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[0080]
【主权项】
1. 一种针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体A 3B5-BsAb，其特征在于，具有： 重链可变结构域，包含高变区OTR1、⑶R2、⑶R3、⑶R 4、⑶R5、⑶R6;以及 轻链可变结构域，包含高变区⑶R1'、CTR2'、⑶R3'、⑶R/、CTR 5'、⑶R6'， 其中，所述⑶Ri的氨基酸序列为：Met-Tyr-Ala-Phe-Ser ; 所述 CDR2 的氨基酸序列为：Gly-I le_I Ie-Pro-Ser-Phe-Asp-Thr-Thr-Asn-Tyr-Ala-Gl n-Lys-Phe-Gln-Cys ； 所述 CDR3 的氨基酸序列为：Ser-Val-I Ie-Thr-Asp-Leu-Asp-Thr-Val-Gly-Asn-Asp-Gl U-Ser-Gly-Asp-Ala-Ser-Tyr-Tyr-Tyr-Met-Asp-Val ； 所述⑶1?4的氨基酸序列为：Ser-Ser-Ala-Ile_Leu ; 所述 CDR5 的氨基酸序列为：Trp-I Ie-Val-Val-Gly-Ser-Gly-Asn-Ala-Ly s-Tyr-Ala-Gl n-Arg-Phe-Gln-Glu ； 所述 CDRj^tl氨基酸序列为=Arg-Gly-His-Ser-Phe-Thr-Ser-Pro-Phe-Asp-Ser ; 所述 CDR1'的氨基酸序列为：Arg-Ser-Ser-Glu-Ser-Leu-Gln-His-Ser-Asp-Gly-Thr-Tyr-Tyr-Leu-Asp ； 所述 CDR/ 的氨基酸序列为：Ser-Ala-Ser-Asn-Thr-Ala-Pro ; 所述 CDR3'的氨基酸序列为：Met-Gln-Ala-Leu-Glu-Thr-Pro-Phe-Thr ; 所述 CDR4'的氨基酸序列为：Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Val-Gly-Ser-Asn-Tyr-Leu-A Ia ； 所述⑶IV 的氨基酸序列为：Gly-Ala-Ser-Thr-Arg-Ala-Thr ; 所述⑶Rf/ 的氨基酸序列为：Gln-Lys-Tyr-Gly-Ser-Ser-Leu-Thr02. 根据权利要求1所述的针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体A3B5-BsAb,其特征在于： 其中，所述重链可变结构域的氨基酸序列如SEQ ID NO. 6所示，所述轻链可变结构域的 氨基酸序列如SEQ ID NO. 8所示。3. 根据权利要求2所述的针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体A 3B5-BsAb，其特征在于： 其中，所述双特异性抗体A3B 5-BsAb选自抗乙肝病毒表面抗原的双特异性抗体以及所 述双特异性抗体片段中的任意一种， 所述双特异性抗体片段为所述双特异性抗体的Fab片段或F(ab'）2片段。4. 一种针对乙肝表面蛋白的抗体片段，其特征在于： 所述抗体片段为权利要求1或2所述的双特异性抗体A3B5-BsAb的Fab片段或F (ab'）2 片段。5. -种编码权利要求1或2所述的针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体A3B5-BsAb的基 因，其特征在于： 编码所述重链可变结构域的核苷酸序列如SEQ ID NO. 5所示，编码所述轻链可变结构 域的核苷酸序列如SEQ ID NO. 7所示。6. -种表达载体，其特征在于： 所述表达载体含有至少一个拷贝的权利要求5所述的基因。7. -种宿主细胞，其特征在于： 所述宿主细胞含有至少一个权利要求6所述的表达载体。8. 权利要求1~3任一项所述的针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体A 3B5-BsAb在制备 预防或治疗乙肝病毒相关肝病的药物或诊断试剂中的用途。9. 权利要求4所述的针对乙肝表面蛋白的抗体片段在制备预防或治疗乙肝病毒相关 肝病的药物或诊断试剂中的用途。10. -种含有权利要求1~3任一项所述的针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体 A3B5-BsAb的药物或诊断试剂，其特征在于： 其中，所述药物或诊断试剂还包含可药用赋形剂、稀释剂与载体中的任意一种。11. 一种含有权利要求4所述的针对乙肝表面蛋白的抗体片段的药物或诊断试剂，其 特征在于： 其中，所述药物或诊断试剂还包含可药用赋形剂、稀释剂与载体中的任意一种。
【专利摘要】本发明提供了一种针对乙肝表面抗原蛋白的双特异性抗体A3B5-BsAb，该双特异性抗体由抗体A3D5以及抗体B5H6组合而成，但其中和HBV病毒的能力以及抑制HBsAg释放的能力较单纯将抗体A3D5以及抗体B5H6联合应用更优，显现出较强的协同效果，显现出较强的协同效果，进而可能阻止HBV的感染相关的肝炎、肝硬化及肝癌的进程。同时，由于该抗体是从接种乙肝疫苗的志愿者外周血中HBsAg特异的记忆性B细胞中克隆获得的全人源抗体，其具有较鼠源、嵌合及人源化抗体更低的免疫原性，可用于制备预防或治疗乙肝病毒相关肝病的药物或诊断试剂。
【IPC分类】G01N33/569, C07K16/08, C12N15/63, A61P31/20, C12N15/13, A61K39/395
【公开号】CN105061590
【申请号】CN201510468936
【发明人】李博华, 孟艳春, 王华菁, 杨扬, 于晓杰
【申请人】中国人民解放军第二军医大学
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年8月3日