蛋白激酶抑制剂的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及作为蛋白激酶抑制剂的化合物，其制备方法以及其治疗应用。
【背景技术】
[0002] 蛋白激酶（PK)的功能障碍/反常是许多病理学的原因，包括肿瘤、免疫、神经、代 谢和感染疾病。在开发用于治疗这些病症的小分子以及生物激酶抑制剂方面，引起相当大 的注意。
[0003] 在肿瘤生成期间，许多PK特别地会反常。因此蛋白激酶是抗癌药物的具吸引力的 靶点，所述抗癌药物包括小分子抑制剂，其通常作用以阻断ATP或基质结合至酪氨酸激酶 的催化功能区；以及单克隆抗体，其可特异性靶向受体酪氨酸激酶（RTK)及其配体。在实体 恶性肿瘤中，单一激酶异常为疾病的唯一的原因并不常见，并且肿瘤仅依靠一种不正常活 化的信号传递通路也是不太可能的。相反，多种信号传递通路紊乱。此外，即使单一分子异 常，也可能具有多种的下游作用。使用同时靶向数个信号传递通路的单一分子的多靶向治 疗法（MTKI="多靶向激酶抑制剂"），比单一靶向治疗法更有效。单一靶向治疗法已显示 出仅对一些适应症有作用，而大部分的实体瘤出现多种信号传递通路的反常。例如，血管内 皮生长因子受体（VEGFR)抑制剂和血小板衍生生长因子受体（PDGFR)抑制剂的组合产生累 积的抗肿瘤功效（Potapova等人，MolCancerTher5, 1280 - 1289, 2006) 〇
[0004] 肿瘤不仅由肿瘤细胞构成。一个重要的部分是由这些细胞产生的结缔组织或间 质（由间质细胞以及胞外基质构成）组成。间质细胞的例子是纤维母细胞、内皮细胞和巨 噬细胞。间质细胞在癌症发生中也起到重要作用，其中其特征在于上调或诱导生长因子及 其受体、黏附分子、细胞因子、趋化因子和蛋白水解酶（Hofmeister等人，Immunotherapy 57, 1 - 17, 2007;Raman等人，CancerLetters256, 137 - 165, 2007;Fox等人，TheLancet Oncology2,278 - 289, 2001)〇
[0005] 内皮和肿瘤细胞上与酪氨酸激酶相关的受体VEGFR，因参与血管生成作用，所以在 促进癌症方面起到主要作用（C6be-Suarez等人，CellMolLifeSci63,601 - 615,2006)。 此外，由癌细胞分泌的生长因子TGF-P、TOGF以及FGF2,将正常的纤维母细胞转化成 肿瘤相关的纤维母细胞，这使其受体成为激酶抑制剂抑制作用的合适的祀点（Raman等 人，2007)。
[0006] 并且，越来越多的证据提出EGF受体（EGFR)与HER2通路和VEGF依赖性血管生成 之间的关联，并且临床前研究显示，EGFR信号传导的直接和间接血管生成作用（Pennell和 Lynch,TheOncologist14,399 - 411,2009)。已提出上调肿瘤促血管生成因子和EGFR非 依赖性肿瘤诱导的血管生成作用，为肿瘤细胞能克服EGFR抑制作用的可能的机制。由EGFR 的活化调节的主要信号传递通路是PI3K、MAPK和Stat通路，其会增加细胞增殖、血管生成、 抑制细胞凋亡以及细胞周期的进行。在大多数实体瘤如肺癌、乳腺癌、结直肠癌以及头颈癌 中，EGFR是过度表达的（Cook和Figg，CACancerJClin60,222 - 2432010)。此外，已显 示出较高的EGFR表达与转移、降低的存活率和较差的预后有关。
[0007]c-Src，一种膜相关的非受体酪氨酸激酶，参与许多重要的信号传递通路，且在细 胞功能上具有多效作用。c-Src整合和调节来自多重跨膜受体相关的酪氨酸激酶的信号传 导，如EGFR、H)GFR、IGF1R、VEGFR、HER2。以及，这些作用调控细胞的存活、增殖、分化、血管 生成、细胞运动性、黏附性以及侵入性（Brunton和Frame,CurrOpinPharmacol8,427 -432,2008)。在许多类型的癌症中，包括结直肠癌、胃肠癌（肝、胰、胃与食道）、乳腺癌、卵 巢癌和肺癌中观察到蛋白c-Src的过度表达以及其活性增加（Yeatman,NatRevCancer 4, 470 - 480, 2004)〇
[0008] 在癌症中，EGFR或KRAS的活化导致Ras依赖性Raf活化水平的大幅提高。因此， 预期消除Raf的功能将有效治疗许多由EGFR和KRAS病变引发的癌症（Khazak等人，Expert Opin.Ther.Targets11，1587 - 1609, 2007)。在肿瘤中，除了Raf信号传导的活化之外，许 多研究也暗示，Ras-Raf-MAPK信号传递通路的活化，为血管发生和血管生成中的关键步骤。 这种活化作用由生长因子受体如VEGFR2、FGFR2诱导，因此抑制Raf的活化作用代表用于调 控肿瘤血管生成和血管新生的合理靶点。
[0009] 虽然VEGFR、roGFR、EGFR、c-Src和Raf是肿瘤细胞和肿瘤间质细胞上的重要靶点， 但其它激酶如FGFR仅作用在间质细胞中，而其它致癌基因常仅作用在肿瘤细胞中。
[0010] 蛋白激酶是多样信号传递通路（包括免疫细胞）的基本组分。其基本功能使得其 为有效的治疗靶点。起初预期的是，高度选择性可能是关键的；然而，随着时间的推移，开始 使用"多激酶"抑制剂。此外，使用激酶抑制剂的疾病的范围，也扩大至不仅包括恶性肿瘤， 还包括免疫调控疾病/炎性疾病。起初是由Src家族蛋白酪氨酸激酶调控由多链免疫识别 受体发出的信号传导的第一步。免疫功能中涉及的MTKI靶向激酶为用于自身免疫疾病， 如类风湿性关节炎、牛皮癣以及炎性肠道疾病的潜在药物（Kontzias等人，FlOOOMedicine Reports4,2012)〇
[0011] 之前提到的蛋白激酶也为许多其它生理学和病理学机制，如神经退化和神经保护 (Chico等人，NatureReviewsDrugDiscovery8, 892 - 909, 2009)、动脉硬化、骨质疏松和 骨吸收、黄斑变性、病理性纤维化、囊肿生成（人类常染色体显性多囊肾病…）的主要组分。
[0012] 在W02010/092489和相关的专利/专利申请中，我们确定了数个展现出可供这些 应用的感兴趣的特性的化合物。然而，我们发现这些化合物的一些特性可通过选择性地作 用在其结构的特定区域而得到提升。然而，在W02010/092489提出申请时，并未精确地阐述 这些结构对激酶的作用机制，因此并无法预期我们发现的，在本申请中所公开的结构的高 活性。
[0013] 本发明的主题是提供具有原始骨架的新颖的多靶点激酶抑制剂，其可用于治疗与 蛋白激酶的反常相关的病理学，包括肿瘤生成、人类免疫病症、炎性疾病、血栓疾病、神经退 行性疾病、骨病、黄斑变性、纤维化、囊肿生成。
[0014] 本发明的抑制剂可特别用于治疗许多癌症，更特别的是下列的情况：液体肿瘤，如 血液学癌症（白血病），或实体瘤，包括但不限于，鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、 胃癌、胰腺癌、胶质细胞肿瘤如胶质母细胞瘤和神经纤维瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、 乳腺癌、黑色素瘤、结直肠癌、子宫内膜癌、唾腺癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肉 瘤、星状细胞瘤以及各种类型的过度增生性疾病。
【发明内容】
[0015] 发明简述
[0016] 本发明涉及下式（I)的化合物和/或其药学上可接受的加成盐、溶剂化物、对映异 构体、非对映异构体，及其混合物：
[0017]
[0018] 其特征在=」，
[0019] _R1 是C「C6烷基、羟基、或NR4R5，
[0020] -R4和R5独立地为氢原子、和/或CfC6烷基，
[0021] -X是CH2、C⑶或C(0)，
[0022] -R2是氢原子、CfQ；烷基或卤素原子，
[0023] -Y选自HNC(0)、HNC(S)、HNS02、HNC(0)CH2、HNC(S)CH2、HNC(0)NH、HNC(S)NH、 CH2NHC(0)、C(0)NH和C(0)NHCH2、CH2NHC(S)，优选HNC(0)，
[0024] -R3 选自：
[0025] -芳基，优选被下列单或多取代的苯基：
[0026] -羟基，
[0027] -卤素原子，
[0028] -CfQ烷基胺，优选二级C^(^烷基胺，
[0029] _(：「(：6烷氧基，
[0030] -被杂芳基如噻唑或咪唑取代的胺，所述杂芳基任选被甲基单取代，
[0031] -CfQ；三氟烷氧基，优选三氟甲氧基，
[0032] -CfQ烷基，优选甲基或异丙基，
[0033] -(^-(：6三氟烷基，优选三氟甲基，
[0034] -杂芳基，如噻唑或咪唑，其任选被甲基单取代，
[0035] -脂肪杂环，其任选被甲基、羟基、胺基团、_NHCH3、或_N(CH3)2取
[0036] 代，
[0037] _被杂环取代的CfQ烷基，其中所述杂环任选被甲基、羟基、胺基团、
[0038] -NHCH3、或-N(CH3) 2取代，或者
[0039] -片段：
[0040]
[0041] _杂芳基，其优选自任选被C「C6烷基、C「(：6三氟烷基、卤素原子和/或羟基取代 的二氢苯并呋喃、吲哚、苯并二氧戊环、苯并三唑、吡啶，
[0042] _非芳香族单取代的环状基团，优选为环状。烷基，其被羟基、卤素、C烷基 胺、Ci-Q烷氧基、C 三氟烷氧基、C 烷基、C 三氟烷基单取代。
[0043] 本发明的另一方面涉及一种制备本文所定义的化合物的方法，其特征在于，其包 含至少一个下列步骤：
[0044] a)在X是C0的情况下，利用优选被~02基团取代的芳香族羧酸的肽偶联技术，优 选通过使用碳化二亚胺或脲阳离子偶联剂，形成NH-C0键；或者在X是012的情况下，通过 还原胺化反应，使用优选被N02基团取代的芳香族醛，优选在硼酸酐的存在下，形成NH-CH2 键，
[0045] b)优选通过氢化反应，如，例如在钯碳存在下的催化剂氢化反应，在氢气氛下，将 勵2基团任选还原成nh2。
[0046] 本发明的另一方面涉及一种制备本文所定义的化合物的方法，其特征在于，所述 方法优选在如上方法的步骤（a)和/或（b)之后包含下列步骤之一：
[0047] Cl)在Y是HNC(0)NH的情况下，通过将步骤b)之后获得的化合物与异氰酸酯反应 形成脲，
[0048] c2)在Y是HNC⑶NH的情况下，通过将步骤b)之后获得的化合物与异硫氰酸酯反 应形成硫脲，
[0049] c3)在Y是圆502的情况下，通过将步骤b)之后获得的化合物与氨基磺酰基卤素 或磺酰卤素，如磺酰氯或氨基磺酰氯反应，形成磺酰胺，
[0050] c4)在Y是HNC(O)的情况下，优选通过将步骤b)之后获得的化合物与活化的羧酸 如酰氯反应形成酰胺，或
[0051] c5)在Y是HNC⑶的情况下，特别地通过将步骤c4)之后获得的化合物与劳氏试 剂反应形成硫酰胺，和
[0052] d)任选皂化所获得的产物，优选通过使用K0H。
[0053] 本发明的另一方面涉及一种制备本文所定义的化合物的方法，其特征在于，所述 方法优选在如上方法的步骤（a)和/或（b)之后包含下列步骤之一：
[0054] Cl)在Y是HNC(0)NH的情况下，通过将步骤b)之后获得的化合物与异氰酸酯反应 形成脲，
[0055] c2)在Y是HNC⑶NH的情况下，通过将步骤b)之后获得的化合物与异硫氰酸酯反 应形成硫脲，
[0056] c3)在Y是圆502的情况下，通过将步骤b)之后获得的化合物与氨基磺酰基卤素 或磺酰卤素，如磺酰氯或氨基磺酰氯反应，形成磺酰胺，
[0057] c4)在Y是HNC(0)或HNC(0) 012的情况下，优选通过使用肽偶联技术将步骤b)之 后获得的化合物与活化的羧酸或酰氯反应形成酰胺，
[0058] c5)在Y是HNC⑶或HNC⑶012的情况下，特别地通过将步骤c4)之后获得的化合 物与劳氏试剂反应形成硫酰胺，
[0059] dl)任选皂化所获得的产物，优选通过使用K0H，或
[0060] d2)任选皂化从步骤cl)至c5)获得的产物，然后与各种烷基胺进行欧联反应。
[0061] 本发明还涉及一种本文定义的化合物，其特征在于，其是药物。
[0062] 本发明还涉及一种本文所定义的化合物，其用作如下列疾病中的蛋白激酶抑制剂 的用途：肿瘤发生、人类免疫疾病、炎性疾病、血栓疾病、神经退行性疾病、骨病、黄斑变性、 纤维化、囊肿生成、过度增生性疾病、癌症，更特别是液体肿瘤如血液学癌症，如白血病、慢 性或急性骨髓增生性疾病；或实体瘤，如鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、胃肠癌、 胰腺癌、胶质细胞肿瘤如胶质母细胞瘤与神经纤维瘤、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、乳腺 癌、黑色素瘤、结直肠癌、子宫内膜癌、唾腺癌、肾肿瘤、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、 肉瘤和/或星状细胞瘤。
[0063] 本发明还涉及一种药物组合物，其特征在于，其含有本文所定义的化合物作为有 效成分，以及药学上可接受的赋形剂。
[0064]定义
[0065] 一般地，使用下列定义：
[0066] 本发明中的表述"肽偶联"意指能够形成酰胺-NH-C(O)-的反应。然而在该反应 中使用的技术是肽合成中常见的，即，通过活化羧酸以使胺与其反应。因此，虽然在本发明 中没有肽形成，但偶联反应是从肽合成衍生而来，且直接应用于本发明的主题。
[0067] 所述偶联反应可在冰冷却的温度或室温下，优选在酰化催化剂如二甲氨基吡啶 (DMAP)、吡啶、N-羟苯并三唑（HOBt)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑（HOAt)、N-羟基丁二烯亚胺 等的存在下，在溶剂如乙醚、丙酮、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、DMF、四氢呋喃（THF)、乙腈、二 甲基亚砜（DMS0)、N-甲基吡咯烷酮（NMP)中，使用缩合试剂或任何其它偶联试剂来进行，所 述缩合试剂如N，N'_二环己基碳化二亚胺（DCC)或1-乙基-3-(3'_二甲氨基丙基）碳化二 亚胺盐酸盐（EDC)，即水溶性碳化二亚胺、0- (1H-苯并三唑-1-基）-N，N，N'，N' -四甲基脲 四氟硼酸盐（TBTU)、苯并三唑-1-基-氧三（二甲氨基）膦六氟磷酸盐（B0P)、0-(7-氮杂 苯并三唑-1-基）-1，2, 3-四甲基脲六氟磷酸盐（HATU)、0-苯并三唑-1-基-N，N，N'，N' -四 甲基脲六氟磷酸盐（HBTU)、0-苯并三唑-1-基-四甲基四氟硼酸盐（TBTU)、N-羟基-5-降 冰片稀_2, 3-二碳化二亚胺。
[0068]术语 "C(0) " 等同于"C= 0"。
[0069] 术语"C⑶"等同于"C=S"。
[0070] 本发明中的表述"烷基"，如没有特别指出，意指具有1至6个碳原子的直链或支链 饱和脂肪族基团。本发明的范围涵盖的烷基的例子为甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、异丙 基等。
[0071] 本发明中的表述"环烷基"意指具有3至10个碳原子的环烷基。本发明的范围涵 盖的烷基的例子为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、甲环己基等。
[0072] 本发明中的表述"芳基"意指包含2至10个碳原子的环状（单-或多环）芳香族 基团。本发明的范围涵盖的芳基的例子为苯基、萘基等。
[0073] 本发明中的表述"杂芳基"意指包含2至10个碳原子以及1至3个杂原子（如氮、 氧或硫）的环状（单-或多环）芳香族基团。本发明的范围涵盖的杂芳基的例子为吡啶、 噻吩、噻唑、咪唑、吡唑、吡咯、喹啉、吲哚、哒嗪、喹喔啉、二氢苯并呋喃、苯并二氧戊环、苯并 三唑，优选自二氢苯并呋喃、吲哚、苯并二氧戊环、苯并三唑、吡啶。任选地，所述杂芳基，特 别是所优选的杂芳基之一被烷基、C 氟烷基、卤素原子和/或羟基取代。
[0074] 本发明中的表述"非芳香族单取代的环状基团"意指非芳香族单取代的杂环基团。
[0075] 本发明中的表述"杂环基团"意指包含2至10个碳原子以及1至3个杂原子（如 氮、氧和硫）的环状基团。所述杂环可以是饱和的，即脂肪族的、非饱和的、或甚至是芳香族 的。本发明的范围涵盖的杂环基团的例子是哌嗪基、吗啉基（morpholyl)、四氢呋喃基、吡 啶基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、喹喔啉、二氢苯并呋喃基、吡咯基、哒嗪基、苯并咪唑基、嘧啶 基、1H-吡咯并[2,3-b]吡啶基等。
[0076] 本发明中的表述"脂肪杂环"意指包含一个或数个杂原子的脂肪环状基团，例如吗 啉、哌啶、哌嗪、吡咯烷。
[0077] 本发明中的表述"卤素原子"意指：氟、氯、溴或碘原子。
[0078] 本发明中的表述"烷氧基"意指键合至一个氧的烷基。本发明的范围涵盖的烷氧 基的例子为甲氧基、乙氧基等。
[0079] 本发明中的表述"芳氧基"意指键合至一个氧原子的芳基。本发明的范围涵盖的 芳氧基的例子为苯氧基等。
[0080] 本发明中的表述"磺酰胺基团"意指：
[0081]
[0082] 本发明中的表述"N-甲基磺酰胺基团"意指：
[0083]
[0084] 本发明中的表述"甲磺酰胺基团"意指：
[0085]
[0086] 本发明中的表述"芳烷基"意指被芳基取代的烷基：
[0087]
[0088] 本发明中的表述"(^-(：6烷基胺基团"或"C 烷基胺基团"意指被胺基团取代的 Cf06烷基：
[0089]
[0090] 本发明中的表述"二级CrC6烷基胺基团"意指被二个Ci-Q烷基（相同或不同） 取代的胺。
[0091] 本发明中的表述"羟基"意指：0H。
[0092] 本发明中的表述"烷氧基烷基"意指烷基，其优选被烷氧基取代：
[0093]
[0094] 本发明中的表述"硫烷基"意指：
[0095]
[0096] 本发明中的表述"脲基"用作脲或硫脲的通称。
[0097] 本发明中的表述"取代苯基"意指被下列单或多取代的苯基：
[0098] -卤素原子、
[0099] -硝基-(N02)、
[0100]-氰基（CN)、
[0101] -甲基噻唑基、
[0102]
[0103] -烷氧基、
[0104] -芳氧基、
[0105] -烷基、
[0106] _磺酰胺基团、
[0107] -N-甲基磺酰胺基团、
[0108] -甲磺酰胺基团、
[0109] -杂芳基、
[0110] -羟基、
[0111] -三级胺基团、
[0112] -基团-C0NH烷基、
[0113] _ 基团-NHC0 烷基。
[0114] 本发明的术语"吡啶基"意指由吡啶衍生来的基团：
[0115]
[0116] 本发明的术语"噻吩基"意指由噻吩衍生来的基团：
[0117]
[0118] 本发明的术语"噻唑基"意指由噻唑衍生来的基团：
[0119]
[0120] 本发明的术语"咪唑基"意指由咪唑衍生来的基团：
[0121]
[0122] 本发明的术语"吡唑基"意指由吡唑衍生来的基团：
[0123]
[0124] 本发明的术语"喹喔啉"意指：
[0125]
[0126] 本发明的术语"二氢苯并呋喃基"意指由二氢苯并呋喃衍生来的基团：
[0127]
[0128] 本发明的术语"吡咯基"意指由吡咯衍生来的基团：
[0129] n
[0130] 本发明的术语"吲哚基"意指由吲哚衍生来的基团：
[0131]