专利名称：血清中甘油的均相化学发光法试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及荧光测试物的使用，具体是一种血清中甘油的均相化学发光法试剂盒。
背景技术：
现有的甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(GP0-PAP法)一 步终点法测定方法检测范围窄、灵敏度低、误差大、操作繁琐。目前，临床实验室测定甘油常用GPO-PAP比色法，由于人体内的游离甘油含量低， 0.06-0. 22mmol/L，血清中甘油和三磷酸腺苷(ATP)在甘油激酶(GK)和甘油磷酸氧化酶 (GPO)的催化下生成H2O2，在过氧化物酶(POD)的催化下，H2O2和色原物(PAP)显色，吸光度 与标本中甘油含量成正相关，可进行比色测定，但是，国外资料显示，正常人体游离甘油含 量为0. 06-0. 22mmol/L,约占总总甘油的6-14%，国内结果与此相近，我国正常人游离甘油 水平为0. 08mmol/L(0. 02-0. 33mmol/L)，约占总总甘油的7. 9 %，虽然临床标本中游离甘油 显著升高者很少见，但在异常情况下如应急反应，剧烈运动，服用含硝酸甘油药物，静脉滴 注含甘油的营养液，肝素治疗，严重肝病、肾病、糖尿病时，血清游离甘油显著升高，给临床 决策带来误导。而采用血清中甘油化学发光测定方法，血清中甘油和试剂中的三磷酸腺苷(ATP) 在甘油激酶(GK)和甘油磷酸氧化酶(GPO)的催化下生成H2O2，在过氧化物酶(POD)的催化 下，H2O2和异鲁米诺生成氧化异鲁米诺和水，同时放出光子而发光，血清中甘油浓度越高，发 出的光信号就越强，用已知浓度的甘油与测出的光信号作剂量-反应曲线；未知样品的甘 油含量可从该曲线推算出来。应用鲁米诺-过氧化物酶的化学发光反应进行血清甘油分析，灵敏度高达 10_18mol，可在20分钟内快速检测出结果，便于完全实现自动化，有效期高达一年以上，无放 射性和致畸物质，便于环保而受到普遍欢迎，是目前发展最迅速的检测技术。例如，血清中甘油和三磷酸腺苷(ATP)在甘油激酶(GK)和甘油磷酸氧化酶(GPO) 的催化下生成H2O2，在过氧化物酶(POD)的催化下，H2O2和异鲁米诺生成氧化异鲁米诺和水， 同时放出光子而发光，血清中甘油浓度越高，发出的光信号就越强，用已知浓度的甘油与测 出的光信号作剂量-反应曲线；未知样品的甘油含量可从该曲线推算出来。未知浓度的甘 油可从该曲线推算出来；所述的化学发光物为异鲁米诺，这便是本发明的化学发光测定方 法，该方法可用于测定血清中甘油含量。1.试剂组成混合酶液每升Tris-HCl 缓冲液内含 Tris 150mmol (ρΗ7· 6)、MgSO412mmol, 胆酸钠 4. 2mmol、Triton X-1000· 12g、ATP 1. 2mmol、GK 600U、GPO 3600U、POD 1200U、 Proclin-300 防腐剂 200 μ 1。发光液:100mlTris buffer 含鲁米诺:0. Olmol/L(0. 178g)，Trisbuffer 配方 0. lmol/L 6. 07gTris 溶于 500ml 水，用盐酸调 pH = 8. 8。[oo10] 仪器MPC—l单光子化学发光免疫分析仪。[oo11] 2．测定方法样品混合酶液发光液一l55。温度37℃温浴5min，，测定[LU值，以甘油定标液定标，测定标本时和高1低质控液同时测定，当高1低质控液测定值均在此范围时，其测定数据可靠。[oo12] 作出剂量一反应曲线，根据样品的发光强度[LU值从该曲线求出血清甘油三酯的浓度。或直接由公式求出[oo13] 甘油三酯的浓度一(样品[LU值／标准[LU值)×标准浓度。[oo14] 上述方法灵敏度更高1线性范围宽，监测范围为2．o×lo”一6．o×lo，成本低1准确度高，测定的光信号，可一个一个光子计数，因此精密度和准确度高于比色法；在反应中，不需要离心或分离步骤，直接进行发光强度测定。发明内容[oo15] 本实用新型就是为了解决广泛应用血清中甘油的均相化学发光法的问题，而提供一种便于各类医疗机构能够普遍应用的血清中甘油的均相化学发光法试剂盒。[oo16] 本实用新型是按以下技术方案设计的。[oo17] 一种血清中甘油的均相化学发光法试剂盒，包括方形盒体及与其一侧边弯折连体的盒盖，而在盒体一侧长边内形成有插孔的试剂架上分别容纳甘油定标液瓶，高值甘油质控血清瓶和低值甘油质控血清瓶，试剂架旁侧形成有卧置酶混合液瓶和发光应用液瓶的空间。[oo18] 本实用新型不仅保持了灵敏度更高1线性范围宽1成本低1准确度高，在反应中，不需要离心或分离步骤，直接进行发光强度测定的优点，而且，便于普及，可用于全自动测定，也可用于手工测定或半自动测定，适用于大中小各层次的医疗和研究机构使用。
[oo19] 附图是本实用新型结构示意图。[0020] 图中1．盒体2．盒盖[0021] 3．插孔4．试剂架[0022] 5．甘油定标液瓶6．高值甘油质控血清瓶[0023] 7．低值甘油质控血清瓶 8．酶混合液瓶[0024] 9．发光应用液lo．支撑架。
具体实施方式
[0025] 一种血清中甘油的均相化学发光法试剂盒，包括方形盒体l及与其一侧边弯折连体的盒盖2，而在盒体l一侧长边内形成有插孔3的试剂架4上分别容纳加盖密封的甘油定标液瓶5，高值甘油质控血清瓶6和低值甘油质控血清瓶7，试剂架4旁侧形成有卧置加盖密封的酶混合液瓶8和发光应用液瓶8的空间。[0026] 所述血清中甘油的均相化学发光法试剂盒，其盒体l的侧壁上沿向盒体内直角弯折形成撑顶酶混合液瓶8和发光应用液瓶9底部的空心支撑架lo，使在盒体l内的酶混合液瓶8和发光应用液瓶9卧置稳定。[0027]所述的酶混合液瓶8预装有IOOml的甘油检测试剂酶混合液；所述发光应用液9 预装有IOOml的异鲁米诺发光应用液；甘油定标液瓶5，高值甘油质控血清瓶6和低值甘油质控血清瓶7分别预装2ml试 剂，备用。盒体1内附加实验操作说明书(未图示)。
权利要求1.一种血清中甘油的均相化学发光法试剂盒，包括方形盒体(1)及与其一侧边弯折连 体的盒盖O)，其特征在于盒体⑴一侧长边内形成有插孔⑶的试剂架⑷上分别容纳 甘油定标液瓶(5)，高值甘油质控血清瓶(6)和低值甘油质控血清瓶(7)，试剂架(4)旁侧 形成有卧置酶混合液瓶(8)和发光应用液瓶(9)的空间。
2.根据权利要求1所述血清中甘油的均相化学发光法试剂盒，其特征在于盒体(1) 的侧壁上沿向盒体内直角弯折形成撑顶酶混合液瓶(8)和发光应用液瓶(9)底部的空心支 撑架(10)。
专利摘要本实用新型涉及一种血清中甘油的均相化学发光法试剂盒，属于荧光测试物的使用。本实用新型包括方形盒体及与其一侧边弯折连体的盒盖，而在盒体一侧长边内形成有插孔的试剂架上分别容纳甘油定标液瓶，高值甘油质控血清瓶和低值甘油质控血清瓶，试剂架旁侧形成有卧置酶混合液瓶和发光应用液瓶的空间。本实用新型依据应用异鲁米诺-过氧化物酶的化学发光反应进行血清甘油分析，不仅保持了灵敏度更高、线性范围宽、成本低、准确度高的优点，而且，便于普及，可用于全自动测定，也可用于手工测定或半自动测定，适用于大中小各层次的医疗和研究机构使用。
文档编号G01N21/76GK201852789SQ201020540030
公开日2011年6月1日 申请日期2010年9月25日 优先权日2010年9月25日
发明者李立和, 王高生 申请人:天津市宝坻区人民医院