多特异性抗体及其制备和使用方法与流程

文档序号:19941951发布日期:2020-02-14 23:15阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种具有n-末端和c-末端的四特异性抗体单体,其从所述n-末端到所述c-末端依次包含:

在所述n-末端的第一scfv结构域、第二scfv结构域、

fab结构域、

fc结构域和

在所述c-末端的第三scfv结构域,

其中所述第一scfv结构域、所述第二scfv结构域、所述fab结构域和所述第三scfv结构域各自具有针对不同抗原的结合特异性,并且其中所述抗原是肿瘤抗原、免疫信号抗原或其组合。

2.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其中所述第一scfv结构域、所述第二scfv结构域、所述fab结构域和所述第三scfv结构域各自独立地具有针对抗原的结合特异性,所述抗原选自ror1、pd-l1、cd3、cd28、41bb、cea、her2、egfrviii、egfr、lmp1、lmp2a、间皮素、psma、epcam、glypimay-3、gpa33、gd2、trop2、nkg2d、bcma、cd19、cd20、cd33、cd123、cd22、cd30、pd1、ox40、4-1bb、gitr、tigit、tim-3、lag-3、ctla4、cd40、vista、icos、btla、light、hvem、csf1r、cd73和cd39,并且其中所述fc结构域包含人iggfc结构域。

3.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其中所述第一scfv结构域、所述第二scfv结构域、所述fab结构域、和所述第三scfv结构域各自独立地具有针对选自cd19、cd3、cd137、4-1bb、和pd-l1的抗原的结合特异性。

4.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其中所述第一scfv结构域具有针对cd19的结合特异性。

5.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其中所述第二scfv结构域具有针对cd3的结合特异性。

6.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其中所述fab结构域具有针对4-1bb或cd137的结合特异性。

7.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其中所述第三scfv结构域具有针对pd-l1的结合特异性。

8.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其中所述第一scfv结构域具有针对cd19的结合特异性,其中所述第二scfv结构域具有针对cd3的结合特异性,其中所述fab结构域具有针对4-1bb或cd137的结合特异性,且其中第三scfv结构域具有针对pd-l1的结合特异性。

9.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其中所述第一scfv结构域、所述第二scfv结构域或所述第三scfv结构域包含gly-gly-gly-gly-ser(g4s)n接头,其中n是2、3或4。

10.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体,其包含与seqidno.37-40具有百分比同源性的氨基酸序列,其中所述百分比同源性不小于98%。

11.一种scfv结构域,其包含与seqidno.2、4、6、8、10、12、26、28、30、32具有百分比同源性的氨基酸序列,其中所述百分比同源性不小于98%。

12.根据权利要求1所述的四特异性抗体单体的fab结构域,其包含与seqidno.1-12,26-32具有百分比同源性的氨基酸序列,其中所述百分比同源性不小于90%。

13.一种四特异性抗体,其包含根据权利要求1所述的四特异性抗体单体。

14.根据权利要求13所述的四特异性抗体,其包含与seqidno.38和40具有百分比同源性的氨基酸序列,其中所述同源性百分比不小于98%。

15.一种分离的核酸序列,其编码与seqidno.37和39具有百分比同源性的氨基酸序列,其中所述同源性百分比不小于98%。

16.一种包含根据权利要求15所述的分离的核酸序列的表达载体。

17.一种包含根据权利要求15所述的分离的核酸序列的宿主细胞,其中所述宿主细胞是原核细胞或真核细胞。

18.一种生产四特异性抗体或单体的方法,包括培养包含分离的核酸序列的宿主细胞,从而表达编码所述四特异性抗体或单体的dna序列,并纯化所述四特异性抗体,其中所述分离的核酸序列编码与seqidno.37-40具有百分比同源性的氨基酸,其中所述百分比同源性不小于98%。

19.一种治疗或预防癌症的方法,所述方法包括施用包含根据权利要求13所述的纯化的四特异性抗体的药物组合物。

20.一种免疫缀合物,其包含通过接头与根据权利要求13所述的四特异性抗体连接的细胞毒性剂或显像剂,其中所述接头包含酯键、醚键、酰胺键、二硫键、酰亚胺键、砜键、磷酸键、磷酸酯键、肽键、疏水性聚(乙二醇)接头或其组合。

21.根据权利要求20所述的免疫缀合物,其中所述细胞毒性剂包括化疗剂、生长抑制剂、来自加利车霉素类的细胞毒性剂、抗有丝分裂剂、毒素、放射性同位素、毒素、治疗剂或其组合。

22.一种药物组合物,其包含药学上可接受的载体和根据权利要求13所述的四特异性抗体或根据权利要求20所述的免疫缀合物中的至少一种。

23.根据权利要求22所述的药物组合物,进一步包含选自放射性同位素、放射性核素、毒素、抗体、酶、化疗剂或其组合的治疗剂。

24.一种治疗患有癌症的人类受试者的方法,包括向所述受试者施用有效量的根据权利要求13所述的四特异性抗体。

25.根据权利要求24所述的方法,进一步包括共同施用有效量的治疗剂,其中所述治疗剂包括抗体,化疗剂,酶,抗雌激素剂,受体酪氨酸激酶抑制剂,激酶抑制剂,细胞周期抑制剂,检查点抑制剂,dna、rna或蛋白质合成抑制剂,ras抑制剂,pd1、pd-l1、ctla4、4-1bb、ox40、gitr、icos、light、tim3、lag3、tigit、cd40cd27、hvem、btla、vista、b7h4、csf1r、nkg2d、cd73、cd3、cd19或其组合的抑制剂。

26.一种包含有效浓度的根据权利要求13所述的四特异性抗体的溶液,其中所述溶液是人受试者的血浆。

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