一种副干酪乳杆菌及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及微生物领域，更具体的说是涉及一种副干酪乳杆菌及其应用。
【背景技术】
[0002] 目前，免疫症状诸如过敏、气喘、慢性鼻炎、异位性皮肤炎（atopic dermatitis)或 是发炎症状在发展中国家或发达国家有越来越普及的趋势。最常使用的治疗方法是口服或 涂抹类固醇，然而其缺点是容易产生副作用例如使病人变胖或增加感染率，甚至有致死的 风险。许多研宄团队正在开发更安全的方法，尽可能在减少副作用的前提下，舒缓或是预防 过敏和免疫疾病。
[0003] 目前普遍已知乳酸杆菌（Lactobacillus spp.)是一群生活在机体内益于宿主健 康的微生物，它维护人体健康和调节免疫功能的作用已被广泛认可。乳酸杆菌属的特定菌 株已被发现能够定殖于肠道粘膜，并协助维持人类和动物的健康，例如抗发炎活性和免疫 调节活性。热灭活的干酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei)代田株（strain Shirota) (LcS) 刺激IL-12的分泌，使免疫反应朝向Thl为主状态，藉以抑制IgE之产生。将热致死嗜酸乳 杆菌（Lactobacillus acidophilus)L-55 口服给予经卵清蛋白（简称0VA)致敏的BALB/c 小鼠，结果显示可抑制由OVA诱导之鼻部症状，如打喷嚏及揉鼻。
[0004] 目前的健康产业努力尝试开发新颖可食用且具有特殊功效的乳酸菌种。乳酸杆菌 已有很长的食用历史，属于公认安全（Generally Regarded as Safe, G.R.A.S)的菌属，在 适当条件培养下通常能产生良好的风味，有些菌株甚至能表现出绝佳的产酸能力以及优异 的免疫调节功效，大幅提升产品价值。如干酪乳酸杆菌代田株，其是著名乳酸菌饮料养乐多 中采用的一种乳酸杆菌，虽然其具有一定的产酸能力、免疫调节功能和抗发炎活性等，但是 由于不同菌株的特性与能力，乳酸杆菌的效果是可变且不可预期的。因此，仍有必要发展在 产酸能力、免疫调节功能和抗发炎活性等方面更加优异的乳酸菌。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种副干酪乳杆菌，使得所述副干酪乳杆菌具 有更加优异的产酸能力。
[0006] 本发明的另一个目的在于提供一种副干酪乳杆菌，使得所述副干酪乳杆菌具有更 加优异的消化道存活能力，即提高其抗酸和抗胆盐能力。
[0007] 本发明的另一个目的在于提供一种副干酪乳杆菌，使得所述副干酪乳杆菌具有更 加优异的分泌胞外多糖的能力。
[0008] 本发明的另一个目的在于提供一种副干酪乳杆菌，使得所述副干酪乳杆菌具有更 加优异的抑制过敏和调节免疫反应的能力。
[0009] 本发明的另一个目的在于提供一种副干酪乳杆菌，使得所述副干酪乳杆菌具有更 加优异的抗发炎能力。
[0010] 本发明的另一个目的在于提供所述副干酪乳杆菌在乳制品制备、保健品制备、药 物制备、食品补充剂制备、食品制备中的应用。
[0011] 为实现本发明目的，本发明提供一种分离自台湾孩童之粪便的副干酪乳杆菌，命 名为菌株为V0151。V0151以MRS培养基于37°C下培养一天后，抽取其基因组DNA，并利用 16s rDNA和pheS引物对于该基因组DNA进行PCR扩增，并利用美国国家生物技术信息中心 (National Center for Biotechnology Information,简称NCBI)数据库进行菌株比对，经 过比对鉴定为副干酪乳杆菌副干酪亚种（Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)， V0151 的 pheS 序列如 SEQ ID NO: 1 所示。
[0012] V0151于2013年6月27日寄存德国微生物及细胞保存中心（German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)，寄存编号为 DSM27448。于 2014 年 03 月 07 日寄 存中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院 3号，中国科学院微生物研宄所，保藏编号为CGMCC No. 8903。
[0013] 作为优选，所述副干酪乳杆菌V0151经热去活化，为灭活菌。
[0014] 相比现有产品养乐多中的干酪乳酸杆菌代田株，本发明所述副干酪乳杆菌V0151 具有更加优异的产酸能力、抗酸和胆盐能力、调节免疫反应能留、抑制过敏和发炎症状的能 力。基于此，本发明提供了所述副干酪乳杆菌V0151在制备食品、保健品、药品、食品补充剂 中的应用，特别是在制备具有抑制过敏、调节免疫反应和抗发炎功效的食品、保健品、药品、 食品补充剂中。其中，所述食品优选为乳制品，更优选为功能性酸奶和乳酸菌饮料。
[0015] 作为优选，所述免疫反应为与 IFN-γ、IL-I β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12、 IL-13、TNF- α、一氧化氮合成酶、环氧合酶-2及其组合相关的免疫反应。
[0016] 作为优选，所述过敏为与IL-4、IL-5、IL-12、IL-13及其组合相关的过敏。进一步 优选地，所述过敏为可以引发如下炎症反应的过敏：
[0017] 气管反应过度、气管反应发炎、异位性皮肤炎、过敏结膜炎、过敏性鼻炎、过敏性肺 炎、外因性过敏性肺泡炎、荨麻瘆、血管性水肿、花粉热、食物过敏或气喘。
[0018] 作为优选，所述发炎为与IFN-γ、IL-I β、IL-6、IL-KKTNF-α、一氧化氮合成酶、 环氧合酶-2及其组合相关的发炎。进一步优选地，所述发炎为气管反应过度、气管反应发 炎、异位性皮肤炎、过敏结膜炎、过敏性鼻炎、过敏性肺炎、外因性过敏性肺泡炎、荨麻瘆、血 管性水肿、花粉热、食物过敏或气喘。
[0019] 根据上述副干酪乳杆菌V0151的应用，本发明提供一种食品，以保藏编号为CGMCC No. 8903的菌株进行制备。进一步优选地、所述食品为乳制品；更优选地，所述乳制品为功 能性酸奶和乳酸菌饮料。
[0020] 此外，本发明还提供一种乳酸菌组合物，包含保藏编号为CGMCC No. 8903的副干酪 乳杆菌和可接受的辅料。
[0021] 作为优选，所述辅料选自乳糖、干燥淀粉、淀粉糊、糊精、环糊精、羧甲基淀粉钠、羧 基淀粉丙酸酯、微晶性纤维素、羧甲基纤维素、麦芽糊精、硬脂酸镁及其类似物。所述类似物 指代的是尚未在本发明中一一具体列明的本领域中常用的辅料。本发明所述辅料可以为一 种，也可以为多种，这由本领域技术人员根据实际制备情况而调节和选择。
[0022] 作为优选，所述乳酸菌组合物还包括益生菌、益生元、食品添加剂中的一种或两 种，由此配合本发明所述副干酪乳杆菌V0151优异的能力来达到最佳效果。其中，所述益生 元选自聚葡萄糖、低聚木糖、菊粉、低聚半乳糖、低聚果糖及其类似物，所述类似物指代的是 尚未在本发明中一一具体列明的本领域中常用的益生元，所述益生元可以为一种，也可以 为多种，这由本领域技术人员根据实际制备情况而调节和选择。
[0023] 作为优选，所述食品添加剂选自果粉、木糖醇、柠檬酸、三氯蔗糖、食用香精及其类 似物，所述类似物指代的是尚未在本发明中一一具体列明的本领域中常用的食品添加剂， 所述食品添加剂可以为一种，也可以为多种，这由本领域技术人员根据实际制备情况而调 节和选择。
[0024] 本发明所述乳酸菌组合物可以制备成任意一剂型，作为优选，其为口服制剂。进 一步优选地，所述口服制剂为溶液、悬浮液、乳剂、粉剂、锭剂、丸剂、糖浆、片剂、口嚼胶或胶 裳。
[0025] 由以上技术方案可知，本发明所述菌株增殖快速且产酸能力优异，具有分泌胞外 多醣以及对抗胆盐和胃酸侵袭的能力，更可调节免疫反应、抑制过敏和发炎现象，十分适合 用于食品、保健品、药品、食品补充剂等广品的制备。
[0026] 生物保藏说明
[0027] 分类命名：副干酪乳杆菌，Lactobacillus paracasei于2014年3月7日保藏在 中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3 号，中国科学院微生物研宄所，保藏编号为CGMCC No. 8903。
【附图说明】
[0028] 图1所示为本发明副干酪乳杆菌副干酪亚种V0151与养乐多代田菌生长过程中环 境酸碱值的变化折线图；
[0029] 图2所示为本发明副干酪乳杆菌副干酪亚种V0151与养乐多代田菌的产酸表现折 线图；