1.一种禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组,其特征在于,所述禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组包括一对特异性引物对和一个荧光基团标记的探针。
2.根据权利要求1所述的禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组,其特征在于,所述禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组包括针对9种NA亚型N1~N9的9对特异性引物与带有荧光探针基团标记的探针,其中,所述特异性引物对与探针分别具有SEQ ID NO 1~27所示的序列。
3.一种禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组,其特征在于,所述禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组包括3组禽流感病毒NA亚型RT-PCR检测引物组,每组禽流感病毒NA亚型RT-PCR检测引物组包括一对特异性引物对和一个荧光基团标记的探针。
4.根据权利要求3所述的禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组,其特征在于,所述禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组包括针对9种NA亚型N1~N9的9对特异性引物与带有荧光探针基团标记的探针,其中,所述特异性引物对与探针分别具有SEQ ID NO 1~27所示的序列。
5.根据权利要求3所述的禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组,其特征在于,所述禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组包括三组所述禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组。
6.根据权利要求5所述的禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组,其特征在于,第一组禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组包括基因型N1、N4与N5禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组;第二组禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组包括基因型N3、N2与N6禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组;第三组禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组包括基因型N7、N9与N8禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组。
7.一种禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测试剂盒,包括反转录试剂、PCR试剂、超纯水,其特征在于:所述PCR试剂中包括如权利要求3~6任意一项所述的禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组。
8.根据权利要求7所述的禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测试剂盒,其特征在于,所述PCR试剂为25μl,分别为Taq probe 2×qPCR MasterMix 12.5μl,上下游引物(0.4μmol/L)各1μl,探针(0.4μmol/L)1μl,模板cDNA 2μl,加水至25μl。
9.根据权利要求7所述的禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测试剂盒,其特征在于,所述PCR反应条件为95℃10min,95℃15s,60℃20s,扩增40个循环,在60℃结束开始收集荧光信号。
10.根据权利要求1~9所述禽流感病毒NA亚型RT-PCR单重检测引物组、禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测引物组、禽流感病毒NA亚型RT-PCR多重检测试剂盒在鉴别禽流感病毒中的应用。