对单个外泌体进行裂解的装置的制造方法

文档序号:9744773阅读:853来源:国知局
对单个外泌体进行裂解的装置的制造方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种外泌体的裂解设备,特别涉及一种对单个外泌体进行裂解的装 置。
【背景技术】
[0002] 最近几年,一种叫做外泌体(Exosome)的小囊泡正受到大家广泛的关注。外泌体是 直径约为30-150nm,密度在1.13-1.21g/ml的小囊泡。外泌体天然存在于体液中,包括血液、 唾液、尿液和母乳,外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性囊 泡。外泌体在30年前被人们所发现。早期的研究认为,外泌体执行蛋白运输功能,特异靶定 受体细胞,交换蛋白和脂类或引发下游信号事件。直到2007年,研究人员发现外泌体也运输 核酸,参与细胞间通讯。总之,其蛋白、RNA和脂肪成分特异,且携带了一些重要的信号分子, 有望在多种疾病的早期诊断中发挥作用,这使得外泌体的市场也在快速扩展,并成为热门 的研究对象。目前研究发现,外泌体内含有与细胞来源相关的蛋白质rRNA和microRNA,并且 外泌体能够通过生物屏障,在细胞间传递功能性核酸分子,从而发挥各种生物学功能。
[0003] 在现有技术中,针对外泌体内RNA的研究和检测手段主要是将大量外泌体全部裂 解,然后检测混合样品中的RNA:具体是用化学裂解液裂解外泌体,然后对混合物执行RNA的 提取。但这会存在一个问题,不同外泌体携带的RNA蛋白是不同的,其对应的细胞性质也不 同,采用传统方法获得的外泌体内的RNA中往往存在较多干扰项,因此如何更细致更准确的 获得单个外泌体中的RNA,就显得十分的有意义。

【发明内容】

[0004] 针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供一种如何获得单个外泌体中 RNA或miRNA的装置,即如何实现对单个外泌体进行裂解的装置。
[0005] 为实现上述目的,本发明通过以下技术方案实现:
[0006] -种对单个外泌体进行裂解的装置,包括:
[0007] 裂解室,其为贯通管状结构,包括有相对设立的收缩端和开阔端,所述收缩端的端 部设有孔径为60~lOOnm的纳米孔;
[0008] 裂解电路,其包括第一电极、第二电极以及电源;所述第一电极位于所述裂解室的 开阔端,所述第二电极位于所述纳米孔的外侧;
[0009] 其中,所述纳米孔的孔口表面设有第一涂层,所述第一涂层包括有以下重量份的 材料: 氧化硅 _重量份1 氧化钛 40~42重量份;
[001 0]氧化钪 10~12重量份; 氧化银 10~12重量份; 氧化镱 3~5重量份。
[0011]优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述纳米孔的外侧还设有 多孔陶瓷层,所述多孔陶瓷层位于所述纳米孔和第二电极之间。
[0012] 优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述多孔陶瓷层的孔径为 50~lOOnm。
[0013] 优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述纳米孔的外侧还设有 滤网,所述滤网位于所述多孔陶瓷层和第二电极之间。
[0014] 优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述滤网的孔径为60~ 100nm〇
[0015] 优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述电源为交直流一体化 电源。
[0016] 优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述第一涂层的厚度为5 ~10nm〇
[0017] 优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述滤网镀有第二涂层, 所述第二涂层包括有以下重量份的材料: 氧化锌 100重量份;
[0018] 氧化锆 10~12重量份; 氧化硅 2~3重量份;
[0019] 氧化钨 2~3重量份; 氧化钐 2~3重量份。
[0020] 优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述第二涂层的厚度为5 ~10nm〇
[0021] 优选的是,所述的对单个外泌体进行裂解的装置,其中,所述第一涂层还包括2~3 重量份的四氧化三铁。
[0022] 本发明的有益效果是:本案利用强电压差对外泌体进行裂解,并结合纳米孔的结 构,使得外泌体只能单个通过纳米孔被裂解,为后续的miRNA检测提供了更加精确的检测目 标。通过对纳米孔表面涂层和滤网涂层的改进,提高了外泌体过滤和进入纳米孔的效率。
【附图说明】
[0023] 图1为对单个外泌体进行裂解的装置的结构示意图。
[0024] 图2为实施例1中,当电源为直流电源时,电流与时间的曲线图。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合附图对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文 字能够据以实施。
[0026] 实施例1
[0027] 如图1所示,本案列出一实施例的对单个外泌体进行裂解的装置,包括:
[0028] 裂解室1,其为贯通管状结构,包括有相对设立的收缩端2和开阔端3,收缩端2的端 部设有孔径为60~lOOnm的纳米孔4;
[0029] 裂解电路,其包括第一电极5、第二电极6以及电源7;第一电极5位于裂解室的开阔 端3,第二电极6位于纳米孔4的外侧;
[0030] 其中,纳米孔4的孔口表面设有第一涂层,第一涂层包括有以下重量份的材料: 氧化硅 100重量份;
[0031] 氧化钛 40~42重量份; 氧化钪 10~12重量份;
[0032] 氧化银 10~12重量份; 氧化镱 3~5重量份。
[0033] 实施例2
[0034] 作为本案另一实施例,其中,纳米孔4的外侧还设有多孔陶瓷层8,该多孔陶瓷层8 位于纳米孔4和第二电极6之间。
[0035] 在上述实施例中,多孔陶瓷层8的孔径优选为50~lOOnm。
[0036] 实施例3
[0037] 作为本案又一实施例,其中,纳米孔4的外侧还设有滤网9,该滤网9位于多孔陶瓷 层8和第二电极6之间。
[0038] 在上述实施例中,滤网9的孔径优选为60~lOOnm。
[0039] 电源7优选为交直流一体化电源。该电源属于现有技术,是市售产品,它的内部集 成了整流滤波器和逆变器,它的好处是可以自由控制切换交流和直流电流,当需要交流电 时就选择交流电供电模式,当需要直流电时就选择直流电供电模式。
[0040] 第一涂层的厚度优选为5~10nm。
[0041] 外泌体的裂解装置的工作过程是:将裂解装置置于溶液中,在纳米孔4附近的溶液 中注入待裂解的外泌体,由于外泌体在溶液中的扩散速度很慢,因此,它不会从开阔端3进 入到裂解室1中;此时,将电源7调为直流电源,由于外泌体本身带电荷,因此它可被吸引进 入纳米孔4内,而由于纳米孔4的孔径限制,一次只能允许单个外泌体进入,当纳米孔4的外 侧设有多孔陶瓷层8和滤网9时,外泌体在电
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