一种苹果皮渣多糖的提取方法与流程

本发明涉及多糖提取技术领域，具体是一种苹果皮渣多糖的提取方法。

背景技术：

苹果是蔷薇科苹果亚科苹果属植物，落叶乔木。苹果的果皮富含多糖、矿物质和维生素，为人们最常食用的水果之一。苹果是最常见的水果，富含丰富的营养，是世界四大水果（苹果、葡萄、柑桔和香蕉）之冠。糖是菠萝皮渣的主要活性成分之一，研究发现菠萝皮渣多糖具有抗氧化、抗脂质过氧化和抗肿瘤作用，同时还可改善肠道内环境、抑制t和b淋巴细胞增殖、增强断奶猪仔的抗病能力。基于此，若将菠萝皮渣进行资源再利用来制备多糖对于提高菠萝深加工产业的附加值、延长菠萝产业链、指导其精深加工具有重要的现实意义。有关菠萝皮渣多糖提取工艺的研究报道多为水提醇沉法，其中水提醇沉法是多糖提取的最传统方法，其操作简便，成本低，不需特殊设备，但提取率较低。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种苹果皮渣多糖的提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种苹果皮渣多糖的提取方法，包括以下步骤：

s1预处理：将经过筛选的苹果皮渣经冷冻干燥后打粉，得苹果皮渣干粉；

s2脱脂：将步骤s1所得苹果皮渣干粉置于容器中，加入沸程30～60℃的石油醚回流提取1～3次，收集滤渣，自然晾干后备用；

s3提取：将步骤得到的晾干滤渣加入蒸馏水,然后用微波超声波仪处理得到提取液b；

s4过滤:提取液b进行真空抽滤，得到滤液a；

s5酶解:滤液a加入纤维素酶和植物蛋白酶，在ph5.0和40-70℃水浴下酶解30-90min，得到滤液c；

s6膜分离：将滤液c装入离心管中行离心，在压力为0.2～0.6mpa时，用超滤膜进行膜分离，离心后将残渣去掉得到心液；

s7脱蛋白：用6mol/l氯化氢溶液调节s6的离心液ph到3，用等体积比的三氯甲烷萃取两次，留上清液进行过滤，然后用氯化钠溶液洗脱，洗脱液浓缩透析除盐，得到脱蛋白多糖溶液d；

s8脱色素：向s7得到的脱蛋白多糖溶液d中加入大孔吸附树脂，混匀，室温振荡1～3h，抽滤，得脱色多糖溶液；

s9透析：将脱色多糖溶液逆向流水透析，最后浓缩冷冻干燥得苹果皮渣多糖。

作为本发明进一步的方案：所述步骤s1预处理得到的菠萝皮渣干粉目数为小于60目。

作为本发明再进一步的方案：所述步骤s3提取的微波超声波仪是在温度50～90℃下提取，且提取的时间为30分钟。

作为本发明再进一步的方案：所述步骤s3提取中加入的蒸馏水与苹果皮渣干粉的体积重量比为500:1ml/g。

作为本发明再进一步的方案：所述步骤s6滤液在4000r/min的速度下进行离心，时间30min。

作为本发明再进一步的方案：所述步骤s9透析中所用的透析袋的分子截留量为8-14kda。

作为本发明再进一步的方案：所述步骤s6膜分离中得到离心液需5-8℃放置2h。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明采用苹果皮冻干后制粉的方式。冻干后破碎更完全，比鲜皮直接破碎提取多糖得率高，且鲜皮中营养成分损失少；且采用酶解、离心及超声提取以及透析等提取苹果皮渣多糖，纤维素酶和植物蛋白酶能酶解细胞壁，有利于多糖的溶出，水浴法采用较高的提取温度进行浸提，可获得较高的多糖得率，两种浸提方法的结合提取，解决了多糖提取率低的问题，且过程操作简单。

附图说明

图1为各种霉类物质提取的多糖得率柱状图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例一：

一种苹果皮渣多糖的提取方法，包括以下步骤：

s1预处理：将经过筛选的苹果皮渣经冷冻干燥后打粉，得苹果皮渣干粉；

s2脱脂：将步骤s1所得苹果皮渣干粉置于容器中，加入沸程30℃的石油醚回流提取2次，收集滤渣，自然晾干后备用；

s3提取：将步骤得到的晾干滤渣加入蒸馏水,然后用微波超声波仪处理得到提取液b；

s4过滤:提取液b进行真空抽滤，得到滤液a；

s5酶解:滤液a加入纤维素酶和植物蛋白酶，在ph5.0和40℃水浴下酶解30min，得到滤液c；

s6膜分离：将滤液c装入离心管中行离心，在压力为0.2mpa时，用超滤膜进行膜分离，离心后将残渣去掉得到心液；

s7脱蛋白：用6mol/l氯化氢溶液调节s6的离心液ph到3，用等体积比的三氯甲烷萃取两次，留上清液进行过滤，然后用氯化钠溶液洗脱，洗脱液浓缩透析除盐，得到脱蛋白多糖溶液d；

s8脱色素：向s7得到的脱蛋白多糖溶液d中加入大孔吸附树脂，混匀，室温振荡1h，抽滤，得脱色多糖溶液；

s9透析：将脱色多糖溶液逆向流水透析，最后浓缩冷冻干燥得苹果皮渣多糖。

步骤s1预处理得到的菠萝皮渣干粉目数为小于60目。

步骤s3提取的微波超声波仪是在温度50℃下提取，且提取的时间为30分钟。

步骤s3提取中加入的蒸馏水与苹果皮渣干粉的体积重量比为500:1ml/g。

步骤s6滤液在4000r/min的速度下进行离心，时间30min。

步骤s9透析中所用的透析袋的分子截留量为8kda。

步骤s6膜分离中得到离心液需5℃放置2h。

实施例二：

一种苹果皮渣多糖的提取方法，包括以下步骤：

s1预处理：将经过筛选的苹果皮渣经冷冻干燥后打粉，得苹果皮渣干粉；

s2脱脂：将步骤s1所得苹果皮渣干粉置于容器中，加入沸程45℃的石油醚回流提取1～3次，收集滤渣，自然晾干后备用；

s3提取：将步骤得到的晾干滤渣加入蒸馏水,然后用微波超声波仪处理得到提取液b；

s4过滤:提取液b进行真空抽滤，得到滤液a；

s5酶解:滤液a加入纤维素酶和植物蛋白酶，在ph5.0和50℃水浴下酶解60min，得到滤液c；

s6膜分离：将滤液c装入离心管中行离心，在压力为0.4mpa时，用超滤膜进行膜分离，离心后将残渣去掉得到心液；

s7脱蛋白：用6mol/l氯化氢溶液调节s6的离心液ph到3，用等体积比的三氯甲烷萃取两次，留上清液进行过滤，然后用氯化钠溶液洗脱，洗脱液浓缩透析除盐，得到脱蛋白多糖溶液d；

s8脱色素：向s7得到的脱蛋白多糖溶液d中加入大孔吸附树脂，混匀，室温振荡2h，抽滤，得脱色多糖溶液；

s9透析：将脱色多糖溶液逆向流水透析，最后浓缩冷冻干燥得苹果皮渣多糖。

步骤s1预处理得到的菠萝皮渣干粉目数为小于60目。

步骤s3提取的微波超声波仪是在温度75℃下提取，且提取的时间为30分钟。

步骤s3提取中加入的蒸馏水与苹果皮渣干粉的体积重量比为500:1ml/g。

步骤s6滤液在4000r/min的速度下进行离心，时间30min。

步骤s9透析中所用的透析袋的分子截留量为11kda。

步骤s6膜分离中得到离心液需6℃放置2h。

实施例三

一种苹果皮渣多糖的提取方法，包括以下步骤：

s1预处理：将经过筛选的苹果皮渣经冷冻干燥后打粉，得苹果皮渣干粉；

s2脱脂：将步骤s1所得苹果皮渣干粉置于容器中，加入沸程60℃的石油醚回流提取3次，收集滤渣，自然晾干后备用；

s3提取：将步骤得到的晾干滤渣加入蒸馏水,然后用微波超声波仪处理得到提取液b；

s4过滤:提取液b进行真空抽滤，得到滤液a；

s5酶解:滤液a加入纤维素酶和植物蛋白酶，在ph5.0和40℃水浴下酶解30min，得到滤液c；

s6膜分离：将滤液c装入离心管中行离心，在压力为0.6mpa时，用超滤膜进行膜分离，离心后将残渣去掉得到心液；

s7脱蛋白：用6mol/l氯化氢溶液调节s6的离心液ph到3，用等体积比的三氯甲烷萃取两次，留上清液进行过滤，然后用氯化钠溶液洗脱，洗脱液浓缩透析除盐，得到脱蛋白多糖溶液d；

s8脱色素：向s7得到的脱蛋白多糖溶液d中加入大孔吸附树脂，混匀，室温振荡3h，抽滤，得脱色多糖溶液；

s9透析：将脱色多糖溶液逆向流水透析，最后浓缩冷冻干燥得苹果皮渣多糖。

步骤s1预处理得到的菠萝皮渣干粉目数为小于60目。

步骤s3提取的微波超声波仪是在温度90℃下提取，且提取的时间为30分钟。

步骤s3提取中加入的蒸馏水与苹果皮渣干粉的体积重量比为500:1ml/g。

步骤s6滤液在4000r/min的速度下进行离心，时间30min。

步骤s9透析中所用的透析袋的分子截留量为14kda。

步骤s6膜分离中得到离心液需8℃放置2h。

对比例1

与实施例3相比，不含酶解步骤。

对比例2

与实施例3相比，酶解步骤中采用木聚糖酶，其他与实施例3相同。

对比例3

与实施例3相比，酶解步骤中采用果胶酶，其他与实施例3相同。

对酶解步骤中分别加入等量的各种酶所得出的多糖得率进行试验，得出的结论如下：

从附图1中可以明显看出纤维素酶和植物蛋白酶同时加入对酶解具有极大的促进作用，提高了多糖得率。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。