一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法
【技术领域】
[0001]本发明属于环保微生物领域，具体涉及高盐废水处理用耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法。
【背景技术】
[0002]生化法应用于高盐废水处理具有运行成本低、环境友好等特点。化工、制药、制革、食品、采油等行业产生的高盐废水盐浓度高达1%?25%。高盐废水生化处理技术的难点和关键是污染物降解微生物。嗜盐菌能够在高盐环境下进行正常的生长代谢，因而利用嗜盐菌菌剂处理高盐废水成为高盐废水生化处理的一种主要方法。嗜盐菌菌剂包括由单一种类嗜盐菌构成的菌剂和多种类嗜盐菌构成的复合菌剂。复合菌剂对高盐废水中有机污染物的降解能力和抗盐度冲击能力一般强于单一菌剂。
[0003]中国专利申请号CN201110003844.8提供了一种复合菌剂，由四种耐盐菌普罗威登斯菌(CGMCC N0.4327)、表皮短杆菌(CGMCC N0.4329)、盐单胞菌(CGMCC N0.4330)、Oceanobacillus sp.CJ-10(CGMCC N0.4328)，组成。专利申请号 CN 200910266193.4提供的复合耐盐菌剂由三株极端嗜盐菌盐单胞菌(CGMCC N0.3081)、假单胞菌(CGMCC N0.3082)和芽孢杆菌(CGMCC N0.3083)组成。这些复合耐盐微生物菌剂进行规模化工程应用，须通过每种耐盐菌的发酵扩大培养后再进行复配得到，导致复合耐盐微生物菌剂的生产成本较高、生产周期较长，限制了其应用范围。
[0004]中专利申请号201310540099.X提供了一种制备耐盐微生物菌剂的方法，该方法是在敞开装置中，直接在1%?30%的盐浓度条件下对耐盐微生物菌群进行混合培养，添加有机碳源、营养元素和微量元素进行制备。该方法虽然对微生物混合菌群进行混合培养，使复合微生物菌剂可以一次培养进行制备，但其生产条件仍然较为复杂，且用于实际高盐废水仍然需要较长时间的驯化。
[0005]因此，将制备的耐高盐复合型微生物菌剂进行批量生产，仍需要进一步降低生产成本、缩短生产周期，提高生产效率和应用效果。
【发明内容】
[0006]本发明所要解决的技术问题是针对现有耐高盐复合型微生物菌剂批量生产技术的缺陷，提供一种生产成本低、生产周期短、生产效率高且应用效果好的耐高盐复合型微生物菌剂生产方法。
[0007]本发明要解决的技术问题通过以下技术方案来实现的。本发明是一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，其特点是:包括以下步骤:
(1)培养基制备:在盐浓度为1%?20%的基础培养基中加入适量的玉米浆、糖蜜或其它提取性有机碳源，使基础培养基的TOC浓度为200?5000mg/L，制得培养基；
(2)菌群接种:向培养基中加入复合微生物菌剂，得培养液;所述的复合微生物菌剂可以是现有技术中公开的或市售的任何一种可适用于本发明的复合微生物菌剂。
[0008](3)菌群培养:控制溶解氧0.1-4.0mg/L、微生物负荷0.05-0.5kgT0C/(kgMLSS.d)，对培养液中的复合微生物菌群进行混合培养，并且保证复合微生物菌群对培养基的TOC去除率不低于80%;
(4)放大培养:按照1%?10%的接种量进行逐级放大培养，在培养条件不变的情况下，直至培养得到所需要数量的菌剂。
[0009]本发明所述的耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，进一步优选的技术特征或者技术方案是:所述的基础培养基是指无机盐培养基中加入高盐废水中的特征污染物，且加入浓度为50?1000mg/L。所述的特征污染物包括但不限于脂肪烃、卤代烃、芳香烃、醇类、醚类、环氧类、有机酸类、酯类、酰胺类、酚类、硝基苯类、有机硫、有机磷、杂环类、染料、助剂或其它有机物中的一种或多种。
[0010]本发明所述的耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，进一步优选的技术特征或者技术方案是:菌群培养与放大培养的溶解氧为0.1?1.0mg/L、1.0?2.0mg/L或2.0?4.0mg/L。
[0011]本发明所述的耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，进一步优选的技术特征或者技术方案是:菌群培养与放大培养的PH为3.0-5.0或6.0?9.0。
[0012]本发明所述的耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，进一步优选的技术特征或者技术方案是:菌群培养与放大培养的温度为10?15°C、15?28°C或28?40°C。
[0013]本发明所述的耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，进一步优选的技术特征或者技术方案是:菌群培养与放大培养的盐浓度为10~35g/L、35?120g/L或120?200g/L。
[0014]本发明方法制备的耐高盐复合型微生物菌剂，经过产品质量检测合格后，可制成液体菌剂、固体菌剂进行使用或保存。
[0015]与现有技术相比，本发明方法的有益效果包括:
(I)菌剂生产成本低。本发明方法培养基主要原料为玉米浆、糖蜜或其它提取性有机碳源，价格便宜，因此菌剂综合生产原料成本较低。
[0016](2)菌剂生产质量高。本发明采用提取性碳源作为培养基生产复合微生物菌剂，菌剂中微生物种群的培养效果更好。
[0017](3)缩短生产周期。本发明方法中耐高盐复合型微生物菌剂通过敞开环境下混合培养一次完成，缩短了菌剂生产周期。
[0018](4)所生产的菌剂适应能力强。本发明方法采用混合培养或混合发酵培养的方式对能够降解废水中有机物污染物的微生物菌群进行一次培养，在培养过程中保持了微生物降解链的完整，并保证了功能微生物的多样性，更容易适应水质的变化。
【具体实施方式】
[0019]以下进一步描述本发明的具体技术方案，以便于本领域的技术人员进一步地理解本发明，而不构成对其权利的限制。
[0020]实施例1，一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，包括以下步骤:
(I)培养基制备:在盐浓度为1%的基础培养基中加入适量的玉米浆、糖蜜或其它提取性有机碳源，使基础培养基的TOC浓度为200mg/L，制得培养基；
(2 )菌群接种:向培养基中加入复合微生物菌剂，得培养液；
(3)菌群培养:控制溶解氧0.lmg/L、微生物负荷0.05kgT0C/(kgMLSS.d)，对培养液中的复合微生物菌群进行混合培养，并且保证复合微生物菌群对培养基的TOC去除率不低于80%；
(4)放大培养:按照1%的接种量进行逐级放大培养，在培养条件不变的情况下，直至培养得到所需要数量的菌剂。
[0021]实施例2，一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，包括以下步骤:
(I)培养基制备:在盐浓度为20%的基础培养基中加入适量的玉米浆、糖蜜或其它提取性有机碳源，使基础培养基的TOC浓度为5000mg/L，制得培养基；
(2 )菌群接种:向培养基中加入复合微生物菌剂，得培养液；
(3)菌群培养:控制溶解氧4.0mg/L、微生物负荷0.5kgT0C/(kgMLSS.d)，对培养液中的复合微生物菌群进行混合培养，并且保证复合微生物菌群对培养基的TOC去除率不低于80%；
(4)放大培养:按照10%的接种量进行逐级放大培养，在培养条件不变的情况下，直至培养得到所需要数量的菌剂。
[0022]实施例3，实施例1或2所述的耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法中:所述的基础培养基是指无机盐培养基中加入高盐废水中的特征污染物，且加入浓度为50?1000mg/L。所述的特征污染物包括但不限于脂肪烃、卤代烃、芳香烃、醇类、醚类、环氧类、有机酸类、酯类、酰胺类、酚类、硝基苯类、有机硫、有机磷、杂环类、染料、助剂或其它有机物中的一种或多种。
[0023]实施例4，一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法:菌群培养与放大培养的溶解氧为0.I?I.0mg/L,1.0-2.0mg/L或2.0-4.0mg/L。菌群培养与放大培养的pH为3.0-5.0或6.0?9.0。菌群培养与放大培养的温度为10?15°C、15?28°C或28?40°C。菌群培养与放大培养的盐浓度为10~35g/L、35?120g/L或120?200g/L。其余与实施例1或2或3所述相同。
[0024]实施例5，一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，步骤包括培养基制备、菌群接种、菌群培养和放大培养:
(1)培养基制备:基础培养基中按重量比1:1加入玉米浆和糖蜜，使培养基的TOC为500~5000mg/L，加入氯化钠使无机盐浓度为50g/L ；
(2)菌群接种:在IL培养瓶中加入市售SEM耐盐微生物菌剂，加入浓度为500mg/L;
(3 )菌群培养:控制溶解氧1.0-3.0mg/L、温度28?30°C、负荷0.卜0.2kgT0C/(kgMLSS.d)，对接入的微生物菌群进行混合培养，检查培养过程中TOC去除率并确保其不低于 80%;
(4)放大培养:按照10%的接种量进行5级放大培养，放大培养规模依次为1L、10L、100L、Im3、1m3，最终培养得到1t耐高盐复合型微生物菌剂。
[0025]实施例6，一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，步骤包括培养基制备、菌群接种、菌群培养和放大培养:
(1)培养基制备:基础培养基中按重量比3:2加入玉米浆和糖蜜，使培养基的TOC为500~5000mg/L，加入苯酚20?200mg/L，加入硫酸钠使无机盐浓度为80g/L ；
(2)菌群接种:在IL培养瓶中加入市售SEM耐盐微生物菌剂，加入浓度为400mg/L;
(3)菌群培养:控制溶解氧I.0-2.0mg/L、温度20?25°C、负荷0.卜0.2kgT0C/(kgMLSS.d)，对接入的微生物菌群进行混合培养，检查培养过程中TOC去除率并确保其不低于 80%;
(4)放大培养:按照1%?10%的接种量进行5级放大培养，放大培养规模依次为1L、10L、10Lam3、1m3，最终培养得到1t复合微生物菌剂。
[0026]实施例7，一种耐高盐复合型微生物菌剂的生产方法，步骤包括培养基制备、菌群接种、菌群培养和放大培养:
(1)培养基制备:基础培养基中按重量比2:3加入玉米浆和糖蜜，使培养基的TOC为500~5000mg/