本发明涉及包含三个稠合的6-7-6-元环的吡啶并苯并二氮杂
发明背景
吡啶并苯并二氮杂
由于由具有(s)-构型的手性c11a-位置导致的右旋纵轴旋转，天然产物以优异的拟合度(即，良好的“异螺旋性(isohelicity)”)在dna螺旋的小沟中相互作用(6)。已经报道dna加合物抑制许多生物学过程，包括转录因子的结合(7-9)和酶(诸如内切核酸酶(10,11)和rna聚合酶(12))的功能。pbd单体(例如，安曲霉素(anthramycin))已经通过足迹法(6)、nmr(13,14)、分子塑模(15)和x-射线结晶学(16)显示跨越三个碱基对并且对序列5’-pu-g-pu-3’(其中pu＝嘌呤，并且g是起反应的鸟嘌呤(17))具有热力学偏好且对py-5-py(其中py＝嘧啶)具有动力学偏好。
pbd被认为首先通过经由范德瓦尔斯(vanderwaals)、氢键键合和静电相互作用定位于低能结合序列(即，5’-pu-g-pu-3’三联体)而与dna相互作用(7)。因此，一旦就位，发生通过中心鸟嘌呤的环外c2-氨基基团的亲核攻击以形成共价加合物(7)。一旦结合，pbd保持锚定于dna小沟中，避免通过引起dna螺旋的可忽略变形的dna修复(16)。pbd在小沟中形成加合物并且交联dna的能力使得它们干扰dna处理，并且因此具有用作抗增殖剂的潜力。
已经从链霉菌属种属中分离出许多单体pbd结构，包括第一个pbd安曲霉素(18)、托马霉素(tomamycin)(19)和最近来自海洋沉积物中的海洋沉积物链霉菌属种属的usabamycin(20)。这已经导致了大范围的已经综述过的合成类似物的开发(1,21)。最近，已经报道了许多通过其c8位置与吡咯和咪唑连接的单体pbd结构，wo2007/039752、wo2013/164593(22-27)。
wo2010/091150公开了经由其a-环连接的6-7-6环系统的二聚体。wo2015/028850公开了经由连接至其芳族a-环的含有氧化膦的接头的连接的6-7-5环系统pbd二聚体。另外，wo2015/028850公开了含有经由关键的含有氧化膦的接头连接的6-7-6环系统的二聚体化合物。
已经显示各种pbd在体外起到细胞毒性剂的作用，例如wo00/12508、wo2004/087711，并且在动物肿瘤模型中在体内起到抗肿瘤作用，例如wo2011/117882、wo2013/164593。此外，c8/c8’-接连的pbd二聚体sjg-136(28,29)已经完成了对白血病和卵巢癌的i期临床试验(30)，并且已经显示了进行ii期研究的足够治疗益处。
然而，来自sjg-136的i期临床评价揭示了所述药物产生了包括下肢水肿和疲劳的若干不良反应(31)。
因此，需要与pbd相关的另外的化合物，所述化合物对治疗各种增殖性疾病具有治疗活性。
本申请报道了吡啶并苯并二氮杂
本发明寻求克服与现有技术有关的问题。
发明概述
本发明提供式(i)的化合物：
及其盐和溶剂化物，
其中；
虚线表示c1和c2、c2和c3以及c3和c4中的一个或多个之间任选存在双键；
r1选自r7、＝ch2、＝ch-(ch2)m-ch3、＝o、(ch2)m-or7、(ch2)m-co2r7、(ch2)m-nr7r8、o-(ch2)n-nr7r8、nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-c(o)-nh-r7、(ch2)m-so2r7、o-so2r7、(ch2)m-c(o)r7和(ch2)m-c(o)nr7r8；
r2选自r9、＝ch2、＝ch-(ch2)r-ch3、＝o、(ch2)r-or9、(ch2)r-co2r9、(ch2)r-nr9r10、o-(ch2)s-nr9r10、nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-c(o)-nh-r9、(ch2)r-so2r9、o-so2r9、(ch2)r-cor9和(ch2)r-c(o)nr9r10；
r3选自h、c1-12烷基和ch2ph；
r4选自任选地用多至三个任选的取代基取代的苯基和c5-9杂芳基，所述取代基选自oh、c1-6烷基、oc1-6烷基、(ch2)j-co2r11、o-(ch2)k-nr11r12、(ch2)j-nr11r12、c(＝o)-nh-(ch2)k-nr11r12；c(＝o)-nh-r24和c(＝o)-nh-(ch2)k-c(＝nh)nr11r12；条件是任选地取代的c5-9杂芳基不是吲哚基；
r19选自h和(ch2)t-nr20r21；
y1是n或ch；
y2是n或ch；并且其中y1和y2中的至少一个是ch；
p是0或1；
j、m、r和t独立地选自0至6的整数；
k、n和s独立地选自1至6的整数；
x1选自o、s、nr13、cr13r14、cr13r14o、c(＝o)、c(＝o)nr13、nr13c(＝o)、o-c(o)和c(o)-o；
l选自氨基酸、具有2至6个氨基酸的肽链、可以含有一个或多个碳-碳双键或三键的含有1至12个碳原子的亚烃基链、低聚甲醛链–(och2)1-12-、聚乙二醇链-(och2ch2)1-6-，所述链可以被o、s和/或nh基团和/或c3-9亚杂芳基和/或亚苯基中的一个或多个中断。
x2选自o、s、nr15、cr15r16、cr15r16o、c(＝o)、c(＝o)nr15、nr15c(＝o)、o-c(o)和c(o)-o或者不存在；
q选自0、1、2、3、4、5和6；
a选自：
对于各a1基团，y3和y4中的一个独立地选自n-r17、s和o；并且y3和y4中的另一个是ch；并且y5独立地选自ch、n、s和coh；并且
对于各a2基团，y6和y7中的一个独立地选自n和ch；并且y6和y7中的另一个是ch；
r7和r9独立地选自h、c1-12烷基、c5-9杂芳基、c6-15杂芳基烷基、苯基和c7-12芳烷基基团；其中所述杂芳基、杂芳基烷基、苯基和芳烷基基团任选地用多至三个任选的取代基取代，所述取代基选自c1-6烷基、oh、oc1-6烷基；
r24是任选地用多至三个任选的取代基取代的苯基，所述取代基选自oh、c1-6烷基、oc1-6烷基、(ch2)j-co2r11、o-(ch2)k-nr11r12、(ch2)j-nr11r12、c(＝o)-nh-(ch2)k-nr11r12和c(＝o)-nh-(ch2)k-c(＝nh)nr11r12；
r8、r10、r11、r12、r13、r14、r15、r16、r17、r20和r21独立地选自h和c1-6烷基；
或者：
(i)r5和r6一起形成双键；
(ii)r5是h并且r6是oh；或
(iii)r5是h并且r6是oc1-6烷基；
条件是当p是0并且a是a1时，则：
(a)对于至少一个a1基团，y3和y4中的一个选自s和o；或
(b)对于至少一个a1基团，y5是s；或
(c)r4不是吡咯基、咪唑基、任选地取代的吡咯基或任选地取代的咪唑基。
本发明提供式(i)的化合物：
及其盐和溶剂化物，
其中；
虚线表示c1和c2、c2和c3以及c3和c4中的一个或多个之间任选存在双键；
r1选自r7、＝ch2、＝ch-(ch2)m-ch3、＝o、(ch2)m-or7、(ch2)m-co2r7、(ch2)m-nr7r8、o-(ch2)n-nr7r8、nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-c(o)-nh-r7、(ch2)m-so2r7、o-so2r7、(ch2)m-c(o)r7和(ch2)m-c(o)nr7r8；
r2选自r9、＝ch2、＝ch-(ch2)r-ch3、＝o、(ch2)r-or9、(ch2)r-co2r9、(ch2)r-nr9r10、o-(ch2)s-nr9r10、nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-c(o)-nh-r9、(ch2)r-so2r9、o-so2r9、(ch2)r-cor9和(ch2)r-c(o)nr9r10；
r3选自h、c1-12烷基和ch2ph；
r4选自任选地用多至三个任选的取代基取代的苯基和c5-9杂芳基，所述取代基选自oh、c1-6烷基、oc1-6烷基、(ch2)j-co2r11、o-(ch2)k-nr11r12、(ch2)j-nr11r12、c(＝o)-nh-(ch2)k-nr11r12；c(＝o)-nh-c6h4-(ch2)j-r18和c(＝o)-nh-(ch2)k-c(＝nh)nr11r12；条件是任选地取代的c5-9杂芳基不是吲哚基；
r19选自h和(ch2)t-nr20r21；
y1是n或ch；
y2是n或ch；并且其中y1和y2中的至少一个是ch；
p是0或1；
j、m、r和t独立地选自0至6的整数；
k、n和s独立地选自1至6的整数；
x1选自o、s、nr13、cr13r14、cr13r14o、c(＝o)、c(＝o)nr13、nr13c(＝o)、o-c(o)和c(o)-o；
l选自氨基酸、具有2至6个氨基酸的肽链、可以含有一个或多个碳-碳双键或三键的含有1至12个碳原子的亚烃基链、低聚甲醛链–(och2)1-12-、聚乙二醇链-(och2ch2)1-6-，所述链可以被o、s和/或nh基团和/或c3-9亚杂芳基和/或亚苯基中的一个或多个所中断；
x2选自o、s、nr15、cr15r16、cr15r16o、c(＝o)、c(＝o)nr15、nr15c(＝o)、o-c(o)和c(o)-o或者不存在；
q选自0、1、2、3、4、5和6；
a选自：
对于各a1基团，y3和y4中的一个独立地选自n-r17、s和o；并且y3和y4中的另一个是ch；并且y5独立地选自ch、n、s和coh；并且
对于各a2基团，y6和y7中的一个独立地选自n和ch；并且y6和y7中的另一个是ch；
r7和r9独立地选自h、c1-12烷基、c5-9杂芳基、c6-15杂芳基烷基、苯基和c7-12芳烷基基团；其中所述杂芳基、杂芳基烷基、苯基和芳烷基基团任选地用多至三个任选的取代基取代，所述取代基选自c1-6烷基、oh、oc1-6烷基；
r18选自co2r11和nr11r12；
r8、r10、r11、r12、r13、r14、r15、r16、r17、r20和r21独立地选自h和c1-6烷基；
或者：
(i)r5和r6一起形成双键；
(ii)r5是h并且r6是oh；或
(iii)r5是h并且r6是oc1-6烷基；
条件是当p是0并且a是a1时，则：
(a)对于至少一个a1基团，y3和y4中的一个选自s和o；或
(b)对于至少一个a1基团，y5是s；或
(c)r4不是吡咯基、咪唑基、任选地取代的吡咯基或任选地取代的咪唑基。
在另外的方面，提供用于在治疗方法中使用的式(i)的化合物及其盐和溶剂化物。
在另外的方面，提供用于作为药物使用的式(i)的化合物及其盐和溶剂化物。
在另外的方面，提供用于在增殖性疾病的治疗中使用的式(i)的化合物及其盐和溶剂化物。
在另外的方面，提供药物组合物，其包含式(i)的化合物及其盐和溶剂化物以及药用赋形剂、载体或稀释剂。
在另外的方面，本发明提供式(i)的化合物及其盐和溶剂化物在制备用于治疗增殖性疾病的药物中用途。
在另外的方面，本发明提供治疗患有增殖性疾病的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的式(i)的化合物及其盐和溶剂化物或者本发明的药物组合物。
在另外的方面，取决于待治疗的病症，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物可以单独或者与其它治疗组合，同时或顺序地施用。
本发明的药物组合物还可以包含一种或多种(例如两种、三种或四种)另外的活性剂。
在另外的方面，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物可以直接或间接地连接至靶向剂(例如，抗体、抗体片段、激素等)以提供靶向缀合物。本公开内容的靶向缀合物可以含有一种或多种式(i)的化合物(或其盐和溶剂化物)。本领域中已知多种靶向缀合物并且可以与式(i)的化合物及其盐和溶剂化物一起使用。例如，在特别的方面，靶向缀合物是抗体-药物缀合物，其中一种或多种式(i)的化合物直接或间接地连接至抗体。因此，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物可以用作靶向缀合物上的有效负载(payload)。
定义
在整个说明书中使用了以下缩写：ac，乙酰基；alloc，烯丙氧基羰基；baib，双(乙酰氧基)碘苯/(二乙酰氧基碘)苯；boc，叔丁氧基羰基；bpd，苯并吡咯并二氮杂
当与化学取代基或部分(例如烷基)结合使用时，“取代的”意指取代基或部分(moiety)的一个或多个氢原子已经被一个或多个非氢原子或基团替代，条件是满足化合价要求并且取代产生化学稳定的化合物。
“任选取代的”是指可以是未经取代的或者可以经一个或多个取代基取代的母体基团。合适地，除非另有说明，当存在任选的取代基时，任选取代的母体基团包含一个至三个任选的取代基。当基团可以“任选地用多至三个基团取代”时，这意指该基团可以被0、1、2或3个任选的取代基取代。当基团可以“任选地用一个或两个任选的取代基取代”时，这意指该基团可以被0、1或2个任选的取代基取代。合适地，基团可以任选地用0或1个任选的取代基取代。
“独立地选自”在这样的语境中使用，例如，“r1和r2独立地选自h、c1-12烷基、苯基…”，并且意指官能团(例如r1)的每个实例，独立于化合物中r1或r2的任何其它实例，选自所列出的选项。因此，例如，可以为化合物中r1的第一个实例选择c1-12烷基；可以为化合物中r1的下一个实例选择苯基；并且可以为化合物中r2的第一个实例选择h。
c1-12烷基：是指直链或支链饱和烃基团，通常具有1至12个碳原子；更合适的是c1-7烷基；更合适的是c1-6烷基。烷基基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊-1-基、戊-2-基、戊-3-基、3-甲基丁-1-基、3-甲基丁-2-基、2-甲基丁-2-基、2,2,2-三甲基乙-1-基、正己基、正庚基等。
“亚烃基”是指来源于可以是直链或支链的烷烃的二价基团，例如–ch2ch2ch2ch2-。
“芳基”：是指具有至少一个芳香环并且具有指定数目的、组成其环成员的碳原子的完全不饱和单环、二环和多环芳族烃(例如，c6-14芳基是指具有6至14个碳原子作为环成员的芳基基团)。芳基基团可以在任何环原子处连接到母体基团或连接到底物，并且可以包括一个或多个非氢取代基，除非这种连接或取代将违反化合价要求。芳基基团的实例包括苯基。
“c7-12芳烷基”是指具有7至12个碳原子并且包含经芳基基团取代的烷基基团的芳基烷基基团。合适地，烷基基团是c1-6烷基基团并且芳基基团是苯基。c7-12芳烷基的实例包括苄基和苯乙基。在一些情况下，c7-12芳烷基基团可以是任选地取代的并且任选地取代的c7-12芳烷基基团的实例是4-甲氧基苄基。
“c5-9杂芳基”：是指包含5至9个环原子(无论是碳还是杂原子)且其中1至5个是环杂原子的不饱和单环或双环芳族基。合适地，任何单环杂芳基环具有5至6个环原子和1至3个环杂原子。合适地，每个环杂原子独立地选自氮、氧和硫。双环包括稠合的环系统，并且特别地包括其中包含5个环原子的单环与苯环稠合的双环基团。杂芳基基团可以在任何环原子处连接到母体基团或连接到底物，并且可以包括一个或多个非氢取代基，除非这种连接或取代将违反化合价要求或产生化学上不稳定的化合物。
单环杂芳基基团的实例包括，但不限于，来源于以下的那些：
n1：吡咯、吡啶；
o1：呋喃；
s1：噻吩；
n1o1：
n2o1：
n3o1：
n1s1：噻唑、异噻唑；
n2：咪唑、吡唑、哒嗪、嘧啶、吡嗪；
n3：三唑、三嗪；和
n4：四唑。
包含稠合环的杂芳基的实例包括，但不限于，来源于以下的那些：
o1：苯并呋喃、异苯并呋喃；
n1：吲哚、异吲哚、吲嗪、异二氢吲哚；
s1：硫茚；
n1o1：苯并
n1s1：苯并噻唑；
n2：苯并咪唑、吲唑；
o2：苯并间二氧杂环戊烯；
n2o1：苯并呋咱；
n2s1：苯并噻二唑；
n3：苯并三唑；和
n4：嘌呤(例如，腺嘌呤、鸟嘌呤)、蝶啶；
“亚杂芳基”是指来源于杂芳基基团的二价基团，例如亚吡啶基–(c5h3n)-。
“c6-15杂芳基烷基”是指经杂芳基基团取代的烷基基团。合适地，烷基是c1-6烷基基团并且杂芳基基团是如上定义的c5-9杂芳基。c6-15杂芳基烷基基团的实例包括吡咯-2-基甲基、吡咯-3-基甲基、吡咯-4-基甲基、吡咯-3-基乙基、吡咯-4-基乙基、咪唑-2-基甲基、咪唑-4-基甲基、咪唑-4-基乙基、噻吩-3-基甲基、呋喃-3-基甲基、吡啶-2-基甲基、吡啶-2-基乙基、噻唑-2-基甲基、噻唑-4-基甲基、噻唑-2-基乙基、嘧啶-2-基丙基等。
氮保护基
氮保护基在本领域中是公知的。
优选的氮保护基是具有以下通式的氨基甲酸酯保护基：
wuts,p.g.m.和greene,t.w.,protectivegroupsinorganicsynthesis,第4版,wiley-lnterscience,2007的第706至771页以及p.kocienski,protectivegroups,第3版(2005)中列出了大量可能的氨基甲酸酯氮保护基，其通过引用并入本文。
特别优选的保护基包括alloc(烯丙氧基羰基)、troc(2,2,2-三氯乙基碳酸酯)、teoc[2-(三甲基硅烷基)乙氧羰基]、boc(叔丁氧基羰基)、doc(2,4-二甲基戊-3-基氧基羰基)、hoc(环己氧基-羰基)、tcboc(2,2,2-三氯-叔丁氧基羰基)、fmoc(9-芴基甲氧基羰基)、1-adoc(1-金刚烷氧基羰基)和2-adoc(2-金刚烷氧基羰基)。
羟基保护基
羟基保护基在本领域中是公知的，wuts,p.g.m.和greene,t.w.,protectivegroupsinorganicsynthesis,第4版,wiley-lnterscience,2007的第16-366页以及p.kocienski,protectivegroups,第3版(2005)中描述了许多合适的基团，其通过引用并入本文。
特别感兴趣的类别包括硅醚、甲醚、烷基醚、二苄醚、醚、苯甲酸酯、碳酸酯和磺酸酯。
特别优选的保护基包括thp(四氢吡喃基酯)。
“式(i)的化合物及其盐和溶剂化物”是指式(i)的化合物；式(i)的化合物的盐；式(i)的化合物的溶剂化物；和式(i)的化合物的盐的溶剂化物。
“药物”、“药物物质”、“活性药物成分”等是指可以用于治疗需要治疗的受试者的化合物(例如，式(i)的化合物和上文特别指出的化合物)。
“赋形剂”是指任何可以影响药物的生物利用度但是在其它方面为药理学上无活性的物质。
“药用”物质是指在合理的医学判断范围内适合用于与受试者的组织接触而没有不适当的毒性、刺激性、变态反应等的那些物质，其与合理的收益-比-风险比率相称，并且对其预期用途有效。
“药物组合物”是指一种或多种药物物质与一种或多种赋形剂的组合。
如本文中所使用的，术语“受试者”是指人类或非人类哺乳动物。非人类哺乳动物的例子包括家畜动物，诸如羊、马、牛、猪、山羊、兔和鹿；以及伴侣动物，诸如猫、狗、啮齿动物和马。
药物的“治疗有效量”是指有效治疗受试者并由此产生所需治疗、改善、抑制或预防效果的药物或组合物的量。治疗有效量可以取决于受试者的体重和年龄以及施用途径等。
“治疗”是指逆转、缓解、抑制该术语适用的病症、疾病和病况的进展或者预防该术语适用的病症、疾病和病况，或者是指逆转、缓解、抑制所述病症、疾病和病况的一种或多种症状的进展或者预防所述病症、疾病和病况的一种或多种症状。
“治疗”是指如上所定义的“治疗”的行为。
如本文中所使用的，术语“包含(comprising)”意指“包括至少部分”，并且意指包含性的或开放式的。当解释本说明书中包括术语“包含”的每个陈述时，也可以存在除了以该术语开始的那个或那些特征、要素和/或步骤之外的特征、要素和/或步骤。相关术语，诸如“包含(comprise)”和“包含(comprises)”以相同的方式解释。
r1
r1选自r7、＝ch2、＝ch-(ch2)m-ch3、＝o、(ch2)m-or7、(ch2)m-co2r7、(ch2)m-nr7r8、o-(ch2)n-nr7r8、nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-c(o)-nh-r7、(ch2)m-so2r7、o-so2r7、(ch2)m-c(o)r7和(ch2)m-c(o)nr7r8。对于其中r1选自＝ch2、＝ch-(ch2)m-ch3和＝o的选项，为了满足分子的化合物要求，与其连接的c-环的碳不能具有任选的双键。例如，如果r1是＝ch2并且位于与c-环的稠合碳相邻的c-环的c1位置，并且r2是h，则所得式(i)的化合物可以表示为：
合适地，r1选自r7、(ch2)m-or7、(ch2)m-co2r7、(ch2)m-nr7r8、o-(ch2)n-nr7r8、nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-c(o)-nh-r7、(ch2)m-so2r7、o-so2r7、(ch2)m-c(o)r7和(ch2)m-c(o)nr7r8。
合适地，r1选自r7、(ch2)m-or7、(ch2)m-co2r7、(ch2)m-nr7r8、o-(ch2)n-nr7r8、nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-c(o)-nh-r7、(ch2)m-c(o)r7和(ch2)m-c(o)nr7r8。
合适地，r1选自r7、or7、co2r7、nr7r8、nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-c(o)-nh-r7、c(o)r7和c(o)nr7r8。
合适地，r1选自r7、or7、co2r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-c(o)-nh-r7、c(o)r7和c(o)nr7r8。
合适地，r1选自r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7和o-(ch2)n-c(o)-nh-r7。
在一些实施方案中，r1是h。
r2
r2选自r9、(ch2)r-or9、(ch2)r-co2r9、(ch2)r-nr9r10、o-(ch2)s-nr9r10、nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-c(o)-nh-r9、(ch2)r-so2r9、o-so2r9、(ch2)r-cor9和(ch2)r-c(o)nr9r10。
合适地，r2选自r9、(ch2)r-or9、(ch2)r-co2r9、(ch2)r-nr9r10、o-(ch2)s-nr9r10、nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-c(o)-nh-r9、(ch2)r-cor9和(ch2)r-c(o)nr9r10。
合适地，r2选自r9、or9、co2r9、nr9r10、nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-c(o)-nh-r9、cor9和c(o)nr9r10。
合适地，r2选自r9、or9、co2r9、o-(ch2)s-nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-c(o)-nh-r9、cor9和c(o)nr9r10。
合适地，r2选自r9、o-(ch2)s-nh-c(o)-r9和o-(ch2)s-c(o)-nh-r9。
在一些实施方案中，r2是h。
r3
合适地，r3选自h、c1-6烷基和ch2ph。
合适地，r3选自h、甲基、乙基和ch2ph。
更合适地，r3选自甲基和乙基。
更合适地，r3是甲基。
r4
r4选自任选地用多至三个任选的取代基取代的苯基和杂芳基基团。因此，r4选择的任何苯基基团或c5-9杂芳基基团可以任选地用多至三个任选的取代基取代。
合适地，r4选自苯基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
合适地，r4选自苯基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
合适地，r4选自苯基、n-甲基吡咯基、噻吩基、n-甲基咪唑基、
合适地，r4任选地用多至三个任选的取代基取代，所述取代基选自oh、c1-6烷基、oc1-6烷基、(ch2)j-co2r11、o-(ch2)k-nh2、(ch2)j-nh2、c(＝o)-nh-(ch2)k-nh2；c(＝o)-nh-r24和c(＝o)-nh-(ch2)k-c(＝nh)nh2。
合适地，r4是任选地取代的c(＝o)-nh-r24，其中r24是-c6h4-(ch2)j-r18，并且亚苯基基团–c6h4-是对位取代的。
合适地，r4任选地用多至三个任选的取代基取代，所述取代基选自oh、甲基、乙基、och3、och2ch3、co2h、co2ch3、co2ch2ch3、o-(ch2)k-nh2和(ch2)j-nh2。
合适地，r4任选地用一个或两个任选的取代基取代。
更合适地，r4任选地用一个任选的取代基取代。
更合适地，r4选自：
其中z1选自nh、n-ch3、s和o；
z2选自ch和n；
z3选自s和o；
z4选自ch和n；
r22选自(ch2)jco2r11、(ch2)jnr11r12和c(＝o)-nh-c6h4-(ch2)j-r18；
r18选自co2r11和nr11r12；
j选自0至6的整数；
r11和r12独立地选自h和c1-6烷基；并且
r23选自h和c1-6烷基。
波浪线表示上述r4基团与式(i)的化合物的其余部分的连接点。
更合适地，r4选自：
其中z1选自nh、n-ch3、s和o；
z2选自ch和n；并且
z3选自s和o；
z4选自ch和n；
r11选自h和c1-6烷基；并且
r23选自h和c1-6烷基。
r5和r6
合适地，对于(iii)，r5是h并且r6是选自o-ch3和o-ch2ch3的oc1-6烷基。
最合适地，(i)r5和r6一起形成双键。
r7
合适地，r7选自h、c1-12烷基、c5-9杂芳基、c6-15杂芳基烷基、苯基、苄基和苯乙基；其中所述杂芳基、杂芳基烷基、苯基和芳烷基基团任选地用选自c1-6烷基、oh、oc1-6烷基的多至三个基团取代。
合适地，r7选自h、c1-12烷基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
合适地，r7选自h、c1-6烷基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
合适地，r7选自h、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
合适地，r7选自h、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
在一些实施方案中，r7选自h、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基。
r9
合适地，r9选自h、c1-12烷基、c5-9杂芳基、c6-15杂芳基烷基、苯基、苄基和苯乙基；其中所述杂芳基、杂芳基烷基、苯基和芳烷基基团任选地用选自c1-6烷基、oh、oc1-6烷基的多至三个基团取代。
合适地，r9选自h、c1-12烷基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
合适地，r9选自h、c1-6烷基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
合适地，r9选自h、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
合适地，r9选自h、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、吡咯基、n-甲基吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、n-甲基咪唑基、
在一些实施方案中，r9选自h、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基。
r8、r10、r11、r12、r13、r14、r15、r16、r17、r20和r21
合适地，r8、r10、r11、r12、r13、r14、r15、r16、r17、r20和r21中的每一个独立地选自h、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基和叔丁基。
合适地，r8、r10、r11、r12、r13、r14、r15、r16、r17、r20和r21中的每一个独立地选自h、甲基和乙基。
合适地，r8是h。
合适地，r10是h。
合适地，r11各自独立地选自h和甲基。
合适地，r12各自独立地选自h和甲基；更合适地，r12各自是h。
合适地，r13是h。
合适地，r14是h。
合适地，r15是h。
合适地，r16是h。
合适地，r17是甲基。
合适地，r20是h。
合适地，r21是h。
r18
合适地，r18选自co2h、co2ch3、co2ch2ch3、nh(ch3)和nh2。
r19
合适地，r19选自h、(ch2)t-n(ch2ch3)2、(ch2)t-n(ch3)2、(ch2)t-nh(ch2ch3)、(ch2)t-nh(ch3)和(ch2)t-nh2。
更合适地，r19选自h和(ch2)t-nh2。
r24
合适地，r24是任选地用多至三个任选的取代基取代的苯基，所述取代基选自oh、甲基、乙基、丙基、och3、och2ch3、co2h、co2ch3、co2ch2ch3、o-(ch2)k-nh2、o-(ch2)k-nh(ch3)、(ch2)j-nh2、(ch2)j-nh(ch3)、c(＝o)-nh-(ch2)k-nh2、c(＝o)-nh-(ch2)k-nh(ch3)、c(＝o)-nh-(ch2)k-c(＝nh)nh(ch3)和c(＝o)-nh-(ch2)k-c(＝nh)nh2。
合适地，r24是任选地用多至三个任选的取代基取代的苯基，所述取代基选自oh、甲基、乙基、och3、och2ch3、co2h、co2ch3、co2ch2ch3、o-(ch2)k-nh2和(ch2)j-nh2。
合适地，r24是对位取代的苯基基团。
更合适地，在一些方面，r24是-c6h4-(ch2)j-r18，其中r18选自co2r11和nr11r12。
j
j的每个实例独立地选自0至6的整数，因此，j各自独立地选自0、1、2、3、4、5和6。
合适地，j各自独立地选自0、1、2和3。
更合适地，j各自独立地选自0和1。
更合适地，j各自是0。
k
k的每个实例独立地选自1至6的整数，因此，k各自独立地选自1、2、3、4、5和6。
合适地，k各自独立地选自1、2和3。
更合适地，k各自是1。
m
m选自0至6的整数，因此，m选自0、1、2、3、4、5和6。合适地，m选自0、1、2和3。
更合适地，m选自0和1。
更合适地，m是0。
n
n选自1至6的整数，因此，n选自1、2、3、4、5和6。
合适地，n选自1、2和3。
更合适地，n是1。
r
r选自0至6的整数，因此，r选自0、1、2、3、4、5和6。
合适地，r选自0、1、2和3。
更合适地，r选自0和1。
更合适地，r是0。
s
s选自1至6的整数，因此，s选自1、2、3、4、5和6。
合适地，s选自1、2和3。
更合适地，s是1。
t
t选自0至6的整数，因此，t选自0、1、2、3、4、5和6。合适地，t选自0、1、2和3。
更合适地，t选自0和1。
更合适地，t是0。
y1
y1是n或ch；合适地，y1是ch。
y2
y2是n或ch；合适地，y2是ch。
x1
合适地，x1选自o、s、nh、ch2、ch2o、c(＝o)、c(＝o)nr13、nr13c(＝o)、o-c(o)和c(o)-o；
合适地，x1选自o、c(＝o)、c(＝o)nr13和nr13c(＝o)。
更合适地，x1选自o、c(＝o)nh和nhc(＝o)。
更合适地，x1是o。
x2
合适地，x2选自o、s、nh、ch2、ch2o、c(＝o)、c(＝o)nr15、nr15c(＝o)、o-c(o)和c(o)-o或者不存在。
合适地，x2选自o、c(＝o)、c(＝o)nr15和nr16c(＝o)或者不存在。
更合适地，x2选自o、c(＝o)nh和nhc(＝o)。
合适地，x2与x1相同。
更合适地，x2是o。
l
l是接头基团。合适地，肽链、亚烃基链、低聚甲醛链或聚乙二醇链中的任一者被一个或多个杂原子(例如，n、o和s)和/或一个或多个c5-9亚杂芳基基团(例如，亚吡咯基、亚吡唑基、亚吡唑基、1,2,3-亚三唑基、亚吡啶基)和/或一个或多个亚苯基基团所中断。更合适地，所述链可以被一个至三个杂原子和/或一个至三个c5-9亚杂芳基基团和/或一个至三个亚苯基基团所中断。
合适地，l选自具有2至5个氨基酸、2至4个氨基酸、2至3个氨基酸的肽链；含有1至11个碳原子、1至10个碳原子、1至9个碳原子、1至8个碳原子、1至7个碳原子、1至6个碳原子、1至5个碳原子、1至4个碳原子、1至3个碳原子的亚烃基链，其可以含有一个或多个碳-碳双键或三键；低聚甲醛链–(och2)1-12-、–(och2)1-11-、–(och2)1-10-、–(och2)1-9-、–(och2)1-8-、–(och2)1-7-、–(och2)1-6-、–(och2)1-5-、–(och2)1-4-、–(och2)1-3-，聚乙二醇链-(och2ch2)1-5-、链-(och2ch2)1-4-、链-(och2ch2)1-3-；所述链可以被一个或多个杂原子和/或c5-9亚杂芳基基团和/或一个至三个亚苯基基团所中断。
更合适地，l可以选自含有1至12个碳原子的亚烃基链，其可以含有一个或多个碳-碳双键或三键。
更合适地，l可以选自ch＝ch、ch2、ch2ch2、ch2ch2ch2、ch2ch2ch2ch2和ch2ch2ch2ch2ch2。
a
在一个实施方案中，a是a1：
其中对于各a1基团，y3和y4中的一个独立地选自n-r17、s和o；并且y3和y4中的另一个是ch；并且y5独立地选自ch、n、s和coh。
在该实施方案中，当q选自2、3、4、5和6时，则a将含有彼此连接的多个a1基团。
因此，含有y3、y4和y5的5-元环是杂芳环。该a1基团可以以任何一个方向连接至分子的其余部分。因此，当a是a1时，如在上述实施方案中，式(i)的化合物选自：
更合适地，当a是a1时，式(i)的化合物是化合物(ii)。
因此，含有y3、y4和y5的杂芳环选自以下基团之一：
更合适地，a是
其中y5选自ch和n。
在另一个实施方案中，a是a2：
其中对于各a2基团，y6和y7中的一个独立地选自n和ch；并且y6和y7中的另一个是ch。
因此，含有y6和y7的6-元环是苯基或吡啶环。a2基团可以以任何一个方向连接至分子的其余部分。因此，当a是a2时，如在上述实施方案中，式(i)的化合物选自：
更合适地，当a是a2时，式(i)的化合物是化合物(iv)。
合适地，a是a4：
更合适地，y6是ch；并且y7是ch。
q
合适地，q选自0、1、2和3。
更合适地，q是0或1。
6-元芳香环
合适地，式(i)的6-元芳香环是对位取代的：
更合适地，式(i)的6-元芳香环是：
c-环中任选的双键
本发明提供式(i)的化合物：
其中虚线表示c1和c2、c2和c3以及c3和c4中的一个或多个之间任选存在双键。
在一个方面，式(i)的化合物在c1和c2之间具有双键以得到式(vi)的化合物：
在另一个方面，式(i)的化合物在c2和c3之间具有双键以得到式(vii)的化合物：
在另一个方面，式(i)的化合物在c3和c4之间具有双键以得到式(viii)的化合物：
在另一个方面，式(i)的化合物在c1和c2之间具有双键并且在c3和c4之间具有双键以得到式(ix)的化合物：
其它限制
对于式(i)的化合物的选项含有这样的条件：当p是0并且a是a1时，则：(a)对于至少一个a1基团，y3和y4中的一个选自s和o；或者(b)对于至少一个a1基团，y5是s；或者(c)r4不是任选地取代的吡咯基或咪唑基。
当q选自2、3、4、5和6时，将存在多于一个a1基团。
因此，当p是0和a是a1时，所述条件要求存在至少一个芳基基团，或者，备选地，存在杂芳基基团(或者作为a1或r4的一部分)，其不含有5-元吡咯或咪唑环，或任选地取代的衍生物诸如n-甲基吡咯或n-甲基咪唑环。因此，该条件避免了式(i)的化合物仅仅具有连接至pdd的聚-吡咯或聚-咪唑或聚-吡咯-咪唑长链基团。具有这种长链基团的化合物倾向具有相对差的细胞毒性。
在一些方面，合适地，对于式(i)的化合物的选项含有这样的条件：当p是0并且a是a1时，则：(a)a1的5-元环选自h9、h10、h11、h12、h13、h14、h15、h16、h17、h19、h20、h21、h22、h23和h24；或者(b)a1的5-元环选自h5和h6；或者(c)r4选自苯基、呋喃基、噻吩基、
在一些方面，合适地，对于式(i)的化合物的选项含有这样的条件：当p是0并且a是a1时，则：(a)a1的5-元环选自h9、h10、h11、h12、h13、h14、h15、h16、h17、h19、h20、h21、h22、h23和h24；或者(b)a1的5-元环选自h5和h6；或者(c)r4选自任选地用多至三个任选的取代基取代的苯基和c9杂芳基基团，所述取代基选自oh、c1-6烷基、oc1-6烷基、(ch2)j-co2r11、o-(ch2)k-nr11r12、(ch2)j-nr11r12、c(＝o)-nh-(ch2)k-nr11r12；c(＝o)-nh-c6h4-(ch2)j-r18；c(＝o)-nh-(ch2)k-c(＝nh)nr11r12,条件是c5-9杂芳基不是吲哚基。
合适的结构
在未指定r1和r2在c-环上的位置的情况下画出式(i)的化合物：
因此，r1和r2可以存在于c-环的任何位置上，条件是满足化合价要求。由于c-环的稠合碳和氮全部具有所示的取代基，这意味着r1和r2可以存在于c-环的任何非稠合碳上(即如上指定的c1、c2、c3或c4位置)。合适地，r1和r2存在于c-环的两个不同的非稠合碳上。
在一个方面，式(i)的化合物选自：
在另一个方面，式(i)的化合物选自：
更合适地，式(i)的化合物具有以下结构：
对于其中r1和/或r2是除h之外的取代基的式(xv)的化合物，与任何该取代基连接的c-环中的碳将是立构中心。在式(xv)中，在不指定与r1和r2连接的c-环上的碳的立体化学的情况下画出它们两者。
更合适地，式(i)的化合物选自：
其中q选自0、1、2、3、4、5或6；
p是0或1；
l是含有1至12个碳原子的亚烃基链；
y1是n或ch；
y2是n或ch；并且其中y1和y2中的至少一个是ch；
y5选自ch和n；
z1选自o、s、nh和n-ch3；
z2选自ch和n；
z3选自s和o；
z4选自ch和n；
r22选自(ch2)jco2h、(ch2)jco2c1-6烷基、(ch2)jnr11r12和c(＝o)-nh-c6h4-(ch2)j-r18；
r18选自co2r11和nr11r12；
r19选自h和(ch2)t-nr20r21；
j和t独立地选自0至6的整数；并且
r11、r12和r23独立地选自h和c1-6烷基。
或者：
(i)r5和r6一起形成双键；
(ii)r5是h并且r6是oh；或
(iii)r5是h并且r6是oc1-6烷基；
条件是当化合物是(xvi)并且p是0时，则z1选自o和s。更合适地，式(i)的化合物选自：
其中q选自0、1、2、3、4、5或6；
p是0或1；
l是含有1至12个碳原子的亚烃基链；
y1是n或ch；
y2是n或ch；并且其中y1和y2中的至少一个是ch；
y5选自ch和n；
z1选自o、s、nh和n-ch3；
z2选自ch和n；
z3选自s和o；
z4选自ch和n；
r19选自h和(ch2)t-nr20r21；
t选自0至6的整数；
r11、r20、r21和r23独立地选自h和c1-6烷基；
或者：
(i)r5和r6一起形成双键；
(ii)r5是h并且r6是oh；或
(iii)r5是h并且r6是oc1-6烷基；
条件是当化合物是(xx)并且p是0时，则z1选自o和s。
更合适地，式(i)的化合物选自：
(a)(s)-5-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
(b)(s)-5-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
(c)(s)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
(d)(s)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
(e)(s)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
(f)(s)-5-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
(g)(s)-4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
(h)(s)-4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
(i)(s)-n-(4-氨基苯基)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢-苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
(j)(s)-n-(2-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)苯并[b]噻吩-5-基)-4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
(k)5-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(62)
(l)(s)-n-(4-氨基苯基)-4-(6-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
和
(m)(s)-n-(2-氨基乙基)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢-苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
在另外的方面，提供式(i)的化合物：
及其盐和溶剂化物，其中：
虚线表示c1和c2、c2和c3以及c3和c4中的一个或多个之间任选存在双键；
r1选自r7、＝ch2、＝ch-(ch2)m-ch3、＝o、(ch2)m-or7、(ch2)m-co2r7、(ch2)m-nr7r8、o-(ch2)n-nr7r8、nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-nh-c(o)-r7、o-(ch2)n-c(o)-nh-r7、(ch2)m-so2r7、o-so2r7、(ch2)m-c(o)r7和(ch2)m-c(o)nr7r8；
r2选自r9、＝ch2、＝ch-(ch2)r-ch3、＝o、(ch2)r-or9、(ch2)r-co2r9、(ch2)r-nr9r10、o-(ch2)s-nr9r10、nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-nh-c(o)-r9、o-(ch2)s-c(o)-nh-r9、(ch2)r-so2r9、o-so2r9、(ch2)r-cor9和(ch2)r-c(o)nr9r10；
r3选自h、c1-12烷基和ch2ph；
r4选自任选地用多至三个任选的取代基取代的苯基和c5-9杂芳基基团，所述取代基选自oh、c1-6烷基、oc1-6烷基、(ch2)j-co2r11、o-(ch2)k-nr11r12、(ch2)j-nr11r12、c(＝o)-nh-(ch2)k-nr11r12；c(＝o)-nh-c6h4-(ch2)j-r18和c(＝o)-nh-(ch2)k-c(＝nh)nr11r12；
r19选自h和(ch2)t-nr20r21；
y1是n或ch；y2是n或ch；并且其中y1和y2中的至少一个是ch；
p是0或1；j、m、r和t独立地选自0至6的整数；
k、n和s独立地选自1至6的整数；
x1选自o、s、nr13、cr13r14、cr13r14o、c(＝o)、c(＝o)nr13、nr13c(＝o)、o-c(o)和c(o)-o；
l选自氨基酸、具有2至6个氨基酸的肽链、可以含有一个或多个碳-碳双键或三键的含有1至12个碳原子的亚烃基链、低聚甲醛链–(och2)1-12-、聚乙二醇链-(och2ch2)1-6-，所述链可以被o、s和/或nh基团和/或c3-9亚杂芳基和/或亚苯基中的一个或多个所中断；
x2选自o、s、nr15、cr15r16、cr15r16o、c(＝o)、c(＝o)nr15、nr15c(＝o)、o-c(o)和c(o)-o或者不存在；
q选自0、1、2、3、4、5和6；
a选自：
对于各a1基团，y3和y4中的一个独立地选自n-r17、s和o；并且y3和y4中的另一个是ch；并且y5独立地选自ch、n、s和coh；并且
对于各a2基团，y6和y7中的一个独立地选自n和ch；并且y6和y7中的另一个是ch；
r7和r9独立地选自h、c1-12烷基、c5-9杂芳基、c6-15杂芳基烷基、苯基和c7-12芳烷基基团；其中所述杂芳基、杂芳基烷基、苯基和芳烷基基团任选地用多至三个任选的取代基取代，所述取代基选自c1-6烷基、oh、oc1-6烷基；
r18选自co2r11和nr11r12；
r8、r10、r11、r12、r13、r14、r15、r16、r17、r20和r21独立地选自h和c1-6烷基；并且
(i)r5和r6一起形成双键；或者(ii)r5是h并且r6是oh；或者(iii)r5是h并且r6是oc1-6烷基。
应用
本发明可以应用于增殖性疾病的治疗。
在某些方面，提供治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括将治疗有效量的式(i)的化合物及其盐和溶剂化物或包含式(i)的化合物及其盐和溶剂化物的组合物施用至受试者。
在某些方面，提供治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括将治疗有效量的靶向缀合物施用至受试者，所述缀合物包含式(i)的化合物及其盐和溶剂化物。
在某些方面，提供治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括将治疗有效量的抗体-药物缀合物施用至受试者，所述缀合物包含式(i)的化合物及其盐和溶剂化物。
术语“增殖性疾病”是指无论是在体外或在体内，过度或异常细胞的不需要的或不受控制的细胞增殖，其是不期望的诸如肿瘤性或增生性生长。增殖性病况的实例包括，但不限于，良性的、恶变前的和恶性的细胞增殖，包括但不限于，赘生物(neoplasms)和肿瘤(例如，组织细胞瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、骨瘤)、癌症(例如，肺癌、小细胞肺癌、肝细胞癌、胃癌或胃癌(包括胃肠癌)、肠癌、结肠癌、肝癌、乳腺癌、成胶质细胞瘤、宫颈癌、卵巢癌、食道癌[或食管癌]、口腔癌、前列腺癌、睾丸癌、肝癌、直肠癌、结直肠癌、子宫内膜或子宫癌、子宫癌、唾液腺癌、肾癌或肾脏癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、肛门癌、阴茎癌，头颈癌、膀胱癌、胰腺癌、脑癌、肉瘤、骨肉瘤、卡波西(kaposi)肉瘤、黑素瘤)、白血病、牛皮癣、骨疾病，纤维增殖性病症(例如,结缔组织的纤维增殖性病症)和动脉粥样硬化。合适地，增殖性疾病选自膀胱癌、骨癌、肠癌、脑癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、头颈癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、黑素瘤、食道癌、口腔癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肾癌、视网膜母细胞瘤、肉瘤、皮肤癌、胃癌、睾丸癌、甲状腺癌和子宫癌。合适地，增殖性疾病选自乳腺癌和宫颈癌。
可以治疗任何类型的细胞，包括但不限于骨骼、眼睛、头颈、肺、肠胃(包括例如口腔、食道、肠、结肠)、乳房(乳房)、子宫颈、卵巢、子宫、前列腺、肝脏(肝细胞)、肾脏(肾细胞)、膀胱、胰腺、脑和皮肤。
技术人员能够容易地确定候选化合物是否治疗任何特定细胞类型的增殖性病况。
合适地，受试者是人类、家畜动物和伴侣动物。
在另外的方面，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物可以直接或间接地连接至靶向剂(例如，抗体、抗体片段、激素等)以提供靶向缀合物。本公开内容的靶向缀合物可以含有一种或多种式(i)的化合物(或其盐和溶剂化物)。本领域中已知多种靶向缀合物并且可以与式(i)的化合物及其盐和溶剂化物一起使用。例如，在特别的方面，靶向缀合物是抗体-药物缀合物，其中一种或多种式(i)的化合物直接或间接地连接至抗体。因此，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物可以用作靶向缀合物上的有效负载。
合适地，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物用于用作靶向缀合物中的药物，所述缀合物通过使式(i)的化合物及其盐和溶剂化物直接地或经由任选的接头基团连接至靶向剂来制备。合适地，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物经由接头基团连接至靶向剂。合适地，靶向缀合物用于在疾病的治疗、更特别是增殖性疾病的治疗中使用。合适地，药物可以通过其含有的任何合适的官能团直接地或经由接头基团连接至靶向剂。典型地，药物含有或者可以经修饰以含有一个或多个官能团，诸如胺、羟基或羧酸基团，用于使药物直接地或经由接头基团连接至靶向剂。在一些方面，式(i)的化合物的一个或多个原子或基团可以在药物连接至抗体期间被消除。在一些方面，靶向剂与细胞表面受体或肿瘤相关抗原结合。在一些方面，靶向剂是抗体。在一些方面，靶向剂是激素。在一些方面，靶向剂是蛋白质。在一些方面，靶向剂是多肽。在一些方面，靶向剂是小分子(例如，叶酸)。
式(i)的化合物可以作为抗体或抗体片段的有效负载应用。式(i)的化合物容易地允许接合至抗体或抗体片段。
抗体药物缀合物
已经建立了抗体疗法用于患有癌症、免疫和血管源性病症的患者的靶向治疗(carter,p.(2006)naturereviewsimmunology6:343-357)。使用抗体-药物缀合物(adc)(即，免疫缀合物)用于局部递送细胞毒性剂或细胞抑制剂(即，在癌症的治疗中杀死或抑制肿瘤细胞的药物)靶向药物部分向肿瘤的递送和其中的细胞内积聚，而系统施用这些非缀合的药剂可以对细胞产生不可接受水平的毒性(xie等人(2006)expert.opin.biol.ther.6(3):281-291；kovtunefa/(2006)cancerres.66(6):3214-3121；law等人(2006)cancerres.66(4):2328-2337；wu等人(2005)naturebiotech.23(9):1137-1145；lambertj.(2005)currentopin.inpharmacol.5:543-549；hamannp.(2005)expertopin.ther.patents15(9):1087-1103；payne,g.(2003)cancercell3:207-212；trailefa/(2003)cancerimmunol.immunother.52:328-337；syrigos和epenetos(1999)anticancerresearch19:605-614)。
由此寻求具有最小毒性的最大功效。设计和改进adc的努力已经集中于单克隆抗体(mab)的选择性以及药物作用机制、药物连接、药物/抗体比率(负载)和药物释放特性(junutula等人,2008bnaturebiotech.,26(8):925-932；doman等人,(2009)blood114(13):2721-2729；us7521541；us7723485；wo2009/052249；mcdonagh(2006)proteineng.design&sel.19(7):299-307；doronina等人,(2006)bioconj.chem.17:114-124；erickson等人,(2006)cancerres.66(8):1-8；等,(2005)clin.cancerres.11:843-852；jeffrey等人,(2005)j.med.chem.48:1344-1358；hamblett等人,(2004)clin.cancerres.10:7063-7070)。
在一些方面，本发明涉及式(i)的化合物及其盐和溶剂化物，其用于用作抗体-药物缀合物中的药物。合适地，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物用于用作抗体-药物缀合物中的药物，所述缀合物通过使式(i)的化合物及其盐和溶剂化物直接地或经由任选的接头基团连接至抗体来制备。合适地，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物经由接头基团连接至抗体。合适地，抗体-药物缀合物用于在疾病的治疗、更特别是增殖性疾病的治疗中使用。合适地，抗体-药物缀合物用于在疾病的治疗、更特别是增殖性疾病的治疗中使用。合适地，药物可以通过其含有的任何合适的官能团直接地或经由接头基团连接至抗体。典型地，药物含有或者可以经修饰以含有一个或多个官能团，诸如胺、羟基或羧酸基团，用于使药物直接地或经由接头基团连接至抗体。在一些方面，抗体药物缀合物的抗体是抗体片段，诸如但不限于单链抗体。在一些方面，式(i)的化合物的一个或多个原子或基团可以在药物连接至抗体期间被消除。在一些方面，抗体与细胞表面受体或肿瘤相关抗原结合。
在一些方面，本发明涉及式(i)的化合物及其盐和溶剂化物作为抗体-药物缀合物中的药物的用途。合适地，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物作为抗体-药物缀合物中的药物的用途通过使式(i)的化合物及其盐和溶剂化物直接地或经由任选的接头基团连接至抗体来实现。合适地，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物经由接头基团连接至抗体。合适地，抗体-药物缀合物用于在疾病的治疗、更特别是增殖性疾病的治疗中使用。合适地，药物可以通过其含有的任何合适的官能团直接地或经由接头基团连接至抗体。典型地，药物含有或者可以经修饰以含有一个或多个官能团，诸如胺、羟基或羧酸基团，用于使药物直接地或经由接头基团连接至抗体。在一些方面，抗体药物缀合物的抗体是抗体片段，诸如但不限于单链抗体。在一些方面，式(i)的化合物的一个或多个原子或基团可以在药物连接至抗体期间被消除。在一些方面，抗体与细胞表面受体或肿瘤相关抗原结合。
式(i)的化合物的取代基可以与dna序列相互作用并且可以经选择以便靶向特定序列。特别地，式(i)的化合物中的以下基团：
可以被选择以靶向特定序列。因此，当以这种方式定制取代基时，式(i)的化合物可以应用于靶向化学疗法。
抗体和抗体片段
术语“抗体”具体涵盖单克隆抗体、多克隆抗体、二聚体、多聚体、多特异性抗体(例如，双特异性抗体)、完整抗体和抗体片段，只要它们呈现所需的生物活性(例如，结合靶细胞或靶组织上的所需抗原的能力)即可。抗体可以是鼠的、人的、人源化的、嵌合的或来源于其它物种的。抗体是由免疫系统产生的蛋白质，其能够识别并结合特定抗原。(janeway,c,travers,p.,walport,m.,shlomchik(2001)immunobiology,第5版,garlandpublishing,newyork)。靶抗原通常具有许多结合位点，也称为表位，其被抗体上的cdr识别。特异性结合不同表位的每种抗体具有不同的结构。因此，一种抗原可以具有多于一种相应的抗体。抗体包括全长免疫球蛋白分子或全长免疫球蛋白分子的免疫学活性部分，即含有免疫特异性结合感兴趣的靶标的抗原的抗原结合位点的分子或其部分，所述靶标包括但不限于癌细胞或产生与自身免疫疾病相关的自身免疫抗体的细胞。免疫球蛋白可以是任何类型(例如，igg、ige、igm、igd和iga)、类别(例如，lgg1、lgg2、lgg3、lgg4、lga1和lga2)或者亚类或同种异型(例如，人g1m1、g1m2、g1m3、非g1m1[其为除g1m1之外的任何同种异型]、g1m17、g2m23、g3m21、g3m28、g3m11、g3m5、g3m13、g3m14、g3m10、g3m15、g3m16、g3m6、g3m24、g3m26、g3m27、a2m1、a2m2、km1、km2和km3)的免疫球蛋白分子。免疫球蛋白可以来源于任何物种，包括人类、鼠或兔子来源。
如本文中所使用的，“与表位结合”用于意指抗体以比非特异性配偶体诸如牛血清白蛋白(bsa，genbank登记号caa76847，版本号caa76847.1gl:3336842，记录更新日期：2011年1月7日，02:30pm)更高的亲和力与表位结合。在一些实施方案中，当在生理条件下测量时，抗体以是抗体对bas的缔合常数至少2、3、4、5、10、20、50、100、200、500、1000、2000、5000、104、105或106-倍高的缔合常数(ka)与表位结合。
术语“抗体片段”是指全长抗体的一部分，例如其抗原结合区或可变区。抗体片段的实例包括fab、fab’、f(ab’)2和scfv片段；双抗体(diabody)；线性抗体；由fab表达文库产生的片段，抗个体基因型(抗-id)抗体，cdr(互补决定区)，单链抗体分子；以及由免疫特异性结合靶抗原(诸如例如癌细胞抗原、病毒抗原或微生物抗原)的任何上述抗体片段和表位结合片段形成的多特异性抗体。如本文中所使用的，术语“单克隆抗体”是指从基本上同质的抗体的群体中获得的抗体，即，构成该群体的各个抗体是相同的，除了可以以微量存在的可能的天然存在的突变以外。单克隆抗体是高度特异性的，其针对单个抗原位点。此外，与包括针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制备物相反，每种单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇或表位。除了它们的特异性之外，单克隆抗体的优点在于它们可以被合成而不被其它抗体污染。修饰语“单克隆”表示如从基本上同质的抗体群体获得的抗体的特征，并且不解释为需要通过任何特殊方法产生该抗体。例如,根据本发明待使用的单克隆抗体可以通过kohler等人(1975)nature256:495首先描述的杂交瘤方法制备，或者可以通过重组dna方法(参见us4816567)制备。单克隆抗体也可以使用clackson等人(1991)nature,352:624-628；marks等人(1991)j.mol.biol.,222:581-597中描述的技术从噬菌体抗体文库中分离，或者从携带完整人类免疫球蛋白系统的转基因小鼠中分离(lonberg(2008)curr.opinion20(4):450-459)。
本文中的抗体(包括单克隆抗体)具体包括“嵌合”抗体，其中抗体结构的一部分(例如重链和/或轻链)与来源于特定物种或属于特定抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而链的其余部分与来源于另一种物种或属于另一种抗体类别或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，以及这些抗体的片段，只要它们呈现所需生物活性即可(us4816567；以及morrison等人(1984)proc.natl.acad.sci.usa,81:6851-6855)。嵌合抗体包括“灵长源化的(primatized)”抗体，其包含来源于非人灵长类(例如，旧大陆猴或猿(oldworldmonkeyorape))的可变结构域抗原结合序列以及人类恒定区序列。本文中的“完整抗体”是包含vl和vh结构域以及轻链恒定结构域(cl)和重链恒定结构域ch1、ch2和ch3的抗体。恒定结构域可以是天然序列恒定结构域(例如，人类天然序列恒定结构域)或其氨基酸序列变体。完整抗体可以具有一种或多种“效应子功能”，所述效应子功能是指可归因于抗体的fc区(天然序列fc区或氨基酸序列变体fc区)的那些生物活性。抗体效应子功能的实例包括c1q结合作用；补体依赖性细胞毒性；fc受体结合作用；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)；吞噬作用；以及细胞表面受体(诸如b细胞受体和bcr)的下调。
本文中公开的抗体可以是经修饰的。例如，为了使它们对人类受试者具有更低的免疫原性。这可以使用本领域技术人员熟悉的多种技术中的任何一种(诸如人类化)来实现。
施用&剂量
式i的化合物可以单独施用或与一种或另一种所述化合物、或与一种或多种不同于式i的化合物的药理学活性化合物组合施用。
本发明的化合物可以适当地与各种组分组合以生产本发明的组合物。合适地，组合物与药用载体或稀释剂组合以生产药物组合物(其可以用于人类或动物用途)。合适的载体和稀释剂包括等渗盐水溶液，例如磷酸盐缓冲盐水。有用的药物组合物及它们的制备方法可以在标准药学文献中找到。参见，例如，handbookforpharmaceuticaladditives,第3版(m.ash和i.ash编),2007(synapseinformationresources,inc.,endicott,newyork,usa)以及remington:thescienceandpracticeofpharmacy,第21版(d.b.troy编)2006(lippincott,williams和wilkins,philadelphia,usa)，它们通过引用并入本文。
本发明的化合物可以通过任何合适的途径施用。合适地，本发明的化合物将通常以包含活性成分的药物制剂的形式，任选地以无毒的有机或无机酸或碱或加成盐的形式，以药用剂型口服或通过任何肠胃外途径施用。
本发明的化合物、它们的药用盐和任一实体的药用溶剂化物可以单独施用，但是将通常与根据预期的施用途径和标准药学实践选择的合适的药物赋形剂、稀释剂或载体混合施用。
例如，本发明的化合物或其盐或溶剂化物可以以片剂、胶囊(包括软凝胶胶囊)、胚珠(ovules)、酏剂、溶液或混悬剂的形式口服、颊部或舌下施用，其可以含有调味剂或着色剂，用于直接-、延迟-、修饰-、持久-、受控-释放或脉冲递送应用。本发明的化合物还可以通过快速分散或快速溶解剂型施用。
这种片剂可以含有赋形剂(诸如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙和甘氨酸)，崩解剂(诸如淀粉(优选玉米、马铃薯或木薯淀粉)、羟基乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠和某些复合硅酸盐)，以及造粒粘结剂(诸如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、羟丙基纤维素(hpc)、蔗糖、明胶和阿拉伯胶)。另外，可以包括润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸、山嵛酸甘油酯和滑石。
类似类型的固体组合物也可以用作明胶胶囊中的填充物。在这方面，优选的赋形剂包括乳糖、淀粉、纤维素、乳糖或高分子量聚乙二醇。对于水性混悬剂和/或酏剂，本发明的化合物可以与以下组合：各种甜味剂或调味剂，着色剂或染料，乳化剂和/或助悬剂，和稀释剂(诸如水、乙醇、丙二醇和甘油)，及其组合。
修饰释放和脉冲释放剂型可以含有赋形剂，诸如对于立即释放剂型详细描述的那些赋形剂以及充当释放速率修饰剂的另外的赋形剂，这些赋形剂被涂覆在设备主体上和/或包含在设备主体中。释放速率修饰剂包括，但不限于，羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、乙酸纤维素、聚环氧乙烷、黄原胶、卡波姆、甲基丙烯酸铵共聚物、氢化蓖麻油、巴西棕榈蜡、石蜡、邻苯二甲酸乙酸纤维素、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、甲基丙烯酸共聚物及其混合物。修饰释放和脉冲释放剂型可以含有释放速率修饰赋形剂中的一种或组合。释放速率修饰赋形剂可以存在于剂型内(即基质内)和/或剂型上(即在表面或涂层上)。
快速分散或溶解剂型制剂(fddf)可以含有以下成分：阿斯巴甜、乙酰氨基磺酸钾、柠檬酸、交联羧甲基纤维素钠、交聚维酮、二抗坏血酸、丙烯酸乙酯，乙基纤维素、明胶、羟丙基甲基纤维素、硬脂酸镁、甘露醇、甲基丙烯酸甲酯、薄荷调味剂、聚乙二醇、煅制二氧化硅、二氧化硅、羟基乙酸淀粉钠、硬脂酰富马酸钠、山梨糖醇、木糖醇。
本发明的化合物还可以肠胃外(例如静脉内、动脉内)施用，或者它们可以通过输注技术施用。对于这种肠胃外施用，它们最好以无菌水溶液的形式使用，其可以含有其它物质，例如足够的盐或葡萄糖以使溶液与血液等渗。如有需要，水溶液应该适当地缓冲(优选至3-9的ph)。在无菌条件下制备合适的肠胃外制剂容易通过本领域技术人员熟知的标准药学技术完成。
合适地，本发明的制剂最佳用于例如口服、静脉内等施用途径。
在治疗过程期间，施用可以以一个剂量连续或间歇地(例如以适当间隔的分次剂量)进行。确定最有效的手段和剂量的方法对于技术人员是公知的，并且将随用于治疗的制剂、治疗目的、被治疗的靶细胞和被治疗的受试者而变化。可以由治疗医生、兽医或临床医师所选择的剂量水平和剂量方案来进行单次或多次施用。
取决于待治疗的病症和患者以及施用途径，组合物可以以不同的剂量施用。例如，成年人的典型剂量可以是100ng至25mg(合适地，约1μg至约10mg)/kg受试者体重/天。
合适地，当估计人类受试者的初始剂量时，可以从试验动物的研究中获得指导。例如，当鉴定了小鼠的特定剂量时，合适地，人类初始试验剂量可以是给予小鼠mg/kg值的约0.5倍至2倍。
其它形式
除非另有说明，否则包括于以上内容的是这些取代基的众所周知的离子、盐、溶剂化物和受保护的形式。例如，对羧酸(-cooh)的提及还包括阴离子(羧酸根)形式(-coo-)，其盐或溶剂化物，以及常规的受保护的形式。类似地，对氨基的提及包括质子化形式(-n+hr1r2)，氨基的盐或溶剂化物(例如盐酸盐)，以及氨基的常规的受保护的形式。类似地，对羟基的提及还包括阴离子形式(-o-)，其盐或溶剂化物，以及常规的受保护的形式。
异构体、盐和溶剂化物
某些化合物可以以一种或多种特定的几何、旋光、对映、非对映、差向异构、位阻异构(atropic)、立体异构、互变异构、构象异构或异头物形式存在，包括但不限于顺式-和反式-形式；e-和z-形式；c-、t-和r-形式；内-和外-形式；r-、s-和内消旋-形式；d-和l-形式；d-和l-形式；(+)和(-)形式；酮-、烯醇-和烯醇化物-形式；同-和反-形式；向斜-和背斜-形式；α-和β-形式；轴向和赤道形式；船-、椅-、扭转-、信封-和半椅-形式；及其组合，在下文统称为“异构体”(或“异构形式”)。
注意，除了下面讨论的互变异构形式，特别从如本文中所使用的术语“异构体”中排除的是结构(或构成)异构体(即，原子间连接不同而不仅仅是原子在空间上的位置不同的异构体)。例如，对甲氧基基团-och3的提及不被解释为对其结构异构体羟甲基基团-ch2oh的提及。
对一类结构的提及还可以包括属于该类的结构异构形式(例如，c1-7烷基包括正丙基和异丙基；丁基包括正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基；甲氧基苯基包括邻-、间-和对-甲氧基苯基)。
上述排除不适用于互变异构形式，例如酮-、烯醇-和烯醇化物-形式，如在例如以下互变异构对中：酮/烯醇、亚胺/烯胺、酰胺/亚氨基醇、脒/脒、亚硝基/肟、硫酮/烯硫醇、n-亚硝基/羟基偶氮以及硝基/异硝基。
注意，术语“异构体”中特别包括的是具有一个或多个同位素取代基的化合物。例如，h可以是任何同位素形式，包括1h、2h(d)和3h(t)；c可以是任何同位素形式，包括12c、13c和14c；o可以是任何同位素形式，包括16o和18o；等等。
除非另有说明，否则对特定化合物的提及包括所有所述异构形式，包括(全部或部分)外消旋及其其它混合物。
制备(例如不对称合成)和分离(例如分步结晶和色谱手段)这种异构形式的方法是本领域已知的，或者是通过以已知的方式改变本文教导的方法或已知的方法而容易地获得的。
除非另有说明，否则对特定化合物的提及还包括其离子、盐、溶剂化物和受保护的形式，例如如下所讨论的。
在一些实施方案中，式(i)的化合物及其盐和溶剂化物包含式(i)的化合物的药用盐。
式(i)的化合物(包括以上具体指出的化合物)可以形成药用复合物、盐、溶剂化物和水合物。这些盐包括无毒酸加成盐(包括二酸)和碱式盐。
如果化合物是阳离子的或具有可以是阳离子的官能团(例如-nh2可以是-nh3+)，则可以与合适的阴离子形成酸加成盐。合适的无机阴离子的实例包括，但不限于，来源于以下无机酸的那些：盐酸、硝酸、亚硝酸、磷酸、硫酸、亚硫酸、氢溴酸、氢碘酸、氢氟酸、磷酸和亚磷酸。合适的有机阴离子的实例包括，但不限于，来源于以下有机酸的那些：2-乙酰氧基苯甲酸、乙酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟脑磺酸、肉桂酸、柠檬酸、依地酸、乙烷二磺酸、乙磺酸、富马酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、谷氨酸、羟基乙酸、羟基马来酸、羟基萘羧酸、羟基乙磺酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、甲磺酸、粘酸、油酸、草酸、棕榈酸、扑酸、泛酸、苯乙酸、苯磺酸、丙酸、丙酮酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、磺胺酸、酒石酸、甲苯磺酸和戊酸。合适的高分子有机阴离子的实例包括，但不限于，来源于以下高分子酸的那些：鞣酸、羧甲基纤维素。所述盐包括乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐、碳酸盐、硫酸氢盐、硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环己氨磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐(hibenzate)、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐，马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基磺酸盐、萘酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、扑酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、蔗糖酸盐(saccharate)、硬脂酸盐、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐和昔萘酸盐(xinofoate)。
例如，如果化合物是阴离子的或具有可以是阴离子的官能团(例如-cooh可以是–coo-)，则可以与合适的阳离子形成碱式盐。合适的无机阳离子的例子包括，但不限于，金属阳离子(诸如碱金属或碱土金属阳离子)、铵和取代的铵阳离子以及胺。合适的金属阳离子的实例包括钠(na+)、钾(k+)、镁(mg2+)、钙(ca2+)、锌(zn2+)和铝(al3+)。合适的有机阳离子的的实例包括，但不限于，铵离子(即，nh4+)和取代的铵离子(例如，nh3r+、nh2r2+、nhr3+、nr4+)。一些合适的取代的铵离子的实例是来源于以下的那些：乙胺、二乙胺、二环己胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、苄胺、苯基苄胺、胆碱、葡甲胺和氨丁三醇以及氨基酸(诸如赖氨酸和精氨酸)。常用季铵离子的实例是n(ch3)4+。合适的胺的实例包括精氨酸、n,n’-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、二环己胺、乙二胺、甘氨酸、赖氨酸、n-甲基葡糖胺、乙醇胺、2-氨基-2-羟甲基-丙-1,3-二醇和普鲁卡因。对于可用的酸加成盐或碱式盐的讨论，参见s.m.berge等人,j.pharm.sci.(1977)66:1-19；还参见stahl和wermuth,handbookofpharmaceuticalsalts:properties,selection,anduse(2011)。
可以使用各种方法制备药用盐。例如，可以使式1的化合物与合适的酸或碱反应以得到所需盐。还可以使式1的化合物的前体与酸或碱反应以去除酸不稳定或碱不稳定的保护基或打开前体的内酯或内酰胺基团。另外，可以通过用合适的酸或碱处理或通过与离子交换树脂接触将式1的化合物的盐转化成另一种盐。在反应之后，如果盐从溶液中沉淀出来，则可以通过过滤分离所述盐，或者通过蒸发回收盐。盐的电离程度可以从完全电离到几乎未电离。
制备、纯化和/或处理活性化合物的相应溶剂化物可能是方便的或期望的。术语“溶剂化物”描述了包含化合物和一种或多种药用溶剂分子(例如etoh)的分子复合物。术语“水合物”是其中溶剂为水的溶剂化物。药用溶剂化物包括其中溶剂可以被同位素取代的那些(例如，d2o、丙酮-d6、dmso-d6)。
对于有机化合物的溶剂合物和水合物，目前可接受的分类体系是区分分离位点、通道和金属-离子配位溶剂合物和水合物的分类体系。参见，例如，k.r.morris(h.g.brittain编)polymorphisminpharmaceuticalsolids(1995)。分离位点溶剂化物和水合物是其中通过插入有机化合物的分子使溶剂(例如水)分子与彼此直接接触分离的溶剂化物和水合物。在通道溶剂化物中，溶剂分子位于晶格通道中，在其中它们与其它溶剂分子相邻。在金属-离子配位溶剂化物中，溶剂分子与金属离子键合。
当溶剂或水紧密结合时，独立于湿度，复合物将具有明确的化学计量。然而，当溶剂或水弱结合时，如在通道溶剂合物和吸湿化合物中，水或溶剂含量将取决于湿度和干燥条件。在这种情况下，通常将观察到非化学计量。
式i的化合物包括pdd的亚胺、甲醇胺和甲醇胺醚形式。当亲核溶剂(h2o、roh)跨越pdd部分的亚胺键添加时，则形成甲醇胺或甲醇胺醚。这些形式之间的这些平衡的平衡取决于其中化合物存在的条件以及部分本身的性质。
这些化合物可以以固体形式分离，例如通过冷冻干燥分离。
在所附的独立权利要求和从属权利要求中阐述了进一步的特定和优选方面。从属权利要求的特征可以适当地与独立权利要求的特征以及除权利要求书中明确阐述的那些之外的组合进行组合。
合成策略
式(i)的化合物可以使用以下描述的技术制备。一些方案和实例可以省略常见反应的细节，包括氧化、还原等，分离技术(萃取、蒸发、沉淀、色谱、过滤、研磨、结晶等)，以及有机化学领域的普通技术人员已知的分析程序。所述反应和技术的细节可以在许多论文中找到，包括richardlarock,comprehensiveorganictransformations,aguidetofunctionalgrouppreparations,第2版(2010)，以及michaelb.smith和其他人编辑的多卷系列,compendiumoforganicsyntheticmethods(1974etseq.)。原材料和试剂可以从商业来源获得或者可以使用文献方法制备。一些反应方案可以省略由化学转化产生的次要产物(例如，来自酯水解的醇，来自二酸脱羧的co2等)。另外，在一些情况下，反应中间体可以在未经分离或纯化的情况下(即原位)在后续步骤中使用。
在以下一些反应方案和实例中，某些化合物可以使用保护基来制备，所述保护基防止在其它反应位点处的不希望的化学反应。保护基也可以用于增强溶解度或以其它方式改变化合物的物理性质。对于保护基策略的讨论，用于安装和去除保护基的材料和方法的描述，以及常见官能团(包括胺、羧酸、醇、酮、醛等)的可用保护基的汇编，参见t.w.greene和p.g.wuts,protectinggroupsinorganicchemistry,第4版,(2006)以及p.kocienski,protectivegroups,第3版(2005)。
通常，尽管某些反应可能受益于使用过量的一种或多种反应物，但是整个说明书中描述的化学转变可以使用基本上化学计算量的反应物进行。另外，整个说明书中公开的许多反应可以在约室温(rt)和环境压力下进行，但是取决于反应动力学、产率等，一些反应可以在高压下进行或者利用更高的温度(例如回流条件)或更低的温度(例如-78℃至0℃)进行。在本发明公开内容中对化学计量范围、温度范围、ph范围等的任何提及，无论是否明确地使用词语“范围”，还包括所指示的端点。
许多化学转化也可以利用一种或多种可能影响反应速率和产率的相容溶剂。取决于反应物的性质，所述一种或多种溶剂可以是极性质子性溶剂(包括水)、极性非质子性溶剂、非极性溶剂或一些组合。代表性的溶剂包括饱和脂族烃(例如，正戊烷、正己烷、正庚烷、正辛烷)；芳香烃(例如，苯、甲苯、二甲苯)；卤代烃(例如，二氯甲烷、氯仿、四氯化碳)；脂族醇(例如，甲醇、乙醇、丙-1-醇、丙-2-醇、丁-1-醇、2-甲基-丙-1-醇、丁-2-醇、2-甲基-丙-2-醇、戊-1-醇、3-甲基-丁-1-醇、己-1-醇、2-甲氧基-乙醇、2-乙氧基-乙醇、2-丁氧基-乙醇、2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙醇、2-(2-乙氧基-乙氧基)-乙醇、2-(2-丁氧基-乙氧基)-乙醇)；醚(例如，乙醚、二异丙醚、二丁醚、1,2-二甲氧基-乙烷、1,2-二乙氧基-乙烷、1-甲氧基-2-(2-甲氧基-乙氧基)-乙烷、1-乙氧基-2-(2-乙氧基-乙氧基)-乙烷、四氢呋喃、1,4-二
在所附的独立权利要求和从属权利要求中阐述了进一步的特定和优选方面。从属权利要求的特征可以适当地与独立权利要求的特征以及除权利要求书中明确阐述的那些之外的组合进行组合。
附图简述
现在将参考附图进一步描述本发明的实施方案，其中：
图1显示了hplc色谱图，其提供了使用c8连接的pdd单体13与nfκb转录因子结合序列形成dna加合物的证据；
图2显示了hplc色谱图，其提供了使用c8连接的pdd单体17与nfκb转录因子结合序列形成dna加合物的证据；
图3显示了hplc色谱图，其提供了使用c8连接的pdd单体20与nfκb转录因子结合序列形成dna加合物的证据；
图4显示了hplc色谱图，其提供了使用c8连接的pdd单体24与nfκb转录因子结合序列形成dna加合物的证据。
实施例
一般性说明
合成结构单元和试剂购自maybridgechemicals(uk)、fluorochem(usa)、chemshuttleinc(usa)和sigma-aldrich(uk)。溶剂购自sigma-aldrich(uk)和fisherscientific(uk)。无水反应在氮气的惰性气氛下在预先烘干的玻璃器皿中进行。在未经进一步干燥的情况下按原样使用无水溶剂。薄层层析(tlc)在硅胶铝板(merck60,f254)上进行，并且柱层析使用硅胶(merck9385,230-400目astm,40-63μm)(同时通过薄层层析监测：uv(254nm)，并且高锰酸钾的碱性水溶液作为染色剂)手动进行，或者使用grace
方法a(10分钟)：在3分钟内从95％a/5％b到50％b。然后在2分钟内从50％b到80％b。然后在1.5分钟内从80％b到95％b，并且保持恒定1.5分钟。然后在0.2分钟内将其降低至5％b，并且维持5％b达1.8分钟。流速是0.5ml/min，经由零死体积t型管分为200μl，使其流入质谱仪。uv检测器的波长范围是220-400nm。
方法b(5分钟)：在3分钟内从95％a/5％b到90％b。然后在0.5分钟内从90％b到95％b，并且保持恒定1分钟。然后在0.5分钟内将其降低至5％b。流速是1.0ml/min，经由零死体积t型管分为100μl，使其流入质谱仪。uv检测器的波长范围是220-500nm。
一般合成方案
i)k2co3,dmf,甲基-4-溴丁酸酯,r.t.；ii)kno3,tfa,0-5℃；iii)kmno4,丙酮,h2o,回流；iv)草酰氯,(s)-哌啶-2-基甲醇,dmfcat.,et3n,ch2cl2,0℃-r.t.；v)h2,pd/c,etoh/etoac；vi)氯甲酸烯丙酯,吡啶,ch2cl2,-10℃-r.t.；vii)tempo,baib,ch2cl,r.t.；viii)ptsa,dhp,etoac,r.t.；ix)naoh,二
实施例1：4-(4-甲酰基-2-甲氧基苯氧基)丁酸甲酯(1)
将香草醛(20.0g,131mmol)、4-溴丁酸甲酯(17.5ml,139mmol)和碳酸钾(27.2g,197mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(100ml)中的混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用水(500ml)稀释，并且通过过滤获得标题化合物(30.2g,91％)，其为白色固体。在未经任何进一步纯化的情况下使产物进行下一个步骤。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.84(s,1h),7.46-7.37(m,2h),6.98(d,j＝8.2hz,1h),4.16(t,j＝6.3hz,2h),3.91(s,3h),3.69(s,3h),2.56(t,j＝7.2hz,2h),2.20(quin,j＝6.7hz,2h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ190.9,173.4,153.8,149.9,130.1,126.8,111.6,109.2,67.8,56.0,51.7,30.3,24.2；msm/z(eims)＝271.9(m+na)+；lcms(方法a):tr＝6.48min。
实施例2：4-(4-甲酰基-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)丁酸甲酯(2)
在0℃向硝酸钾(10.0g,98.9mmol)在tfa(50ml)中的搅拌溶液中滴加4-(4-甲酰基-2-甲氧基苯氧基)丁酸甲酯(1)(20.0g,79.2mmol)在tfa(50ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌1小时。然后将其在真空中浓缩并且用乙酸乙酯(400ml)稀释。将有机层用盐水(3x100ml)和碳酸氢钠饱和水溶液(2x80ml)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩以得到标题化合物(23.5g,100％)，其为黄色固体。在未经任何进一步纯化的情况下使产物进行下一个步骤。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.42(s,1h),7.60(s,1h),7.39(s,1h),4.21(t,j＝6.3hz,2h),3.98(s,3h),3.70(s,3h),2.61-2.53(m,2h),2.22(quin,j＝6.6hz,2h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ187.8,173.2,153.5,151.7,143.8,125.5,109.9,108.1,68.6,56.6,51.8,30.2,24.1；msm/z(eims)＝296.1(m-h)-；lcms(方法a):tr＝6.97min。
实施例3：5-甲氧基-4-(4-甲氧基-4-氧代丁氧基)-2-硝基苯甲酸(3)
向4-(4-甲酰基-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)丁酸甲酯(2)(23.0g,77.4mmol)在丙酮(600ml)中的溶液中快速加入高锰酸钾(46.0g,291mmol)在水(400ml)中的热(70℃)溶液。将反应混合物在70℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土。将硅藻土饼用热水(200ml)洗涤。将亚硫酸氢钠在hcl(200ml)中的溶液添加至滤液中，用二氯甲烷(2x400ml)萃取。将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱层析(二氧化硅)纯化所得残余物，用甲醇/二氯甲烷(0％至50％)洗脱，以得到标题化合物(17.0g,70％)，其为浅黄色固体。
1hnmr(400mhz,meod)δ7.47(s,1h),7.25(s,1h),4.13(t,j＝6.2hz,2h),3.94(s,3h),3.68(s,3h),2.54(t,j＝7.2hz,2h),2.17-2.06(m,2h)；13cnmr(100mhz,meod)δ175.3,168.6,153.8,151.3,143.1,122.8,112.4,109.2,69.6,57.0,52.2,31.2,25.5；msm/z(eims)＝311.9(m-h)-；lcms(方法a):tr＝6.22min。
实施例4：(s)-4-(4-(2-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)丁酸甲酯(4)
将5-甲氧基-4-(4-甲氧基-4-氧代丁氧基)-2-硝基苯甲酸(3)(8.0g,25.5mmol)、草酰氯(6.6ml,77.0mmol)和无水n,n-二甲基-甲酰胺(2滴)在无水二氯甲烷(100ml)中的混合物在室温下搅拌1小时。将无水甲苯(20ml)添加至反应混合物中，然后在真空中浓缩。在–10℃将所得残余物在无水二氯甲烷(10ml)中的溶液滴加至(s)-哌啶-2-基甲醇(3.8g,33.4mmol)和三乙胺(10.7ml,77.0mmol)在无水二氯甲烷(90ml)中的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌2小时，然后用盐酸(1m,50ml)和盐水(50ml)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱层析(二氧化硅)纯化所得残余物，用甲醇/二氯甲烷(0％至5％)洗脱，以得到标题化合物(9.2g,73％)，其为黄色油状物。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.68-7.64(m,1h),6.77-6.70(m,1h),4.16-4.07(m,3h),3.93-3.89(m,3h),3.83(s,1h),3.67(s,3h),3.15(d,j＝1.4hz,1h),3.11(s,1h),2.78(s,1h),2.56-2.50(m,3h),2.21-2.12(m,4h),1.74-1.55(m,4h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ173.3,168.1,154.6,148.2,137.4,127.6,111.4,108.3,68.3,60.6,56.7,53.5,51.7,43.3,38.0,34.9,30.3,24.1,19.7；msm/z(eims)＝411.0(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.28min。
实施例5：(s)-4-(5-氨基-4-(2-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯氧基)丁酸甲酯(5)
向(s)-4-(4-(2-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)丁酸甲酯(4)(9.2g,22.4mmol)在乙醇(40ml)和乙酸乙酯(10ml)中的溶液中添加活性炭上的钯(10％基重)(920mg)。在parr装置中在35psi下将反应混合物氢化3小时。将反应混合物过滤通过硅藻土并且将所得饼用乙酸乙酯洗涤。将滤液在真空中浓缩以得到标题化合物(9.0g,90％)，其为粉红色固体。在未经任何进一步纯化的情况下使产物进行下一个步骤。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.69(s,1h),6.27-6.18(m,1h),4.03-3.94(m,3h),3.94-3.82(m,3h),3.81-3.76(m,1h),3.74(s,3h),3.73-3.68(m,1h),3.67-3.65(m,3h),3.56(d,j＝4.8hz,1h),3.03(s,1h),2.51(t,j＝7.2hz,2h),2.11(quin,j＝6.7hz,2h),1.68-1.59(m,4h),1.55-1.40(m,2h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ173.6,171.2,150.3,141.8,141.1,113.2,112.3,102.4,67.5,60.8,60.4,56.8,51.6,30.4,25.8,24.3,21.0,19.9,14.2；msm/z(eims)＝381.0(m+h)+；lcms(方法a):tr＝5.52min。
实施例6：(s)-4-(5-(((烯丙氧基)羰基)氨基)-4-(2-(羟基-甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯氧基)丁酸甲酯(6)
在–10℃向(s)-4-(5-氨基-4-(2-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯氧基)丁酸甲酯(5)(9.0g,23.7mmol)和吡啶(4.4ml,54.4mmol)在无水二氯甲烷(100ml)中的溶液中滴加氯甲酸烯丙酯(2.6ml,24.8mmol)在无水二氯甲烷(20ml)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将反应混合物顺序地用硫酸铜(ii)饱和水溶液(80ml)、水(80ml)和碳酸氢钠饱和水溶液(80ml)洗涤。将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱层析纯化(二氧化硅)所得残余物(11.0g粗产物中的2.0g)，用甲醇/二氯甲烷(0％至1％)洗脱，以得到标题化合物(930mg，47％，基于纯化的量)，其为黄色油状物。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.30(brs,1h),7.63(brs,1h),6.76(brs,1h),5.92(ddt,j＝17.2,10.6,5.4,5.4hz,1h),5.37-5.28(m,1h),5.20(dq,j＝10.4,1.3hz,1h),4.65-4.56(m,2h),4.06(t,j＝6.2hz,2h),3.94-3.82(m,1h),3.79(s,3h),3.66(s,3h),3.62-3.54(m,1h),3.40(brs,1h),3.10-2.88(m,1h),2.52(t,j＝7.4hz,2h),2.22-2.04(m,3h),1.64(brs,4h),1.56-1.31(m,2h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ173.5,170.6,153.9,149.7,144.8,132.6,130.1,117.6,116.9,110.8,107.1,106.0,67.7,65.6,60.7,56.3,53.5,51.6,43.1,30.5,25.7,24.4,19.7；msm/z(eims)＝465.1(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.47min。
实施例7：(6as)-6-羟基-2-甲氧基-3-(4-甲氧基-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(s)-4-(5-(((烯丙氧基)羰基)氨基)-4-(2-(羟甲基)-哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯氧基)丁酸甲酯(6)(930mg,2.0mmol)在二氯甲烷(45ml)中的溶液中添加tempo(32mg,0.20mmol)和(二乙酰氧基碘)-苯(773mg,2.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后顺序地用焦亚硫酸钠饱和水溶液(20ml)、碳酸氢钠饱和水溶液(20ml)、水(20ml)和盐水(20ml)洗涤。然后将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱层析(二氧化硅)纯化所得残余物，用甲醇/二氯甲烷(0％至5％)洗脱，以得到标题化合物(825mg,89％)，其为乳白色固体。
msm/z(eims)＝462.9(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.30min。
实施例8：(6as)-2-甲氧基-3-(4-甲氧基-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
将(6as)-6-羟基-2-甲氧基-3-(4-甲氧基-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝546.7(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.70min。
实施例9：4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-甲氧基-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝532.9(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.98min。
实施例10：5-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(10)
将4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸(500mg,2.1mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(725mg,3.8mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(577mg,4.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后添加5-氨基苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(392mg,1.9mmol)并且将所得混合物在室温下搅拌16小时。然后将其倒入冰水(20ml)中并且用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机萃取物顺序地用1m柠檬酸(30ml)、碳酸氢钠饱和水溶液(35ml)、水(35ml)和盐水(35ml)洗涤。然后将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱层析(二氧化硅)纯化所得残余物，用乙酸乙酯/己烷(0％至50％)洗脱，以得到标题化合物(610mg,75％)，其为米色固体。
msm/z(eims)＝430.2(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.90min。
实施例11：5-(4-氨基-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯盐酸盐(11)
将5-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)苯并-[b]噻吩-2-甲酸甲酯(10)(610mg,1.4mmol)溶于盐酸(4m，在二
msm/z(eims)＝329.9(m+h)+；lcms(方法a):tr＝5.52min。
实施例12：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-((2-(甲氧基羰基)苯并-[b]噻吩-5-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代-丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝844.0(m+h)+；lcms(方法a):tr＝8.10min。
实施例13：(s)-5-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-((2-(甲氧基羰基)苯并[b]-噻吩-5-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]-二氮杂
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.35(s,1h),8.28(s,1h),8.02(s,1h),7.94(s,1h),7.90(d,j＝5.7hz,1h),7.75(d,j＝8.8hz,1h),7.58(dd,j＝8.7,2.1hz,1h),7.42-7.41(m,1h),7.13(d,j＝1.6hz,1h),6.78(s,1h),6.56(d,j＝1.6hz,1h),4.25-4.18(m,1h),4.08(t,j＝6.0hz,2h),3.93(s,3h),3.88(s,3h),3.83(s,3h),3.79-3.75(m,1h),3.23-3.16(m,1h),2.52-2.47(m,2h),2.21(d,j＝6.4hz,1h),2.18(d,j＝2.1hz,1h),1.96(brs,2h),1.86-1.81(m,2h),1.77-1.66(m,2h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ170.0,167.6,163.4,163.2,160.0,150.7,148.0,140.0,139.2,137.6,135.8,134.2,130.6,123.0,122.9,121.5,121.0,120.1,116.2,111.7,110.3,104.3,68.1,56.1,53.5,52.5,49.7,40.0,36.8,33.0,24.9,24.5,22.9,18.3；msm/z(eims)＝658.0(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.92min。
实施例14：(6as)-3-(4-((2-(乙氧基羰基)-1-甲基-1h-咪唑-4-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)-氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝683.7(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.35min。
实施例15：4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-3-(4-((2-(乙氧基羰基)-1-甲基-1h-咪唑-4-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝656.2(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.53min。
实施例16：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((2-((2-(甲氧基羰基)-苯并[b]噻吩-5-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-咪唑-4-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝844.9(m+h)+；lcms(方法a):tr＝8.22min。
实施例17：(s)-5-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((2-((2-(甲氧基羰基)苯并[b]-噻吩-5-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-咪唑-4-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]-二氮杂
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ9.07(s,1h),8.36(d,j＝2.0hz,1h),8.13(s,1h),8.03(s,1h),7.90(d,j＝5.7hz,1h),7.82(d,j＝8.7hz,1h),7.56(dd,j＝8.7,2.1hz,1h),7.49-7.43(m,2h),6.81(s,1h),4.26-4.17(m,2h),4.10-4.06(m,3h),3.98-3.93(m,6h),3.93-3.85(m,1h),3.74(td,j＝5.8,4.0hz,1h),3.27-3.16(m,1h),2.68-2.60(m,2h),2.29(quin,j＝6.4hz,2h),2.10-2.02(m,1h),1.97-1.89(m,1h),1.83-1.77(m,2h),1.76(s,2h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.7,167.5,163.3,163.2,160.3,156.7,150.4,148.0,140.0,139.3,135.8,135.0,130.6,123.2,120.1,115.4,114.9,110.3,98.0,67.8,65.2,56.1,52.6,49.6,39.8,35.9,32.9,31.0,29.3,24.7,24.6,22.9,18.4；msm/z(eims)＝659.1(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.00min。
实施例18：4-(4-氨基苯基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(18)
将4-溴-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(750mg,3.44mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苯胺(905mg,4.13mmol)和碳酸钾(1.43g,10.3mmol)在甲苯/乙醇/水(9:3:1)(总计13ml)中的混合物用氮脱气5分钟。然后加入四(三苯基膦)钯(0)(230mg,6mol％)并且将反应混合物在100℃用微波照射15分钟。然后将水(10ml)添加至反应混合物，将其用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。然后将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱层析(二氧化硅)纯化所得残余物，用乙酸乙酯/己烷(0％至50％)洗脱，以得到标题化合物(145mg,18％)，其为黄色固体。
msm/z(eims)＝230.9(m+h)+；lcms(方法a):tr＝5.17min。
实施例19：(6s,6as)-2-甲氧基-3-(4-((2-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-咪唑-4-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝868.1(m+h)+；lcms(方法a):tr＝8.22min。
实施例20：(s)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6s,6as)-2-甲氧基-3-(4-((2-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-咪唑-4-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.95(s,1h),8.27(s,1h),7.89(d,j＝5.7hz,1h),7.59(d,j＝8.6hz,2h),7.47-7.41(m,4h),7.19(d,j＝2.0hz,1h),7.05(d,j＝1.9hz,1h),6.79(s,1h),4.25-4.18(m,1h),4.17-4.12(m,1h),4.12-4.06(m,1h),4.04(s,3h),3.95(s,3h),3.93(s,3h),3.84(s,3h),3.76-3.71(m,1h),3.26-3.16(m,1h),2.65-2.57(m,2h),2.26(t,j＝6.4hz,2h),2.09-2.01(m,2h),1.96-1.89(m,1h),1.85-1.77(m,2h),1.67(dd,j＝10.9,5.5hz,1h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.7,167.5,163.3,161.7,156.5,150.4,148.0,140.0,135.8,135.6,133.7,130.6,126.1,125.5,123.1,122.8,120.0,114.6,111.6,110.2,67.8,56.1,51.2,49.6,39.8,37.0,35.8,32.8,31.0,29.7,24.7,24.5,22.9,18.4；msm/z(eims)＝682.1(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.03min。
实施例21：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝668.8(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.42min。
实施例22：4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝677.0(m+na)+；lcms(方法a):tr＝6.92min。
实施例23：(6s,6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
msm/z(eims)＝867.0(m+h)+；lcms(方法a):tr＝8.10min。
实施例24：(s)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6s,6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.09(s,1h),8.04-8.01(m,1h),7.90(d,j＝5.8hz,1h),7.58(s,1h),7.56(s,1h),7.44-7.40(m,3h),7.18(d,j＝2.0hz,1h),7.12(d,j＝1.8hz,1h),7.04(d,j＝2.0hz,1h),6.78(s,1h),6.50(d,j＝1.9hz,1h),4.26-4.18(m,1h),4.07(t,j＝6.0hz,2h),3.94(s,3h),3.87(s,3h),3.84(d,j＝2.9hz,6h),3.76(td,j＝5.7,3.9hz,1h),3.25-3.15(m,1h),2.49(t,j＝7.0hz,2h),2.24-2.18(m,2h),2.10-2.03(m,1h),2.01-1.93(m,2h),1.86-1.80(m,2h),1.73-1.66(m,1h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ169.9,167.6,163.5,161.7,159.7,150.7,147.9,139.9,136.4,130.2,126.1,125.4,123.3,123.0,120.6,119.8,114.6,111.7110.2,103.9,68.1,56.1,53.8,51.2,49.7,39.9,37.0,36.7,33.0,31.0,29.3,24.9,24.5,22.9,18.4；msm/z(eims)＝681.0(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.98min。
实施例25：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((4-(甲氧基羰基)苯基)-氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝666(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.88min。
实施例26：4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((4-(甲氧基羰基)苯基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并-[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝652(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.13min。
实施例27：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((4-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)苯基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝864(m+h)+；lcms(方法a):tr＝8.10min。
实施例28：(s)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((4-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)苯基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.14(brs,1h),8.06(brs,1h),7.91(d,j＝5.7hz,1h),7.81(d,j＝8.7hz,2h),7.65(d,j＝8.6hz,2h),7.60(d,j＝8.4hz,2h),7.46-7.50(m,2h),7.41(s,1h),7.21(d,j＝2.1hz,1h),7.08(d,j＝1.9hz,1h),6.78-6.82(m,1h),4.24(d,j＝14.0hz,1h),4.11-4.18(m,2h),3.95-3.98(m,3h),3.83-3.86(m,6h),3.74-3.79(m,2h),3.18-3.30(m,2h),2.60-2.66(m,2h),2.28(t,j＝6.3hz,2h),1.97(d,j＝6.3hz,2h),1.82-1.88(m,2h)；13cnmr(100mhz,cdcl3)δ215.5,171.1,167.5,165.0,163.4,161.7,150.3,147.8,141.3,140.0,136.2,130.8,128.1,125.6,123.5,123.1,121.5,120.6,119.3,114.7,111.7,110.2,67.9,56.1,51.2,49.7,39.8,37.0,34.3,30.9,25.6,24.5,23.0,18.4；ms(es+):m/z＝678(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.05min。
实施例29：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((4-((2-(甲氧基羰基)苯并-[b]噻吩-5-基)氨基甲酰基)苯基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a]-[1,4]二氮杂
将4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝841(m+h)+；lcms(方法a):tr＝8.15min。
实施例30：(s)-5-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((4-((2-(甲氧基羰基)苯并[b]-噻吩-5-基)氨基甲酰基)苯基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.48(brs,1h),8.39(d,j＝1.9hz,1h),8.31(s,1h),7.97(s,1h),7.91(d,j＝5.8hz,1h),7.77-7.84(m,3h),7.65(dd,j＝8.8,2.0hz,1h),7.57(d,j＝8.6hz,2h),7.38(s,1h),6.79(s,1h),4.24(dt,j＝13.7,4.1hz,1h),4.09-4.17(m,2h),3.95(s,3h),3.79-3.82(m,3h),3.74-3.79(m,1h),3.49(d,j＝3.9hz,1h),3.29-3.41(m,1h),3.17-3.28(m,1h),2.58-2.64(m,2h),2.26(quin,j＝6.2hz,2h),2.05-2.13(m,1h),1.92-2.01(m,1h),1.83-1.87(m,1h),1.07-1.19(m,1h)；13cnmr(cdcl3,100mhz)δ171.2,167.5,165.5,163.4,163.2,150.4,147.8,141.5,140.0,139.3,138.0,135.1,134.4,130.6,128.2,123.0,121.4,120.9,119.2,116.4,111.7,110.1,67.9,56.0,52.6,49.7,39.8,34.2,30.9,24.7,24.5,22.9,18.3；ms(es+):m/z＝655(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.00min。
实施例31：4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-咪唑-2-甲酰胺基)苯甲酸甲酯(31)
将4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-咪唑-2-甲酸(100mg,0.415mmol)在无水二氯甲烷(3ml)中的溶液中加入n-[(二甲基氨基)-1h-1,2,3-三唑并-[4,5-b]吡啶-1-基亚甲基]-n-甲基-甲胺
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ9.16(s,1h),8.01-8.07(m,2h),7.69-7.75(m,2h),7.21(brs,1h),6.84(s,1h),4.07(s,3h),3.92(s,3h),1.53(s,9h)；ms(es-):m/z＝373(m-h)-；lcms(方法a):tr＝7.68min。
实施例32：4-(4-氨基-1-甲基-1h-咪唑-2-甲酰胺基)-苯甲酸甲酯盐酸盐(32)
将4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-咪唑-2-甲酰胺基)-苯甲酸甲酯(31)(40mg,0.11mmol)溶于盐酸(4m，在1,4-二
1hnmr(meod,400mhz)δ7.89-7.95(m,2h),7.72-7.78(m,2h),7.31(s,1h),4.01(s,3h),3.80(s,3h)；13cnmr(meod,100mhz)δ168.0,143.6,132.5,131.6,126.9,123.3,120.6,92.6,68.1,52.3,36.7；ms(es+):m/z＝275(m+h)+；lcms(方法a):tr＝5.43min。
实施例33：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((2-((4-(甲氧基羰基)苯基)-氨基甲酰基)-1-甲基-1h-咪唑-4-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝789(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.87min。
实施例34：(s)-4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((2-((4-(甲氧基羰基)苯基)-氨基甲酰基)-1-甲基-1h-咪唑-4-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ9.13(s,1h),8.24(s,1h),8.03(d,j＝8.7hz,2h),7.90(d,j＝5.7hz,1h),7.65-7.75(m,2h),7.43-7.50(m,2h),6.77-6.83(m,1h),4.12-4.23(m,2h),4.07(s,3h),3.93(s,3h),3.91(s,3h),3.18-3.27(m,1h),2.80(s,3h),2.56-2.68(m,3h),2.23-2.31(m,2h),1.85(d,j＝10.1hz,4h)；13cnmr(cdcl3,100mhz)δ169.3,167.1,166.2,162.9,156.2,150.1,147.6,147.4,141.4,139.6,135.6,132.8,130.5,130.3,125.2,121.1,118.2,114.8,111.2,109.9,94.1,67.4,63.5,55.7,53.4,51.6,49.2,39.4,38.2,35.5,32.5,31.6,30.9,28.9,24.9,24.3,24.1,22.5,19.9,18.0；ms(es+):m/z＝603(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.57min。
实施例35：4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)苯甲酸甲酯(35)
将4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸(100mg,0.416mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(3ml)中的溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(145mg,0.756mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(115mg,0.941mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时。然后添加4-氨基苯甲酸甲酯(57mg,0.38mmol)并且将所得混合物在室温下搅拌16小时。然后将其倒入冰水(40ml)中并且用乙酸乙酯(3x100ml)萃取。将合并的有机萃取物顺序地用柠檬酸水溶液(1m,60ml)、碳酸氢钠饱和水溶液(70ml)、水(70ml)和盐水(70ml)洗涤。然后将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。然后通过柱层析(二氧化硅)纯化所得残余物，用甲醇/二氯甲烷(0％至10％)洗脱，以得到标题化合物(90mg,58％)，其为白色固体。
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ7.99-8.07(m,2h),7.69(s,1h),7.61-7.67(m,2h),6.88(s,1h),6.69(brs,1h),6.25(brs,1h),3.93(s,3h),3.91(s,3h),1.52(s,9h)；13cnmr(cdcl3,100mhz)δ166.6,159.4,153.4,142.3,130.9,125.5,123.1,122.5,119.2,118.7,140.1,80.5,52.0,36.8,28.4；ms(es+):m/z＝374(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.52min。
实施例36：4-(4-氨基-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)-苯甲酸甲酯盐酸盐(36)
将4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)-苯甲酸甲酯(35)(90mg,0.24mmol)溶于盐酸(4m，在1,4-二
1hnmr(meod,400mhz)δ7.99(d,j＝8.7hz,2h),7.80(d,j＝8.7hz,2h),7.13(d,j＝1.9hz,1h),7.09(d,j＝1.9hz,1h),3.96(s,3h),3.89(s,3h)；13cnmr(meod,100mhz)δ168.2,161.2,144.5,131.5,126.9,126.4,123.7,120.8,114.2,109.0,52.5,37.5；ms(es+):m/z＝274(m+h)+；lcms(方法a):tr＝4.98min。
实施例37：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-((4-(甲氧基羰基)苯基)-氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝788(m+h)+；lcms(方法a):tr＝7.77min。
实施例38：(s)-4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-((4-(甲氧基羰基)苯基)-氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(cdcl3,400mhz)δ8.41(s,1h),8.00(s,2h),7.98(s,1h),7.90(d,j＝5.8hz,1h),7.72-7.74(m,1h),7.70-7.72(m,1h),7.41(s,1h),7.14(d,j＝1.8hz,1h),6.79(s,1h),6.57(d,j＝1.8hz,1h),4.22(d,j＝14.1hz,1h),4.09(t,j＝6.0hz,2h),3.89(s,3h),3.88(s,3h),3.83(s,3h),3.74-3.79(m,2h),3.21(d,j＝3.3hz,1h),2.47-2.52(m,2h),2.17-2.23(m,2h),1.93(brs,3h),1.79-1.85(m,2h)；13cnmr(cdcl3,100mhz)δ170.0,167.6,166.8,163.6,159.8,150.7,147.9,142.9,139.9,130.7,124.9,122.8,121.6,121.5,120.8,119.1,111.8,110.4,104.6,68.1,56.1,52.0,49.7,39.9,36.9,33.0,31.0,25.0,24.5,22.9,18.3；ms(es+):m/z＝602(m+h)+；lcms(方法a):tr＝6.52min。
实施例39：4-(4-(4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝853(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.83min。
实施例40：(6as)-3-(4-((5-((4-(5-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将44-(4-(4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝944(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.45min。
实施例41：(s)-n-(4-氨基苯基)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-3-(4-((5-((4-(5-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ9.88-9.96(m,1h),9.81(s,2h),9.50(s,1h),8.32(brs,2h),8.00(d,j＝5.7hz,1h),7.67-7.73(m,2h),7.48(d,j＝8.6hz,2h),7.39(d,j＝1.8hz,1h),7.31-7.35(m,2h),7.30(d,j＝1.6hz,1h),7.27(s,1h),7.22(d,j＝1.5hz,1h),6.96(d,j＝1.6hz,1h),6.80(s,1h),6.51-6.55(m,2h),4.09-4.17(m,1h),3.99-4.05(m,1h),3.90-3.97(m,1h),3.88(s,3h),3.83(s,3h),3.82(s,3h),3.68-3.72(m,1h),3.05-3.16(m,2h),2.44(t,j＝7.3hz,2h),2.02-2.07(m,2h),1.81-1.91(m,1h),1.68-1.78(m,2h),1.56(d,j＝4.9hz,2h)；13cnmr(dmso-d6,100mhz)δ168.8,166.3,164.7,159.5,159.2,150.2,147.1,144.7,139.8,137.0,129.6,128.2,126.1,124.6,124.3,122.0,121.8,120.4,120.2,118.8,113.7,111.3,109.6,104.7,67.7,67.2,55.6,51.1,49.2,38.5,36.2,36.1,35.4,31.8,30.2,24.7,23.7,22.5,17.7；ms(es+):m/z＝757(m+h)+；lcms(方法a):tr＝5.80min。
实施例42：5-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(42)
将4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸(127mg,0.530mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(1ml)中的溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(185mg,0.960mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(147mg,1.20mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4小时。然后添加5-氨基苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(100mg,0.480mmol)并且将所得混合物在室温下搅拌16小时。然后将其倒入冰水(40ml)中并且用乙酸乙酯(3x100ml)萃取。将合并的有机萃取物顺序地用柠檬酸水溶液(1m,60ml)、碳酸氢钠饱和水溶液(70ml)、水(70ml)和盐水(70ml)洗涤。然后将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩以得到标题化合物(185mg,90％)，其为乳白色固体。在未经任何进一步纯化的情况下使产物进行下一个步骤。
ms(es+):m/z＝430(m+h)+；lcms(方法b):tr＝4.07min。
实施例43：5-(4-氨基-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)-苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯盐酸盐(43)
将5-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)苯并-[b]噻吩-2-甲酸甲酯(42)(150mg,0.340mmol)溶于盐酸(4m，在1,4-二
ms(es+):m/z＝364(m+h)+；lcms(方法b):tr＝2.78min。
实施例44：(6as)-2-甲氧基-3-(4-((5-((2-(甲氧基羰基)苯并-[b]噻吩-5-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代-丁氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝844(m+h)+；lcms(方法b):tr4.23min.
实施例45：5-(4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝831(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.82min。
实施例46：(6as)-3-(4-((5-((2-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)苯并-[b]噻吩-5-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代-丁氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将5-(4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝921(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.48min
实施例47：(s)-n-(2-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)苯并[b]噻吩-5-基)-4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-3-(4-((5-((2-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)苯并[b]噻吩-5-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]-二氮杂
1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ10.13(s,1h),9.98-10.03(m,1h),9.95(s,1h),8.358.42(m,1h),8.19(s,1h),8.01(d,j＝5.7hz,1h),7.95(d,j＝8.9hz,1h),7.33-7.40(m,2h),7.23-7.28(m,2h),7.02(s,1h),6.81(s,1h),6.57(d,j＝8.7hz,2h),5.00(br.s.,2h),4.10-4.14(m,1h),3.86(s,3h),3.83(s,3h),3.65-3.74(m,2h),3.15-3.19(m,1h),3.06-3.14(m,1h),2.45(t,j＝7.5hz,3h),2.11-2.13(m,1h),2.00-2.08(m,4h)1.74(dd,j＝9.0,5.3hz,3h)；ms(es+):m/z＝734(m+h)+；lcms(方法a):tr＝5.63min。
一般合成方案
i)k2co3,dmf,6-溴丁酸乙酯,r.t.；ii)kno3,tfa,0-5℃；iii)kmno4,丙酮,h2o,回流；iv)hatu,(s)-哌啶-2-基甲醇,et3n,ch2cl2,0℃-r.t.；v)h2,ni/ra,meoh；vi)氯甲酸烯丙酯,吡啶,ch2cl2,-10℃-r.t.；vii)tempo,baib,ch2cl,r.t.；viii)ptsa,dhp,etoac,r.t.；ix)naoh,二
实施例48：6-(4-甲酰基-2-甲氧基苯氧基)己酸乙酯(48)
将香草醛(6.5g,42.7mmol)、6-溴己酸乙酯(8.0ml,45.0mmol)和碳酸钾(8.70g,63.0mmol)在n,n-二甲基甲醛(50ml)中的混合物在室温下搅拌18小时。将反应混合物用水(100ml)稀释，分离并且用乙酸乙酯(120ml)萃取。将合并的有机萃取物顺序地用水(100ml)、盐水(100ml)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩以得到标题化合物，其为浅黄色油状物(12.5g,99％)。在未经任何进一步纯化的情况下使产物进行下一个步骤。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.84(s,1h),7.42-7.44(dd,j＝8.2,1.9hz,1h),7.40(d,j＝1.9hz,1h),6.96(d,j＝8.1hz,1h),4.08-4.15(m,4h),3.92(s,3h),2.34(t,j＝7.5hz,2h),1.87-1.94(m,2h),1.68-1.75(m,2h),1.49-1.56(m,2h),1.25(t,j＝7.2hz,3h)；ms(es+):m/z＝317(m+na)+；lcms(方法b):tr＝3.82min。
实施例49：6-(4-甲酰基-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)己酸乙酯(49)
在室温向硝酸钾(5.4g,53mmol)在三氟乙酸(25ml)中的搅拌溶液中滴加6-(4-甲酰基-2-甲氧基苯氧基)己酸乙酯(48)(12.5g,42mmol)在三氟乙酸(25ml)中的溶液。将反应混合物搅拌1小时。然后将其在真空中浓缩并且将残余物溶于乙酸乙酯(200ml)中。将其用盐水(3x50ml)然后是碳酸氢钠饱和水溶液(2x40ml)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩以得到标题化合物，其为黄色固体(14.4g,100％)。在未经任何进一步纯化的情况下使产物进行下一个步骤。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ10.43(s,1h)7.58(s,1h),7.40(s,1h),4.10-4.16(m,4h),4.00(s,3h),2.35(t,j＝7.4hz,2h),1.84-1.96(m,2h),1.69-1.76(m,2h),1.50-1.58(m,2h),1.25(t,j＝7.2hz,3h)；ms(es+):m/z＝340(m+h)+；lcms(方法b):tr＝4.02min。
实施例50：4-((6-乙氧基-6-氧代己基)氧基)-5-甲氧基-2-硝基苯甲酸(50)
向6-(4-甲酰基-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)己酸乙酯(49)(7.8g,23.0mmol)在丙酮(200ml)中的溶液中添加高锰酸钾(13.6g,86.0mmol)在水(100ml)中的热(70℃)溶液。然后将混合物在70℃搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土。然后将饼用热水(100ml)洗涤。将亚硫酸氢钠在盐酸(100ml)中的溶液添加至滤液中，并且用二氯甲烷(2x200ml)萃取。将合并的有机萃取物用硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩以得到标题化合物，其为黄色固体(5.0g,61％)，其在未经进一步纯化的情况下在随后的步骤中使用。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.34(s,1h),7.14(s,1h),3.96-4.03(m,4h),3.84(s,3h),2.24(t,j＝7.4hz,2h),1.70-1.77(m,2h),1.55-1.62(m,2h),1.39-1.45(m,2h),1.13(t,j＝7.1hz,3h)；ms(es+):m/z＝354(m-h)+；lcms(方法b):tr＝3.63min。
实施例51：(s)-6-(4-(2-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)己酸乙酯(51)
向4-((6-乙氧基-6-氧代己基)氧基)-5-甲氧基-2-硝基苯甲酸(50)(2.0g,5.6mmol)和三甲胺(4.70ml,33.8mmol)在二氯甲烷(40ml)中的搅拌溶液中一次加入o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n,n’-四甲基脲
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.60-7.63(m,1h),6.75-6.77(m,1h),4.02-4.13(m,4h),3.93(s,3h),3.70-3.78(m,1h),3.39-3.68(m,1h),3.11-3.18(m,3h),2.32(t,j＝7.6hz,2h),1.83-1.91(m,2h),1.39-1.72(m,11h),1.26(t,j＝7.1hz,3h)；ms(es+):m/z＝453(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.63min。
实施例52：(s)-6-(5-氨基-4-(2-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯氧基)己酸乙酯(52)
向(s)-6-(4-(2-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基-5-硝基苯氧基)己酸乙酯(51)(1.2g,2.7mmol)在甲醇(20ml)中的溶液中添加
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.69(s,1h),6.32(s,1h),4.13(m,4h),3.98(t,j＝6.5hz,2h),3.79(s,3h),3.67-3.57(m,1h),3.19-3.22(m,4h),2.87(s,2h),2.32-2.36(m,2h),1.82-1.89(m,2h),1.65-1.73(m,6h),1.47-1.55(m,3h),1.27(t,j＝7.1hz,3h)；ms(es+):m/z＝423(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.23min。
实施例53：(s)-6-(5-(((烯丙氧基)羰基)氨基)-4-(2-(羟基-甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯氧基)己酸乙酯(53)
在-10℃向(s)-6-(5-氨基-4-(2-(羟甲基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯氧基)己酸乙酯(52)(1.23g,2.91mmol)和吡啶(542μl,6.69mmol)在无水二氯甲烷(20ml)中的溶液中滴加氯甲酸烯丙酯(278μl,2.62mmol)在二氯甲烷(12ml)中的溶液。将所得反应混合物在室温下搅拌0.5小时，用硫酸铜(ii)饱和水溶液(25ml)猝灭，用二氯甲烷(10ml)稀释，分离，并且顺序地用水(20ml)、碳酸氢钠饱和水溶液(20ml)和盐水(20ml)洗涤。然后将有机层用硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩以得到标题化合物(588mg,40％)，其为橙色油状物。在未经进一步纯化的情况下使所得物质进行下一个步骤。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.23(brs,1h),7.70(brs,1h),6.78(s,1h),5.90-6.00(m,1h),5.33-5.38(m,1h),5.24(dd,j＝10.4,1.3hz,1h),4.63(m,2h),4.12(q,j＝7.1hz,2h)4.05(t,j＝6.6hz,2h),3.83(s,3h),3.64-3.72(m,1h),3.02-3.12(m,1h),2.33(t,j＝7.6hz,2h),1.84-1.91(m,2h),1.67-1.74(m,10h),1.66-1.54(m,4h),1.26(t,j＝7.1hz,3h)；ms(es+):m/z＝507(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.70min。
实施例54：(6as)-3-((6-乙氧基-6-氧代己基)氧基)-6-羟基-2-甲氧基-12-氧代-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]-二氮杂
向(s)-6-(5-(((烯丙氧基)羰基)氨基)-4-(2-(羟甲基)-哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯氧基)己酸乙酯(53)(1.7g,3.4mmol)在二氯甲烷(80ml)中的溶液中添加2,2,6,6-四甲基-1-哌啶基氧基(53mg,0.30mmol)和(二乙酰氧基碘)苯(1.3g,4.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时，然后置于冰浴中并用焦亚硫酸钠饱和水溶液(35ml)猝灭。将混合物用二氯甲烷(30ml)稀释，分离，并且顺序地用碳酸氢钠饱和水溶液(30ml)、水(30ml)和盐水(30ml)洗涤。然后将有机层用硫酸镁干燥，过滤并在真空中浓缩。通过柱层析(二氧化硅)进行纯化，用乙酸乙酯/己烷(0％至80％)洗脱以得到所需化合物(1.1g,66％)，其为无色油状物。
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.70-7.72(m,1h),7.09-7.13(m,1h),5.80-5.98(m,1h),5.25-5.38(m,1h),5.14-5.19(m,2h),4.63-4.72(m,2h),4.35-4.50(m,1h),4.13(q,j＝7.1hz,2h),4.03-4.08(m,1h),3.96-4.01(m,2h),3.91(s,3h),3.81-3.83(m,1h),3.45-3.53(m,1h),3.03-3.10(m,1h),2.33(t,j＝7.6hz,2h),1.83-1.90(m,2h),1.62-1.74(m,10h),1.48-1.53(m,2h)；ms(es+):m/z＝505(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.57min。
实施例55：(6as)-3-((6-乙氧基-6-氧代己基)氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并-[1,2-a][1,4]二氮杂
向包含(6as)-3-((6-乙氧基-6-氧代己基)氧基)-6-羟基-2-甲氧基-12-氧代-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.16(m,1h),6.50(s,1h),6.10(m,1h),5.76-5.81(m,1h),5.03-5.14(m,2h),4.57-4.69(m,2h),4.37-4.49(m,1h),4.26-4.34(m,1h),4.12(q,j＝7.1hz,2h),3.94-4.01(m,3h),3.90(s,3h),3.62-3.68(m,1h),3.46-3.68(m,2h),3.03-3.12(m,1h),2.33(t,j＝7.4hz,2h),1.66-1.89(m,11h),1.47-1.57(m,6h),1.25(t,j＝7.1hz,3h)；ms(es+):m/z＝589(m+h)+；lcms(方法b):tr＝4.32min。
实施例56：6-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-3-((6-乙氧基-6-氧代己基)氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]-二氮杂
1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.18(s,1h),6.19(s,1h),5.99-6.19(m,1h),5.71-5.81(m,1h),5.02-5.12(m,2h),4.51-4.67(m,1h),4.36-4.48(m,1h),4.23-4.31(m,1h),3.88-4.00(m,7h),3.46-3.66(m,2h),3.02-3.12(m,1h),2.36(t,j＝7.4hz,2h),1.79-1.81(m,2h),1.65-1.75(m,10h),1.49-1.55(m,7h)；ms(es+):m/z＝561(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.78min。
实施例57：4-(4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2甲酰胺基)苯基)-1-甲基-1h-吡咯-2甲酸甲酯(57)
向4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸(18)(59mg,0.23mmol)在n,n-二甲基甲酰胺(4ml)中的溶液中添加1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(67mg,0.36mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(65mg,0.53mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。然后将4-(4-氨基苯基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(41mg,0.18mmol)添加至反应混合物，然后在室温下搅拌16小时。将反应混合物倒入冰水(40ml)中并且用乙酸乙酯(3x100ml)萃取。将合并的有机层顺序地用1m柠檬酸(60ml)、碳酸氢钠饱和水溶液(70ml)、水(70ml)和盐水(70ml)洗涤。将有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱层析(二氧化硅)纯化所得残余物，用乙酸乙酯/二氯甲烷(0％至50％)洗脱，以得到标题化合物(36mg,45％)，其为乳白色固体。
ms(es+):m/z＝453(m+h)+；lcms(方法b):tr＝4.07min。
实施例58：4-(4-(4-氨基-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)-苯基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(58)
将4-(4-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)-苯基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酸甲酯(57)(150mg,0.330mmol)溶于盐酸(4m，在1,4-二
ms(es+):m/z＝353(m+h)+；lcms(方法b):tr＝2.88min。
实施例59：(6as)-2-甲氧基-3-((6-((5-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-6-氧代己基)氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将6-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝896(m+h)+；lcms(方法b):tr＝4.25min。
实施例60：4-(4-(4-(6-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-2-甲氧基-3-((6-((5-((4-(5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-6-氧代己基)氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝882(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.92min。
实施例61：(6as)-3-((6-((5-((4-(5-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-6-氧代己基)氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(4-(4-(6-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝972(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.55min
实施例62：5-(4-((叔丁氧基羰基)氨基)-1-甲基-1h-吡咯-2-甲酰胺基)苯并[b]噻吩-2-甲酸甲酯(62)
向(6as)-3-((6-((5-((4-(5-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-6-氧代己基)氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ9.81-9.85(m,1h),9.58(s,1h),9.51(s,2h),8.00(d,j＝5.7hz,1h),7.69-7.72(m,2h),7.47-7.49(m,2h),7.38-7.43(m,1h),7.30-7.35(m,2h),7.18-7.24(m,1h),7.11-7.13(m,1h),7.07(s,1h),6.94-6.98(m,1h),6.80(brs,1h),6.63-6.72(m,2h),6.52-6.54(m,1h),3.95-4.14(m,3h),3.89(s,3h),3.83(s,3h),3.70(s,3h),3.65-3.69(m,1h),3.17(d,j＝5.2hz,2h),2.28(t,j＝6.5hz,2h),1.72-1.78(m,4h),1.62-1.68(m,4h),1.42-1.48(m,3h)13cnmr(dmso-d6,100mhz)δ169.5,166.3,164.6,159.5,159.2,150.3,147.1,144.8,139.8,137.0,129.6,128.2,126.6,124.6,124.3,122.7,122.1,121.8,121.7,120.5,120.4,118.7,113.7,111.3,109.6,109.3,104.7,68.1,55.6,36.3,36.1,35.5,28.3,25.2,25.1,23.7,22.5,17.7；ms(es+):m/z＝785(m+h)+；lcms(方法a):tr＝3.08min。
实施例63：(6s,6as)-2-甲氧基-3-((6-((5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-6-氧代己基)氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]-二氮杂
将6-(((6s,6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝697(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.98min。
实施例64：4-(6-(((6s,6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6s,6as)-2-甲氧基-3-((6-((5-(甲氧基羰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-6-氧代己基)氧基)-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝683(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.68min。
实施例65：(6s,6as)-3-((6-((5-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-6-氧代己基)氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(6-(((6s,6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
ms(es+):m/z＝773(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.27min。
实施例66：(s)-n-(4-氨基苯基)-4-(6-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6s,6as)-3-((6-((5-((4-氨基苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-6-氧代己基)氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ9.78(s,1h),9.48(s,1h),8.00(d,j＝5.7hz,1h),7.32(d,j＝8.8hz,2h),7.25(s,1h),7.17(d,j＝1.8hz,1h),6.82(d,j＝1.9hz,1h),6.79(s,1h),6.56(d,j＝8.6hz,2h),4.13(dd,j＝5.7,3.4hz,5h),3.80(s,3h),3.79(s,3h),3.17(s,1h),3.07-3.11(m,1h),2.26(t,j＝7.2hz,3h),1.75(dd,j＝13.8,7.0hz,6h),1.60-1.65(m,5h)；ms(es+):m/z＝587(m+h)+；lcms(方法b):tr＝2.72min,ms(es+):m/z＝587(m+h)+；lcms(方法a):tr＝5.23min。
实施例67：(6as)-3-(4-((5-((4-(5-((2-氨基乙基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
将4-(4-(4-(4-(((6as)-5-((烯丙氧基)羰基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-5,6,6a,7,8,9,10,12-八氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]-二氮杂
ms(es+):m/z＝896(m+h)+；lcms(方法b):tr＝3.12min。
实施例68：(s)-n-(2-氨基乙基)-4-(4-(4-(4-((2-甲氧基-12-氧代-6a,7,8,9,10,12-六氢苯并[e]吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
向(6as)-3-(4-((5-((4-(5-((2-氨基乙基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)苯基)氨基甲酰基)-1-甲基-1h-吡咯-3-基)氨基)-4-氧代丁氧基)-2-甲氧基-12-氧代-6-((四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-6,6a,7,8,9,10-六氢苯并[e]-吡啶并[1,2-a][1,4]二氮杂
1hnmr(dmso-d6,400mhz)δ10.01(s,1h),9.84(s,1h),9.21(brs,2h),8.41(s,1h),8.01(d,j＝5.7hz,1h),7.70(d,j＝8.8hz,2h),7.44(d,j＝8.7hz,2h),7.38(d,j＝1.8hz,1h),7.31(d,j＝1.9hz,1h),7.27(s,1h),7.22(d,j＝1.8hz,1h),6.98(d,j＝1.8hz,1h),6.80(s,1h),4.09-4.19(m,2h),3.99-4.05(m,2h),3.87(s,3h),3.82(m,6h),3.65-3.72(m,2h),3.45-3.50(m,2h),3.16(d,j＝5.3hz,3h),2.96(t,j＝5.8hz,2h),2.45(t,j＝7.4hz,2h),2.00-2.09(m,4h)；(dmso-d6,100mhz)δ203.1,168.8,166.3,164.7,161.6,159.6,150.2,147.1,139.8,137.0,129.5,125.9,124.2,122.0,120.6,120.4,111.2,109.8,109.3,98.8,95.4,85.9,78.8,71.0,67.7,55.6,49.2,48.5,36.3,31.8,30.2,24.7,22.5,17.7；ms(es+):m/z＝709(m+h)+；lcms(方法b):tr＝2.80min,ms(es+):m/z＝709(m+h)+；lcms(方法a):tr＝5.38min。
实施例69：通过hplc证明dna加合物形成
利用x-bridgemsc182.5μmost柱(2.3x50mm)以及40％乙腈/水和100mmteab(溴化四乙胺)/水的梯度作为流动相，在流速为0.5ml/min且uv检测在254nm处的情况下，使用hplc测定研究c8连接的pdd单体与双链转录因子共有序列的相互作用。使用4:1摩尔比的配体:寡核苷酸，每个单链寡核苷酸溶于1m乙酸铵中以形成1mm的储备溶液。通过将它们的1mm溶液加热至70℃达10分钟，然后逐渐冷却历时8小时，并在-20℃储存过夜，首先使寡核苷酸退火。然后通过用100mm乙酸铵稀释退火的储备溶液来制备25μm的寡核苷酸的工作溶液。将配体溶于dmso中以形成10mm的储备溶液，其在-20℃储存不超过4个月。通过用100mm乙酸铵稀释储备溶液来制备100μm的药物的工作溶液。将配体的工作溶液在室温下添加到寡核苷酸的工作溶液中，并且将混合物在室温下温育不同的时间间隔。
实施例70：荧光共振能量转移(fret)测定
用于fret测定的寡核苷酸序列购自eurogentec，南安普顿，uk：tamra(6-羧基四甲基罗丹明)和fam(6-羧基荧光素)分别为受体和供体荧光团。在使用前，由20μm储备溶液制备fret缓冲液(最优化为50mm钾，50mm二甲基胂酸盐，ph7.4)中的400nm溶液。通过将样品加热至90℃达10分钟，然后冷却至室温并在该温度下储存5小时，使寡核苷酸退火。使用fret缓冲液从最初的5mmdmso储备溶液进行稀释。将退火的dna(50μl)和样品溶液(50μl)添加到96孔板(mjresearch,waltham,ma)的各个孔中，并且在dnaengineopticon(mjresearch)中处理。在30-100℃范围内以0.5℃的间隔获取荧光读数，在每次读数之前保持恒温达30秒。使用450-495nm的入射辐射，在515-545nm处进行检测。在将原始数据导入程序origin(版本7.0，oringinlabcorp.)中，并且使用10点移动平均使图平滑，然后进行归一化。使用脚本、基于平滑熔化曲线的一阶导数的最大值确定熔化温度。将每个样品的熔化温度与空白的熔化温度之间的差值(δtm)用于比较目的。
表1：在与转录因子双链dna序列温育24小时后确定的δtm
实施例71：通过mtt测定对c8连接的pdd单体的细胞毒性分析
细胞培养
从美国典型培养物保藏中心(americantypeculturecollection)获得mdamb231(三阴性人乳腺癌)。在37℃在湿润的5％co2气氛下在75cm2烧瓶(tpp，瑞士)中将细胞系维持单层培养。将mdamb231细胞系维持在高葡萄糖dmem(4.5g\l；invitrogen)、胎牛血清(10％，bioserauk)、非必需氨基酸(1x；invitrogen)、l-谷氨酰胺(2mm；invitrogen)和青霉素-链霉素(1％v/v，invitrogen)中。将hela细胞系维持在补充有胎牛血清(10％v/v；invitrogen)、l-谷氨酰胺(2mm；invitrogen)、非必需氨基酸(1x；invitrogen)和青霉素-链霉素(1％v/v，invitrogen)的dulbecco改进的eagle培养基(dulbecco’smodifiedeaglesmedia)(dmem；invitrogen)中。为了传代，将细胞用pbs(gibco14040,invitrogen,uk)洗涤，用胰蛋白酶(gibco25300,invitrogen,uk)温育，并且再接种到新鲜培养基中。为了接种，在细胞非贴壁悬浮液上通过显微镜(nikon,usa)使用neubauer血细胞计数器(assistant，德国)对细胞计数，所述细胞在pbs中洗涤，经胰蛋白酶消化，在8℃在8000rpm下离心5分钟，并且重新悬浮于新鲜培养基中。
mtt测定
使用适当的培养基在37℃在5％co2湿润气氛下在正常细胞培养条件中使细胞生长。将细胞计数调节至105个细胞/ml，并且根据细胞系每孔添加5,000-20,000个细胞。将细胞温育24小时，并且将1μl的适当的抑制剂浓度一式三份地添加到孔中。在连续暴露于各化合物72小时后，使用溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑(mtt)(lancastersynthesisltd,uk)比色测定，确定细胞毒性。[34在λ＝570nm处通过分光光度法定量吸光度(envisionplatereader,perkinelmer,usa)。使用graphpad
表2：暴露于c8连接的pdd单体72小时后确定的ic50值(nm)。
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上述说明书中提及的所有出版物均通过引用并入本文。尽管参考附图已经在本文中详细公开了本发明的说明性实施方案，但是应该理解，本发明不限于明确的实施方案，并且在不偏离由所附权利要求书及其等同物限定的本发明的范围的情况下，本领域技术人员能够对本发明做出各种改变和修饰。