿到测序平台上进行簇生成和测序，也可将RNA文库存放在-20℃保存。
10.根据权利要求7所述的应用于第二代高通量测序的全自动RNA文库制备装置，其特征在于：测序方法具体还包括步骤：
文库质量检测：
制备好的RNA文库用琼脂糖凝胶电泳检测RNA文库中的片段长度分布范围，若构建的文库质量良好，可以直接进行测序。