的工艺参数为:发酵温度27-28°C，发酵罐空气流量0.5-1.0vvm，发酵罐内部压力0.1-0.25kg/cm3，搅拌转速70-150转/分钟，发酵时间3_11天；
[0045](4)桦褐孔菌木质纤维素降解酶制备:发酵结束后，将发酵产物过滤，获得发酵液，在发酵液中加硫酸铵至硫酸铵的终浓度为20wt%，离心10-15分钟后收集上清液，再往上清液中加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为80wt%，离心15-25分钟后收集沉淀，沉淀溶解在醋酸-醋酸钠缓冲液中，透析，冷冻干燥。
[0046]实施例1
[0047](I)菌种活化:以桦褐孔菌为菌种，划线接种至斜面菌种培养基上27 0C，培养250小时，获得活化菌种;斜面菌种培养基的配方为:麦芽浸膏40g/100mL，蛋白胨4g/100mL，琼脂I Og/1 OOmL，pH 值为 5.4-5.6。
[0048](2)液体菌种培养:将活化菌种转入液体种子培养基270C，摇床上培养4.5d至对数期得液体菌种，摇床转速80转/分钟。液体种子培养基的配方为:葡萄糖5g/100mL，蛋白胨
0.5g/100mL，酵母浸膏0.lg/100mL，KH2P040.lg/100mL，MgS040.15g/100mL，CaCl20.01g/10mLo
[0049](3)液体深层发酵:将液体菌种接入装有液体深层发酵培养基的发酵罐中发酵培养，液体菌种与液体深层发酵培养基的体积比为1:8，液体深层发酵的工艺参数为:发酵温度27 0C，发酵罐空气流量0.5vvm，发酵罐内部压力0.lkg/cm3，搅拌转速70转/分钟，发酵时间7天;所述液体深层发酵培养基的配方为:玉米粉2g/L，木质纤维素基质(山核桃壳，粉碎后使用)40g/L，促进剂(乙醇)1.2g/L，诱导剂(没食子酸)5X10—5g/L，蛋白胨2.3g/L，酵母粉I.2g/L，KH2PO40.8g/L，Na2HPO40.2g/L，MgSO4.7H20 0.5g/L，pH值6.0。
[0050](4)桦褐孔菌木质纤维素降解酶制备:发酵结束后，将发酵产物过滤，获得发酵液，在发酵液中加硫酸铵至硫酸铵的终浓度为20wt %，离心(10000 X g) 10分钟后收集上清液，再往上清液中加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为80wt%，离心(10000 Xg) 15分钟后收集沉淀，沉淀溶解在醋酸-醋酸钠缓冲液(pH 6.0，浓度，20mmol/L)中，透析，冷冻干燥。
[0051 ] 实施例2
[0052](I)菌种活化:以桦褐孔菌为菌种，划线接种至斜面菌种培养基上28°C，培养200小时，获得活化菌种;斜面菌种培养基的配方为:麦芽浸膏40g/100mL，蛋白胨4g/100mL，琼脂I Og/1 OOmL，pH 值为 5.4-5.6。
[0053](2)液体菌种培养:将活化菌种转入液体种子培养基28°C，摇床上培养3.5d至对数期得液体菌种，摇床转速140转/分钟。液体种子培养基的配方为:葡萄糖5g/1 OOmL，蛋白胨0.5g/100mL，酵母浸膏0.lg/100mL，KH2P040.lg/100mL，MgS040.15g/100mL，CaCl20.01g/10mLo
[0054](3)液体深层发酵:将液体菌种接入装有液体深层发酵培养基的发酵罐中发酵培养，液体菌种与液体深层发酵培养基的体积比为1:10，液体深层发酵的工艺参数为:发酵温度28 0C，发酵罐空气流量1.0vvm，发酵罐内部压力0.25kg/cm3，搅拌转速150转/分钟，发酵时间11天;所述液体深层发酵培养基的配方为:玉米粉6g/L，木质纤维素基质(竹肩，粉碎后使用)48g/L，促进剂(曲拉通，市售)1.5g/L，诱导剂(黎芦醇)9X10—5g/L，蛋白胨2.5g/L，酵母粉1.5g/L，KH2POUg/L，Na2HPO40.4g/L，MgS04.7H200.6g/L，pH值6.0。
[0055](4)桦褐孔菌木质纤维素降解酶制备:发酵结束后，将发酵产物过滤，获得发酵液，在发酵液中加硫酸铵至硫酸铵的终浓度为20wt %，离心(10000 X g) 15分钟后收集上清液，再往上清液中加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为80wt%，离心(10000 Xg)25分钟后收集沉淀，沉淀溶解在醋酸-醋酸钠缓冲液(pH 6.0，浓度，20mmol/L)中，透析，冷冻干燥。
[0056]实施例3
[0057](I)菌种活化:以桦褐孔菌为菌种，划线接种至斜面菌种培养基上28°C，培养220小时，获得活化菌种;斜面菌种培养基的配方为:麦芽浸膏40g/100mL，蛋白胨4g/100mL，琼脂I Og/1 OOmL，pH 值为 5.4-5.6。
[0058](2)液体菌种培养:将活化菌种转入液体种子培养基28 0C，摇床上培养4d至对数期得液体菌种，摇床转速100转/分钟。液体种子培养基的配方为:葡萄糖5g/100mL，蛋白胨
0.5g/100mL，酵母浸膏0.lg/100mL，KH2P040.lg/100mL，MgS040.15g/100mL，CaCl20.01g/10mLo
[0059](3)液体深层发酵:将液体菌种接入装有液体深层发酵培养基的发酵罐中发酵培养，液体菌种与液体深层发酵培养基的体积比为1:9，液体深层发酵的工艺参数为:发酵温度280C，发酵罐空气流量0.8vvm，发酵罐内部压力0.2kg/cm3，搅拌转速100转/分钟，发酵时间9天;所述液体深层发酵培养基的配方为:玉米粉4g/L，木质纤维素基质(竹肩，粉碎后使用)45g/L，促进剂(3-[(3_胆固醇氨丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸，CHAPS)1.3g/L，诱导剂(J L茶素)7 X I O—5g/L，蛋白胨2.4g/L，酵母粉 I.3g/L，KH2PO40.9g/L，Na2HPO40.3g/L，MgSO4.7H20 0.5g/L，pH值6.0。
[0060](4)桦褐孔菌木质纤维素降解酶制备:发酵结束后，将发酵产物过滤，获得发酵液，在发酵液中加硫酸铵至硫酸铵的终浓度为20wt %，离心(10000 X g) 12分钟后收集上清液，再往上清液中加入硫酸铵至硫酸铵的终浓度为80wt%，离心(10000 Xg)20分钟后收集沉淀，沉淀溶解在醋酸-醋酸钠缓冲液(pH 6.0，浓度，20mmol/L)中，透析，冷冻干燥。
[0061 ]发酵中发酵液降解酶活性分析:
[0062](I)木质素降解酶
[0063]木质素过氧化物酶(Lip)活性测定通过测定藜芦醇氧化成藜芦醛的速率。定义在Imin产生1.0ymol藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位(U)。锰过氧化物酶(MnP)活性的测定基于Mn2+被氧化成Mn3+。定义在Imin产生1.0ymol Mn3+所需的酶量为一个酶活力单位(U)。漆酶(Lac)活性的测定采用ABTS法。定义转化lmol/min的ABTS所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
[0064](2)半纤维素降解酶
[0065]内切-β-l，4-木聚糖酶采用DNS法，用木聚糖作为底物，木聚糖酶活力通过反应Ih内还原糖的变化表示。酶活力单位定义为每分钟转化木糖的微摩尔数。甘露聚糖酶的测定采用DNS法，槐角豆胶作为甘露聚糖酶测定的底物，甘露聚糖酶活力通过反应Ih内还原糖的变化表示。酶活力单位定义为每分钟转化甘露糖的微摩尔数。
[0066](3)纤维素降解酶
[0067]全酶活(FPase)的测定采用DNS法，定义在Imin内由无淀粉新华滤纸产生1.Ομηιο?还原糖所需的酶量为一个酶活力单位(U)。纤维素内切酶(Endoglucanase)用CMCNa酶活表示，定义在Imin内由CMCNa产生1.Ομπιο?还原糖所需的酶量为一个酶活力单位