重组EcoRV限制性内切酶的制备方法与流程

文档序号:11767658阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明公开了一种重组EcoR V限制性内切酶的制备方法,包括以下步骤:(1)表达质粒pCreat Duet‑EcoR V‑甲基化酶的构建;(2)EcoR V与甲基化酶蛋白的诱导表达与鉴定;(3)EcoR V与甲基化酶蛋白的纯化与鉴定。本发明通过重组方式将EcoR V限制性内切酶与甲基化酶克隆到含His标签的pCreat Duet共表达载体中,在低温条件下表达量达到30%。通过Ni柱亲和层析、Superdex200凝胶过滤层析得到高活力的重组EcoR V限制性内切酶,比活与商业化酶相似。

技术研发人员:李森;雍德祥;邹刚刚;王方平
受保护的技术使用者:通用生物系统(安徽)有限公司
技术研发日:2017.07.26
技术公布日:2017.10.20
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