含哌嗪杂环类衍生物抑制剂、其制备方法和应用与流程

1.本发明属于药物合成领域，具体涉及一种含哌嗪杂环类衍生物抑制剂及其制备方法和应用。


背景技术：

2.大鼠肉瘤(rat sarcoma，ras)，由原癌基因hras，nras以及kras编码，分为4种蛋白hras，nras，kras4a和kras4b，是一种gtp(guanosine triphosphate)结合蛋白。ras位于细胞膜内表面，上游为受体酪氨酸激酶(rtk)，激活后调控下游的pi3k，raf等信号通路，从而调控细胞的生长、存活、迁移和分化等功能。
3.ras在机体内主要有两种状态：与gdp(guanosine diphosphate)结合的失活状态和与gtp结合的激活状态。其活性受两个蛋白调控，鸟苷交换因子(guanine nucleotide exchange factor，gef)促使gdp从ras蛋白上释放，使gtp结合激活ras；gtp酶激活蛋白(gtpase activating protein，gap)激活ras蛋白的gtp酶活性，将结合在ras蛋白上的gtp水解成gdp，使ras失活。正常情况下，ras蛋白处于非活化状态，突变后构象发生改变，ras处于持续激活状态，且下游信号通路也被持续激活，从而导致多种癌症的发生。
4.ras作为第一个被确认的癌基因，是突变率最高的致癌基因，在人类癌症中平均占25％。ras家族中最常见的致癌突变为kras(85％)，而nras(12％)和hras(3％)则较为少见。kras突变主要高发于胰腺癌(95％)、结直肠癌(52％)和肺癌(31％)等一系列癌症。kras最常见的突变方式为点突变，多发生在p-loop(aa 10～17)中的g12、g13和switchii区(aa59-76)的q61，其中以g12突变最为常见(83％)。在非小细胞肺癌(nsclc)和结直肠癌中，kras g12c是最常见的突变之一。
5.虽然存在极大的临床需求，但至今没有一个直接靶向kras的药物上市，目前临床治疗kras突变的患者一般只能采取化疗。kras抑制剂的研发困难主要有两个因素，首先ras蛋白结构平滑，小分子难以结合到蛋白表面；其次ras gtp酶对gtp的亲和力高达皮摩尔(pm)级别，且内源性gtp水平高，小分子药物难以阻断二者结合。近期研究发现kras 12位甘氨酸(glycine，gly)突变为半胱氨酸(cysteine，cys)后，构象改变，形成一个新的口袋供小分子共价结合，不可逆的将kras g12c锁定在结合gdp的非活化状态。因此kras g12c抑制剂有望成为首个直接靶向kras的药物。
6.目前已有多个kras g12c抑制剂进入临床研究阶段，如amgen公司开发的amg 510，wellspring biosciences公司开发的ars-3248和mirati公司开发的mtrx849，目前均处于临床i期研究阶段，但还没有一款开发上市的kras g12c抑制剂。其中amg 510在早期临床中展示了不错的疗效以及很好的安全性，预期未来可以为kras g12c突变的癌症患者带来更多的治疗选择。
7.kras g12c目前没有特异的靶向药，存在较大的临床需求。选择性更高、活性更好、安全性更佳的kras g12c抑制剂有治疗多种癌症的潜力，具有广阔的市场前景。


技术实现要素：

8.本发明的目的在于提供一种通式(i)所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其中通式(i)所示的化合物结构如下：
[0009][0010]
其中：
[0011]
x1选自cr1或cr1r2；
[0012]
x2选自n、nr3或cr3；
[0013]
x3选自c(o)、s(o)、s(o)2或c-l-r4；
[0014]
x4选自o、s、c(o)、n、nr5、cr5或cr5r6；
[0015]
x5选自o、s、c(o)、n、nr7、cr7或cr7r8；
[0016]
l选自键、-o(ch2)
n-、-s(ch2)
n-、-nr
aa
(ch2)
n-、-(ch2)
n
nr
aa-、-(ch2)
n
o-、-(ch2)
n-、-(ch2)
n
c(o)-、-(ch2)
n
c(o)o-、-(ch2)
n
nr
aa-、-(ch2)
n
c(o)nr
aa-、-oc(r
aa
r
bb
)
n
(ch2)
m-、-(ch2)
n
nr
aa
c(o)-、-(ch2)
n
nr
aa
c(o)nr
bb-、-(ch2)
n
s(o)
m-、-(ch2)
n
s(o)
m
nr
aa-、-(ch2)
n
nr
aa
s(o)
m-、-cr
aa
＝cr
bb
(ch2)
n-或-cr
aa
＝cr
bb
(ch2)
n
nr
aa-；
[0017]
环a选自环烷基、杂环基、芳基或杂芳基；
[0018]
r1和r2各自独立的选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的氨基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0019]
r3选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述的烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0020]
或者，r1和r3连同它们所在的原子一起链接形成环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0021]
r4选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，其中所述的烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0022]
r5和r6各自独立的选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的氨基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷
基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0023]
r7和r8各自独立的选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的氨基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0024]
r
a
选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、氧代基、硫代基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的氨基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0025]
或者，任意两个相邻或不相邻的r
a
链接形成环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0026]
r
b
选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、氧代基、硫代基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的氨基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0027]
或者，任意两个相邻或不相邻的rb链接形成环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0028]
r
aa
和r
bb
各自独立的选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的氨基、烷基、烯基、炔基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷氧基、羟烷基、环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选的可以进一步被取代；
[0029]
x为0～6的整数；
[0030]
y为0～6的整数；
[0031]
m为0、1、2或3；且
[0032]
n为0、1、2或3。
[0033]
在本发明一种优选的实施方式中，l选自键、-o(ch2)
n-、-nr
aa
(ch2)
n-、-(ch2)
n
c(o)-、-(ch2)
n
c(o)nr
aa-、-(ch2)
n
nr
aa
c(o)-、-(ch2)
n
s(o)
m-、-(ch2)
n
s(o)
m
nr
aa-、-(ch2)
n
nr
aa
s(o)
m-、-cr
aa
＝cr
bb
(ch2)
n-或-oc(r
aa
r
bb
)
n
(ch2)
m-；
[0034]
在本发明进一步优选的实施方式中，l选自-o(ch2)
n-、-(ch2)
n
c(o)-或-cr
aa
＝cr
bb
(ch2)
n-；
[0035]
r
aa
和r
bb
各自独立的氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基、5-14元杂芳基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选的被氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、c
1-6
卤代烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0036]
m为0、1、2或3；且
[0037]
n为0、1、2或3。
[0038]
在本发明一种优选的实施方式中，环a选自c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，优选c
6-10
芳基或5-10元杂芳基；
[0039]
在本发明进一步优选的实施方式中，环a选自苯基、吡啶基、5-7元含氮杂芳基、苯并5-7元含氮杂芳基或5-7元含氮杂芳基并苯基；
[0040]
在本发明进一步优选的实施方式中，环a选自以下基团：
[0041][0042]
在本发明一种优选的实施方式中，r1选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选的被氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0043]
在本发明进一步优选的实施方式中，r1选自氢、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环基；
[0044]
在本发明进一步优选的实施方式中，r1选自氢、氟、氯、甲基、乙基、丙基、甲氧基或乙氧基。
[0045]
在本发明一种优选的实施方式中，r2选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-12
芳基或5-12元杂芳基；
[0046]
在本发明进一步优选的实施方式中，r2选自氢、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环基；
[0047]
在本发明进一步优选的实施方式中，r2选自氢。
[0048]
在本发明一种优选的实施方式中，r3选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选的被氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0049]
在本发明进一步优选的实施方式中，r3选自c
1-6
烷基、c
6-10
芳基或5-10元杂芳基，所述的c
1-6
烷基、c
6-10
芳基和5-10元杂芳基，任选的被氢、羟基、卤素、氨基和c
1-6
烷基中的一个
或多个取代基所取代；
[0050]
在本发明进一步优选的实施方式中，r3选自选苯基和吡啶基，所述的苯基和吡啶基，任选的被氢、羟基、卤素、氨基和c
1-6
烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0051]
或者，r1和r3连同它们所在的原子一起链接形成c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选的被氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0052]
在本发明一种优选的实施方式中，r4选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选的被氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0053]
在本发明进一步优选的实施方式中，r4选自c
3-8
环烷基或3-8元杂环基，所述的c
3-8
环烷基或3-8元杂环基，任选的被氢、羟基、卤素、氨基和c
1-3
烷基中的一个或多个取代基所取代；
[0054]
在本发明进一步优选的实施方式中，r4选自c
1-3
烷基取代的3-8元含氮杂环基，所述氮原子的个数为1-3个。
[0055]
在本发明一种优选的实施方式中，r5选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-12
芳基或5-12元杂芳基；
[0056]
在本发明进一步优选的实施方式中，r5选自氢、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环基；
[0057]
在本发明进一步优选的实施方式中，r4选自氢。
[0058]
在本发明进一步优选的实施方式中，r6选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-12
芳基或5-12元杂芳基；
[0059]
在本发明进一步优选的实施方式中，r6选自氢、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环基；
[0060]
在本发明进一步优选的实施方式中，r6选自氢。
[0061]
在本发明一种优选的实施方式中，r7选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、
c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选的被氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0062]
在本发明进一步优选的实施方式中，r7选自氢、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环基；
[0063]
在本发明进一步优选的实施方式中，r7选自氢、氟、氯或甲基。
[0064]
在本发明一种优选的实施方式中，r8选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-12
芳基或5-12元杂芳基；
[0065]
在本发明进一步优选的实施方式中，r8选自氢、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环基；
[0066]
在本发明进一步优选的实施方式中，r8选自氢。
[0067]
在本发明一种优选的实施方式中，r
a
选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、氧代基、硫代基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基或氰基取代的c
1-6
烷基；
[0068]
在本发明进一步优选的实施方式中，r
a
选自氢、c
1-3
烷基或氰基取代的c
1-3
烷基。
[0069]
在本发明一种优选的实施方式中，r
b
选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基，所述的c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-14
芳基和5-14元杂芳基，任选的被氢、氘、卤素、氨基、羟基、巯基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
烷硫基、卤代c
1-6
烷氧基、c
1-6
羟烷基、c
3-12
环烷基、3一12元杂环基、c
6-14
芳基或5-14元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0070]
在本发明进一步优选的实施方式中，r
b
选自氢、卤素、羟基、氨基、c
1-3
烷基、c
1-3
卤代烷基、c
1-3
烷氧基、c
1-3
羟烷基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环基；
[0071]
在本发明进一步优选的实施方式中，r
b
选自氢、氟、氯、羟基、氨基或甲基。
[0072]
在本发明进一步优选的实施方式中，提供一种式(ii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其具体结构如下：
[0073]
[0074]
在本发明进一步优选的实施方式中，提供一种式(iii)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其具体结构如下：
[0075][0076]
其中：
[0077]
x5选自n或cr7。
[0078]
在本发明进一步优选的实施方式中，提供一种式(iv)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其具体结构如下：
[0079][0080]
在本发明进一步优选的实施方式中，提供一种式(v)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其具体结构如下：
[0081][0082]
其中：
[0083]
环b选自3-14元杂环基或5-14元杂芳基；优选3-8元杂环基，更优选含1-3个氮原子或氧原子的5-7元杂环基，更优选哌啶基和吗啉基；
[0084]
r
c
选自氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷氧基、c
1-6
羟烷基、氰基取代的c
1-6
烷基、c
3-12
环烷
基、3-12元杂环基、c
6-12
芳基或5-12元杂芳基，所述的氨基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷氧基、c
1-6
羟烷基、氰基取代的c
1-6
烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-12
芳基和5-12元杂芳基任选被氢、氘、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
2-6
烯基、c
2-6
炔基、氧代基、硫代基、c
1-6
氘代烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
1-6
卤代烷氧基、c
1-6
羟烷基、氰基取代的c
1-6
烷基、c
3-12
环烷基、3-12元杂环基、c
6-12
芳基和5-12元杂芳基中的一个或多个取代基所取代；
[0085]
优选氢、卤素、氨基、羟基、氰基、硝基、c
1-6
烷基、c
1-6
卤代烷基、c
1-6
烷氧基、c
3-8
环烷基或3-8元杂环基；
[0086]
更优选异丙基或异丁基；且
[0087]
z为0～6的整数。
[0088]
在本发明进一步优选的实施方式中，提供一种式(vi)化合物、其立体异构体或其药学上可接受盐，其具体结构如下：
[0089][0090]
其中：
[0091]
x4选自o、s、c(o)、nr5或cr5r6；优选c(o)或ch2。
[0092]
在本发明最优选的实施方式中，包括以下具体化合物：
[0093]
[0094][0095]
本发明还提供了一种优选方案，还涉及一种药用组合物，其包括治疗有效剂量的所示的通式(i)化合物及其立体异构体或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
[0096]
本发明进一步涉及任一所示的通式(i)化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，或所述的药物组合物在制备kras抑制剂药物中的应用；优选在kras g12c突变药物中的应用。
[0097]
本发明还提供了一种优选方案，还涉及所述的通式(i)化合物、及其立体异构体或其药学上可接受的盐，或所述的药物组合物在治疗预防和/或治疗预制备治疗由kras g12c抑制剂介导的病症的方法，该方法包括向患者施用治疗有效剂量的通式(i)所示的化合物其立体异构体或其药学上可接受的盐，或其药物组合物。
[0098]
在一些实施例中，本发明的化合物和组合物可用于治疗在制备治疗努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、头颈部肿瘤、胃癌、肺癌及其结肠癌等疾病或病症中的用途。
[0099]
本发明的化合物和组合物可用于治疗在制备治疗努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、头颈部肿瘤、肺癌及其结肠癌等疾病或病症中的方法。
[0100]
在一些实施例中，本发明提供一种治疗癌症病症的方法，其包含将本发明的化合物或组合物给予患有癌症病症的患者。
[0101]
在一些实施例中，由本发明的化合物或组合物治疗的癌症为努南氏症候群、豹皮症候群、白血病、神经母细胞瘤、黑色素瘤、乳腺癌、食道癌、头颈部肿瘤、胃癌、肺癌及其结肠癌；优选非小细胞肺癌、结肠癌、食管癌、头颈部肿瘤。
[0102]
发明的详细说明
[0103]
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
[0104]
术语“烷基”指饱和脂肪族烃基团，其为包含1至20个碳原子的直链或支链基团，优选含有1至8个碳原子的烷基，更优选1至6个碳原子的烷基，最优选1至3个碳原子的烷基。非
限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有1至6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基，本发明优选甲基、乙基、异丙基、叔丁基、卤代烷基、氘代烷基、烷氧基取代的烷基和羟基取代的烷基。
[0105]
术语“亚烷基”是指烷基的一个氢原子进一步被取代，例如：“亚甲基”指-ch
2-、“亚乙基”指-(ch2)
2-、“亚丙基”指-(ch2)
3-、“亚丁基”指-(ch2)
4-等。术语“烯基”指由至少由两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的如上定义的烷基，例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。烯基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基。
[0106]
术语“环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，环烷基环包含3至20个碳原子，优选包含3至12个碳原子，更优选包含3至6个碳原子。单环环烷基的非限制性实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等；多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基，优选环丙基、环丁基、环己基、环戊基和环庚基。
[0107]
术语“螺环烷基”指5至20元的单环之间共用一个碳原子(称螺原子)的多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为3元/6元、3元/5元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实例包括：
[0108]
等；
[0109]
也包含单螺环烷基与杂环烷基共用螺原子的螺环烷基，非限制性实例包括：
[0110]
等。
[0111]
术语“稠环烷基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环烷基。稠环烷基的非限制性实例包括：
[0112]
等。
[0113]
术语“桥环烷基”指5至20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实例包括：
[0114][0115]
所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
[0116]
术语“杂环基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包含3至20个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)
m
(其中m是整数0至2)的杂原子，但不包括-o-o-、-o-s-或-s-s-的环部分，其余环原子为碳。优选包含3至12个环原子，其中1～4个是杂原子；更优选包含3至8个环原子；最优选包含3至8个环原子；进一步优选包含1-3氮原子的3-8元杂环基，任选地，被1-2个氧原子、硫原子、氧代基取代，包括含氮单环杂环基、含氮螺杂环基或含氮稠杂环基。
[0117]
单环杂环基的非限制性实例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、二氢咪唑基、二氢呋喃基、二氢吡唑基、二氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、吖庚基、1，4-二氮杂环庚基、吡喃基等，优选吡咯烷基、吗啉基、哌啶基、吖庚基、1，4-二氮杂环庚基和哌嗪基，更优选吡咯烷基、哌啶基或吗啉基。多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基；其中涉及到的螺环、稠环和桥环的杂环基任选与其他基团通过单键相
连接，或者通过环上的任意两个或者两个以上的原子与其他环烷基、杂环基、芳基和杂芳基进一步并环连接。
[0118]
术语“螺杂环基”指5至20元的单环之间共用一个原子(称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)
m
(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺杂环基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺杂环基和双螺杂环基。更优选为3元/5元、3元/6元、4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元单螺杂环基。螺杂环基的非限制性实例包括：
[0119][0119]
等。
[0120]
术语“稠杂环基”指5至20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)
m
(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为5元/5元或5元/6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实例包括：
[0121][0121]
等。
[0122]
术语“桥杂环基”指5至14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，其可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的π电子系统，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)
m
(其中m是整数0至2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为6
至14元，更优选为7至10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥杂环基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥杂环基的非限制性实例包括：
[0123][0123]
等。
[0124]
所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，其非限制性实例包括：
[0125]
等。
[0126]
杂环基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
[0127]
术语“芳基”指具有共轭的π电子体系的6至14元全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为6至12元，例如苯基和萘基。更优选苯基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，包括苯并5-10元杂芳基、苯并3-8元环烷基和苯并3-8元杂烷基，优选苯并5-6元杂芳基、苯并3-6元环烷基和苯并3-6元杂烷基，其中杂环基为含1-3氮原子、氧原子、硫原子的杂环基；或者还包含含苯环的三元含氮稠环。
[0128]
其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，其非限制性实例包括：
[0129][0129]
等。
[0130]
芳基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0131]
术语“杂芳基”指包含1至4个杂原子、5至14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子选自氧、硫和氮。杂芳基优选为5至12元，更优选为5元或6元，例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、三唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，优选为三唑基、噻吩基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、嘧啶基或噻唑基；更有选吡唑基、吡咯基和噁唑基。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，其非限制性实例包括：
[0132]
等。
[0133]
杂芳基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0134]
术语“烷氧基”指-o-(烷基)和-o-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基。烷氧基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0135]
术语“烷硫基”指-s-(烷基)和-s-(非取代的环烷基)，其中烷基的定义如上所述。烷硫基的非限制性实例包括：甲硫基、乙硫基、丙氧基、丁硫基、环丙硫基、环丁硫基、环戊硫基、环己硫基。烷硫基可以是任选取代的或非取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0136]“卤代烷基”指被一个或多个卤素取代的烷基，其中烷基如上所定义。
[0137]“卤代烷氧基”指被一个或多个卤素取代的烷氧基，其中烷氧基如上所定义。
[0138]“羟烷基”指被羟基取代的烷基，其中烷基如上所定义。
[0139]“烯基”指链烯基，又称烯烃基，其中所述的烯基可以进一步被其他相关基团取代，例如：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0140]“炔基”指(ch≡c-)，其中所述的炔基可以进一步被其他相关基团取代，例如：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0141]
术语“烯基羰基”指-c(o)-(烯基)，其中烯基的定义如上所述。烯基羰基的非限制性实例包括：乙烯基羰基、丙烯基羰基、丁烯基羰基。烯基羰基可以是任选取代的或非取代
的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、羧基或羧酸酯基。
[0142]“羟基”指-oh基团。
[0143]“卤素”指氟、氯、溴或碘。
[0144]“氨基”指-nh2。
[0145]“氰基”指-cn。
[0146]“硝基”指-no2。
[0147]“羰基”指-c(o)-。
[0148]“羧基”指-c(o)oh。
[0149]“i-pr”指-ch(ch3)3。
[0150]“thf”指四氢呋喃。
[0151]“etoac”指乙酸乙酯。
[0152]“meoh”指甲醇。
[0153]“dmf”指n，n-二甲基甲酰胺。
[0154]“dipea”指二异丙基乙胺。
[0155]“tfa”指三氟乙酸。
[0156]“mecn”指乙晴。
[0157]“dma”指n，n-二甲基乙酰胺。
[0158]“et2o”指乙醚。
[0159]“dce”指1，2二氯乙烷。
[0160]“dipea”指n，n-二异丙基乙胺。
[0161]“nbs”指n-溴代琥珀酰亚胺。
[0162]“nis”指n-碘代丁二酰亚胺。
[0163]“cbz-cl”指氯甲酸苄酯。
[0164]“pd2(dba)
3”指三(二亚苄基丙酮)二钯。
[0165]“dppf”指1，1
’-
双二苯基膦二茂铁。
[0166]“hatu”指2-(7-氧化苯并三氮唑)-n，n，n’，n
’-
四甲基脲六氟磷酸酯。
[0167]“khmds”指六甲基二硅基胺基钾。
[0168]“lihmds”指双三甲基硅基胺基锂。
[0169]“meli”指甲基锂。
[0170]“n-buli”指正丁基锂。
[0171]“nabh(oac)
3”指三乙酰氧基硼氢化钠。
[0172]“x选自a、b、或c”、“x选自a、b和c”、“x为a、b或c”、“x为a、b和c”等不同用语均表达了相同的意义，即表示x可以是a、b、c中的任意一种或几种。
[0173]
本发明所述的氢原子均可被其同位素氘所取代，本发明涉及的实施例化合物中的任一氢原子也均可被氘原子取代。
[0174]“任选”或“任选地”意味着随后所描述的事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以
但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
[0175]“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
[0176]“药物组合物”表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学上/可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学/可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。
[0177]“可药用盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。
具体实施方式
[0178]
以下结合实施例进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。
[0179]
实施例
[0180]
本发明的化合物结构是通过核磁共振(nmr)或/和液质联用色谱(lc-ms)来确定的。nmr化学位移(δ)以百万分之一(ppm)的单位给出。nmr的测定是用bruker avance-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)，氘代甲醇(cd3od)和氘代氯仿(cdcl3)，内标为四甲基硅烷(tms)。
[0181]
液质联用色谱lc-ms的测定用agilent 1200infinity series质谱仪。hplc的测定使用安捷伦1200dad高压液相色谱仪(sunfire c18150
×
4.6mm色谱柱)和waters 2695-2996高压液相色谱仪(gimini c
18
150
×
4.6mm色谱柱)。
[0182]
薄层层析硅胶板使用烟台黄海hsgf254或青岛gf254硅胶板，tlc采用的规格是0.15mm～0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。
[0183]
本发明实施例中的起始原料是已知的并且可以在市场上买到，或者可以采用或按照本领域已知的方法来合成。
[0184]
在无特殊说明的情况下，本发明的所有反应均在连续的磁力搅拌下，在干燥氮气或氩气氛下进行，溶剂为干燥溶剂，反应温度单位为摄氏度。
[0185]
实施例1
[0186]
4-((s)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0187][0188]
第一步：叔-丁基4-(5-溴-2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯的制备
[0189][0190]
将5-溴-2，4-二氯-6-甲基嘧啶(5g，20.8mmol)溶于acn(50ml)中，加入叔-丁基哌嗪-1-羧酸酯(5.1g，27.4mmol)，dipea(8.1g，62.7mmol)，室温搅拌15小时。加入水，乙酸乙酯(50ml)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品，柱层析(petro ether/etoac＝5∶1)纯化得到目标产物叔-丁基4-(5-溴-2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(7.9g，产率：97％)。
[0191]
ms m/z(esi)：391.1[m+h]
+
，393.1[m+h+2]
+
.
[0192]
第二步：叔-丁基4-(5-溴-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯的制备
[0193][0194]
将叔-丁基4-(5-溴-2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(5g，12.8mmol)溶于meoh(30ml)中，冰浴下加入naoh(1.5g，37.5mmol)，逐渐升至室温搅拌5小时；加水和乙酸乙酯(50ml)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品，柱层析(petro ether/etoac＝5∶1)纯化得到目标产物叔-丁基4-(5-溴-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(3.5g，产率：71％)。
[0195]
ms m/z(esi)：387.1[m+h]
+
，389.1[m+h+2]
+
.
[0196]
第三步：叔-丁基4-(5-甲酰基-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯的制备
[0197][0198]
将叔-丁基4-(5-溴-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(3.2g，8.3mmol)溶于无水thf(100ml)中，氮气保护下，冷却至-78℃，加入n-buli(9.9ml，9.9mmol)，搅拌0.5小时。加入dmf/thf(1ml/5ml)，-78℃搅拌1小时，逐渐升至室温。继续搅拌2小时。加水淬灭，加水和乙酸乙酯(3*50ml)萃取。合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物叔-丁基4-(5-甲酰基-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(2.0g，产率：72％)。
[0199]
ms m/z(esi)：337.1[m+h]
+
.
[0200]
第四步：叔-丁基4-(5-(((叔-丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯的制备
[0201][0202]
将叔-丁基4-(5-甲酰基-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(1.8g，5.4mmol)溶于二氯甲烷(50ml)中，加入甲胺盐酸盐(710mg，10.6mmol)，nabh(oac)3(1.4g，6.7mmol)和冰醋酸(30mg，0.5mmol)。室温搅拌过夜。加入boc2o(2.3g，10.6mmol)，室温搅拌3小时。加水淬灭，加水和乙酸乙酯(3*50ml)萃取。合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物叔-丁基4-(5-(((叔-丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(1.9g，产率：79％)。
[0203]
ms m/z(esi)：452.1[m+h]
+
.
[0204]
第五步：叔-丁基(e)-4-(5-(((叔-丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)-6-(2-氟-6-甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯的制备
[0205][0206]
将叔-丁基4-(5-(((叔-丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)-2-甲氧基-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(1.8g，4.0mmol)加入naoh水溶液(5m，100ml)中，加入2-氟-6-甲氧基
苯甲醛(730mg，4.8mmol)和三辛基甲基氯化铵(220mg，0.5mmol)，加热至回流，搅拌5小时。冷却，过滤，滤饼用水洗涤，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物叔-丁基(e)-4-(5-(((叔-丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)-6-(2-氟-6-甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(1.7g，产率：73％)。
[0207]
ms m/z(esi)：588.1[m+h]
+
.
[0208]
第六步：7-(2-氟-6-甲氧苯基)-2-甲氧基-6-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶的制备
[0209][0210]
将叔-丁基(e)-4-(5-(((叔-丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)-6-(2-氟-6-甲氧基苯乙烯基)-2-甲氧基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(1.5g，2.6mmol)溶于乙酸乙酯(50ml)中，加入2mhcl的乙酸乙酯溶液(6ml)，室温搅拌5小时，浓缩除去溶剂；粗品溶于水(20ml)，加入k2co3(720mg，5.2mmol)和ki(430mg，2.6mmol)，加热至100℃，搅拌15小时，冷却，加入水和乙酸乙酯(3*30ml)萃取。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物7-(2-氟-6-甲氧苯基)-2-甲氧基-6-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶(560mg，产率：57％)。
[0211]
ms m/z(esi)：388.1[m+h]
+
.
[0212]
第七步：1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-2-甲氧基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮的制备
[0213][0214]
将7-(2-氟-6-甲氧苯基)-2-甲氧基-6-甲基-4-(哌嗪-1-基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶(500mg，1.3mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中，加入dipea(820mg，3.9mmol)，室温滴加丙烯酰氯(140mg，1.6mmol)，加完继续搅拌1小时。加水淬灭，二氯甲烷(20ml)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-2-甲氧基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(480mg，产率：84％)。
[0215]
ms m/z(esi)：442.1[m+h]
+
.
[0216]
第七步：1-(4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-2-羟基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，
3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮的制备
[0217][0218]
将1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-2-甲氧基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(450mg，1.0mmol)溶于二氯甲烷(50ml)中，冷却到-40℃，滴加入bbr3(1.3g，5.2mmol)，逐渐升至室温，搅拌2小时。加入饱和nahco3水溶液搅拌1小时，乙酸乙酯(10ml)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物1-(4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-2-羟基-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(350mg，产率：85％)。
[0219]
ms m/z(esi)：414.1[m+h]
+
.
[0220]
第八步：4-((s)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0221][0222]
将4-((s)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮(100mg，0.24mmol)溶于meoh(20ml)中，加入2-异丙基-4-甲基-3-吡啶硼酸(90mg，0.5mmol)，醋酸铜(100mg，0.5mmol)，四甲基乙二胺(58mg，0.5mmol)，加热至60℃，搅拌15小时。加入水和乙酸乙酯(10ml)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，制备hplc纯化得到目标产物4-((s)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮(12mg，产率：9％)。
[0223]
ms m/z(esi)：561.1[m+h]
+
.
[0224]
实施例2～6的制备参照实施例1路线。
[0225]
实施例7
[0226]
4-((s)-4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-6-甲基苯基)-6-甲基-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0227][0228]
第一步：4，6-二氯-n-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰)尼克酰胺的制备
[0229][0230]
室温下滴加草酰氯(501mg，3.95mmol)到4，6-二氯尼克酰胺(500mg，2.63mmol)的四氢呋喃(30ml)溶液里，加完升高温度到70℃，搅拌1小时，反应冷却至室温，加三乙胺(1063mg，10.5mmol)，再加2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺(1184mg，7.89mmol)的四氢呋喃(10ml)溶液，搅拌1小时。加水(50ml)淬灭反应，用乙酸乙酯(40ml
×
3)萃取；乙酸乙酯层用饱和nacl溶液洗涤后，无水硫酸钠干燥，浓缩柱层析[洗脱剂∶水～乙腈/水从0％到24％]纯化得到黄色固体4，6-二氯-n-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰)尼克酰胺(380mg，产率39％)。
[0231]
msm/z(esi)：367.1[m+h]
+
，369.1[m+h+2]
+
。
[0232]
第二步：7-氯-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0233][0234]
0℃往4，6-二氯-n-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酰)尼克酰胺(343mg，0.937mmol)的四氢呋喃(25ml)溶液里滴加六甲基二硅胺基钾(2.5ml，2.5mmol)，加完搅拌2小时。用氯化铵水溶液(40ml)淬灭反应，乙酸乙酯(20ml
×
3)萃取，乙酸乙酯层用饱和nacl溶液洗涤后，无水硫酸钠干燥，浓缩得到浅黄色固体7-氯-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮(250mg，产率81％)。
[0235]
ms m/z(esi)：331.1[m+h]
+
，369.1[m+h+2]
+
。
[0236]
第三步：4，7-二氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0237][0238]
室温下往7-氯-4-羟基-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮(240mg，0.727mmol)的乙腈(20ml)溶液里加n，n-二异丙基乙胺(1.4g，11mmol)，再
加三氯氧磷(671mg，4.36mmol)，80℃搅拌1小时。冷却至室温，直接用于下一步反应。
[0239]
第四步：叔-丁基(s)-4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-羰基-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸酯的制备
[0240][0241]
往上一步反应液里加n，n-二异丙基乙胺(938mg，7.27mmol)，加完搅拌5分钟，再加叔-丁基(s)-3-甲基哌嗪-1-羧酸酯(290mg，1.45mmol)，搅拌1小时。补加叔-丁基(s)-3-甲基哌嗪-1-羧酸酯(436mg，2.18mmol)，搅拌1小时。反应用氯化铵水溶液(100ml)淬灭，乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取，有机相用氯化钠水溶液(30ml)洗，旋干柱层析[洗脱剂：二氯甲烷～甲醇(含1％氨水)/二氯甲烷从0％到5％]纯化得到黄色固体产物叔-丁基(s)-4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-羰基-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸酯(730mg，2步产率196％)。
[0242]
ms m/z(esi)：513.2[m+h]
+
，515.1[m+h+2]
+
。
[0243]
第五步：(s)-7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-4-(2-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0244][0245]
室温下往叔-丁基(s)-4-(7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-羰基-1，2-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸酯(586mg，1.14mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液里加2，6二甲基吡啶(306mg，2.85mmol)，三氟甲磺酸三甲基硅酯(762mg，3.43mmol)。没反应完，补加三氟甲磺酸三甲基硅酯(762mg，3.43mmol)，搅拌1小时。反应液直接用于下一步。
[0246]
ms m/z(esi)：413.2[m+h]
+
，415.1[m+h+2]
+
。
[0247]
第六步：(s)-4-(4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0248][0249]
往上一步反应液加入n，n-二异丙基乙胺(1.2ml)，冷却至0℃，加入丙烯酰氯(261mg，2.9mmol)，加完搅拌1小时。反应液用氯化铵水溶液(30ml)淬灭，二氯甲烷(20ml
×
3)萃取，二氯甲烷层分别用饱和碳酸氢钠水溶液(20ml)，饱和nacl水溶液(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥后柱层析[洗脱剂：二氯甲烷～甲醇(含1％氨水)/二氯甲烷从0％到5％]纯化得到黄色油状产物(s)-4-(4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮(400mg，2步产率75％)。
[0250]
ms m/z(esi)：467.2[m+h]
+
，469.1[m+h+2]
+
。
[0251]
第七步：(s)-4-(4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0252][0253]
(s)-4-(4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-氯-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮(180mg，0.386mmol)，(2-氟-6-甲氧苯基)硼酸(131mg，0.773mmol)，[1，1
′-
双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(31mg，0.0386mmol)和碳酸铯(376mg，1.16mmol)在二氧六环(7ml)和水(1ml)中100℃微波搅拌1小时。旋干反应液，柱层析[洗脱剂：二氯甲烷～甲醇(含1％氨水)/二氯甲烷从0％到5％]纯化得到黄色固体产物(s)-4-(4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮(50mg，产率23％)。
[0254]
ms m/z(esi)：557.3[m+h]
+
。
[0255]
第八步：(s)-4-(4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的制备
[0256][0257]
0℃往(s)-4-(4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-甲氧苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮的二氯甲烷(10ml)溶液中滴加三溴化硼(0.45ml，0.45mmol)，溶液慢慢变混浊，加n，n-二异丙基乙胺(0.1ml)，溶液变澄清，反应在0℃搅拌30分钟，再升到室温搅拌1.5小时。把反应液倒入碳酸氢钠水溶液，二氯甲烷萃取(20ml
×
3)，二氯甲烷相用饱和nacl溶液洗涤(20ml)，无水硫酸钠干燥后浓缩有机相，制备色谱纯化得到灰色固体产物(s)-4-(4-丙烯酰-2-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)吡啶并[4，3-d]嘧啶-2(1h)-酮(1.9mg，产率4％)。
[0258]1h nmr(400mhz，chloroform-d)δ9.32(br，1h)，8.64(s，1h)，8.26(d，j＝12hz，1h)，7.36-7.30(m，2h)，6.88-7.07(m，2h)，6.61-6.72(m，2h)，6.42(d，j＝16hz，1h)，5.83(d，j＝12hz，1h)，4.53-4.10(m，5h)，3.32-3.00(m，3h)，1.26(d，j＝4hz，3h).
[0259]
ms m/z(esi)：543.2[m+h]+。
[0260]
实施例17
[0261]
1-(4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮的制备
[0262][0263]
第一步：叔-丁基(s)-4-(5-溴-6-甲基-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯的制备
[0264][0265]
将叔-丁基4-(5-溴-2-氯-6-甲基嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(6g，15.3mmol)溶于thf(100ml)中，冰浴下加入(s)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(2.3g，20.0mmol)，nahh(800mg，
4-(哌嗪-1-基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶的制备
[0276][0277]
将叔-丁基(s)-4-(5-(((叔-丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)-6-甲基-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯(1.8g，3.4mmol)加入naoh水溶液(5m，100ml)中，加入2-氟-6-甲氧基苯甲醛(630mg，4.1mmol)和三辛基甲基氯化铵(220mg，0.5mmol)，加热至回流，搅拌5小时。冷却，过滤，滤饼用水洗涤，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物7-(2-氟-6-甲氧苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶(1.5g，产率：66％)。
[0278]
ms m/z(esi)：671.1[m+h]
+
.
[0279]
第五步：1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮的制备
[0280][0281]
将7-(2-氟-6-甲氧苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶(1g，1.5mmol)溶于乙酸乙酯(50ml)中，加入2m hcl的乙酸乙酯溶液(6ml)，室温搅拌5小时，浓缩除去溶剂；粗品溶于水(20ml)，加入k2co3(420mg，3.0mmol)和ki(250mg，1.5mmol)，加热至100℃，搅拌15小时，冷却，加入水和乙酸乙酯(3*30ml)萃取。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(320mg，产率：45％)。
[0282]
ms m/z(esi)：471.1[m+h]
+
.
[0283]
第六步：1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮的制备
[0284][0285]
将1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(300mg，0.64mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，加入dipea(400mg，1.9mmol)，室温滴加丙烯酰氯(69mg，0.77mmol)，加完继续搅拌1小时。加水淬灭，二氯甲烷(10ml)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，柱层析(ch2cl2/meoh＝10∶1)纯化得到目标产物1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(310mg，产率：93％)。
[0286]
ms m/z(esi)：525.1[m+h]
+
.
[0287]
第七步：1-(4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮的制备
[0288][0289]
将1-(4-(7-(2-氟-6-甲氧苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(100mg，0.19mmol)溶于二氯甲烷(20ml)中，冷却到-40℃，滴加入bbr3(240mg，0.96mmol)，逐渐升至室温，搅拌2小时。加入饱和nahc03水溶液搅拌1小时，乙酸乙酯(10ml)萃取三次。合并有机层，无水硫酸钠干燥，浓缩得到粗品，制备hplc纯化得到目标产物1-(4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-6-甲基-2-(((s)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5，6，7，8-四氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(23mg，产率：24％)。
[0290]
ms m/z(esi)：511.1[m+h]
+
.
[0291]
实施例18～23的制备参照实施例17路线。
[0292]
生物学测试评价
[0293]
以下结合测试例进一步描述解释本发明，但这些实施例并非意味着限制本发明的范围。
[0294]
测试例1、本发明化合物对h358/mia paca-2细胞增殖活性抑制作用的测定
[0295]
实验目的：该测试例的目的是测量化合物对h358或miapaca-2细胞增殖活性的抑制作用。
[0296]
实验仪器：酶标仪(biotek synergy h1)，移液器(eppendorf&rainin)实验方法：培养h358或mia paca-2细胞至合适的融合度时，收集h358或mia paca-2细胞，使用完全培养基将细胞调整为合适的细胞浓度，将细胞悬液铺于96孔板，每孔90μl，放入37℃，5％co2培养箱贴壁过夜，使用dmso以及培养基配制不同浓度的化合物溶液，设置溶媒对照，将化合物溶液加入到96孔板中，每孔10μl，放入37℃，5％co2培养箱中继续培养72h～144h后，加入celltiter-glo溶液，振荡混合均匀后，避光孵育10分钟，用bioteksynergyh1酶标仪进行读数。
[0297]
验数据处理方法：
[0298]
使用发光信号值计算抑制率，将浓度以及抑制率使用graphpad prism软件进行非线性回归曲线拟合，得到ic
50
值。
[0299]
实验结论：
[0300]
通过以上方案得出本发明所示的化合物在h358或mia paca-2细胞增殖活性的抑制试验中显示出约0.01nm至1000nm(ic
50
)的生物活性。
[0301]
在一些实施方案中，本发明的化合物对于h358或mia paca-2细胞增殖活性的抑制作用ic
50
小于约500nm、优选化合物小于约100nm、进一步优选小于约10nm、更优选小于约1nm、本发明所列示的化合物中最优选小于0.1nm或甚至小于约0.01nm。