本发明涉及一类氨基硫代甲酸酯类化合物在抑制癌细胞增殖/或治疗癌症的药物中的用途。
背景技术：
国家癌症中心指出，中国癌症死亡率高于全球平均水平17％，全国每天约一万人确诊为癌症,癌症已经成为我国居民死亡的主要原因之一，而目前所用的治疗癌症的抗肿瘤药物中有69％的是天然产物或者基于天然抗肿瘤药改造而来的。而莱菔硫烷和莱菔素就是目前公认的防癌和抗癌效果最好的天然产物之一,已经有大量的研究工作证实它可以有效抑制动物实验中食道癌、肺癌和结肠癌的发生，但是他们由于结构不稳定，无法长期存储，限制了其应用，研究发现，在进入体内后，他们的异硫氰酸酯基团会与含巯基的氨基酸反应变为氨基二硫代甲酸酯，从而产生更好的抗癌效果。研究表明氨基二硫代甲酸酯类化合物由于具有广泛的生物活性,该类化合物具有抗病毒，抗氧化，抑制胆碱酯酶和抗菌的作用，近年来,越来越多的研究发现,氨基二硫代类化合物具有较好的肿瘤预防和抗肿瘤活性。因此，将莱菔素和莱菔硫烷中的不稳定集团异硫氰酸酯基团换成更加稳定的氨基二硫代甲酸酯集团，从中探寻比莱菔素和/或莱菔硫烷更具有较高抗癌细胞增殖活性的氨基二硫代甲酸酯类化合物是该领域工作者重要的科研项目。如能成功，实对抗癌药物的开发具有深长和重要意义，同时带来了巨大的国民经济价值。
本发明提供了如通式(ⅰ)和通式(ⅱ)所示的氨基二硫代甲酸酯类化合物，实验证明其对多种癌细胞均具有强大的抑制增殖的能力,对患有癌症的病人可有优良的治疗效果。陈凑喜等新合成的18β-甘草次酸氨基二硫代甲酸酯酰胺衍对人肝癌细胞株smmc-7721有着一定的抑制疗效(陈凑喜,李学强,李天才,周学章.新型18β-甘草次酸氨基二硫代甲酸酯衍生物的合成及抗癌活性研究[j].化学学报，2012，70(7)，852-858)。中国专利申请(公布号cn105906539a)公开了几种莱菔素衍生物，含有氨基二硫代甲酸酯集团，对人宫颈癌细胞hela具有明显的抑制增殖的作用。本发明提供了一系列的新型的氨基二硫代甲酸酯类化合物，本发明所提供的具有优良抗癌细胞增殖的氨基二硫代甲酸酯类化合物在上述专利中从未被提及或公开过。
本发明中所引述的文献、著作、专利和专利申请公开书，其中全部或局部都明确地和独立地都在本专利申请书引用参考。
技术实现要素：
本发明涉及一类氨基二硫代甲酸酯类化合物的设计与合成，为了克服莱菔素和莱菔硫烷不稳定的问题，本发明提供一种稳定性好且药效活性更优异的氨基二硫代甲酸酯类化合物。本发明还解决了此类氨基二硫代甲酸酯类化合物的制备方法。本发明之所以能够解决上述问题乃是通过以下技术方案给予实现：
一种氨基二硫代甲酸酯类化合物，其特征在于下列通式(ⅰ)和通式(ⅱ)所示的结构：
其中其中r为烷基，酰胺基烷基，酰基烷基，酮基烷基，酯基烷基，羧基烷基，二羧基烷基，芳基，烷基取代的芳基，卤素取代的芳基，烷氧基取代的芳基，酰胺基取代的芳基，芳基烷基，烷基取代的芳基烷基，卤素取代的芳基烷基，烷氧基取代的芳基烷基，酰胺基取代的芳基烷基。
作为一种优选方案，本发明的氨基二硫代甲酸酯类化合物中的r集团选自下列结构：
作为一种优选方案，所述氨基二硫代甲酸酯类化合物的与无机酸、有机酸、无机碱或有机碱通过化学反应形成的盐，与水或溶剂形成水合物或溶剂合物。
作为一种最优选方案，所述的无机或有机酸选自：盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸、高氯酸、醋酸、柠檬酸、草酸、乳酸、苹果酸、水杨酸、酒石酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、取代的苯磺酸、异烟酸、油酸、鞣酸、泛酸、抗坏血酸、丁二酸、马来酸、龙胆酸、富马酸、葡萄糖酸、糖醛酸、葡萄糖二酸、蔗糖酸、甲酸、苯甲酸、谷氨酸、双羟萘酸或山梨酸；所述的无机或有机碱选自：氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化铁、氢氧化钙、氢氧化钡、氢氧化铝、氢氧化镁、氢氧化锌、氨水、氢氧化有机季铵盐、碳酸钠、碳酸锂、碳酸钙、碳酸钡、碳酸镁、碳酸化有机季铵盐、碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸氢锂、碳酸氢钙、碳酸氢钡、碳酸氢镁、或碳酸氢化有机季铵盐。
作为一种最优选方案，所述的溶剂合物是指所述的异羟肟酸类化合物与化学上常用的溶剂以共价键、氢键、离子键、范德华力、络合力或包合形成的稳定物质，其中的溶剂选自：甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、乙二醇、丙二醇、聚乙二醇或丙酮。本发明还公开了一种制备本发明所述的氨基二硫代甲酸酯类化合物(ⅰ)和化合物(ⅱ)的方法：
化合物(ⅰ)的制备方法：
化合物(ⅰ)的制备方法：
其中r为甲基，乙基，正丙基，异丙基，丁基或取代的丁基，戊基或取代的戊基，烷氧基，烷基羰基，烷氧基羰基，烷酰胺基，硫代烷基，芳香环基及取代芳香环基；
通式(ⅰ)制备方法：在碱金属盐碳酸氢钠条件下，将原料莱菔素(ⅲ)与通式(ⅳ)化合物以乙醇和水作混合溶剂进行反应，常温条件下反应，制备产物莱菔素衍生物通式(ⅰ)；其中化合物(ⅲ)与nahco3的摩尔之比为(1～1.1)：1.05；其中所述的化合物(ⅲ)与化合物(ⅳ)的摩尔比为(1～1.1)：1；反应时间是1至24小时；
通式(ⅱ)制备方法：在碱金属盐碳酸氢钠条件下，将原料莱菔硫烷(ⅴ)与通式(ⅳ)化合物以乙醇和水作混合溶剂进行反应，常温条件下反应，制备产物莱菔硫烷衍生物通式(ⅱ)；其中化合物(ⅴ)与nahco3的摩尔之比为(1～1.1)：1.05；其中所述的化合物(ⅴ)与化合物(ⅳ)的摩尔比为(1～1.1)：1；反应时间是1至24小时；
本发明所述的溶剂为水，甲醇，乙醇，水和乙醇或甲醇的混合溶剂，优选溶剂为水和乙醇的混合溶剂。
本发明所述的碱金属盐碳酸氢钠可以换为碳酸钠，氢氧化钠。
下列化合物为本发明合成其中一部分的氨基二硫代甲酸酯类化合物：
表i本发明合成其中一部分的氨基二硫代甲酸酯类化合物
具体实施方式
通过以下的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细解释及展述，使本领域的普通技术人员能够更加容易地理解本发明，但不应该将此理解为本发明所述主题的范围仅限于以下的实例及限制本发明的任何或所有权利，更不应该背离本发明的精神。
氨基二硫代甲酸酯类化合物
实施例1：
r101的制备：
称量原料nahco30.26g(3.2mmol)于100ml单口烧瓶中，加入10ml水溶解，磁力搅拌，再称乙硫醇0.19g(3mmol)加入其中，最后称莱菔素0.53g(3mmol)用20ml乙醇稀释溶解加入反应液中，室温反应，反应时间为5h，期间用薄层层析板跟踪反应，展开剂为乙酸乙酯：甲醇＝5：1。反应完成后旋蒸掉有机溶剂乙醇后，加20ml水稀释,用乙酸乙酯60ml,每次20ml萃取三次，萃取液用无水mgso4干燥后过滤，将滤液旋蒸后的黄色油状物，冷冻干燥后得最终产物0.49g,产率为：69.3％。c8h16nos3，ms(es+)m/z(m+h)+:238.0389；1hnmr(400mhz,meod-d4):δ＝6.64(m,1h),6.48(m,1h),3.81(m,2h),3.23(m,1h),2.68(m,7h),1.32(t,j＝7.58hz,3h)。13cnmr(400mhz,meod-d4)δ＝14.9,30.0,31.6,40.5,45.9,136.3,138.1,138.7,199.3。
实施例2：
w101的制备：
称量原料nahco30.26g(3.2mmol)于100ml单口烧瓶中，加入10ml水溶解，磁力搅拌，再称乙硫醇0.19g(3mmol)加入其中，最后称莱菔素0.53g(3mmol)用20ml乙醇稀释溶解加入反应液中，室温反应，反应时间为5h，期间用薄层层析板跟踪反应，展开剂为乙酸乙酯：甲醇＝5：1。反应完成后旋蒸掉有机溶剂乙醇后，加20ml水稀释,用乙酸乙酯60ml,每次20ml萃取三次，萃取液用无水mgso4干燥后过滤，将滤液旋蒸后的黄色油状物，冷冻干燥后得最终产物0.63g,产率为：87.5％。c8h18nos3，ms(es+)m/z(m+h)+:240.0545；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝3.67(m,2h),3.15(m,2h),2.71(m,2h),2.52(s,3h),1.67(m,4h),1.22(t,j＝7.27,2h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝14.5,19.5,26.7,27.9,37.9,46.0,52.9,196.0.
其它化合物制备方法与以上实例相似。
r102:ms(es+)m/z:252.0545(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.95(s,1h),6.73(m,1h),6.26(m,1h),3.86(m,1h),3.69(m,2h),2.56(m,5h),1.32(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝22.8,30.0,44.1,44.9,133.8,136.7,195.9。
r103:ms(es+)m/z:266.0702(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):6.64(d,j＝45.35hz1h),6.26(m,1h),3.82(m,1h),3.70(m,2h),2.56(m,5h),1.64(m,2h),1.30(m,3h),0.94(m,3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝11.2,20.2,28.7,29.6,45.1,46.0,133.8,137.1,196.2。
r104:ms(es+)m/z:280.0858(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.98(s,1h),6.64(d,j＝15.15hz1h),6.26(m,1h),3.59(m,2h),3.70(m,2h),3.18(t,j＝7.57hz2h),2.56(m,5h),1.63(m,1h),1.47(m,2h),0.90(m,6h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝22.1,27.1,29.6,32.2,45.3,133.8,137.1,196.6。
r105:ms(es+)m/z:280.0858(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.01(s,1h),6.64(d,j＝15.55hz1h),6.26(m,1h),3.59(m,2h),3.70(m,2h),3.17(m,2h),2.56(m,5h),1.64(m,1h),1.33(m,2h),0.90(m,6h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝11.3,18.6,28.4,29.8,34.7,45.5,134.1,136.8,196.7。
r106:ms(es+)m/z:295.0603(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.1(s,1h),8.1(s,1h),6.64(d,j＝15.05hz1h),6.26(m,1h),3.71(m,2h),3.24(m,4h),2.56(m,5h),1.80(s,3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝22.5,29.8,33.4,45.3,133.8,137.3,169.5,195.9。
r107:ms(es+)m/z:294.0651(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝6.80(m,1h),6.68(d,j＝15.4hz,1h),6.29(m,1h),3.84(m,2h),3.55(m,1h),2.59(m,5h),1.86(m,2h),1.29(m,3h),0.89(m,3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝8.0,15.5,29.6,30.1,43.5,44.6,100.8,133.9,136.5,193.6。
r108:ms(es+)m/z:296.0443(m+h)+；1hnmr(400mhz,meod-d4):δ＝6.58(t,j＝12.4hz1h),6.48(m,1h),3.85(m,2h),3.69(s,3h)3.48(t,j＝7.36hz2h),2.76(t,j＝7.01hz2h),2.66(m,5h),13cnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝29.5,33.6,45.5,40.5,51.9,134.1,137.1,195.8。
r109:ms(es+)m/z:340.0342(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝6.67(d,j＝15.55hz1h),6.26(m,1h),4.73(m,1h),2.53(m,9h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝28.6,35.5,42.6,46.0,133.2,133.8,137.2,171.4,176.1,202.7。
r110：ms(es+)m/z:300.0545(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.08(s,1h),7.32(m,5h),6.64(d,j＝15.15hz1h),6.26(m,1h),4.51(s,2h),3.73(m,2h),2.56(m,5h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.8,38.1,32.2,45.8,127.4,129.0,134.1,137.1,137.7,195.9。
r111:ms(es+)m/z:314.0702(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.06(s,1h),7.19(m,4h),6.64(d,j＝15.15hz1h),6.26(m,1h),4.45(s,2h),3.72(t,j＝7.38hz2h),2.55(m,5h),2.27(s,3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝20.9,29.8,39.5,45.3,129.2,134.1,136.9,195.7。
r112:ms(es+)m/z:330.0651(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.03(s,1h),7.28(d,j＝8.58hz,2h),6.87(d,j＝8.58hz,2h),6.64(d,j＝15.36hz1h),6.26(m,1h),4.43(s,2h),3.74(s,3h),3.72(m,2h),2.55(m,5h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.9,37.9,45.6,55.3,113.8,130.3,134.3,137.1,158.9。
r113:ms(es+)m/z:334.0155(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝7.38(m,4h),6.63(d,j＝15.50hz1h),6.24(m,1h),4.49(s,2h),3.71(t,j＝6.81hz,2h),2.54(m,5h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.8,37.2,45.8,128.5,130.8,134.2,137.1,140.2,195.2。
r114:ms(es+)m/z:300.0545(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.40(s,1h),7.34(m,4h),6.62(d,j＝15.15hz1h),6.24(m,1h),3.59(m,2h),3.68(m,2h),2.56(m,5h),2.37(s,3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝21.0,29.8,45.1,126.0,130.5,133.9,136.2,137.1,140.2,195.2。
r115:ms(es+)m/z:314.0702(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.45(s,1h),7.34(m,4h),6.63(d,j＝15.15hz1h),6.24(m,1h),3.69(d,j＝7.01hz2h),2.67(m,2h),2.58(s,3h),2.52(m,2h),2.23(t,j＝8.12hz3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝15.1,28.4,29.8,45.1,126.5,129.2,134.1,146.5,195.0。
r116:ms(es+)m/z:342.1015(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝7.50(d,j＝7.28hz2h),7.41(d,j＝8.42hz2h),6.64(d,j＝15.55hz1h),6.24(m,1h),3.70(t,j＝15.55hz2h),2.56(m,5h),1.31(m,9h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.8,34.7,45.3,126.4,133.9,134.1,135.7,137.1,152.8,194.9。
r117:ms(es+)m/z:316.0494(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.28(s,1h),7.42(d,j＝8.37hz2h),7.04(d,j＝8.37hz2h),6.62(d,j＝15.15hz1h),6.24(m,1h),3.82(s,3h),3.68(m,2h),2.56(m,5h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.8,45.1,55.7,120.2,134.5,137.1,160.8,195.6。
r118:ms(es+)m/z:304.0294(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.63(s,1h),7.54(m,2h),7.32(t,j＝8.87hz2h),6.64(d,j＝15.15hz1h),6.26(m,1h),3.69(m,2h),2.56(m,5h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.3,45.3,116.7,133.9,136.8,138.6,162.5,164.6,194.7。
r119:ms(es+)m/z:319.9999(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.71(s,1h),7.52(m,4h),6.65(d,j＝15.15hz1h),6.24(m,1h),3.69(m,2h),2.56(m,5h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.5,45.3,128.7,129.9,133.9,135.5,137.1,138.2,194.1。
r120:ms(es+)m/z:365.9647(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.72(s,1h),7.68(d,j＝8.27hz2h),7.43(d,j＝8.67hz2h),6.65(d,j＝15.45hz1h),6.24(m,1h),3.69(t,j＝7.27hz2h),2.56(m,5h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.8,45.3,124.4,129.0,132.6,134.1,137.1,138.4,193.9。
r121:ms(es+)m/z:343.0603(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.27(s,1h),7.42(d,j＝8.50hz,2h),7.04(d,j＝8.68hz,2h),6.62(d,j＝15.06hz1h),6.22(m,1h),3.82(s,3h),3.68(m,2h),2.61(m,2h),2.57(s,3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.8,45.3,55.7,114.8,119.8,133.9,136.2,137.1,137.7,160.8,195.6。
r122:ms(es+)m/z:314.0702(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.07(s,1h),7.30(m,5h),6.64(d,j＝15.15hz1h),6.26(m,1h),3.71(t,j＝7.01hz,2h),3.41(t,j＝7.75hz,2h),2.89(t,j＝7.75hz,2h),2.56(m,5h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝29.8,35.2,45.8,126.2,129.0,134.4,136.8。
w101:ms(es+)m/z:240.0545(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝3.67(m,2h),3.15(m,2h),2.71(m,2h),2.52(s,3h),1.67(m,4h),1.22(t,j＝7.27,2h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝14.5,19.5,26.7,27.9,37.9,46.0,52.9,196.0。
w102:ms(es+)m/z:254.0702(m+h)+；1hnmr(400mhz,cd3cl-d):δ＝4.03(m,1h),3.80(m,2h),2.7(m,2h),2.62(s,3h),1.90(m,4h),1.41(m,6h).13cnmr(400mhz,cd3cl-d):δ＝20.2,22.8,27.1,38.6,40.9,45.8,53.5,198.1。c9h20nos3[m+h]+
w103:ms(es+)m/z:268.0858(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝3.83(m,1h),3.60(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.67(m,6h),1.30(m,3h),0.94(t,j＝7.98hz3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝11.3,19.6,20.2,26.7,28.7,45.6,45.8,52.7,195.8。
w104:ms(es+)m/z:282.1015(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝3.62(m,2h),3.18(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.67(m,5h),1.47(m,2h),0.90(m,6h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.6,22.1,26.7,27.1,32.1,37.9,46.1,52.7,196.2。
w105:ms(es+)m/z:282.1015(m+h)+；1hnmr(400mhz,meod-d4):δ＝3.61(t,j＝7.12hz2h),4.54(s,2h),3.16(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.66(m,5h),0.91(m,6h).13cnmr(400mhz,meod-d4):δ＝11.1,18.6,19.2,26.7,28.3,34.3,38.1,40.646.3,52.7,196.4。
w106:ms(es+)m/z:297.0760(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝3.59(m,2h),3.20(m,4h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.81(m,3h),1.65(m,4h),13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.7,22.4,27.5,32.9,37.9,52.7,169.2。
w107:ms(es+)m/z:296.0807(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝6.77(s,1h),3.79(m,2h),3.46(m,1h),2.74(m,2h),2.54(s,3h),1.75(m,6h),1.26(m,3h),0.90(m,3h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝8.2,15.4,19.6,26.7,30.1,37.9,44.6,52.7,100.8,193.0。
w108:ms(es+)m/z:298.0600(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.06(s,1h),3.63(m,5h),3.40(m,2h),2.73(m,4h),2.54(s,3h),1.65(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.6,26.7,29.2,33.6,37.9,46.1,51.3,52.7,171.7,196.0。w109:ms(es+)m/z:342.0498(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝4.74(t,j＝6.18hz1h),3.92(t,j＝7.62hz2h),3.30(m,2h),3.11(m,2h)，2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.68(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.2,25.3,35.2,37.9,43.6,45.9,52.6,171.4,176.1,202.8。
w110:ms(es+)m/z:302.0702(m+h)+；1hnmr(400mhz,meod-d4):δ＝7.30(m,5h),4.54(s,2h),3.78(t,j＝6.93hz2h),2.87(m,2h),2.63(s,3h),1.85(m,4h)。13cnmr(400mhz,meod-d4):δ＝21.1,28.2,38.1,40.0,47.3,54.3,128.2,129.4,130.1,138.8,198.5。
w111:ms(es+)m/z:316.0858(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝7.20(m,4h),4.46(s,2h),3.63(m,2h),2.71(m,2h),2.28(s,3h),1.69(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.8,20.6,26.7,46.2,52.7,128.7,134.1,136.4。
w112:ms(es+)m/z:332.0807(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝7.28(m,2h),6.87(m,2h),4.40(s,2h),3.73(s,3h),3.6(m,2h),2.73(m,2h),2.52(s,3h),1.68(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.6,26.9,38.1,46.6,52.7,55.0,113.9,130.4,158.3。
w113:ms(es+)m/z:336.0312(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.08(s,1h),7.38(m,4h),4.52(s,2h),3.72(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.68(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.5,26.6,37.2,46.7,52.7,128.4,130.7,131.7,136.8。
w114:ms(es+)m/z:302.0702(m+h)+；1hnmr(400mhz,meod-d4):δ＝7.34(m,4h),3.65(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),2.37(s,3h),1.67(m,4h).13cnmr(400mhz,meod-d4):δ＝19.4,20.9,26.6,28.3,46.0,52.6,126.1,128.1,130.1,135.8,194.8。
w115:ms(es+)m/z:316.0858(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.50(s,3h),7.37(m,4h),3.607.37(m,4h),2.72(m,4h),2.52(s,3h),1.67(m,4h),1.22(t,j＝7.90,2h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝15.1,19.5,26.7,27.9,37.9,46.0,52.7,126.4,128.9,135.8,146.0,194.8。
w116:ms(es+)m/z:344.1171(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝7.46m,4h),3.61(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.81(m,3h),1.69(m,4h),1.29(m,9h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.4,26.6,28.3,30.9,34.5,37.9,46.1,51.9,52.6,126.3,135.5,194.6。
w117:ms(es+)m/z:318.0651(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.34(s,1h),7.41(d,j＝8.72,2h),7.04(d,j＝8.72,2h),3.82(s,3h),3.58(m,2h),2.71(m,2h),2.52(s,3h),1.64(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.6,26.9,37.9,45.8,52.5,55.4,115.2,119.9,137.9,160.8。
w118:ms(es+)m/z:306.0451(m+h)+；1hnmr(400mhz,meod-d4):δ＝9.68(s,1h),7.55(t,j＝9.29hz2h),7.32(t,j＝9.35hz2h),3.59(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.66(m,4h).13cnmr(400mhz,meod-d4):δ＝19.6,27.0,38.1,46.2,54.7,116.5,138.6,162.1,194.5。
w119:ms(es+)m/z:322.0155(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝7.52(m,4h),3.64(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.67(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.5,26.6,37.9,46.2,52.1,128.6,129.4,137.7,193.8。
w120:ms(es+)m/z:365.9650(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝9.77(s,1h),7.68(d,j＝8.60hz2h),7.43(d,j＝8.60hz2h),3.59(m,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.66(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.6,26.6,37.9,46.2,52.6,124.1,129.1,132.3,137.9,193.7。
w121:ms(es+)m/z:345.0760(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝10.18(s,1h),9.37(s,1h),7.69(d,j＝8.152h),7.42(d,j＝8.152h),3.58(m,2h),2.69(m,2h),2.52(s,3h),2.08(s,3h),1.63(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.6,24.1,27.3,46.2,52.7,122.6,136.7,141.1,168.6,195.1。
w122:ms(es+)m/z:316.0858(m+h)+；1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝7.28(m,5h),3.63(t,j＝6.84,2h),3.43(t,j＝7.26,2h),2.90(t,j＝7.47,2h),2.72(m,2h),2.52(s,3h),1.67(m,4h).13cnmr(400mhz,dmso-d6):δ＝19.4,26.7,35.0,46.1,52.7,126.4,128.4,139.8。
实施例3：
(1)实验细胞系，人皮肤恶性黑色素瘤细胞株a375，人肝癌细胞smmc-7721，人肺癌a549，人结肠癌细胞hct116，人宫颈癌细胞hela，其中a375,smmc-7721用dmem培养基培养，hct116，a549，hela在rpmi-1640培养基中培养，用0.25％胰蛋白酶常规消化后传代。
(2)将对数生长期的癌细胞消化成单个细胞后，以3×104个/ml的密度接种于96孔板中，每孔加入90μl的细胞悬液，在含5％co2的37℃培养箱中培养12小时，加药10μl氨基硫代甲酸酯类药物及对照药莱菔素均作用于同一细胞，每个浓度设置3个复孔，72h后各孔加入cck-8溶液10μl孵育1小时后，用酶标仪检测490nm处的吸光度值并计算抑制率。
表ⅱa375,smmc-7721在氨基二硫代甲酸酯类化合物作用下的抑制率
“—”表示没有抑制效果
表ⅱ的结果表明：不同结构的氨基硫代甲酸酯化合物对不同癌细胞增殖的抑制能力不同。
(1)对于人皮肤黑色素瘤细胞a375：r113,r114,r115,r116,r118,r119,r120和r121的抑制作用优于或者相当于对照化合物莱菔素(sfe)。w111,w113,w115,w117,w118,w119,w120,和w121的抑制作用优于或者相当于对照化合物莱菔硫烷(sfa)
(2)人肝癌细胞smmc-7721：r106,r111,r112,r113,r114,r115,r116,r118,r119,r120和r121的抑制作用优于或者相当于对照化合物莱菔素(sfe)。w111,w113,w115,w117,w118,w119,w120,和w121的抑制作用优于或者相当于对照化合物莱菔硫烷(sfa)
综上氨基二硫代甲酸酯类化合物对两种癌细胞抑制率比对，本发明特优选r113,r114,r115,r116,r118,r119,r120,r121,w111,w113,w115,w117,w118,w119,w120,和w121氨基硫代甲酸酯化合物做人皮肤恶性黑色素瘤细胞株a375，人肝癌细胞smmc-7721，人肺a549，人结肠癌细胞hct116，人宫颈癌细胞hela癌细胞半数致死度实验，结果如表ⅲ所示：
表ⅲsfe衍生物对五种癌细胞的ic50值
表ⅲ的结果表明：不同的癌细胞对化合有着不一样的敏感度，r113,r114,r115,r116,r120这几种化合物对5种癌细胞的ic50值都比对比药物莱菔素(sfe)效果明显，w113,w115,w117,w118,w119,w120几种化合物对5种癌细胞的ic50都比莱菔硫烷(sfa)效果明显，这几种化合物有着很好的广谱抗癌作用，尤其人肝癌细胞smmc-7721对这几种药物最为敏感，其中相比参比药物，抑制人肝癌细胞smmc-7721效果最好的化合物有r114,r116,w115和w120这几种化合物。