取代的氨基六元饱和杂脂环类长效dpp-iv抑制剂的制作方法

取代的氨基六元饱和杂脂环类长效dpp-iv抑制剂的制作方法
【专利摘要】本发明涉及药物化学领域，具体涉及如式I所示的取代的氨基六元饱和杂脂环类长效DPP-IV抑制剂、其制备方法、其药物组合物。本发明还涉及所述化合物及其药物组合物治疗受益于DPP-IV酶抑制的疾病的用途，例如治疗糖尿病尤其是2型糖尿病。
【专利说明】
取代的氨基六元饱和杂脂环类长效DPP-IV抑制剂
技术领域
[0001] 本发明涉及新的具有二肽基肽酶-IV(DPP-IV)长效抑制活性的氨基六元饱和杂 脂环衍生物、其制备方法、其药物组合物，本发明还涉及所述化合物及其药物组合物治疗受 益于DPP-IV酶抑制的疾病的用途，例如治疗糖尿病尤其是2型糖尿病。
【背景技术】
[0002] 糖尿病是一种常见的多病因慢性疾病，主要因胰岛素绝对或相对不足或靶细胞对 胰岛素敏感性降低所引起的以糖代谢紊乱为主的慢性综合性疾病，表现在空腹状态或口服 糖耐受试验中服用葡萄糖之后的血糖水平升高或高血糖症。持续的不可控制的高血糖症可 能会引起肾脏病变、神经病变、视网膜病变、动脉硬化等一系列严重并发症，严重影响患者 的健康和生活质量，因此成为一个很重要的公众健康问题。据国际糖尿病联合会统计预测， 世界糖尿病患者增长迅猛，发病率逐年高企。1985年全球仅有3千万例，2000年为1. 71亿， 2010年为2. 85亿（发病率6. 4% )，2012年为3. 71亿，预计2030年将达4. 38亿。
[0003] 糖尿病主要分两种类型，I型糖尿病也称胰岛素依赖型糖尿病，病人自己体内几乎 不能产生胰岛素。II型糖尿病也称非胰岛素依赖型糖尿病，这类患者体内的胰岛素水平与 正常人水平相当甚至更高一些，但是，这些患者体内主要的胰岛素敏感组织中糖代谢和脂 代谢都出现了胰岛素抵抗。
[0004] 在对糖尿病病理生理机制的研究和认识中，发现胰高血糖素样肽（glucagon-like p印tide 1，GLP-1)在调节血糖方面起着重要作用，它是由肠道黏膜L细胞分泌的一种由30 个氨基酸组成的肽类激素，属于肠降血糖素（incretins)的一种，另外一种为葡萄糖依赖 促胰岛素多肽（GIP)，也对调节血糖起着一定作用。在健康人体内，肠降血糖素促进胰岛素 分泌的作用可以占到餐后胰岛素分泌的50%-70%。GLP-1调节血糖的主要机制有：1.以 葡萄糖依赖的方式作用于胰岛0细胞，刺激胰岛素分泌，并且促进胰岛素基因转录，增加 胰岛素生物合成；2.抑制餐后胰高血糖素的分泌；3.增加外周葡萄糖摄取和提高胰岛素敏 感性；4.抑制食欲，减少摄食；5.减缓胃排空。这些都有助于降低餐后血糖，维持血糖水平 稳定。动物研究表明，GLP-1还具有刺激胰岛0细胞分化和增值的作用，并可抑制0细胞 的凋亡，从而增加0细胞的数量和体积。
[0005] 二肽基肽酶IV (DPP-IV)是一种丝氨酸蛋白酶，它在体内很多组织中都有表达，如 肠、肝、肺、肾等，以及T淋巴细胞中。它能迅速将肽链N端为脯氨酸或丙氨酸的蛋白质裂解， 负责体内某些内源性肽（如GLP-UGIP)的代谢性裂解，并已经证明有体外对抗多种其它肽 (GHRH，NPY，G LP-2, VIP)的蛋白分解活性。由于DPP-IV酶的降解，体内GLP-UGIP迅速失 活，两者的半衰期分别只有小于2分钟和7-8分钟。因此抑制DPP-IV的活性可以大大延长 体内GLP-1、GIP生理活性的持续时间，从而间接调控胰岛素的分泌，最终起到控制血糖的 作用。
[0006] DPP-IV抑制剂作为一种新型的糖尿病治疗手段，具有葡萄糖依赖性的刺激胰岛素 分泌的作用，在控制血糖过程中不易发生低血糖的副作用，还具有保留胰岛0细胞功能等 特点；胃肠道反应少，耐受性好；可以口服而不用注射；与现有口服降糖药疗效相当。
[0007] 基于以上特点，DPP-IV抑制剂是可用于预防、延缓其进展和/或治疗由DPP-IV介 导的病症的药物，如糖尿病，尤其是II型糖尿病和肥胖等。
[0008] 自 2006 年至目前已有 sitagliptin, vildagliptin, saxagliptin, linagliptin, a logliptin, anagliptin, gemigliptin, teneligliptin 等八个 DPP-IV 抑制剂成功上市，在 II/III期临床研究阶段的有五个，还有更多的处于I期临床和临床前的研究项目。
[0009] 由于糖尿病属于慢性疾病，患者需要终生用药，因此用药的便利性对患者 坚持治疗从而对疗效有很大影响。已上市药物中，Vildagliptin，anagliptin需要 每天服用两次，其它都是每天服用一次。而处于III期临床研究阶段的两个化合物 omarigliptin (MK-3102)和trelagliptin (SYR-472)都可以每周服用一次，研究者认为这 可以提高患者服用的便利性，从而使患者更容易坚持用药。

【发明内容】

[0010] 本发明提供一种式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：
[0011]
[0012] 其中，
[0013] A环选自5-6元芳烃环或含有1-2个选自N、0或S原子的5-6元杂芳环；
[0014] X选自0或CH2，Y选自N或CH，并且当X为CH2时，Y不为(^^、私和^分别独立 地选自H、Q 3烷基、-NH 2或-OH ;
[0015] R4选自卤素、_NH2、-OH、Q 6烷基、C i 6烷氧基、苯氧基或苄氧基；
[0016] R5选自q 6烷基、卤素、-^-011、-(1)01?6、-順1?7或-30 2馬，或者两个1?5基团与所连 A环原子一起组成一个5-7元环；
[0017] R6选自H或C16烷基；
[0018] R7选自 H、C 丨 6烷基或-SO 2Rs;
[0019] Rs选自-OH、-NH 2、Q 6烷基或C 3 6环烷基；
[0020] 〇和p分别独立地选自1、2或3 ;
[0021] m和n分别独立地选自1或2。
[0022] 作为本发明的一个实施方式，提供一种式II所示的化合物或其药学上可接受的 盐：
[0023]
[0024] 其中，
[0025] X 选自 0 ;
[0026] Y 选自 N 或 CH ;
[0027] 札选自-NH 2或-OH，R 2和 R 3为 H ;
[0028] R4a和 R 4b选自 F、Cl、Br、I、-NH 2或-OH ;
[0029] R5选自 F、Cl、Br、I、-CN、-C00R6、-順馬或-SO 2Rs;
[0030] p 选自 1 或 2 ;
[0031] R6选自H、甲基、乙基、丙基或丁基；
[0032] R7选自H、甲基、乙基、丙基、丁基或-S02Rs;
[0033] Rs选自-OH、-NH2、甲基、乙基、丙基、丁基、C3环烷基、C 4环烷基或(：5环烷基。作为 本发明的一个实施方式，提供一种式III所示的化合物或其药学上可接受的盐：
[0034]
[0035] 其中，
[0036] X 选自 0 ;
[0037] Y 选自 N 或 CH ;
[0038] 札选自-NH 2或-OH，R 2和 R 3为 H ;
[0039] R4a和 R 4b选自 F、Cl、Br、-NH 2或-OH ;
[0040] R5a和 R 5b的分别独立地选自 F、Cl、Br、I、-CN、-C00R 6、-順馬或-SO 2Rs;
[0041] R6选自H、甲基、乙基、丙基或丁基；
[0042] R7选自H、甲基、乙基、丙基、丁基或-S02Rs;
[0043] Rs选自-OH、-NH2、甲基、乙基、丙基、丁基、(：3环烷基、(： 4环烷基或(：5环烷基。
[0044] 作为本发明的一个实施方式，提供一种式IV所示的化合物或其药学上可接受的 盐：
[0045]
[0046] 其中，
[0047] X 选自 0 ;
[0048] Y 选自 N 或 CH ;
[0049] 札选自-NH 2或-OH，R 2和 R 3为 H ;
[0050] R4a和 R 4b选自 F、Cl、Br、-NH 2、-OH ;
[0051] R5。和R5d与所连R比唑环原子一起组成的一个5、6或7元非芳香环，所述5、6或7 元非芳香环优选包含1、2或3个选自N、0或S杂原子，所述5、6或7元非芳香环更优选 含-S0 2-基团。
[0052] 作为本发明的一个实施方式，提供一种式V所示的化合物或其药学上可接受的 盐：
[0053]
[0054] 其中，
[0055] X 选自 0 ;
[0056] Y 选自 N 或 CH ;
[0057] &、R2和R 3分别独立地选自H、C丨3烷基、-NH 2或-OH ;
[0058] R4选自卤素 、-NH 2、-OH、Q 6烷基、C丨6烷氧基、苯氧基或苄氧基；
[0059] R5选自 C 丨 6烷基、卤素、-CN、-OH、-C00R 6、-順馬或-SO 2Rs;
[0060] R6选自H或C16烷基；
[0061] R7选自 H、C 丨 6烷基或-SO 2Rs;
[0062] Rs选自-OH、-NH 2、Q 6烷基或C 3 6环烷基；
[0063] o和p分别独立地选自1、2或3。
[0064] 作为式V的一种优选实施方式，札选自_順2或-OH。
[0065] 作为式V的一种优选实施方式，R2和1?3为H。
[0066] 作为式V的一种优选实施方式，R4选自F、Cl、Br、I、-NH2S-OH。
[0067] 作为式V的一种优选实施方式，R5选自F、Cl、Br、I、-C00R6、-順馬或-SO 2Rs。
[0068] 作为式V的一种优选实施方式，R6选自H、甲基、乙基、丙基或丁基。
[0069] 作为式V的一种优选实施方式，R7选自H、甲基、乙基、丙基、丁基或-SO 2Rs。
[0070] 作为式V的一种优选实施方式，Rs选自-OH、_NH2、甲基、乙基、丙基、丁基、C 3环烷 基、04环烷基或C 5环烷基。
[0071] 作为式V的一种优选实施方式，〇为2。
[0072] 作为式V的一种优选实施方式，p为1或2。
[0073] 作为式V的一种优选实施方式，R4的取代位置如下式VI结构R 4a和R 4b所示：
[0074]
[0075] 其中，R4a和R4b分别独立地选自F、Cl、Br、I、_順 2或-OH，其他取代基与前述式V 定义相同。
[0076] 作为式V的一种优选实施方式，p为2,并且R5的取代位置如下式W结构R 5a和R5b 所示：
[0077]
[0078] 其中，R5a和R5b分别独立地选自F、Cl、Br、I、-C00R 6、-順馬或-S02Rs，其他取代基 与式V定义相同。
[0079] 作为式V的一种优选实施方式，P为1，并且R5的取代位置如下式W结构R 5a所示：
[0080]
[0081] 其中，R5a选自？、(：1、8厂1、-(：001?6、-順1? 7或-302馬，其他取代基与式￥定义相同。
[0082] 本发明优选下述化合物：
[0084] 化学术语及定义
[0085] 本发明所述的"化合物"包括所有立体异构体、几何异构体、互变异构体和同位素。 [0086] 本发明化合物可以是不对称的，例如，具有一个或多个立体异构体。除非另有说 明，所有立体异构体都包括，如对映异构体和非对映异构体。本发明的含有不对称碳原子的 化合物可以以光学活性纯的形式或外消旋形式被分离出来。光学活性纯的形式可以从外消 旋混合物拆分，或通过使用手性原料或手性试剂合成。
[0087] 本发明化合物还包括互变异构体形式。互变异构体形式来源于一个单键与相邻的 双键交换并一起伴随一个质子的迀移。
[0088] 本发明还包括所有同位素的原子，无论是在中间体或最后的化合物。同位素的原 子包括具有相同的原子数，但不同质量数。例如，氢的同位素包括氚和氘。
[0089] 术语"卤素"是指氟、氯、溴或碘。
[0090] 术语"羟基"指-OH。
[0091] 术语"羧基"指-C00H。
[0092] 术语"氰基"指-CN。
[0093] 术语"横醜基"指-S02_烷基、_S02-环烷基和_S0 2-芳基。
[0094] 术语"氨基"是指-NH2、_NH (烷基）和-N (烷基）2，氨基的具体例子包括但不限于-NH2、-NHCH3、-NHCH (CH3) 2、-N (CH3) 2、-NHC2H5、-N (CH3) (：2115等 〇
[0095] 术语"烷基"是指由碳原子和氢原子组成的直链或支链的饱和脂肪烃基团，例如 甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。所述特定烷基包括其所有同 分异构体形式，例如丙基包括-ch2ch2ch3、-ch(ch 3)2，例如丁基包括-ch2ch2ch2ch 3、-ch(ch3) (ch2ch3)、-c(ch 3)3、-ch2ch(ch3)2〇术语"Ci 6烷基"指具有1-6个碳原子的烷基。术语"ci 4 烷基"指具有1-4个碳原子的烷基。术语"C13烷基"指具有1-3个碳原子的烷基。所述"烷 基"、"Ci 8烷基"、"Ci 6烷基"或"Ci 3烷基"可以是非取代的或是被一个或多个选自羟基、卤 素或氨基的取代基取代。
[0096] 术语"环烷基"是指由碳原子和氢原子组成的全碳单环的饱和烃基团，如C3 2。环烷 基，优选为C36环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。所述环烷基可以是非取代 的或是被取代的，所述的取代基包括但不限于烷基、烷基氧基、氰基、羧基、芳基、杂芳基、氨 基、卤素、磺酰基、亚磺酰基、磷酰基和羟基。
[0097] 术语"芳烃基"是指具有完全共辄的31电子体系的全碳单环或稠合环，其具有 6-14个碳原子，优选具有6-12个碳原子，最优选具有6个碳原子。芳基可以是非取代的或 被一个或多个取代基所取代，所述取代基的实例包括但不限于烷基、烷基氧基、芳基、芳烷 基、氨基、卤素、羟基、磺酰基、亚磺酰基、磷酰基和杂脂环基。非取代的芳基的非限制性实例 包括但不限于苯基、萘基和蒽基。
[0098] 术语"芳烃基烷基"指被如上文所定义的芳基取代的烷基，优选被芳基取代的 (；-6烷基。芳基烷基的非限制性实例包括但不限于-CH 2_苯基、-(CH2) 2_苯基、-(CH2) 3-苯 基、-CH(CH3)_ 苯基、-ch2-ch(ch3)-苯基、-(ch2)4-苯基、-ch 2-ch(ch3)-ch2-苯 基、-CH2 _CH2_CH (CH3)_ 苯基等。
[0099] 术语"杂芳基"是指5-12个环原子的单环或稠合环，具有5、6、7、8、9、10、11或12 个环原子，其中含有1、2、3或4个选自N、0、S的环原子，其余环原子为C，且具有完全共辄 的ji-电子体系。杂芳基可以是非取代的或取代的，所述的取代基包括但不限于烷基、烷基 氧基、芳基、芳烷基、氨基、卤素、羟基、氰基、硝基、羰基和杂脂环基。非取代的杂芳基的非限 制性实例包括但不限于吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、 吡嗪基、喹啉基、异喹啉基、四唑基、三嗪基。
[0100] 术语"杂芳基烷基"指被如上文所定义的杂芳基取代的烷基，优选被杂芳基取 代的c「6烷基。杂芳基烷基的非限制性实例包括但不限于-ch 2-吡唑基、-(ch2)2-吡啶 基、-(CH2) 3-噻吩基、-CH (ch3)-吡嗪基、-ch2-ch (ch3)-呋喃基等。
[0101] 术语"杂脂环"是指具有3-12个环原子的单环或稠合环，具有3、4、5、6、7、8、9、10、 11或12个环原子，其中1或2个环原子是选自N、0、S(0) n(其中n为0、1或2)的杂原子， 其余环原子为C。这样的环可以是饱和的或不饱和的（例如具有一个或多个双键），但是 不具有完全共辄的JT -电子体系。3元饱和杂脂环的实例包括但不限于
4元饱和杂脂环的实例包括但不限于
\5元饱和杂脂环的实例包括但 不限于
6元饱 和杂脂环的实例包括但不限于

7元饱和杂脂环的实例包括但不限于

5元不饱和杂脂环的实例包括但不限于 ;6元不饱和杂脂环的实例包括但不限于 1 X

[0102] 术语"杂脂环基"是指"杂脂环"分子去掉1个氢原子后余下的基团，杂脂环基可 以是非取代的或者其中的氢原子任选地被取代基取代，所述的取代基包括但不限于烷基、 烷氧基、=〇、芳基、芳烷基、-C00H、-CN、氨基、卤素或羟基。
[0103] 本发明还提供了一种制备式I所示化合物的方法，包括以下合成方案：
[0104] 合成方案1
[0106] 化合物1-6可以使用合成方案1合成。卤代的酚1-7与烷基卤、苄卤或芳卤（需金 属催化）在碱存在下得到卤代芳醚中间体1-1，中间体1-1经格氏试剂金属化后和Weinreb 酰胺反应，得到酮中间体1-2,中间体1-2经手性金属催化剂选择性还原得到化合物1-3,中 间体1-3经金属催化剂催化关环得到化合物1-4,中间体1-4的双键经硼氢化氧化得到醇化 合物1-5,中间体1-5的醇羟基经催化氧化得到化合物1-6。
[0107] 合成方案2
[0109] 化合物2-4可以使用合成方案2合成（q选自0、1或2)。并环取代的吡唑2-5与 N-碘代丁二酰亚胺反应得碘取代的中间体2-1，中间体2-1和氯烷基磺酰氯反应的得到中 间体2-2,中间体2-2先与锌粉金属化后金属催化闭环得化合物2-3,中间体2-3可被酸脱 去保护得化合物2-4。
[0110] 合成方案3
[0112] 化合物3-4可以使用合成方案3合成。4-溴邻苯二甲酰亚胺3-5经硼烷还原得到 中间体3-1，中间体3-1用Boc酸酐和碱上保护得到化合物3-2,中间体3-2与烷基亚磺酸 钠在亚铜和脯氨酸催化下得砜类化合物3-3,中间体3-3可用酸脱保护得化合物3-4。
[0113] 合成方案4
[0114]
[0115] 化合物4-2可以通过合成方案4合成。5-氨基-1-氧代异吲哚啉4-3与烷基磺酰 氯反应得到中间体4-1，中间体4-1经硼烷还原得到中间体4-2。
[0116] 合成方案5
[0118] 化合物5-4可以通过合成方案5合成。5-氨基-1-氧代异吲哚啉5-5与N-氯代 丁二酰亚胺反应得到中间体5-1，中间体5-1先重氮化再与碘化钾反应得到中间体5-2,再 与烷基亚磺酸钠在亚铜和脯氨酸催化下得砜类化合物5-3,中间体5-3经硼烷还原得到化 合物5-4。
[0119] 合成方案6
[0121] 化合物6-3可以通过合成方案6合成。5-氨基-1-氧代异吲哚啉6-4先重氮化再 与二氧化硫和氯化亚铜反应得到磺酰氯中间体6-1，中间体6-1与胺反应得到中间体6-2， 再经硼烷还原得到最终化合物6-3。
[0122] 合成方案7
[0123]
[0124] 化合物7-3可以通过合成方案7合成。酮7-4与胺7-5进行还原氨化反应得到中 间体7-1，再烷基磺酰氯反应得到中间体7-2,中间体7-2在酸性条件下脱除保护基得到最 终化合物7-3。
[0125] 合成方案8
[0127] 化合物8-2可以通过合成方案8合成。酮8-3与胺8-4进行还原氨化反应得到中 间体8-1，中间体8-1在酸性条件下脱除保护基得到最终化合物8-2。
[0128] 上述合成方案只是列举了本发明中部分化合物的制备方法，按照本领域的公知技 术，技术人员在上述合成方案的基础上，采用类似的方法也可合成本发明中的化合物。
[0129] 本发明的化合物或其盐可以作为活性物质单独给药，优选以其药物组合物的形式 给药。
[0130] 本发明另一方面提供一种药物组合物，其含有通式I的化合物或其药学上可接受 的盐、溶剂化物、多晶型、代谢物作为活性成份，以及一种或多种药学上可接受的载体。
[0131] "药物组合物"是指一种或多种本发明的化合物或其盐与在本领域中通常接受的 用于将生物活性化合物输送至有机体（例如人）的载体的制剂。药物组合物的目的是有利 于对有机体给予本发明的化合物。
[0132] "药学上可接受的载体"是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合 物的生物活性及性能的那些载体。"药学上可接受的载体"是指与活性成份一同给药的、有 利于活性成份给药的惰性物质，包括但不限于被美国食品药品管理局许可为可接受的用于 人或动物（例如家畜）的任何助流剂、增甜剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、矫味增强剂、 表面活性剂、润湿剂、分散剂、崩解剂、助悬剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。所述载体的 非限制性实例包括碳酸妈、磷酸钙、各种糖和各类淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙 二醇。
[0133] 以纯的形式或以适宜的药物组合物形式的本发明化合物或其药物可接受的盐的 给药可通过提供类似用途的药剂的任何可接受的给药模式来进行。本发明的药物组合物 可通过将本发明的化合物与适宜的药物可接受的载剂、稀释剂或赋形剂组合而制备。本发 明的药物组合物可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒 剂、膏剂、乳剂、悬浮剂、溶液剂、栓剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂、微球及气溶胶等等。
[0134] 给予本发明化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物的典型途径包括但不 限于口服、直肠、透黏膜、经肠给药，或者局部、经皮、吸入、肠胃外、舌下、阴道内、鼻内、目艮 内、腹膜内、肌内、皮下、静脉内给药。优选的给药途径是口服给药。
[0135] 本发明的药物组合物可以采用本领域周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、 制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法、冷冻干燥法等。
[0136] 在优选的实施方案中，药物组合物是口服形式。对于口服给药，可以通过将活性化 合物与本领域熟知的药学上可接受的载体混合，来配制该药物组合物。这些载体能使本发 明的化合物被配制成片剂、丸剂、锭剂、糖衣剂、胶囊剂、液体、凝胶剂、浆剂、悬浮剂等，用于 对患者的口服给药。
[0137] 可以通过常规的混合、填充或压片方法来制备固体口服药物组合物。例如，可通过 下述方法获得：将所述的活性化合物与固体赋形剂混合，任选地碾磨所得的混合物，如果需 要则加入其它合适的辅剂，然后将该混合物加工成颗粒，得到了片剂或糖衣剂的核心。适合 的辅料包括但不限于：粘合剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、甜味剂或矫味剂等。如微晶 纤维素、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶溶液、蔗糖和淀粉糊；滑石、淀粉、硬脂酸镁、硬脂酸 钙或硬脂酸；乳糖、蔗糖、淀粉、甘露糖醇、山梨糖醇或磷酸二钙；二氧化硅；交联羧甲基纤 维素钠、预交化淀粉、淀粉羟乙酸钠、藻酸、玉米淀粉、马铃薯淀粉、甲基纤维素、琼脂、羧甲 基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮等。可以根据通常药物实践中公知的方法任选地对糖衣剂 的核心进行包衣，尤其使用肠溶包衣。
[0138] 药物组合物还可适用于肠胃外给药，如合适的单位剂型的无菌溶液剂、混悬剂或 冻干产品。能够使用适当的赋形剂，例如填充剂、缓冲剂或表面活性剂。
[0139] 本发明再一方面涉及通式I的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶型、 代谢物等在治疗或预防受益于DPP-IV抑制的疾病的药物中的用途。所述的受益于DPP-IV 抑制的疾病选自胰岛素抵抗、高血糖症、II型糖尿病、糖尿病性脂血异常、葡萄糖耐量减低 (IGT)症、禁食血浆葡萄糖减低（IFG)症、代谢性酸中毒、酮症、食欲调节、肥胖症、各种癌 症、神经系统病症或免疫系统病症等，优选地包括II型糖尿病或肥胖症。
[0140] 本发明提供的取代的氨基六元杂脂环类化合物具有非常好的DPP-IV抑制活性， 其活性与进入III期临床的长效DPP-IV抑制剂Omarigliptin的活性相当或更优，并且具有 非常好的体内代谢水平和非常长的体内半衰期，有望成为更合适的长效DPP-IV抑制剂类 药物。
【附图说明】
[0141] 图1实施例4对大鼠血浆DPP-IV酶活性抑制离体实验结果。在口服剂量5毫克 每千克体重下，实施例4对大鼠血浆DPP-IV酶活性抑制到120小时仍能达到近50%，可以 满足长效的要求。
【具体实施方式】
[0142] 下面的具体实施例，其目的是使本领域的技术人员能更清楚地理解和实施本发 明。它们不应该被认为是对本发明范围的限制，而只是本发明的示例性说明和典型代表。本 领域技术人员应该理解：还有形成本发明化合物的其它合成途径，下面提供的是非限制性 的实施例。
[0143] 凡涉及易氧化或易水解的原料的所有操作都在氮气保护下进行。除非另有说明， 本发明使用的原料都是市场上直接买到未经进一步纯化直接使用的。
[0144] 柱层析色谱采用青岛化工有限公司生产的硅胶（200-300目）。薄层色谱采用 E. Merck公司生产的预制板（硅胶60PF254, 0. 25毫米）。手性化合物分离和对映体过量值 (ee)测定使用 Agilent LC 1200series (柱子：CHIRALPAK AD-H, 04.6x250 毫米，5 微米， 30°C)。核磁共振色谱（NMR)使用Varian VNMRS-400核磁共振仪测定；液质连用（LC/MS)使 用 FINNIGAN Thermo LCQ Advantage MAX，Agilent LC 1200series (柱子：Waters Symmetry C18, 04.6 x 50毫米，5微米，35°C )，采用ESI (+)离子模式。
[0145] 实验部分
[0146] 中间体1 :(21?，35)-2-(2,5-二氟苯基）-5-氧代四氢-211-吡喃-3-基氨基甲酸叔 丁酯
[0148] 步骤1 :2_(二苯甲基亚氨基）乙酸甲酯
[0149] 甘氨酸甲酯盐酸盐（39. 4g, 0. 314mol)溶于300mL二氯甲烧中，搅拌下一次性加 入二苯甲酮亚胺（50. 0g，0. 276mol)，反应液在室温下搅拌1天。过滤除掉生成的固体，滤 液分别用水、碳酸钠溶液、饱和盐水洗，蒸发浓缩得油状产物2-(二苯甲基亚氨基）乙酸 甲酯（64. 2g)冷却后固化，直接用于下步反应，收率：92%。iH-NMRGOOMHz，⑶Cl3): S = 7. 66 (2H，m)，7. 45 (4H，m)，7. 35 (2H，m)，7. 17 (2H，m)，4. 22 (2H，s)，3. 74 (3H，s)。
[0150] 步骤2 :2-(二苯甲基亚氨基）戊-4-炔酸甲酯
[0151] 搅拌条件下，向2-(二苯甲基亚氨基）乙酸甲酯（64.2心0.254!11〇1)、炔丙基溴 (27. 8mL，0. 322mol)和溴化四正丁胺（8. 66g，26. 9mmol)的甲基叔丁基醚溶液（600mL)中加 入碳酸铯（175. 4g，0. 538mol)。加毕在50°C搅拌反应2天。滤去固体，滤饼用少量甲基叔 丁基醚（MTBE)洗涤，滤液浓缩至300mL直接用于下步反应。iH-NMRGOOMHz，⑶C1 3):S = 7. 66 (2H, m), 7. 45 (4H, m), 7. 35 (2H, m), 7. 17 (2H, m), 4. 32 (1H, m), 3. 73 (3H, s), 2. 83 (2H, m), 1. 95 (1H, s) 〇
[0152] 步骤3 :2_(叔丁氧羰基氨基）戊-4-炔酸
[0153] 向上步所得浓缩溶液中加入IN盐酸280mL，室温搅拌直至TLC显示2-(二苯甲基 亚氨基）戊-4-炔酸甲酯消失，大约需要12小时。分去有机相，水相用甲基叔丁基醚萃取， 弃去有机相。水相加入50%氢氧化钠溶液（18. 75N，0. 712mol)，搅拌2小时。加入50mL 水，再加入Boc酸酐（61.0g，0. 28mol)的甲基叔丁基醚溶液（200mL)。混合物室温搅拌6 小时，冰浴冷却下用10%盐酸酸化至pH为3。分出有机相，水相用甲基叔丁基醚萃取，合 并有机相，干燥浓缩得到产物2-(叔丁氧羰基氨基）戊-4-炔酸（38. 8g)，两步收率72%。 'H-NMR (400MHz，CDC13) : S = 7. 65 (1H，brs)，5. 36 (1H，d，J = 8. 0Hz)，4. 52 (1H，m)，2. 77 (2H ，m)，2. 08(1H，s)，1. 46(9H，s)。
[0154] 步骤4 :2_(叔丁氧羰基氨基）戊-4-炔酰-(N-甲氧基-N-甲基）胺
[0155] 将2_(叔丁氧羰基氨基）戊-4-炔酸（20. 22g，94. 9mmol)溶于乙腈（200mL)， 再分别加入2-(7-偶氮苯并三氮唑）4州州'，^-四甲基脲六氟磷酸酯（拟1'1])(43.27 8， 113. 9mmol)，N, 0-二甲基羟胺盐酸盐（11. llg，113. 9mmol)和三乙胺（46. 2mL, 332. 2mmol)， 室温搅拌2小时。将反应液倾入1500mL水中，用乙酸乙酯萃取3次，合并有机相，依次用IN 盐酸、水、饱和碳酸氢钠溶液和饱和盐水洗，干燥浓缩后用硅胶柱层析（石油醚/乙酸乙酯， 5:1~4:1)得到产物2-(叔丁氧羰基氨基）戊-4-炔酰-(N-甲氧基-N-甲基）胺（19. 6g)， 收率 81%。iH-NMRGOOMHz，CDC13) : S = 5. 45(1H，d，J = 8. 0Hz)，4. 82(lH，m)，3. 77(3H，s) ，3. 24 (3H，s)，2. 66 (2H，m)，2. 04 (1H，s)，1. 45 (9H，s)。
[0156] 步骤5 :1- (2, 5_二氣苯基）-1-氧代戊_4_块_2_基氨基甲酸叔丁酯
[0157] 2, 5-二氣溴苯（11. 58g，60mmol)溶于 25mL 甲苯中，冷至-10 °C-5 °C。加入 溴化锂（2.61g，30mmol)，在1.5小时内滴入异丙基氯化镁的四氢呋喃溶液（2M，33ml， 66_〇1)，在低温下搅拌1小时。2-(叔丁氧羰基氨基）戊-4-炔酰-(N-甲氧基-N-甲 基）胺（7.68g，30mmol)溶于35mL四氢呋喃中，在1小时内滴入反应体系中，缓慢升至室 温，再于室温下搅拌1小时。向反应液中滴入3N盐酸22mL淬灭反应，有机相依次用水、饱 和碳酸氢钠溶液和饱和盐水洗，干燥浓缩后用硅胶柱层析（石油醚/乙酸乙酯，10:1)得 到产物1- (2, 5-二氟苯基）-1-氧代戊-4-炔-2-基氨基甲酸叔丁酯（6. 07g)，收率65 %。 'H-NMR (400MHz, CDC13) : 8 = 7. 56 (1H, m), 7. 26 (1H, m), 7. 15 (1H, m), 5. 68 (1H, d, J = 7. 6Hz )，5. 24 (1H, m)，2. 91 (1H, m)，2. 68 (1H, m)，1. 99 (1H, s)，1. 45 (9H, s)。
[0158] 步骤6 : (1R, 2S)_1_(2, 5_二氣苯基）_1_羟基戊_4_块_2_基氨基甲酸叔丁酯
[0159] 1_(2, 5-二氟苯基）-1_氧代戊-4-炔-2-基氨基甲酸叔丁酯（6. 07g，19. 7mmol)和 1，4-二氮杂二环[2. 2. 2]辛烷（DABCO) (6. 61g，59mmol)溶于70mL四氢呋喃中，通氮气30分 钟。加入（对伞花烃）（（1R，2R)-N-对甲苯磺酰基-1,2-二苯基乙二胺）氯化钌（I) (63mg， 0. lmmol)，通氮气/抽真空3次，氮气氛下向溶液中滴入甲酸（4. 53g，98. 5mmol)，在40°C搅 拌2天。加入二氯甲烧200mL，依次用5%梓檬酸溶液、饱和碳酸氢钠溶液和饱和盐水洗，干 燥浓缩后用硅胶柱层析（石油醚/乙酸乙酯，25:1-8:1)得到产物（1R，2S)-1-(2, 5-二氟苯 基）_1_羟基戊-4-炔-2-基氨基甲酸叔丁酯（6. llg)，收率100%。
[0160] 步骤7 : (2R, 3S) _2_ (2, 5-二氣苯基）-3, 4-二氢-2H-吡喃_3_基氨基甲酸叔丁酯
[0161] (1R, 2S)-1-(2, 5_二氣苯基）-1-羟基戊_4_块_2_基氨基甲酸叔丁酯（6. llg， 19. 6mmol)溶于60mL DMF中，通氮气30分钟。加入三（三（3-氟苯基）膦）氯化铑催化 剂（427mg，0. 393mmol)，通氮气/抽真空3次，氮气氛下在80°C搅拌16小时。冷却后加入 水和饱和碳酸氢钠溶液各150mL，用甲苯萃取，合并有机相，用水洗几次，干燥浓缩后用硅胶 柱层析（石油醚/乙酸乙酯，30:1-25:1)得到产物（2R，3S)-2-(2, 5-二氟苯基）-3, 4-二 氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯（4. 89g)，收率80 %。
[0162] 步骤8 : (2R, 3S) _2_ (2, 5_二氣苯基）_5_羟基四氛-2H-吡喃_3_基氛基甲酸叔丁 酯
[0163] (2R, 3S)-2_(2, 5-二氣苯基）_3, 4-二氢-2H-吡喃_3_基氨基甲酸叔丁酯（2. 81g， 9. 04mmol)溶于50ml四氢呋喃中，冷至-10°C，滴入硼烷-二甲硫醚络合物（2. 26mL， 22. 6mmol)，低温下搅拌2小时，升温至15 °C。向溶液中滴入IN氢氧化钠溶液（27. lmL， 27. lmmol)，加入高硼酸钠（4. 17g，27. lmmol)，搅拌过夜。加入100mL水，分出有机相， 水相用二氯甲烷萃取。合并有机相，水洗，干燥浓缩后用硅胶柱层析（二氯甲烷/甲醇， 30:1-12:1)得到产物（2R，3S) -2- (2, 5-二氟苯基）-5-羟基四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸 叔丁酯（2. 33g)白色固体，收率78%。
[0164] 步骤9 : (2R, 3S) _2_ (2, 5_二氣苯基）_5_氧代四氢-2H-吡喃_3_基氨基甲酸叔丁 酯
[0165] (2R, 3S) _2_ (2, 5_二氣苯基）_5_羟基四氛-2H-吡喃_3_基氛基甲酸叔丁 酯（2. 33g，7. 08mmol)溶于24mL乙腈、4mL水和4mL醋酸的混合溶液中，加入水合氯化 韦了（3. 7mg，0. 0142mmol)的水溶液（4mL)，冷至 0°C，加入溴酸钠（535mg，3. 54mmol)，低温 下搅拌约1. 5小时至原料反应完毕。向溶液中滴入120mL水，0°C搅拌过夜，用二氯甲烷 萃取。有机相水洗、干燥浓缩后用硅胶柱层析（石油醚/乙酸乙酯，10:1)得到中间体 1(21?，33)-2-(2,5-二氟苯基）-5-氧代四氢-211-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯（1.7]^)白色 固体，收率 74%。iH-NMRGOOMHz^DCU: S = 7.22(lH，m)，7.00(lH，m)，4.82(lH，m)，4.63 (1H, m), 4. 29 (1H, d, J = 16. 2Hz), 4. 11 (1H, d, J = 16. 4Hz), 4. 05 (1H, m), 3. 05 (1H, m), 2. 85 ( lH，m), 1. 30(9H, s)。
[0166] 中间体2:2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻 嗪-1，1二氧化物对甲苯磺酸盐
[0167]
[0168] 步骤1 :3_碘-4,6-二氢吡咯并[3, 4-c]吡唑-5 (2H)-羧酸叔丁酯
[0169] 把4,6-二氢吡咯并[3,4-(：]吡唑-5(211)-羧酸叔丁酯（9.418,45臟〇1)溶于2001^ 1，2-二氯乙烧中，加入N-碘代丁二酰亚胺（13. 16g，58. 5mmol)，回流过夜。蒸去溶剂后用 硅胶柱层析得3-碘-4,6-二氢吡咯并[3, 4-c]吡唑-5 (2H)-羧酸叔丁酯（4. 66g)，收率： 31%。MS m/z[ESI]:336.0[M+l]。
[0170] 步骤2 :2- (3-氯丙磺酰基）-3-碘-4,6-二氢吡咯并[3, 4-c]吡唑-5 (2H)-羧酸 叔丁酯
[0171] 把3-碘-4,6-二氢吡咯并[3,4-(：]吡唑-5(211)-羧酸叔丁酯（2.8(^，8.36臟〇1) 和三乙胺（1. 69g, 16. 7mmol)溶于四氢咲喃（80mL)中，冷至-10°C，滴入3-氯丙磺酰氯 (1.77g，10mm〇l)，低温下搅拌过夜。加入水（100mL)，用二氯甲烷萃取。有机相依次用柠檬 酸溶液、水、盐水洗，干燥蒸发浓缩后用硅胶柱层析得2- (3-氯丙磺酰基）-3-碘-4,6-二氢 吡咯并[3, 4-c]吡唑-5 (2H)-羧酸叔丁酯（2. 70g)，收率：68 %。4-匪1? (400MHz，CDC13) : S =4. 675 (2H，m)，4. 35 (2H，m)，3. 68 (4H，m)，2. 26 (2H，m)，1. 51 (9H，s)。
[0172] 步骤3:6-叔丁氧羰基-2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并 [1，5-b] [1，2]噻嗪-1，1 二氧化物
[0173] 将2- (3-氯丙磺酰基）-3-碘-4,6-二氢吡咯并[3, 4-c]吡唑-5 (2H)-羧酸 叔丁酯（230mg，0. 48mmol)、锌粉（126mg，1. 93mmol)、氯化锌的四氢咲喃溶液（0. 5M， 1.93mL，0. 97mmol)和四氢咲喃（20mL)加入微波反应管中，通入氮气5分钟。氮气氛下 l〇〇°C微波加热反应1.5小时。冷却后加入四（三苯基膦）钯（56mg，0.048mmol)，通入氮气 5分钟。氮气氛下l〇〇°C微波加热反应2小时。过滤，滤液蒸发浓缩后硅胶柱色谱分离得到 产物6-叔丁氧羰基-2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡咯并[3'，V :3, 4]吡唑并[1，5-b] [1，2]噻 嗪-1，1 二氧化物（23mg)，收率 15%。MS m/z[ESI] :314. 1[M+1]。iH-NMRGOOMHz, CDC13) : S =4. 36 (2H, m), 4. 11 (2H, m), 3. 70 (2H, m), 3. 35 (2H, m), 2. 26 (2H, m), L 47 (9H, s) 〇
[0174] 步骤 4:2, 3,4, 5,6, 7-六氢吡咯并[3' ，4' :3,4]吡唑并[1，5-b] [1，2]噻 嗪-1，1-二氧化物对甲苯磺酸盐
[0175] 将6-叔丁氧羰基-2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4' :3,4]吡唑并
[1，5_b] [1，2]噻嗪-1，1-二氧化物（46mg，0? 15mmol)溶于1. 5mL乙酸乙酯中，加入 对甲苯磺酸（47mg，0. 30mmol)，室温搅拌过夜。过滤收集生成的固体，用乙酸乙酯洗， 干燥后得到产物2,3,4,5,6,7_六氢吡咯并[3' ，4' :3,4]吡唑并[l，5-b][l，2] 噻嗪-1，1-二氧化物对甲苯磺酸盐（48mg)，收率83 %。MS m/z [ESI] : 214. 1 [M+1]。 匪R(400MHz, DMS0-d6) : S = 9. 40 (2H, brs)，7. 48 (2H, d，J = 8. OHz)，7. 12 (2H，d， J = 8. OHz)，4. 27 (2H，s)，4. 08 (2H，s)，3. 77 (2H，t，J = 6. 6Hz)，3. 45 (2H，t，J = 7. 4Hz)，2. 29 (3H，s)，2. 16 (2H，m)。
[0176] 中间体3 :3-甲基-2,4, 5,6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑
[0177]
[0178] 步骤1 :3_甲基-2-((2-(三甲基硅基）乙氧基）甲基）-4,6-二氢吡咯并[3, 4-c] 吡唑-5 (2H)-羧酸叔丁酯
[0179] 把2-((2_(三甲基硅基）乙氧基）甲基）_4,6_二氢吡咯并[3, 4-c]吡 P坐-5(2H)-羧酸叔丁酯（3.0g，8.85mmol)溶于干燥的四氢咲喃（60mL)中，冷至_78°C，滴 入丁基锂的四氢呋喃溶液（2.4M，5. 5mL，13. 2mmol)，低温下搅拌1.5小时。滴入碘甲烷 (1. 90g，13. 2mmol)，低温下搅拌5小时。升至室温，加入水（50mL)，用乙酸乙酯萃取。有机相 干燥蒸发浓缩后用硅胶柱层析得3-甲基-2-((2-(三甲基硅基）乙氧基）甲基）-4,6_二氢 吡咯并[3, 4-c]吡唑-5 (2H)-羧酸叔丁酯（1. 5g)，收率：48 %。MS m/z [ESI] : 354. 2 [M+1]。
[0180] 步骤2 :3_甲基-2,4, 5,6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑
[0181] 将3-甲基-2-((2-(三甲基硅基）乙氧基）甲基）-4,6-二氢吡咯并[3, 4-c]吡 唑-5(2H)_羧酸叔丁酯（1. lg，3. 12mmol)溶于20mL乙醇中，加入1N盐酸（40mL)，封管中 90°C反应3小时。冷却后用氢氧化钠溶液调pH至13。浓缩后用硅胶柱层析得到产物3-甲 基-2,4,5,6-四氢吡咯并[3,4-(：]吡唑（28〇11^)，收率 ：73%。]^111/2[￡31]:124.1[]\1+1]。
[0182] 中间体4 :5_甲磺酰基异吲哚啉盐酸盐
[0184] 步骤1 :5_溴异吲哚啉
[0185] 把4-溴邻苯二甲酰亚胺（22. 6g, lOOmmol)加入干燥的四氢咲喃（250mL)中，滴入 硼烷-二甲硫醚络合物（51mL，500_〇1)，室温下搅拌2小时，再回流过夜。冷却后小心滴入 甲醇破坏过量的硼烷。蒸发浓缩后用硅胶柱层析得5-溴异吲哚啉（10. 36g)，收率：52%。 MS m/z[ESI]:198. 0[M+1]〇
[0186] 步骤2 :5_漠_2_叔丁氧幾基异H引噪琳
[0187] 将5-溴异吲哚啉（10. 36g，52. 3mmol)溶于80mL二氯甲烷中，冰浴冷却。滴加Boc 酸酐（22. 8g，104. 6mmol)，再加入碳酸钠（16. 6g，156. 9mmol)和水（150mL)，冰浴下搅拌4 小时。分出有机相，盐水洗。浓缩后用硅胶柱层析得到产物5-溴-2-叔丁氧羰基异吲哚啉 (13. 3g)，收率：85 %。MS m/z [ESI]: 298.0 [M+ljZH-NMR (400MHz，CDC13): S = 7.37 (2H，m)， 7. 11 (1H, m)，4. 62 (4H, m)，1. 51 (9H，s)
[0188] 步骤3 :5-甲磺酰基-2-叔丁氧羰基异吲哚啉
[0189] 把5-溴-2-叔丁氧羰基异吲哚啉（5. 96g，20mmol)、甲基亚磺酸钠（90 %， 2. 94g, 26mmol)、鹏化亚铜（762mg, 4mmol)和 L-腫氨酸（920mg, 8mmol)加入二甲亚讽 (80mL)中，通入氮气排除空气，于120°C下搅拌2天。冷却后倾入水中，用乙酸乙酯萃取。 有机相干燥蒸发浓缩后用硅胶柱层析得5-甲磺酰基-2-叔丁氧羰基异吲哚啉（5. 46g)，收 率：92 %。MS m/z[ESI]:298. 1[M+1]。
[0190] 步骤4 :5_甲磺酰基异吲哚啉盐酸盐
[0191] 将5-甲磺酰基-2-叔丁氧羰基异吲哚啉（5.46g，18.4mmol)溶于甲醇/二氯甲 烷（l:l，80mL)中，通入氯化氢气体至饱和，室温搅拌1小时。倾入800mL乙醚中，过滤收 集沉淀，乙醚洗，干燥，得到产物5-甲磺酰基异吲哚啉盐酸盐（3. 44g)，收率：80%。MS m/ z [ESI]: 198. 0 [M+1]。4-匪1? (400MHz，CDC13): S = 7.82 (lH，s)，7.81 (lH，d，J = 8.0Hz)， 7. 43 (1H, d，J = 8. 0Hz)，4. 31 (4H, s)，3. 05 (3H, s)，2. 30 (2H, brs)
[0192] 中间体5 :5-甲磺酰胺基异吲哚啉
[0194] 步骤1 :1-氧代-5-甲磺酰胺基异吲哚啉
[0195] 把5-氨基异吲噪啉-1-酮（444mg, 3mmol)溶于15mL吡啶中，加入甲基磺酰氯 (378mg，3. 3_〇1)，室温搅拌4小时。蒸去溶剂后用硅胶柱层析得1-氧代-5-甲磺酰胺基 异吲哚啉（610mg)，收率：90%。MS m/z[ESI]:227.0[M+l]。
[0196] 步骤2 :5_甲磺酰胺基异吲哚啉
[0197] 把1-氧代-5-甲磺酰胺基异吲噪啉（610mg, 2. 7mmol)溶于四氢咲喃（10mL)中，加 入硼烷的四氢呋喃溶液（1M，8. lmL，8. 1_〇1)，室温下搅拌2小时，再回流过夜。冷却后小心 滴入甲醇破坏过量的硼烷。蒸发浓缩后用硅胶柱层析得5-甲磺酰胺基异吲哚啉（315mg)， 收率：55%。MS m/z[ESI]:213.1[M+l]。
[0198] 中间体6 :4_氯-5-甲磺酰基异吲哚啉
[0200] 步骤1 :4_氯-5-氨基异吲哚啉-1-酮
[0201] 5-氨基异吲哚啉-1-酮（2. 96g, 20mmol)加入氯仿（50mL)中，再加入N-氯代丁二 酰亚胺（2. 67g，20mmol)，回流搅拌2小时。蒸发浓缩后用硅胶柱层析得4-氯-5-氨基异吲 哚啉-1-酮（2. 58g)，收率：70 %。MS m/z [ESI] : 183. 0 [M+1]。
[0202] 步骤2 :4_氯-5-碘异吲哚啉-1-酮
[0203] 将4-氯-5-氨基异吲哚啉-1-酮（2. 58g，14mmol)加入15mL 2M硫酸中，冰浴冷 却。滴加亚硝酸钠（〇. 97g，28mmol)和水（1.5mL)配成的溶液，低温下搅拌30分钟。再加 入碘化钾（11. 62g，70mmol)，冰浴下搅拌2小时，室温搅拌2小时。用二氯甲烷萃取，有机相 水洗，盐水洗。浓缩后用硅胶柱层析得到产物4-氯-5-碘异吲哚啉-1-酮（2. 48g)，收率： 60%。MS m/z [ESI]: 293.9 [M+l]。i-NMR (400MHz，CDC13):S =8.01 (lH，d，J = 8.0Hz)， 7. 49 (1H, d，J = 8. 0Hz)，4. 44 (4H, m)。
[0204] 步骤3 :4_氯-5-甲磺酰基异吲哚啉-1-酮
[0205] 4-氯-5-碘异吲噪啉-1-酮（1. 76g, 6mmol)、甲基亚磺酸钠（90 %， 0? 884g, 7. 8mmol)、鹏化亚铜（229mg, 1. 2mmol)和 L-腫氨酸（276mg, 2. 4mmol)加入二甲亚 砜（25mL)中，通入氮气排除空气，于110°C下搅拌2天。冷却后倾入水中，用乙酸乙酯萃取。 有机相干燥蒸发浓缩后用硅胶柱层析得4-氯-5-甲磺酰基异吲哚啉-1-酮（1. 03g)，收率： 70%。MS m/z[ESI]:246.0[M+l]。
[0206] 步骤4 :4_氯-5-甲磺酰基异吲哚啉
[0207] 将4-氯-5-甲磺酰基异吲噪啉-1-酮（249mg，lmmol)溶于四氢咲喃（10mL)中，加 入硼烷的四氢呋喃溶液（1M，4mL，4_〇1)，室温下搅拌2小时，再回流过夜。冷却后小心滴入 甲醇破坏过量的硼烷。蒸发浓缩后用硅胶柱层析得4-氯-5-甲磺酰基异吲哚啉（170mg)，收 率：73 %。MS m/z [ESI] : 232. 0 [M+1]。4-匪1? (400MHz，CDC13) : S = 8. 08 (1H，d，J = 8. 0Hz)， 7. 32 (1H, d，J = 8. 0Hz)，4. 30 (4H, m)，3. 32 (3H, s)，2. 80 (1H, brs)。
[0208] 中间体7 :异吲哚啉-5-磺酰胺
[0210] 步骤1 :1_氧代异吲哚啉-5-磺酰氯
[0211] 把5-氨基异吲哚啉-1-酮（5. 92g，40mmol)加入浓盐酸/冰醋酸（13. 3/4. OmL) 混合溶剂中，冰浴冷却。滴加亚硝酸钠（3. 04g，28mmol)和水（4. 4mL)配成的溶液，低温下 搅拌30分钟。同时在另一烧瓶中加入冰醋酸，通二氧化硫至饱和，加入氯化亚铜（0.99g， lOmmol)，搅拌下继续通二氧化硫至固体基本全溶。慢慢滴入上面制得的重氮盐溶液，低温 搅拌半小时，室温搅拌1小时。二氯甲烷萃取，水洗，干燥，旋干得1-氧代异吲哚啉-5-磺 酰氯（8. 33g)，收率：90 %。MS m/z [ESI] : 232. 0 [M+1]。
[0212] 步骤2 :1_氧代异吲哚啉-5-磺酰胺
[0213] 将1-氧代异吲哚啉-5-磺酰氯（463mg，2mmol)加入20mL乙腈中。滴加浓氨水 (lmL，12mmol)搅拌3小时。用6N盐酸中和至中性。旋蒸除去乙腈，残留物加水过滤，滤饼 用水、乙酸乙酯洗，干燥，得到产物1-氧代异吲哚啉-5-磺酰胺（288mg)，收率：68%。MS m/ z[ESI] :213. 0[M+1]。
[0214] 步骤3 :异H引噪琳_5_横醜胺
[0215] 将1-氧代异吲噪啉-5-磺酰胺（288mg，1. 36mmol)溶于四氢咲喃（15mL)中，加入 硼烷的四氢呋喃溶液（1M，6. 8mL，6. 8_〇1)，室温下搅拌2小时，再回流过夜。冷却后小心滴 入甲醇破坏过量的硼烷。蒸发浓缩后用硅胶柱层析得异吲哚啉-5-磺酰胺（162mg)，收率： 60%。MS m/z[ESI]:199.0[M+l]。
[0216] 中间体8 :5_环丙磺酰基异吲哚啉盐酸盐
[0218] 步骤1 :5_环丙磺酰基-2-叔丁氧羰基异吲哚啉
[0219] 把5-溴-2-叔丁氧羰基异吲哚啉（2. 98g，lOmmol)、环丙基亚磺酸钠（90 %， 1. 85g, 13mmol)、鹏化亚铜（381mg, 2mmol)和 L-腫氨酸（460mg, 4mmol)加入二甲亚讽 (40mL)中，通入氮气排除空气，于110°C下搅拌2天。冷却后倾入水中，用乙酸乙酯萃取。有 机相干燥蒸发浓缩后用硅胶柱层析得5-环丙磺酰基-2-叔丁氧羰基异吲哚啉（2. 30g)，收 率：71%。MS m/z[ESI]:324. 1[M+1]。
[0220] 步骤4 :5_环丙磺酰基异吲哚啉盐酸盐
[0221] 将5-环丙磺酰基-2-叔丁氧羰基异吲哚啉（2. 30g，7. lmmol)溶于甲醇/二氯甲 烷（1: 1，40mL)中，通入氯化氢气体至饱和，室温搅拌2小时。倾入250mL乙醚中，过滤收集 沉淀，乙醚洗，干燥，得到产物5-环丙磺酰基异吲哚啉盐酸盐（1.85g)，收率：100%。MS m/ z[ESI] :224. 1[M+1]。
[0222] 实施例 1 : (2R，3S，5R) -5- (2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡咯并[3 ' ，4 ' : 3, 4]吡唑并
[1，5-b] [1，2]噻嗪-1，1-二氧化物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-胺
[0223]
[0224] 步骤 1 : (2R，3S，5R) -5- (2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡咯并[3 '，4 ' : 3, 4]吡唑并
[1，5-b] [1，2]噻嗪-1，1-二氧化物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨 基甲酸叔丁酯
[0225]
[0226] 将（2R, 3S) _2_ (2, 5_二-氣苯基）_5_氧代四氢-2H-吡喃_3_基氨基甲酸叔 丁酯（48mg，0? 146mmol)、2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡咯并[3 ' ，4 ' : 3, 4]吡唑并[1，5_b]
[1，2]噻嗪-1，1二氧化物对甲苯磺酉爱盐（48mg，0. 13mmol)和三乙胺（10mg，0. lmmol)加 入N，N-二甲基乙酰胺（2mL)中，室温搅拌3小时。冰浴冷却，加入三乙酰氧基硼氢化 钠（87mg，0.39mmol)，缓慢升至室温，搅拌过夜。加入饱和碳酸氢钠溶液，用二氯甲烷萃 取，饱和盐水洗，干燥，浓缩，柱层析纯化，得到（2R，3S，5R) -5- (2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡咯并 [3'，4' :3,4]吡唑并[l，5-b][l，2]噻嗪 _1，1 二氧化物-6-基）-2-(2,5_ 二氟苯基） 四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯（48mg)，收率：71%。MS m/z[ESI]:525. 2[M+1]。4 NMR (400MHz, CDC13) : S = 7. 20 (1H，m)，6. 98 (2H，m) 4. 53 (1H，m)，4. 16 (4H，m)，4. 02 (2H， m)，3. 64 (2H，m)，3. 32 (3H，m)，2. 80 (2H，m)，2. 56 (2H，m)，2. 39 (1H，m)，1. 45 (1H，m)，1. 26 (9H， s) 〇
[0227] 步骤 2 : (2R，3S，5R) -5- (2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡咯并[3 '，4 ' : 3, 4]吡唑并
[1，5-b] [1，2]噻嗪-1，1-二氧化物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-胺
[0228]
[0229] 将 5-(2,3,4,5,6,7_ 六氢吡咯并[3 ' ，4 ' :3,4]吡唑并[l，5_b][l，2]噻 嗪-1，1二氧化物-6-基）-2-(2,5_二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁 酯（(45mg，0.086mmol)、一水对甲苯磺酸（75mg，0.43mmol)加入二氯甲烷（lmL)中，室 温下搅拌过夜。加入饱和碳酸氢钠溶液，用二氯甲烷萃取，旋干溶剂，柱层析纯化，得 到（21?，35,51?)-5-(2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4' :3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻 嗪-1，1-二氧化物-6-基）-2-(2,5-二氟苯基）四氢-211-吡喃-3-胺（151^)，收率42%肩3 m/z[ESI]:425.1[M+l]。虫 NMR (400MHz, CDC13) =7.14 (lH，m), 7.01 (2H，m), 4.18 (4H， m)，4. 03 (2H，m)，3. 66 (2H，m)，3. 32 (3H，m)，2. 80 (2H，m)，2. 56 (2H，m)，2. 35 (1H，m)，1. 38 (1H， m), 1. 26 (2H, brs) 〇
[0230] 实施例 2 :5-((3R，5S，6R)-5-氨基-6-(2,5-二氟苯基）四氢-2H-吡 喃-3-基）-3-甲基-1-甲磺酰基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑
[0231]
[0232] 步骤1:5-((31?，53,61?)-5-叔丁氧羰基氨基-6-(2,5-二氟苯基）四氢-211-吡 喃-3-基）-3-甲基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑
[0233]
[0234] 将（2R, 3S) _2_ (2, 5_二氣苯基）_5_氧代四氢-2H- R比喃_3_基氨基甲酸叔丁 酯（327mg，lmmol)、3-甲基 _2,4,5,6_ 四氢吡咯并[3,4-c]吡唑（123mg，lmmol)和冰醋 酸（30mg，0.5mmol)加入1，2_二氯乙烷（10mL)中，室温搅拌2小时。冰浴冷却，加入三乙 酰氧基硼氢化钠（672mg，3mmol)，缓慢升至室温，搅拌过夜。加入饱和碳酸氢钠溶液，用二 氯甲烷萃取，饱和盐水洗，干燥，浓缩，柱层析纯化，得到5- ((3R，5S，6R) -5-叔丁氧羰基氨 基-6-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基）-3-甲基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c] 吡唑（145mg)，收率：33%。MS m/z[ESI]:435.2[M+l]。
[0235] 步骤2:5-((31?，53,61?)-5-叔丁氧羰基氨基-6-(2,5-二氟苯基）四氢-211-吡 喃-3-基）-3-甲基-1-甲磺酰基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑
[0236]
[0237] 将5- ((3R，5S，6R) -5-叔丁氧羰基氨基-6- (2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡 喃-3-基）-3_ 甲基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑（（145mg，0? 33mmol)、三 乙胺（53mg, 0? 53mmol)加入四氢咲喃（10mL)中，冰浴冷却，加入甲基磺酰氯（49mg， 0. 43mmol)，搅拌反应2小时。倾入水中，加入二氯甲烷萃取，有机相干燥，柱层析纯化，得 到5- ((3R, 5S, 6R) _5_叔丁氧幾基氨基_6_ (2, 5-二氣苯基）四氢-2H-吡喃_3_基）_3_甲 基-1-甲磺酰基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑（16mg)，收率：9. 5 %。MS m/ z[ESI]:513.2[M+l]。4 NMR(400MHz，CDC13):S = 7.21(lH，m)，6.96(2H，m)，4.52(lH， m)，4. 37-4. 20 (2H，m)，4. 08 (2H，m)，3. 75 (3H，m)，3. 39 (1H，m)，3. 28 (3H，s)，3. 07 (1H， m)，2. 48 (1H，m)，2. 26 (3H，s)，1. 53 (1H，m)，1. 27 (9H，s)。
[0238] 步骤3:5_((31?，53,61?)-5-氛基-6-(2,5-二氣苯基）四氛-211-[1比喃-3-基）-3-甲 基-1-甲磺酰基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑
[0239]
[0240] 将5- ((3R，5S，6R) -5-叔丁氧羰基氨基-6- (2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡 喃-3-基）-3-甲基-1-甲磺酰基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑（（16mg，0? 031mmol)、 苯磺酸（20mg，0. 125mmol)加入二氯甲烷（0? 7mL)中，室温下搅拌过夜。加入三乙胺 (23mg，0? 228mmol)，旋干溶剂，柱层析纯化，得到5- ((3R，5S，6R) -5-氨基-6- (2, 5-二氟苯 基）四氢-2H-吡喃-3-基）-3_甲基-1-甲磺酰基-1，4, 5, 6-四氢吡咯并[3, 4-c]吡唑 (1.7mg)，收率 13%，MS m/z[ESI]:413.2[M+l]。4 NMR(400MHz，CDC13):S =7.16(1H， m)，7. 01 (2H，m)，4. 30 (1H，m)，4. 22 (1H，m)，4. 10 (1H，m)，3. 90-3. 70 (3H，m)，3. 42 (1H， m)，3. 27 (3H，s)，3. 02 (2H，m)，2. 48 (2H，m)，2. 26 (3H，s)，2. 00 (1H，m)，1. 60 (1H，m)。
[0241] 实施例 3 :5-((3R，5S，6R)-5-氨基-6-(2,5-二氟苯基）四氢-2H-吡 喃-3-基）-5, 6-二氢-4H-噻吩并[3, 2-c]吡咯-2-羧酸
[0242]
[0243] 步骤1:5-((31?，53,61?)-5-叔丁氧羰基氨基-6-(2,5-二氟苯基）四氢-211-吡 喃-3-基）-5, 6-二氢-4H-噻吩并[3, 2-c]吡咯-2-羧酸
[0244]
[0245] 参照实施例1中步骤1的方法，用5, 6-二氢-4H-噻吩并[3, 2-c]吡咯-2-羧酸 盐酸盐（市售）代替2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡咯并^，V : 3, 4]吡唑并[1，5-b] [1，2]噻 嗪-1，1二氧化物对甲苯磺酸盐，得到目标化合物，收率：44%。MS m/z[ESI] :481. 1[M+1]。 巾 NMR (400MHz，CDC13) : S = 9. 22 (1H，s)，7. 56 (1H，s)，7. 11 (1H，m)，6. 96 (2H，m)，4. 55 (1H， m)，4. 30 (2H，m)，4. 12 (2H，m)，3. 96 (2H，m)，3. 80 (1H，m)，3. 47 (1H，m)，3. 05 (1H，m)，2. 52 (1H， m), 1. 58(1H，m), 1. 26(9H，s)。
[0246] 步骤 2 :5-((3R，5S，6R)_5-氨基-6_(2,5-二氟苯基）四氢-2H-吡 喃-3-基）-5, 6-二氢-4H-噻吩并[3, 2-c]吡咯-2-羧酸
[0247]
[0248] 参照实施例1中步骤2的方法，用5- ((3R，5S，6R) -5-叔丁氧羰基氨基-6- (2, 5-二 氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基）-5, 6-二氢-4H-噻吩并[3, 2-c]吡咯-2-羧酸代替 5-(2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧化 物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯，得到目标化合物， 收率 61 %，MS m/z[ESI]:381.1[M+l]。4 NMR(400MHz，DMS0-d6) = 7.35-7.10(3H， m)，7. 06 (1H，s)，4. 12 (2H，m)，3. 90 (2H，m)，3. 76 (2H，m)，3. 23 (1H，m)，2. 82 (2H，m)，2. 28 (1H， m), 1. 37(1H，m) 〇
[0249] 实施例4 : (2R，3S，5R)-5-(5-甲磺酰基异吲哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四 氢-2H-吡喃_3_胺
[0250]
[0251] 步骤1 :(2R，3S，5R)-5-(5-甲磺酰基异吲哚啉-2-基）-2-(2,5_二氟苯基）四 氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯
[0252]
[0253] 参照实施例1中步骤1的方法，用5-甲磺酰基异吲哚啉盐酸盐代替 2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧化物对甲 苯磺酸盐，得到目标化合物，收率：541ms m/z [ESI]: 509.2 [M+l]。1!! NMR (400MHz, CDC13): 8 = 7. 83 (1H, d, J = 8. 0Hz), 7. 82 (1H, s), 7. 42 (1H, d, J = 8. 0Hz), 7. 24 (1H, m), 6. 97 (2H, m), 4. 50 (1H, m), 4. 32 (2H, m), 4. 08 (4H, m), 3. 80 (1H, m), 3. 43 (1H, t, J = 10. 6Hz), 3. 04 (3H, s)，2. 95 (1H，m)，2. 54 (1H，m), 1. 54 (1H，m), 1. 28 (9H，s)。
[0254] 步骤2 :(2R，3S，5R)-5_(5-甲磺酰基异吲哚啉-2-基）-2_(2,5-二氟苯基）四 氢-2H-吡喃_3_胺
[0255]
[0256] 参照实施例1中步骤2的方法，用（2R，3S，5R)-5-(5-甲磺酰基异吲 哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯代替 5-(2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧 化物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯，得到目标化 合物，收率 68%，MS m/z[ESI]:409.1[M+l]。虫 NMR(400MHz，CDC13):S =7.83(lH，d， J = 8. OHz)，7. 82 (1H，s)，7. 42 (1H，d，J = 8. OHz)，7. 17 (1H，m)，7. 02 (2H，m)，4. 28 (1H， m)，4. 24 (2H，d，J = 9. 6Hz)，4. 09 (4H，m)，3. 45 (1H，m)，3. 04 (3H，s)，2. 92 (2H，m)，2. 49 (1H， m), 1. 47(1H，m)，1. 30(2H，brs)。
[0257] 实施例5 : (2R，3S，5R)-5-(5-甲磺酰胺基异吲哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基） 四氢-2H-吡喃-3-胺
[0258]
[0259] 步骤1 : (2R，3S，5R)-5-(5-甲磺酰胺基异吲哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四 氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯
[0260]
[0261] 参照实施例1中步骤1的方法，用5-甲磺酰胺基异吲哚啉代替2, 3, 4, 5, 6, 7-六 氢吡咯并[3'，4' :3, 4]吡唑并[1，5-b] [1，2]噻嗪-1，1二氧化物对甲苯磺酸盐，收率： 50%。MS m/z[ESI]:524.2[M+l]。
[0262] 步骤2 : (2R，3S，5R)-5-(5-甲磺酰胺基异吲哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四 氢-2H-吡喃_3_胺
[0263]
[0264] 参照实施例1中步骤2的方法，用（2R，3S，5R) -5- (5-甲磺酰胺基异吲 哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯代替 5-(2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧化 物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯，得到目标化合物， 收率 57%，MS m/z[ESI]:424.1[M+l]。4 NMR(400MHz，CDC13) = 7.24(lH，m)，7.17(lH， m)，7. 07-6. 90 (4H，m)，5. 35 (1H，s)，4. 35-4. 20 (2H，m)，4. 08 (4H，m)，3. 65 (2H，m)，3. 00 (3H， s)，2. 82 (1H，m)，2. 32 (1H，m)，1. 47 (1H，m)，1. 25 (2H，brs)。
[0265] 实施例6 : (2R，3S，5R) -5- (5-溴异吲哚啉-2-基）-2- (2, 5-二氟苯基）四 氢-2H-吡喃_3_胺
[0266]
[0267] 步骤1:(21?，33,51?)-5-(5-溴异吲哚啉-2-基）-2-(2,5-二氟苯基）四氢-211-吡 喃-3-基氨基甲酸叔丁酯
[0268]
[0269] 参照实施例1中步骤1的方法，用5-溴异吲哚啉代替2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡咯 并[3'，4' :3,4]吡唑并[l，5-b][l，2]噻嗪_1，1二氧化物对甲苯磺酸盐，得到目标 化合物，收率：62%。MS m/z[ESI]:509.1[M+l]。4 NMR(400MHz，CDC13) =7.36(1H， s)，7. 34 (1H，d，J = 8. 0Hz)，7. 23 (1H，m)，7. 09 (1H，d，J = 8. 0Hz)，6. 97 (2H，m)，4. 49 (1H， m)，4. 30 (2H，m)，3. 94 (4H，m)，3. 79 (1H，m)，3. 42 (1H，t，J = 10. 8Hz)，2. 92 (1H，m)，2. 52 (1H， d，J = 10. 8Hz)，1. 54 (1H，m)，1. 27 (9H，s)。
[0270] 步骤2:(21?，33,51?)-5-(5-溴异吲哚啉-2-基）-2-(2,5-二氟苯基）四氢-211-吡 喃-3_胺
[0271]
[0272] 参照实施例1中步骤2的方法，用（2R，3S，5R)-5_(5-溴异吲哚 啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯代替 5-(2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧化 物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯，得到目标化合物， 收率 69%，MS m/z[ESI]:409.1[M+l]。4 NMR(400MHz，CDC13) = 7.37(lH，s)，7.34(lH， d，J = 8. OHz)，7. 15 (1H，m)，7. 10 (1H，d，J = 8. OHz)，7. 02 (2H，m)，4. 27 (1H，m)，4. 22 (1H， d，J = 9. 2Hz)，3. 99 (4H，m)，3. 79 (1H，m)，3. 42 (1H，t，J = 10. 8Hz)，2. 87 (2H，m)，2. 47 (1H， d，J = 10. 8Hz)，1. 48 (1H，m)，1. 32 (2H，brs)。。
[0273] 实施例7 : (2R，3S，5R) -5- (4-氯-5-甲磺酰基异吲哚啉-2-基）-2- (2, 5-二氟苯 基）四氢-2H-吡喃-3-胺
[0274]
[0275] 步骤1 : (2R, 3S, 5R) _5_ (4_氣_5_甲横醜基异H引噪琳_2_基）_2_ (2, 5_二氣苯基） 四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯
[0276]
[0277] 参照实施例1中步骤1的方法，用4-氯-5-甲磺酰基异吲哚啉代替 2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧化物对甲 苯磺酸盐，得到目标化合物，收率：56%。MS m/z [ESI] : 543. 1 [M+1]。
[0278] 步骤2 : (2R，3S，5R) -5- (4-氯-5-甲磺酰基异吲哚啉-2-基）-2- (2, 5-二氟苯基） 四氢-2H-吡喃-3-胺
[0279]
[0280] 参照实施例1中步骤2的方法，用
（2R，3S，5R) -5- (4-氯-5-甲磺酰基异 吲哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯代替 5-(2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧 化物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯，得到目标化 合物，收率 47%，MS m/z[ESI]:443.1[M+l]。虫 NMR(400MHz，CDC13):S =8.06(lH，d， J = 7. 6Hz)，7. 33 (1H，d，J = 7. 6Hz)，7. 19 (1H，m)，6. 99 (2H，m)，4. 69 (1H，m)，4. 22 (4H， m)，3. 71 (1H，m)，3. 33 (1H，m)，3. 27 (3H，s)，2. 91 (1H，m)，2. 61 (2H，m)，1. 52 (1H，m)，1. 32 (2H， brs) 〇
[0281] 实施例8:2-((31?，53,61?)-5-氨基-6-(2,5-二氟苯基）四氢-211-吡喃-3-基） 异吲哚啉-5-磺酰胺
[0282]
[0283] 步骤1 :2_((3R, 5S, 6R) _5_叔丁氧幾基氛基_6_(2, 5_二氣苯基）四氛_2H_ P比 喃-3-基）异吲哚啉-5-磺酰胺
[0284]
[0285] 参照实施例1中步骤1的方法，用异吲哚啉-5-磺酰胺盐酸盐代替 2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧化物对甲 苯磺酸盐，得到目标化合物，收率：46%。MS m/z[ESI]:510. 2[M+1]。
[0286] 步骤 2 :2_ ((3R，5S，6R) -5-氨基-6- (2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基）异 吲哚啉-5-磺酰胺
[0287]
[0288] 参照实施例1中步骤2的方法，用2- ((3R，5S，6R) -5-叔丁氧羰基氨基-6- (2, 5-二 氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基）异吲哚啉-5-磺酰胺代替5-(2, 3, 4, 5, 6, 7-六氢吡 咯并[3' ，4' :3,4]吡唑并[l，5-b][l，2]噻嗪 _1，1 二氧化物-6-基）-2-(2,5_ 二 氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯，得到目标化合物，收率37%，MS m/ z[ESI]:410.1[M+l]。虫 NMR(400MHz，CDC13) = 7.81(lH，d，J = 7.6Hz)，7.80(lH， s)，7. 37 (1H，d，J = 7. 6Hz)，7. 17 (1H，m)，7. 02 (2H，m)，4. 79 (2H，brs)，4. 28 (1H，d，J =9. 6Hz), 4.23 (lH，d，J = 9. 6Hz), 4.07 (4H，m), 3.43 (lH，t，J = 10.8Hz) ,2.90 (2H， m)，2. 49 (1H，m)，1. 49 (1H，m)，1. 31 (2H，brs)。
[0289] 实施例9 : (2R，3S，5R) -5- (5-环丙磺酰基异吲哚啉-2-基）-2- (2, 5-二氟苯基） 四氢-2H-吡喃-3-胺
[0290]
[0291] 步骤1 : (2R，3S，5R)-5-(5-环丙磺酰基异吲哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四 氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯
[0292]
[0293] 参照实施例1中步骤1的方法，用5-环丙磺酰基异吲哚啉盐酸盐代替 2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧化物对甲 苯磺酸盐，得到目标化合物，收率：53%。MS m/z [ESI] : 535. 2 [M+1]。
[0294] 步骤2 : (2R，3S，5R)-5-(5-环丙磺酰基异吲哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四 氢-2H-吡喃_3_胺
[0295]
[0296] 参照实施例1中步骤2的方法，用（2R，3S，5R) -5- (5-环丙磺酰基异吲 哚啉-2-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯代替 5-(2,3,4,5,6,7-六氢吡咯并[3'，4':3,4]吡唑并[1，5-13][1，2]噻嗪-1，1二氧 化物-6-基）-2-(2, 5-二氟苯基）四氢-2H-吡喃-3-基氨基甲酸叔丁酯，得到目标化 合物，收率 80%，MS m/z[ESI]:435.2[M+l]。虫 NMR(400MHz，CDC13):S =7.77(lH，d， J = 8. OHz)，7. 76 (1H，s)，7. 42 (1H，d，J = 8. OHz)，7. 17 (1H，m)，7. 02 (2H，m)，4. 30 (2H， m)，4. 10 (4H，m)，3. 54 (1H，t，J = 10. 8Hz)，3. 24 (1H，m)，2. 95 (2H，m)，2. 45 (1H，m)，1. 52 (1H， m)，1. 28 (2H，brs)，1. 05 (2H，m)，0? 87 (2H，m)。
[0297] 实验例1 :DPP_IV酶抑制活性的测定
[0298] 本发明采用以下方法来测定发明的化合物对血浆中DPP-IV酶的抑制活性，该抑 制活性采用IC 5。这一指标来表示，1C 5。即DPP-IV酶的活性被抑制50%时的化合物的浓度。
[0299] 材料和方法：
[0300] 材料：
[0301] a?白色 384 孔板（Perkin Elmer，Catalog No. 607290/99)
[0302] b. HEPES 缓冲液：用 1M HEPES 缓冲液（Invitrogen，Catalog No. 15630-080)配制 50ml 0. 5MHEPES缓冲液：取1M HEPES缓冲液25mL，加适量ddH20 (重蒸水），用NaOH调节pH 至7. 8，最后加ddH20至50ml。
[0303] c.大鼠血浆：大鼠眼眶取血，加肝素抗凝，4000rpm离心10分钟，取上清血浆作为 DPP-IV的酶源。
[0304] d. DPP-IV酶反应底物H-Gly-Pro-AMC(甘氨酸-脯氨酸-7-氨基-4-甲基香豆 素），由本公司自己合成，溶解于DMS0至100mM母液。
[0305] e. 1M MgCl2
[0306] f. 1. 5M NaCl
[0307] g. 10% BAS
[0308] h. DMS0
[0309] i. ddH20
[0310] j.待测化合物：阳性对照化合物Omarigliptin和本发明实施例化合物
[0311] 按以下操作顺序进行：
[0312] 1?配制 DPP-IV 酶反应缓冲液：50mM HEPES(pH = 7. 8)，80mM MgCl2,150mM NaCl， 1% BSA，放置于冰上备用；
[0313] 2.用DMS0将待检测化合物从lOmM稀释至ImM (终操作浓度的100倍），然后在96 孔板上进行3倍梯度稀释共11个浓度，第12孔加入DMS0作为空白对照，然后用酶反应缓 冲液稀释25倍至终工作浓度的4倍待用；
[0314] 3.解冻DPP-IV酶反应底物H-Gly-Pro-AMC，用酶反应缓冲液稀释至160 y M(4倍 工作浓度），置于冰上备用；
[0315] 4.解冻大鼠血衆，用酶反应缓冲液稀释100倍（2倍工作浓度）置于冰上备用；
[0316] 5.在384孔板中加入5 y L待测的4倍浓度的化合物，然后加入10 y L的大鼠血浆 (2倍工作浓度），离心混匀；
[0317] 6.加入5 y 1酶反应底物H-Gly-Pr〇-AMC(4倍工作浓度），离心混匀，用封膜封住 384孔板；
[0318] 7?在孵育箱（22_23°C )中孵育1小时；
[0319] 8?使用 FlexStationI3 (Molecular devices)酶标仪读取反应的焚光信号：380nm 激发，读取460nm波长的发射光谱；
[0320] 9.化合物对DPP-IV酶抑制IC5。的生成：使用GraFit6软件计算化合物的1C 5。值。
[0321] 表1实施例化合物的DPP-IV酶抑制活性

[0324] 实验例2 :药代动力学参数的测定
[0325] 本发明采用以下方法来测定发明的化合物的药代动力学参数。
[0326] 研究使用7-9周龄健康雄性成年大鼠。每组动物（3雄性只大鼠）单次灌胃给药， 剂量为5mg/kg，灌胃给药组的动物在实验前禁食过夜，禁食时间从给药前10小时至给药后 4小时。
[0327] 在给药后0. 25、0. 5、1、2、4、6、8和24小时采血。使用小动物麻醉机经异氟烷麻醉 后通过眼底静脉丛采取0. 3mL全血，放于肝素抗凝管中，样品于4oC、4000rpm离心5min，血 浆转移至离心管中，并放于_80°C保存直到分析。
[0328] 血浆样品分析使用已确证的液相色谱-串联质谱联用方法（LC-MS/MS)。个体动物 的血衆浓度-时间数据用WinNonlin(专业版，版本6. 3 ;Pharsight公司）软件进行分析。 非房室模型被用于浓度分析。计算化合物的药代动力学参数，数据如下表2所示：
[0329] 表2化合物的药代动力学参数
[0330]
[0331] 实验例3 :CYP酶系的抑制IC5。的测定
[0332] 本发明采用以下方法来测定发明的化合物对CYP酶系的抑制IC5。的测定。
[0333] 将-80°C冰箱冻存的人肝微粒体置于冰上融化，刚刚融化后立即取100 yL至 60°C、lOOrpm的恒温振荡箱中孵育（1小时），剩余肝微粒体立即放入-80°C冰箱冻存。1小 时后，取出100 y L灭活的肝微粒体，加入400 y L磷酸盐缓冲液混匀成4mg/mL灭活的肝微 粒体溶液；另将_80°C冰箱冻存的人肝微粒体置于冰上融解，刚刚融解后取出100 y L加入 400 y L磷酸盐缓冲液混匀成4mg/mL肝微粒体溶液，按照下表3平行配制阳性对照及测试品 和阴性对照组孵育混合液：
[0334] 表3阳性对照及测试品和阴性对照组孵育混合液

[0337] 将混合液置于37°C、lOOrpm的恒温振荡箱中孵育5分钟。
[0338] 取2. 5 y L测试品或阳性对照工作液（阴性对照组加入测试品工作液），加入 91. 5 y L孵育混合液、6 y LNADPH溶液并涡旋启动反应，将溶液置于37°C、lOOrpm的恒温振 荡箱中孵育，孵育时间如下表4所示：
[0339] 表4孵育时间
[0341] 孵育相应时间后，加入200 y L内标液（CYP2C19的内标液为100ng/mL氯霉素的乙 腈溶液、其余内标液为250ng/mL华法林、500ng/mL普萘洛尔的乙腈溶液）终止反应，终止反 应的样品于12000rpm离心10分钟，取上清液进样检测。
[0342] 处理数据用Analystl. 4. 2或等同软件。检测积分来确保所有的峰适当积分并且 必要时调整积分参数。
[0343] 分析物的定量被定义为分析物的峰面积与内标的峰面积之比。分析使用液相色 谱-串联质谱联用方法（LC-MS/MS)。使用Graphpad Prism(版本5. 03)软件计算IC50等 参数，结果如下表5所示：
[0344] 表5实施例4对CYP酶系的抑制IC5。（ y M)
[0346] 实验例4 :肝微粒体代谢稳定性
[0347] 本发明采用以下方法来测定发明的化合物的肝微粒体代谢稳定性。
[0348] 取8 y L人肝微粒体（20mg/mL)、20 y L的NADPH、368 y L 0? 1M的磷酸盐缓冲液混 合，在37°C中预孵育5分钟。分别加入4 y L分析工作液（测试品或阳性对照），在37°C预 孵育0、10、20、30、45和60分钟时，取50 y L的孵育液加入150 y L含内标（0. 25M华法林） 的乙腈；取4 y L大鼠肝微粒体（20mg/mL)、10 y L的NADPH、184 y L 0. 1M的磷酸盐缓冲液混 合，在37°C中预孵育5分钟。分别加入2 y L分析工作液（测试品或阳性对照），在37°C预 孵育0、10、20、30、45和60分钟时，取20 y L的孵育液加入180 y L含内标（0. 25M华法林） 的乙腈。所有样品涡旋后于4000rpm离心15min，然后取150 y L上清液加入96孔进样板。 取5yL进LC/MS/MS系统检测。分析色谱柱为C18 1.7ym 2. lX50mm(Waters)。检测使用 三重四极杆质谱（API4000，AB公司）。在正离子模式下检测CT-1225的峰面积与内标峰面 积的比值。半衰期值为测试品/内标的峰面积与时间比值。结果数据如下表6所示：
[0349] 表6实施例4及参考化合物肝微粒体代谢稳定性
【主权项】
1. 一种式I所示的化合物或其药学上可接受的盐： 其中，A环选自5-6元芳控环或含有1-2个选自N、O或S原子的5-6元杂芳环； X选自O或邸2, Y选自N或CH，并且当X为邸2时，Y不为CH ;R i、R2和R 3分别独立地选 自 H、Cl 3烷基、-NH 2或-OH ; Ra选自面素 、-NH 2、-OH、Cl e烷基、C 1 e烷氧基、苯氧基或节氧基； Rs选自C 16烷基、面素、-CN、-OH、-COOR 6、-畑咕或-SO 2馬，或者两个Rs基团与所连A环 原子一起组成一个5-7元环； Re选自H或C 16烷基； 咕选自H、C 16烷基或-SOzRs; Rs选自-OH、-NH 2、Cl 6烷基或C 3巧烷基； O和P分别独立地选自1、2或3; m和n分别独立地选自1或2。2. 根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自式II所示 的化合物或其药学上可接受的盐： 其中， X选自0 ;Y选自N或CH; Ri 选自-NH 2或-OH，R 2和 R 3为 H ; R4a和 R 4b选自 F、Cl、Br、I、-NH 2或-OH ; Rs选自 F、C1、化、I、-CN、-COOR 6、-畑咕或-SO 2?; P选自1或2 ; Re选自H、甲基、乙基、丙基或下基； 咕选自H、甲基、乙基、丙基、下基或-SO 2?; Rs选自-OH、-NH 2、甲基、乙基、丙基、下基、Cs环烷基、C 4环烷基或C 5环烷基。3. 根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自式III所示 的化合物或其药学上可接受的盐：其中， X选自0 ; Y选自N或CH; Ri 选自-NH 2或-OH，R 2和 R 3为 H ; 尺4。和 R 4b选自 F、Cl、Br、-NH 2或-OH ; Rsa和R 5b的分别独立地选自F、Cl、化、I、-CN、-COOR 6、-饥取7或-SO 2?; Re选自H、甲基、乙基、丙基或下基； Ry选自H、甲基、乙基、丙基、了基或-SO 2尺8; Rs选自-OH、-NH 2、甲基、乙基、丙基、下基、Cs环烷基、C 4环烷基或C 5环烷基。4. 根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自式IV所示 的化合物或其药学上可接受的盐：其中， X选自0 ; Y选自N或CH; Ri 选自-NH 2或-OH，R 2和 R 3为 H ; R4a和 R 化选自 F、Cl、Br、-NH 2、-OH ; Rfc和RjMi与所连化挫环原子一起组成的一个5、6或7元非芳香环，所述5、6或7元非芳 香环优选包含1、2或3个选自N、0或S杂原子，所述5、6或7元非芳香环更优选含-S〇2-基 团。5. 根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，选自式V所示 的化合物或其药学上可接受的盐： 其中，X选自0; Y选自N或CH; Ri、Rz和R 3分别独立地选自H、C 1 3烷基、-NH 2或-OH ; Ra选自面素 、-NH 2、-OH、Cl e烷基、C 1 e烷氧基、苯氧基或节氧基； Rs选自 C 1 6烷基、面素、-CN、-OH、-COOR 6、-饥取7或-SO 2?; Re选自H或C 16烷基； 咕选自H、C 16烷基或-SOzRs; Rs选自-OH、-NH 2、Cl 6烷基或C 3巧烷基； O和P分别独立地选自1、2或3。6. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R 1 选自-畑2或-OH。7. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Rz 和Rs为H。8. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R 4 选自 F、Cl、Br、1、-畑2或-OH。9. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Rs 选自 F、C1、Br、I、-COORe、-畑咕或-SO 2咕。10. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Re 选自H、甲基、乙基、丙基或下基。11. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R 7 选自H、甲基、乙基、丙基、下基或-SOzRs。12. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，Rs 选自-OH、-畑2、甲基、乙基、丙基、下基、Cs环烷基、C 4环烷基或C 5环烷基。13. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，O 为2。14. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，P 为1或2。15. 根据权利要求5所述的式V所示的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，R 4 的取代位置如下式VI结构R4。和R 4b所示： 其中，R4。和R 4b分另 I代基与式V定义相同。其中，Rsa选自F、Cl、Br、I、-COOR 6、-NHR,或-SO 2?，其他取代基与式V定义相同。18. 下式表示的化合物：16. 根据权利要求 受的盐，其特征在于，P 为2,并且Rs的取代位J 其中，Rs。和R 5b分ミ -SO 2?，其他取代基与式 V定义相同。17. 根据权利要求 受的盐，其特征在于，P 为1，并且Rs的取代位J19. 药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-18任一项所述的化合物或其药学上 可接受的盐、溶剂化物、多晶型物、互变异构体或前药和药学可接受的载体。20. 根据权利要求1-18任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物、多晶 型物、互变异构体或前药在制备用于在需要其的哺乳动物中治疗选自膜岛素抵抗、高血糖 症、II型糖尿病的病症的药物中的用途。
【文档编号】A61K31/4035GK105985357SQ201510076191
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2015年2月12日
【发明人】许新合, 沈宇, 校登明, 罗鸿, 彭勇, 韩永信, 张爱明, 杨玲
【申请人】北京赛林泰医药技术有限公司, 正大天晴药业集团股份有限公司, 连云港润众制药有限公司