一种从海带中制备海带多糖的方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种多糖的制备方法，具体涉及一种从海带中制备海带多糖的方法。
【背景技术】
[0002] 海带（LaminariaJaponicaAresch)是褐藻门海带目海带科海带属的大型海藻。 海带富含多种功能性成分，具有极高的食用和药用价值，其药用价值在《本草纲目》、《神农 本草经》和《食物本草》等传统医书中都已有记载。研宄表明海带的多种生物功能大多与海 带中的生理活性多糖有关，如免疫调节、抗肿瘤、抗凝血、降脂、降糖、抗氧化等。
[0003]目前，对于海带多糖的提取方法已有一些海带多糖提取的文献或报道，传统方法 主要为酸提取法、碱提取法、酶提取法等，这些提取方法都存在一定的缺陷：酸提可造成多 糖水解，碱提取法造成多糖生物活性降低，酶提取法耗时，工业生产需要使用的酶量大，成 本高，热水提取醇沉的方法简便，但是耗时耗能。脱除多糖中蛋白的方法有三氯乙酸沉淀法 及savage法等，利用三氯乙酸沉淀蛋白，多糖收率较高，但常伴有糖链降解；savage法采用 氯仿及戊醇等有机试剂使蛋白变性、沉淀，其处理条件温和，能较好的避免多糖降解，但处 理效率低，多糖损失严重。如中国专利CN103421126A，公开了一种制备海带多糖的方法，将 海带洗净后，晒干、粉碎、过筛后浸泡到水中，经过水提和超声波浸提，然后再醇沉，得到海 带多糖沉淀，最后将沉淀烘干，即的粗品的海带多糖，该方法得到海带多糖含量低。现有方 法均存在不足，这在一定程度上制约了海带多糖的精深加工与应用。
【发明内容】
[0004] 本发明提供了一种工艺成熟、适合生产的从海带中制备海带多糖的方法。
[0005] 本发明是通过如下技术方案实现的：
[0006] 一种从海带中制备海带多糖的方法，包括下述步骤：
[0007] 1)原料处理：将海带干制后，粉碎；
[0008] 2)高压微射流超微粉碎处理：将粉碎后的海带，按照1:8-10的重量比加入纯净 水，用高速剪切乳化机处理10_20min，转速为8000-12000r/min，然后用高压微射流超微粉 碎设备于25°C进行处理，处理压力为80-120MPa，处理次数为2-3次，得到膏状浆液；
[0009] 3)发酵：将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整PH6. 5-7. 0， 按体积百分比为10-15%接入培养成熟的乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间 3-4h;
[0010] 4)酶解：将步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，调pH值至4. 0-5.0,再加 入滤液重量1. 5-2. 5%的胃蛋白酶，搅拌均匀，37-40°C酶解l_2h，然后沸水浴10-20min，过 滤，收集滤液；
[0011] 5)脱色：向步骤4)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的 乙醇，4°C静置4h，过滤，滤液中加入滤液重量0. 5%的活性碳，80°C保温25-35min进行脱 色，抽滤，收集滤液；
[0012] 6)除蛋白：向步骤5)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95% 的乙醇，4°C静置4h，过滤，向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L，4°C静置过 夜，离心10-15min，沉淀进行冷冻干燥得成品。
[0013] 优选的，步骤1)中粉碎至40-60目。
[0014] 优选的，步骤3)中乳酸菌为保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、乳脂链球 菌、两歧双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌。
[0015] 优选的，步骤4)中胃蛋白酶的酶解时间为2h，胃蛋白酶的用量为2.0%。
[0016] 优选的，步骤5)中，向步骤4)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度 为95 %的乙醇，4°C静置4h，过滤，沉淀加入步骤4)中，再次酶解。
[0017] 优选的，步骤6)中，离心为5000r/min。
[0018] 采用本发明的得方法得到的海带多糖，具有如下性状：
[0019] 白色略带黄色的粉末，易吸湿，易溶于水。
[0020] 采用本发明的方法以海带为原料制备海带多糖，与现有技术相比，本发明的优 占.
[0021] 1、本发明通过使用高压微射流超微粉碎技术处理海带原料，利用高压微射流超微 粉碎设备产生挤压力、剪切力、冲击力，经过液-液、液-固之间的高速撞击、高剪切、空穴作 用等，使物料的分子结构发生变化。高压微射流超微粉碎设备可以做到纳米分散，细化效 果可达0.lum甚至以下，压力高达100-200MPa，得到的溶液颗粒粒径分布均匀，具有操作简 单、无污染、可在线清洁消毒、可高效率进行细胞破壁等诸多优点。
[0022] 2、现有技术制备海带多糖采用酶解，酶解只能处理蛋白，而本发明先通过乳酸菌 来处理，具有促进蛋白质的分解，在接下来的酶解步骤中，加强了酶解效果，即使采用单一 的酶，也有很好的效果。
[0023] 3、采用本发明方法得到的海带多糖，得到的产品晶形较好、色泽好，产品的含量可 高达99 %以上、收率28 %以上。
【具体实施方式】
[0024] 下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
[0025] 实施例1 :
[0026] 一种从海带中制备海带多糖的方法，包括下述步骤：
[0027] 1)原料处理：将海带干制后，粉碎；
[0028] 2)高压微射流超微粉碎处理：将粉碎后的海带，按照1:8的重量比加入纯净水，用 高速剪切乳化机处理l〇min，转速为12000r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备于25°C 进行处理，处理压力为80MPa，处理次数为3次，得到膏状浆液；
[0029] 3)发酵：将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH7.0,按体积 百分比为10%接入培养成熟的保加利亚乳杆菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间3h;
[0030] 4)酶解：将步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，调pH值至4. 0,再加入滤 液重量2. 5 %的胃蛋白酶，搅拌均匀，37-40°C酶解2h，然后沸水浴lOmin，过滤，收集滤液；
[0031] 5)脱色：向步骤4)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的 乙醇，4°C静置4h，过滤，滤液中加入滤液重量0. 5%的活性碳，80°C保温35min进行脱色，抽 滤，收集滤液；
[0032] 6)除蛋白：向步骤5)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95% 的乙醇，4°C静置4h，过滤，向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L，4°C静置过 夜，离心lOmin，沉淀进行冷冻干燥得成品。
[0033] 实施例2 :
[0034] 一种从海带中制备海带多糖的方法，包括下述步骤：
[0035] 1)原料处理：将海带干制后，粉碎；
[0036] 2)高压微射流超微粉碎处理：将粉碎后的海带，按照1:10的重量比加入纯净水， 用高速剪切乳化机处理15min，转速为10000r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备于 25°C进行处理，处理压力为lOOMPa，处理次数为2次，得到膏状浆液；
[0037] 3)发酵：将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH6. 5,按体 积百分比为12%接入培养成熟的嗜酸乳杆菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间4h;
[0038] 4)酶解：将步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，调pH值至4. 5,再加入滤 液重量2.0%的胃蛋白酶，搅拌均匀，37-40°C酶解lh，然后沸水浴15min，过滤，收集滤液；
[0039] 5)脱色：向步骤4)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的 乙醇，4°C静置4h，过滤，滤液中加入滤液重量0. 5%的活性碳，80°C保温25min进行脱色，抽 滤，收集滤液；
[0040] 6)除蛋白：向步骤5)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95% 的乙醇，4°C静置4h，过滤，向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L，4°C静置过 夜，离心12min，沉淀进行冷冻干燥得成品。
[0041] 实施例3:
[0042] 一种从海带中制备海带多糖的方法，包括下述步骤：
[0043] 1)原料处理：将海带干制后，粉碎；
[0044] 2)高压微射流超微粉碎处理：将粉碎后的海带，按照1:8的重量比加入纯净水，用 高速剪切乳化机处理20min，转速为8000r/min，然后用高压微射流超微粉碎设备于25°C进 行处理，处理压力为120MPa，处理次数为3次，得到膏状浆液；
[0045] 3)发酵：将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH7.0,按体 积百分比为15%接入培养成熟的婴儿双歧杆菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间3h;
[0046] 4)酶解：将步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，调pH值至5. 0,再加入滤 液重量2. 5 %的胃蛋白酶，搅拌均匀，37-40°C酶解2h，然后沸水浴20min，过滤，收集滤液；
[0047] 5)脱色：向步骤4)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的 乙醇，4°C静置4h，过滤，滤液中加入滤液重量0. 5%的活性碳，80°C保温30min进行脱色，抽 滤，收集滤液；
[0048] 6)除蛋白：向步骤5)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95% 的乙醇，4°C静置4h，过滤，向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L，4°C静置过 夜，离心15min，沉淀进行冷冻干燥得成品。
[0049]结果：
【主权项】
1. 一种从海带中制备海带多糖的方法，其特征在于，包括下述步骤： 1) 原料处理：将海带干制后，粉碎； 2) 高压微射流超微粉碎处理：将粉碎后的海带，按照1:8-10的重量比加入纯净水，用 高速剪切乳化机处理10-20min，转速为8000-1200()r/min，然后用高压微射流超微粉碎设 备于25°C进行处理，处理压力为80-120MPa，处理次数为2-3次，得到膏状浆液； 3) 发酵：将步骤2)得到的膏状浆液经过超高温瞬时灭菌，然后调整pH6. 5-7. 0,按 体积百分比为10-15%接入培养成熟的乳酸菌液体菌种，放入发酵罐中发酵，发酵温度在 35-37°C，发酵时间 3-4h; 4) 酶解：将步骤3)得到的发酵液经过超高温瞬时灭菌，调pH值至4. 0-5. 0,再加入滤 液重量1. 5-2. 5%的胃蛋白酶，搅拌均匀，37-40°C酶解l_2h，然后沸水浴10-20min，过滤， 收集滤液； 5) 脱色：向步骤4)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙醇， 4°C静置4h，过滤，滤液中加入滤液重量0. 5%的活性碳，80°C保温25-35min进行脱色，抽 滤，收集滤液； 6) 除蛋白：向步骤5)得到的滤液中加入相当于滤液重量2倍的质量浓度为95%的乙 醇，4°C静置4h，过滤，向滤液中缓缓加入醋酸钾稀溶液至终浓度2mol/L，4°C静置过夜，离 心10-15min，沉淀进行冷冻干燥得成品。
2. 根据权利要求1所述的一种从海带中制备海带多糖的方法，其特征在于：步骤3)中 乳酸菌为保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、乳脂链球菌、两歧双歧杆菌、婴儿双歧 杆菌、长双歧杆菌。
【专利摘要】本发明公开了一种从海带中制备海带多糖的方法，包括下述步骤:原料处理、高压微射流超微粉碎处理、发酵、酶解、脱色、除蛋白、干燥即得成品。相比现有的三氯乙酸沉淀法及savage法等，海带多糖的收率高、含量高。
【IPC分类】C08B37-00
【公开号】CN104710541
【申请号】CN201510145871
【发明人】归三岷
【申请人】广西还珠海洋生物科技有限公司
【公开日】2015年6月17日
【申请日】2015年3月31日