专利名称：菲人工完全抗原的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种菲(Wienanthrene)人工完全抗原的制备方法，属于有机化学及免疫学技术范畴。
背景技术：
^1^77 (Polycyclic Aromatic Hydrocarbons ；PAHs) ^^^^^ 致癌/助癌特性且在环境中较为稳定的微污染物。多环芳烃主要来源于城市生活排污、工业废水排放、石油污染和有机质自燃等，具有高毒、持久、长距离迁移和高生物蓄积性等特点，对环境安全和人类健康具有严重的危害。PAHs在空气、水、土壤等环境中广泛分布，同时 PAHs在各种溶剂中具有很高的溶解度，由于食品产地环境受到污染以及在饮料和酒品加工制作过程中均可产生PAHs，致使PAHs在食品、饮料及酒品等非水体系中存在，有人在烤制的面包片、牛奶、酒、茶饮料中发现了微量的PAHs，长期食用含有PAHs的食物会对人体健康将产生潜在威胁。目前对多环芳烃的检测分析方法有很多，如高效液相色谱法，气相色谱一质谱联用法等。但样品预处理烦琐，操作复杂，仪器昂贵，很难达到快速、简便的现场检测要求。如果能够采用金标免疫或酶联免疫的方法，则可达到快速、灵敏并能现场检测PAHs的需要。为了建立其免疫分析的方法，首先必须得到PAHs的抗体。PAHs分子结构简单，分子量小，属于半抗原，不能直接免疫制取抗体，必须首先将其与载体蛋白偶联制备出它的完全抗原，才能诱发动物产生抗体。
发明内容
本发明的目的在于寻求适当的试剂，用简单、实用的方法合成出菲 (Phenanthrene)的完全抗原，为以后筛选出它的特异性抗体和建立免疫分析方法提供基石出。
发明内容
本发明涉及一种菲(Wienanthrene)人工完全抗原的制备方法，属于有机化学及免疫学技术范畴。利用1-菲丁酸的羧酸基团，将1-菲丁酸直接或者通过适当长度的连接臂链接到载体蛋白上，制备菲的完全抗原。载体蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白 (OVA)，血兰蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-T0F-MS质谱确定载体蛋白上菲的数量。 本方法操作简单，无需特别的仪器设备，成本低廉，为以后筛选出它的特异性抗体和建立免疫分析方法提供了基础。
具体实施例方式实施例1
权利要求
1.本发明涉及一种菲(Wienanthrene)人工完全抗原的制备方法，属于有机化学及免疫学技术范畴。利用1-菲丁酸的羧酸基团，将1-菲丁酸直接或者通过适当长度的连接臂链接到载体蛋白上，制备菲的完全抗原。载体蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白 (OVA)，血兰蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-T0F-MS质谱确定载体蛋白上菲的数量。 本方法操作简单，无需特别的仪器设备，成本低廉，为以后筛选出它的特异性抗体和建立免疫分析方法提供了基础。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，载体蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血兰蛋白(KLH)，人血清蛋白(HSA)或其他蛋白以及蛋白的衍生物。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，可以将1-菲丁酸直接或者通过适当长度的连接臂链接到载体蛋白上；连接臂的类型或者长度的选择取决于由此抗原产生的抗体的活性。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，能够将菲链接到载体蛋白上的方法和试剂。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应温度在-100°C-100°C之间。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应时间在1分钟-200小时之间。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，菲的用量为载体蛋白的0.001-2000摩尔=I里。
全文摘要
本发明涉及一种菲(Phenanthrene)人工完全抗原的制备方法，属于有机化学及免疫学技术范畴。利用1-菲丁酸的羧酸基团，将1-菲丁酸直接或者通过适当长度的连接臂链接到载体蛋白上，制备菲的完全抗原。载体蛋白可以是牛血清白蛋白(BSA)，卵清蛋白(OVA)，血兰蛋白(KLH)或人血清蛋白(HSA)。MALDI-TOF-MS质谱确定载体蛋白上菲的数量。本方法操作简单，无需特别的仪器设备，成本低廉，为以后筛选出它的特异性抗体和建立免疫分析方法提供了基础。
文档编号G01N27/62GK102276714SQ20101020277
公开日2011年12月14日 申请日期2010年6月10日 优先权日2010年6月10日
发明者孙艳灵, 杜宇国, 魏国华 申请人:中国科学院生态环境研究中心