表达或活性可降低SDC2的量与/或活性与/或表达，从而降低细胞的 免疫抑制特性。可降低SDC2的量与/或活性与/或表达，从而降低细胞的血管形成特性。 本发明的其它实施例提供了包括处理细胞，从而诱导免疫刺激与/或免疫活化的方法。可 对细胞进行处理，消除天然SDC2表达；例如，可采用反义疗法或其它疗法来敲除或敲低SDC 表达。
[0070] 本发明的所有方法进一步包括从经处理的细胞得到后代细胞或组织；本发明还扩 展到采用这些方法得到的细胞或组织。
[0071] 因此，在本发明的实施例中，细胞和细胞培养基上SDC2的水平与免疫调节与/或 其它治疗特性由此相联系。本发明还提供一种检测包含细胞与/或组织的细胞治疗产品的 方法，包括检测SDC2。这可通过采用基于结合SDC2抗体，优选SDC2-特异性抗体的试验实 现。现有的SDC2ELISA方法是合适的。可以测量细胞表面或培养基或两者中的SDC2。将 SDC2水平与预定标准相比较，水平升高表明存在免疫抑制与/或其它治疗特性，水平降低 表明缺乏免疫抑制与/或其它治疗特性。
[0072] 在本发明的一个实施例中，提供了一种用于含细胞的治疗产品效力的试验，包括 对细胞的SDC2表达或检测产品（例如溶液）中是否存在SDC2进行试验。本发明的另一个 实施例利用试验中SDC2的水平检测细胞治疗产品的效力。
[0073] 通常在本发明的测试/试验方法中，可采用ELISA监测SDC2脱落，从而监测特定 批次人MSC的效力。
[0074] 未通过测试/试验的细胞或产品被舍弃或经处理以增加其SDC2表达。可在决定 是否根据本发明的其它方法处理细胞或组织之前，开展SDC2的试验。
[0075] 本发明的试验方案包括：
[0076] 1.检测潜在产品的SDC2水平；
[0077] 2.将此水平与合格治疗产品的最低预定水平进行对比；
[0078] a.如果该水平等于或超过最低预定水平，则潜在产品合格；
[0079] b.如果该水平低于最低预定水平，则产品不合格；
[0080] 3.任选接下来将该水平与不合格治疗产品的最高预定水平进行对比；
[0081] a.如果该水平低于最高预定水平，则舍弃该产品；
[0082] b.如果该水平处于合格治疗产品最低预定水平和不合格治疗产品最高预定水平 之间，则可以对潜在产品进行处理，尝试提高其SDC2水平，然后，重复该试验。
[0083] 上文提到的试验的SDC2取舍水平、最低预定水平和最高预定水平，根据其它测 试、使用的细胞、疗法的性质及其它因素而变化。治疗产品的最低预定水平可以是大约 1200pg/ml、1300pg/ml、1400pg/ml、1500pg/ml或更高值的SDC2水平。不合格制剂的最高预 定水平可以是大约200pg/ml、300pg/ml、400pg/ml、500pg/ml或600pg/ml ;虽然通常明显低 于合格产品的最低水平，但是，也可以比这些指出的值更高或更低。或者，低于合格治疗产 品最低预定水平的任何制剂可视为不合格，但是，适合经处理，尝试将SDC2水平提高到合 格水平。
[0084] 在下文详细描述的本发明的具体实施例中，较差的MSC供体细胞制备物未通过 SDC2试验，而合格供体通过了 SDC2试验。
[0085] 因此，本发明提供使用、分派等之前干细胞和其它细胞治疗贴片或产品的"批释 放"或质量控制效力试验。
[0086] 多配体蛋白聚糖-2(SDC2)亦称为纤维蛋白聚糖（Fibroglycan)，现在称为⑶362， 是一种跨膜（I型）硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（heparan sulfate proteoglycan)，是多配体蛋 白多糖家族的成员。本发明所述SDC2通常指的是所有物种的SDC2,包括其直系同源物，优 选人、小鼠、大鼠、狗、马、兔、羊、牛和猪的SDC2,特别是马以及更优选是人的SDC2。
[0087] 本发明进一步涉及SDC2的抗体、利用SDC2抗体的处理方法、SDC2抗体的用途及 包含SDC2抗体的药物组合物。与至少人、小鼠和大鼠反应的抗多配体蛋白聚糖2抗体、 orbl3481 可由 Biorbyt Ltd. (12Pembroke Avenue, Denny Industrial Centre, ffaterbeach ，Cambridge, CB259QR, UK)提供。目录编号 MAB29651 (Clone 305507)、与人、小鼠、大鼠、马、 兔和猪反应的其它SDC2抗体可从R&D Systems, Inc获取。本发明公开的SDC2抗体片段也 包括在词语抗-SDC2抗体之内。
[0088] 使用实例的数据证明了因此，本发明提供SDC2拮抗剂，如SDC2或SDC2抗体的治 疗用途，这些用途与本发明公开的SDC2的用途对应，及与W0 2013/117761公开的SDC2阳 性细胞的用途对应。因此，本发明提供用于免疫抑制、炎症治疗、癌症治疗和伤口 /骨愈合 的SDC2拮抗剂（如抗体）。
[0089] 因此，本发明进一步提供作为肿瘤抑制剂的SDC2抗体。SDC2抗体可用于治疗肺 部疾病，包括急性肺损伤（ALI);急性呼吸窘迫综合症（ARDS);慢性阻塞性肺疾病（C0PD); 及特发性肺纤维化（IPF)。SDC2抗体可用于治疗败血症和败血症诱发的多器官功能衰竭、 骨髓移植（BMT)或造血干细胞（HSC)排斥；实体器官移植（S0T)排斥（包括肝、肾、皮肤、角 膜、心脏、肺）；急性毒素诱发肝功能衰竭；自身免疫性肝炎；原发性胆汁性肝硬变（PBC)和 原发性硬化性胆管炎（PSC);骨坏死；退行性椎间盘疾病；类风湿性关节炎；糖尿病患者骨 关节炎和骨延迟愈合；自身免疫性肾炎，包括韦格纳氏肉芽肿病（WG);烧伤、严重烧伤；肌 肉萎缩病和萎缩症，包括肌少症；恶病质和其它肌肉萎缩病，包括肌营养不良症（杜氏和贝 氏）；充血性心力衰竭、急性心肌梗塞和中风；1型糖尿病；2型糖尿病；糖尿病视网膜病变 和其它视网膜病；糖尿病肾病和其它肾病；糖尿病神经病变和其它神经病变；无法愈合的 糖尿病溃疡；糖尿病心肌病和其它肌病；动脉粥样硬化症；外周动脉疾病和严重肢体缺血； 葡萄膜炎；（湿或干）急性黄斑变性（AMD);视网膜和角膜损伤；自身免疫性疾病，如自身免 疫性胃炎（AIG);移植物抗宿主病（GvHD);多发性硬化疾病和脱髓鞘病；甲状腺疾病；炎症 性肠病，包括克罗恩氏病、溃疡性结肠炎和痿化克罗恩氏病；硬皮病；狼疮（SLE);格雷夫斯 氏病；和自身免疫性淋巴增生性疾病（ALPS)。
[0090] SDC2抗体还可用于治疗马的各种疾病，包括蹄叶炎、腱损伤和运动性肺出血 (EIPH)--亦称为"出血"或"突发出血"。
[0091] 用于本发明的抗体包括具有与SDC2结合的特性及具有与第二靶标结合的特性的 抗体。因此，这些抗体可包括与另一个抗原（如细胞表面抗原）结合的第二结合域，包括本 领域通常已知的双特异性抗体。
[0092] 词语"抗体"包括仍然保留结合特异性的抗体的衍生物或其功能片段。生产抗体的 技术是本领域所熟悉的，并且在例如Harlow和Lane的《抗体：实验室手册（Antibodies, A Laboratory Manual)》，冷泉港实验室出版社（Cold Spring Harbor Laboratory Press) 1988及Harlow和Lane 的《使用抗体：实验室手册（Using Antibodies:A Laboratory Manual)》，冷泉港实验室出版社（Cold Spring Harbor Laboratory Press)，1999 中进行 了描述。词语"抗体"还包括不同类别（即IgA、IgG、IgM、IgD和IgE)和子类（IgGl、IgG2 等）的免疫球蛋白（Ig(s))。
[0093] 词语"抗体"还包括实施例如嵌合、单链和人源化抗体，以及抗体片段等，特别是 Fab片段。抗体片段或衍生物进一步包括F(ab'）2、Fv、scFv片段或单域抗体、单可变域抗 体或免疫球蛋白单可变域，单可变域仅包括一个可变域，这个可变域可以是VH或VL，与独 立于其它V区或域的抗原或表位特异性结合。这种免疫球蛋白单可变域不仅包括分离的抗 体单可变域多肽，而且还包括较大的多肽，这些较大的多肽包括抗体单可变域多肽序列的 一个或多个单体。
[0094] 人SDC2可进一步包括由下述各项组成或包括下述各项的多肽：
[0095] (a) SEQ ID N0:3或4规定的氨基酸序列；
[0096] (b) (a)的天然变体；
[0097] (c) (a)或（b)的直系同源物；
[0098] ⑷生物活性和对诊断或治疗有用的片段，其类似物、变体及衍生物；
[0099] (e) (a)-(d)的胞外域，及
[0100] (f)所有以上各项的二聚体和低聚物。
[0101] 本发明的SDC2多肽可以是重组多肽、天然多肽或合成多肽，优选是天然或重组多 肽。词语"片段"、"衍生物"、"变体"及"类似物"指的是基本上保留SDC2相同生物功能或 活性的多肽，可以是（i)其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基（优选保 守氨基酸残基）取代，或（ii)其中一个或多个氨基酸残基包括取代基，或（iii)其中成熟 多肽与另一化合物融合，所述化合物如提高多肽半衰期的化合物（例如，聚乙二醇或多唾 液酸），但不限于这些，或（iv)其中另外的氨基酸被融合到成熟多肽上，例如，方便成熟多 肽的提纯，但并不限于这些。
[0102] 本发明的多肽还包括SEQ ID N0:3和4的多肽（特别是成熟多肽），以及与SEQ ID N0:3和4的多肽具有至少60%类似性（优选至少60%-致性）的多肽，优选与SEQ ID N0:3和4的多肽具有至少80%类似性（优选至少80%-致性）的多肽，更优选与SEQ ID N0:3和4的多肽具有至少90%类似性（优选至少90%-致性）的多肽，更优选与SEQ ID N0:3和4的多肽具有至少95%类似性（优选至少95%-致性）的多肽，还包括此类多肽 的部分，此类多肽的部分通常包含至少100个氨基酸，优选包含至少120个或更优选包含至 少140个氨基酸。两个多肽之间的"类似性"这样确定：将一个多肽的氨基酸序列及其保守 氨基酸取代物与第二个多肽的序列进行对比。各种计算序列类似性和一致性的不同方法是 人们所熟悉的。通常，执行这些计算的合适方法是利用程序，如Smith-Waterman、BLAST或 FASTA进行数据库搜索，及采用一个或优选两个或甚至三个类似性表格。Blosum和PAM (可 接受点突变）矩阵是用于数据库搜索和序列比对的合适的氨基酸类似性矩阵。如果采用 Smith-Waterman或FASTA，则有关的是确保空位罚分足够大，而且如果初次运行未揭露任 何同源序列，则尝试采用不同的算法是合适的一一如果你一开始使用启发式算法BLAST或 FASTA，这尤其正确。
[0103] 在下文详细描述的本发明的具体实施例中，制备了 SDC2片段，并相对天然的，BP 完整的人SDC2对其活性进行了测试。鉴别了活性片段。因此，本发明还提供保留SDC2活 性的SDC2片段--在本发明其它地方表明，在实例2或实例9的试验中（即对TNF或IL1 引起的NFkB活化产生剂量依赖性抑制），所述片段将显示人SDC2的特有活性（虽然不必具 有相同的效力）。活性片段保留了 SDC2活性，且可能超过天然SDC2的活性；所述片段优选 保留天然SDC2至少30%、至少50%、至少70%或至少80%的活性。
[0104] 因此，本发明包括并提供包含SDC2片段或由SDC2片段组成的多肽，其中所述多肽 具有SDC2活性。所述片段适宜地包含不超过150、不超过120、不超过100或不超过80个 SEQ ID N0:3的氨基酸。此外，本发明的片段分别地可包括SDC2的信号序列，即SEQ ID N0:3 的氨基酸1-18。所述片段的合适长度是至少30、至少40、至少50或至少60个氨基酸。片 段、包含片段的组合物的用途、及利用片段的处理方法就如完整SDC2。所述片段构成SDC2 的实施例。
[0105] 优选地，词语SDC2指的是天然（"完整"）SDC2、SDC2的活性片段、SDC2的 活性变体及被SDC2抗体识别，优选被SDC2特异性抗体识别的SDC2型表面蛋白； SDC2优选指天然SDC2及其活性片段，更优选指天然SDC2。SDC2抗体的目录编号是： MAB29651 (Clone305507)，可从R&D Systems, Inc公司获取，与人、小鼠、大鼠、马、兔和猪反 应。本发明的人SDC2在按照实例2或实例9的免疫抑制性试验中呈阳性，而且更优选与 SDC2抗体结合。
[0106] 本发明进一步提供一种包含SDC2片段或由SDC2片段组成的多肽的抗体。这种抗 体适合用于人体治疗，特别是用于（i)免疫抑制，（ii)炎症治疗，（iii)癌症治疗，（iv)伤 口愈合或（v)骨愈合。这种抗体也适合用于本发明所述的完整SDC2抗体的疗法。
[0107] 序列
[0108] SEQ ID N0:1-SDC2 人 mRNA
[0111] SEQ ID N0:2-SEQ ID N0:1 的核苷酸 605-1210
[0112] (编码 SEQ ID NO :3)
[0113] SEQ ID N0:3_SDC2 人蛋白
[0114]
[0115] SEQ ID N0:4-SEQ ID