(3)微波提取:开启微波装置，调整微波功率在600W，微波辐射提取5min，过滤得香菇多糖提取液；
(4)脱色过程:采用粒径为40目的DA201-C大孔树脂对香菇多糖提取液进行脱色纯化，利用DA201-C大孔树脂在pH值4?6，温度40°C，流速3BV/h的工艺条件下，进行香菇多糖提取液的脱色处理；
(5)分级纯化:将脱色后的香菇多糖提取液放入陶瓷膜超滤装置，进行分级纯化；先进行微滤去除超大分子及颗粒物，然后选定透过膜分子量进行超滤，得到不同分分子量区间的纯化香菇多糖，并对提取液起到一定的浓缩作用；
(6)浓缩、醇沉过程:利用旋转蒸发仪将香菇多糖提取液进行浓缩到一定比例，往浓缩液中加入4倍体积的95%乙醇使香菇多糖浓缩液沉淀出香菇多糖；
(7)干燥过程:采用冷冻干燥方法使香菇多糖干燥；
(8)检测和结构分析:通过分光光度计和高效液相色谱仪进行多糖含量检测，并通过柱前衍生对香菇多糖的单糖组成进行分析。得香菇多糖产品的含量为91%，香菇多糖提取得率为 9.12%ο
[0028]实施例3
香菇粉状物粒径对提取提取工艺的影响
中药原材料颗粒的粗细对提取率会产生影响，粒径越细，比表面积越大，与溶剂的接触面越大，提取速率更高。但颗粒越细，溶液粘度越大，造成提取溶液与原材料的过滤分离越困难，因此颗粒大小要适中。考察了香菇粉状物粒径从0.20?0.35mm对多糖提取得率的影响，结果表明，当粒径为0.25mm时，其综合效果最为合适。
[0029]实施例4
料液比对提取提取工艺的影响
考察了不同料液比(1:15?25)对提取提取工艺的影响，结果发现，随着溶剂量的增大，多糖的提取得率也相应提高，这是因为溶剂量大，溶液中多糖浓度低，有利于多糖的传质，但溶剂量过大，后续浓缩步骤耗能增多，时间增长，料液比较低时，提取液粘度较大，造成过滤困难。结果表明，当料液比为1:22时，其综合效果最为合适。
[0030]实施例5 酶制剂用量对提取提取工艺的影响
酶的浓度要控制一定范围，过大的酶浓度会产生竞争性的抑制反应。在50°C，pH 5.0，酶解60min条件下，考察了中性蛋白酶酶解过程中酶用量对多糖提取得率及蛋白质含量的影响，以确定最佳的酶用量，结果显示，提取介质中中性蛋白酶用量增加到1.0%后，再增加酶用量，多糖提取得率基本不再增加，而蛋白质的含量随着酶用量的增加，蛋白质含量降低，这说明中性蛋白酶能降解香菇中的蛋白质。在酶用量大于1.0%后，基本维持在一个较低水平，因此选择中性蛋白酶用量为1.0%。
[0031]实施例6
温度对提取提取工艺的影响
温度提高，有利于加快分子的扩散速度，同时增大溶质在溶剂中的溶解度，并降低溶剂的粘度，往往能显著提高溶质的提取得率，但多糖是热敏感的物质，这要考虑高温对多糖的破坏作用，因此温度的选择是一个非常重要的因素。
[0032]在料液质量比为1:22，pH值5.0，酶解时间60min，酶用量为1.0%条件下，考察了从40?60°C不同温度下，酶解温度对香菇多糖及蛋白质提取得率的影响，结果显示，酶解温度为50°C时，香菇多糖提取得率最高，蛋白质提取得率最低。因为蛋白酶的酶解反应也是一种化学反应，依然存在活化能，所以在一定的温度范围内，温度对蛋白酶酶催化的影响也符合一般的化学反应规律，即蛋白酶分子的动能随着温度的增加而增加，从而加速反应速度；另一方面由于蛋白酶是一种蛋白质，在受热的条件下还会发生变性反应，温度对蛋白酶就存在着激活与失活两方面的作用。酶反应的最适温度就是这两种过程平衡的结果。
[0033]实施例7
酶解时间对提取提取工艺的影响
在50°C，pH值为5.0时，酶用量为1.0 %时，酶解不同的时间(50?70min)，结果显示，当酶解时间超过60min后，酶解基本完全，再延长时间，香菇多糖提取得率提高缓慢。
[0034]实施例8
微波功率对多糖得率的影响
考察了从500?700W不同功率下，微波功率对香菇多糖提取得率的影响，结果表明微波功率对多糖提取得率有一定的影响，随着微波强度的增大，多糖提取得率也增大，这是因为微波强度越大，微波穿透介质进入原材料内部的能力越强，产生的内加热温度越高，细胞越易破裂，多糖就易溶出。但当功率超过600W后，多糖提取得率变化趋于缓慢。
[0035]实施例9
微波提取时间对多糖得率的影响
改变微波提取时间，考察提取时间(3?7min)对多糖提取得率的影响，结果表明，多糖提取得率随提取时间的延长而增加，但当时间增大到5min后，多糖提取得率反而略有下降。这是因为提取时间越长，溶液温度越高，多糖有可能在高温下，分子发生降解或结构遭到破坏的缘故，因此微波提取时间不能太长。
【主权项】
1.一种微波辅助提取香菇多糖的设备，其特征在于:所述设备包括顺次设置的提取装置、脱色装置、纯化装置、浓缩装置，所述提取装置包括提取反应器，所述提取反应器上端设有酶制剂加入口，所述提取反应器上安装有微波发生器；所述脱色装置内填充有大孔树脂，所述大孔树脂粒径为30?50目；所述提取装置、脱色装置、纯化装置、浓缩装置顺次通过管道连通；所述提取装置与脱色装置之间设有过滤装置。
2.根据权利要求1所述的微波辅助提取香菇多糖的设备，其特征在于:所述设备还包括清洗装置、干燥装置和检测装置，所述清洗装置设置在提取装置之前，干燥装置设置在浓缩装置之后，所述检测装置设置在干燥装置之后，所述检测装置包括分光光度计和高效液相色谱仪。
3.根据权利要求1或2所述的微波辅助提取香菇多糖的设备，其特征在于:所述纯化装置为陶瓷膜超滤装置，所述浓缩装置包括旋转蒸发装置，所述干燥装置为冷冻干燥机。
4.一种微波辅助提取香菇多糖的工艺，其特征在于包括下述步骤: (1)待提取物预处理:将香菇洗净晒干，粉碎成粒径为0.20?0.35mm的粉状物； (2)酶制剂预处理:将待提取物置于提取反应器中，向提取反应器中加入一定体积水和酶制剂，调节PH值，对香菇提取液酶解一定时间； (3)微波提取:开启微波装置，微波辐射提取一定时间后，过滤得香菇多糖提取液； (4)脱色过程:采用大孔树脂对香菇多糖提取液进行脱色纯化； (5)分级纯化:将脱色后的香菇多糖提取液放入陶瓷膜超滤装置，进行分级纯化； (6)浓缩、醇沉过程:利用旋转蒸发装置将香菇多糖提取液进行浓缩到一定比例，往浓缩液中加入一定体积的95%乙醇使香菇多糖浓缩液沉淀出香菇多糖； (7)干燥过程:采用冷冻干燥方法使香菇多糖干燥。
5.根据权利要求4所述的微波辅助提取香菇多糖的工艺，其特征在于:步骤(2)中，提取反应器中各项条件分别控制为:料液质量比为1:15?25，酶制剂用量0.5?1.5%，酶解温度为40?60°C，提取时间为50?70min，pH 4.0?6.0。
6.根据权利要求5所述的微波辅助提取香菇多糖的工艺，其特征在于:所述酶制剂为果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶或酸性蛋白酶中的任一种。
7.根据权利要求4所述的微波辅助提取香菇多糖的工艺，其特征在于:步骤(3)中，微波功率为500?700W，微波辐射提取3?7min。
8.根据权利要求4所述的微波辅助提取香菇多糖的工艺，其特征在于:步骤(4)中，大孔树脂为DA201-C大孔树脂，脱色条件控制为:pH值4?6，温度30?50°C，流速2?4BV/h0
9.根据权利要求4所述的微波辅助提取香菇多糖的工艺，其特征在于:步骤(6)中，沉降用的95%乙醇的体积为浓缩液的3?6倍。
10.根据权利要求4所述的微波辅助提取香菇多糖的工艺，其特征在于:包括下述步骤: (1)待提取物预处理:将香菇洗净晒干，粉碎成粒径为0.25mm的粉状物； (2)酶制剂预处理:将待提取物置于提取反应器中，向提取反应器中加入一定体积水和中性蛋白酶，调节PH值，对香菇提取液酶解一定时间；其中，料液质量比为1:22，中性蛋白酶用量1.0%，酶解温度为500C，提取时间为60min，pH 5.0 ； (3)微波提取:开启微波装置，调整微波功率在600W，微波辐射提取5min，过滤得香菇多糖提取液； (4)脱色过程:采用粒径为40目的DA201-C大孔树脂对香菇多糖提取液进行脱色纯化，利用DA201-C大孔树脂在pH值4?6，温度40°C，流速3BV/h的工艺条件下，进行香菇多糖提取液的脱色处理； (5)分级纯化:将脱色后的香菇多糖提取液放入陶瓷膜超滤装置，进行分级纯化；先进行微滤，然后选定透过膜分子量进行超滤，得到不同分分子量区间的纯化香菇多糖； (6)浓缩、醇沉过程:利用旋转蒸发装置将香菇多糖提取液进行浓缩到一定比例，往浓缩液中加入4倍体积的95%乙醇使香菇多糖浓缩液沉淀出香菇多糖； (7)干燥过程:采用冷冻干燥方法使香菇多糖干燥； (8)检测和结构分析:通过分光光度计和高效液相色谱仪进行多糖含量检测，并通过柱前衍生对香菇多糖的单糖组成进行分析。
【专利摘要】本发明涉及一种微波辅助提取香菇多糖的设备及其工艺，所述设备包括顺次设置的提取装置、脱色装置、纯化装置、浓缩装置，所述提取装置包括提取反应器，所述提取反应器上端设有酶制剂加入口，所述提取反应器上安装有微波发生器；所述脱色装置内填充有大孔树脂，所述大孔树脂粒径为30～50目；所述提取装置、脱色装置、纯化装置、浓缩装置顺次通过管道连通；所述提取装置与脱色装置之间设有过滤装置。本发明将酶提取与微波辅助提取相结合，不仅易于工业化生产，具有流程短、工艺简单经济等优点，而且通过该工艺制备得到的香菇多糖具有提取率高、纯度高等特点。同时保证了香菇多糖的生物活性不被破坏。
【IPC分类】C08B37-00
【公开号】CN104861079
【申请号】CN201510203796
【发明人】刘振锋, 戴圣佳, 张立, 王廷山, 关荣发, 叶兴乾
【申请人】浙江山狼谷旅游产业发展有限公司
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2015年4月27日