一种WST‑1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒的制作方法

本实用新型涉及生物技术领域，具体为一种WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒。

背景技术：

WST-1是MTT的升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT和MTS等相比有明显的优点。首先，MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-1和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-1产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-1和MTT、XTT等相比，线性范围更宽和灵敏度更高等优点。但是在使用96孔板进行检测时，如果细胞培养时间较长，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，不利于细胞增殖，有可能还会导致细胞死亡，影响检测结果。

技术实现要素：

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足，本实用新型提供了WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒，解决了在使用96孔板进行细胞增殖及细胞毒性检测时，如果细胞培养时间较长，96孔板周围一圈容易蒸发，不利于细胞增殖，有可能还会导致细胞死亡，影响检测结果的问题。

(二)技术方案

为实现上述目的，本实用新型提供如下技术方案：一种WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒，包括盒体，所述盒体的内壁上固定连接有第一固定板和第二固定板，且第二固定板位于第一固定板的上方，所述盒体的顶部通过合页活动连接有盒盖，所述盒盖的一侧面固定连接有比色卡，所述第二固定板的上表面固定连接有导向杆，所述导向杆活动连接在96孔板上表面开设的通孔内，所述盒体的一侧面固定连接有出水管，且出水管与盒体的内部相连通，所述出水管的出水端螺纹连接有密封盖。

所述盒体的一侧面开设有通槽，所述通槽的内部活动连接有抽屉，所述抽屉的一侧面固定连接有拉扣，所述抽屉的内壁上固定连接有第一分隔板，所述第一分隔板的一侧面固定连接有第二分隔板。

优选的，所述第一分隔板的数量为三个，第二分隔板的数量为九个，且三个第一分隔板和九个第二分隔板将抽屉分为九个大小相等的放置槽。

优选的，所述第一固定板与盒体的连接处固定连接有密封圈。

优选的，所述96孔板的大小与盒体的大小相适配。

优选的，所述第一固定板与第二固定板的垂直距离为八厘米。

(三)有益效果

本实用新型提供了WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒。具备以下有益效果：

本实用新型通过设置盒体、第一固定板、第二固定板和96孔板，在进行检测时，根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况确定时间长短，如果细胞需要长时间培养，可向盒体中加入一定量的水，减少96孔板周围一圈容易蒸发，使得细胞正常增殖，解决了在使用96孔板进行细胞增殖及细胞毒性检测时，如果细胞培养时间较长，96孔板周围一圈容易蒸发，不利于细胞增殖，有可能还会导致细胞死亡，影响检测结果的问题。

附图说明

图1为本实用新型结构示意图；

图2为本实用新型的第一固定板结构示意图。

图中：1-盒体、2-第一固定板、3-第二固定板、4-合页、5-盒盖、6-比色卡、7-导向杆、8-96孔板、9-通孔、10-出水管、11-密封盖、12-通槽、13-抽屉、14-拉扣、15-第一分隔板、16-第二分隔板、17-密封圈。

具体实施方式

下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

如图1-2所示，本实用新型提供技术方案：一种WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒，包括盒体1，盒体1的内壁上固定连接有第一固定板2和第二固定板3，且第二固定板3位于第一固定板2的上方，第一固定板2与第二固定板3的垂直距离为八厘米，第一固定板2与盒体1的连接处固定连接有密封圈17，防止水流入盒体1的下层，污染试剂，增加了结构的实用性，盒体1的顶部通过合页4活动连接有盒盖5，盒盖5的一侧面固定连接有比色卡6，WST-1是类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan，细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅，和比色卡6进行比较，判断出细胞的增值速度和细胞毒性，第二固定板3的上表面固定连接有导向杆7，导向杆7活动连接在96孔板8上表面开设的通孔9内，96孔板8的大小与盒体1的大小相适配，导向杆7的数量为四个，通过导向杆7将96孔板8固定住，防止96孔板8晃动，还可以将96孔板8取下，进行更换或者清洗，简单方便，且第二固定板3用于支撑96孔板8，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000个细胞，具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等因素决定，按照实验需要，进行培养并给予0-10微升特定的药物刺激，每孔加入10微升WST-1溶液，如果起始的培养体积为200微升，则需加入20微升WST-1溶液，其它情况以此类推，可以用加了相应量细胞培养液和WST-1溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照，在细胞培养箱内继续孵育0.5-4小时，对于大多数情况，孵育1-2小时就即可，时间长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，如果细胞需要长时间培养，可向盒体1中加入一定量的水，减少96孔板8周围一圈容易蒸发，使得细胞正常增殖，盒体1的一侧面固定连接有出水管10，且出水管10与盒体1的内部相连通，且出水管10位于第一固定板2的上方，打开密封盖11即可将盒体1中的水放出，出水管10的出水端螺纹连接有密封盖11，本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。

盒体1的一侧面开设有通槽12，通槽12的内部活动连接有抽屉13，抽屉13的一侧面固定连接有拉扣14，抽屉13的内壁上固定连接有第一分隔板15，第一分隔板15的一侧面固定连接有第二分隔板16，第一分隔板15的数量为三个，第二分隔板16的数量为九个，且三个第一分隔板15和九个第二分隔板16将抽屉13分为九个大小相等的放置槽，抽屉13用于存放WST-1试剂和电子耦合试剂，当需要配置溶液进行试验时，将5毫升电子耦合试剂加入到WST-1粉末中，完全溶解即成WST-1溶液。

使用时，打开抽屉13取出WST-1试剂和电子耦合试剂，将5毫升电子耦合试剂加入到WST-1粉末中，完全溶解即成WST-1溶液，再将细胞加入96孔板8内，进行培养，时间长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，如果细胞需要长时间培养，可向盒体1中加入一定量的水，减少96孔板8周围一圈容易蒸发，使得细胞正常增殖，且本试剂盒检测非常便捷，无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板8内完成，不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外步骤去溶解formazan，可以用于大批量样品的检测。

综上可得，本实用新型通过设置盒体1、第一固定板2、第二固定板3和96孔板8，解决了在使用96孔板8进行细胞增殖及细胞毒性检测时，如果细胞培养时间较长，96孔板8周围一圈容易蒸发，不利于细胞增殖，有可能还会导致细胞死亡，影响检测结果的问题。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。

尽管已经示出和描述了本实用新型的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本实用新型的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本实用新型的范围由所附权利要求及其等同物限定。