;
[0036] 冰箱：2 Γ ~5 Γ ;
[0037] 天平：感量为0· Ig ;
[0038] 均质器。
[0039] 2、实验试剂与材料
[0040] 无菌吸管：ImL (具0.0 lmL刻度）、IOmL (具0.1 mL刻度）或微量移液器及吸头；
[0041] 无菌锥形瓶：容量250mL、500mL ;
[0042] 无菌平皿：直径90mm pH计或pH比色管或精密pH试纸。
[0043] 3、培养基的配制
[0044] 称取孟加拉红培养基36. 6g于1000 ml蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，121°C高压 灭菌15分钟备用。
[0045] 4、操作过程
[0046] 按照实施例1的方法检测样品中菌体含量，区别在于，
[0047] 在步骤（2)中：称取10克稀释液置于无菌平皿内，然后及时将15mL~20mL冷却 至46°C左右的孟加拉红培养基倾注平皿，摇匀；
[0048] 在步骤（3)中，将步骤（2)所得到的含有培养基的平皿置于28°C ±1°C培养5d。
[0049] 实施例2
[0050] 在该实施例中对实施例1和对比例1进行菌落计数和报告。
[0051] 表1给出了实施例1和对比例1的方法检出的菌落数。结果发现，对比例1的方 法不能完全检出所有菌体，原因主要是待检测胶类或果酱物质类与培养基在平皿中混合不 均匀，待检测胶类或果酱物质聚集成大量块状物，其中的菌体无法接触培养基，以致无法生 长，导致不能检出。实施例1的方法能够充分检出待检测胶类或果酱物质中菌体。
[0052] 实施例1与对比例1的检测结果如表1所示，
[0053] 表1 :实施例1和对比例1的菌落总数
[0056] 综合表1结果可以看出，本发明所提出的方法，能够检测到溶解后集结成块的样 品中的霉菌和酵母菌的含量，样品中霉菌和酵母菌的检出率显著提高，是满足原料质量标 准要求的检测方法。
[0057] 对比例2
[0058] 按照实施例1的方法检测待测胶类或果酱物质中霉菌和酵母菌的含量，区别在 于，
[0059] 步骤（1)进一步包括：取1毫升1:10的稀释液置于盛有IOmL生理盐水中的无菌 均质袋中，l〇〇〇〇r/min均质2min，制成I :100的稀释液，
[0060] 步骤（2)称取1:100的稀释液进行试验。
[0061] 实施例3
[0062] 每个待测样品分别独立地按照实施例1和对比例2的方法进行10次，测定其霉菌 和酵母菌含量。结果发现，按照实施例1的方法进行检测时，各次得到的结果之间的相对偏 差较小，而按照对比例2的方法进行检测时，各次得到的结果之间偏差较大，准确性较差。
[0063] 实施例4
[0064] 在该实施例中，按照下列步骤分别测定实施例1和对比例1方法的检出率
[0065] (1)通过向无菌样品中添加已知菌落数的目标菌，得到待测样；
[0066] (2)分别按照实施例1和对比例1的方法测定待测样的菌落数；以及
[0067] (3)分别计算实施例1和对比例1方法的检出率，其中检出率（％) =(待测样检 测出的菌落数/已知目标菌的菌落数）X 100 %。
[0068] 表2给出了实施例1和对比例1的方法的检出率
[0069] 表 2
[0070]
[0071] 由表2可以看出本发明实施例提出的方法检出率较高，可以用于样品中的霉菌和 酵母菌菌落数的更加准确地检测。
[0072] 在本说明书的描述中，参考术语"一个实施例"、"一些实施例"、"示例"、"具体示 例"、或"一些示例"等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特 点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不 必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任 一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技 术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结 合和组合。
[0073] 尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例 性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述 实施例进行变化、修改、替换和变型。
【主权项】
1. 一种检测样品中霉菌和酵母菌含量的方法，其特征在于，所述方法包括： (1) 将25g待测样品置于225ml生理盐水中，所述生理盐水预先盛装在第一无菌均质袋 中，并将所述待测样品在转速为l〇〇〇〇r/min的条件下进行第一均质处理1分钟； (2) 取步骤（1)所得第一均质处理后样品10g置于第二无菌均质袋中，并向第二无菌均 质袋中加入15ml孟加拉红培养基，并对所述第一均质处理后样品在转速为8000r/min的条 件下进行第二均质处理1分钟；以及 (3) 将步骤（2)所得的第二均质处理后样品进行刮涂处理，并在27~29摄氏度下培 养5天，以便对所述待测样品中霉菌和酵母菌的含量进行测定， 其中，所述样品为胶类或果酱类物质。2. -种检测样品中霉菌和酵母菌含量的方法，其特征在于，所述方法包括： (1) 将待测样品置于生理盐水中，所述生理盐水预先盛装在第一无菌均质袋中，并将所 述待测样品进行第一均质处理； (2) 将步骤（1)所得第一均质处理后样品置于第二无菌均质袋中，并向第二无菌均质 袋中加入孟加拉红培养基，并对所述第一均质处理后样品进行第二均质处理；以及 (3) 将步骤（2)所得的第二均质处理后样品进行刮涂处理和培养，以便对所述待测样 品中霉菌和酵母菌的含量进行测定。3. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述样品为胶类或果酱类物质。4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于， 在步骤（1)中，所述第一均质处理是在转速为8000~1000r/min的条件下进行1~ 2min，所述待测样品在所述生理盐水中的含量为10重量％ ; 在步骤（2)中，所述第二均质处理是在转速为8000~1000r/min的条件下进行lmin， 所述步骤（1)所得第一均质处理后样品与所述孟加拉红培养基的用量比是l〇g: 15ml。5. 根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤（3)进一步包括：将刮涂处理后的样 品在27~29摄氏度下培养5天，以便对所述待测样品中霉菌和酵母菌的含量进行测定。
【专利摘要】本发明提出了一种检测样品中霉菌和酵母菌含量的方法，所述样品为胶类或果酱类物质。本发明所提出的检测样品中霉菌和酵母菌含量的方法中，利用均质袋实现了培养基与样品的均匀混合，扩大了培养面积有利于菌落观察与计数。通过本发明所提出的检测样品中霉菌和酵母菌含量的方法，能够检测到溶解后集结成块的样品中的霉菌和酵母菌的含量，显著提高了样品中霉菌和酵母菌的检出率，提高了检测结果的准确性降低了质量安全风险。
【IPC分类】C12Q1/06
【公开号】CN105385749
【申请号】CN201511001056
【发明人】吴玉秋, 薛志清, 梁春梅, 俞东威, 宋晓东
【申请人】内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司
【公开日】2016年3月9日
【申请日】2015年12月28日