快速检测制品中丙嗪类物质的方法
【专利摘要】本发明涉及快速检测制品中丙嗪类物质的方法。具体涉及检测怀疑掺有丙嗪类物质的制品中是否含有丙嗪类物质的方法，该方法包括以下步骤：（1)取所述制品适量，与特殊的溶剂混合，振摇或超声辅助溶解，得混合试液；(2)采用适当的基于特定电化学方法的检测仪测定混合试液的特定电化学参数；(3)根据参数值的大小即可判断制品中是否可能非法添加有丙嗪类物质中枢神经抑制物质。本发明的方法不需要过滤样品溶液，检测全过程仅耗时2?3分钟，具有快速、简便、安全、灵敏度局、环保等优点。
【专利说明】快速检测制品中丙嗪类物质的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种药品、保健食品或食品的分析【技术领域】，尤其涉及一种基于电化 学方法的快速筛查药品、保健食品或食品中非法添加的丙嗪类中枢神经抑制药的方法。
【背景技术】
[0002]丙嗪类化合物对中枢神经具有抑制作用。其代表化合物盐酸异丙嗪能阻断平滑 肌、毛细血管壁等组织的H1受体，从而与组胺起竞争性的拮抗作用，尚能显著的中枢安定 作用，能加强麻醉药、催眠药及镇痛的作用。并能降低体温和镇吐。另一代表化合物盐酸氯 丙嗪对中枢神经系统，小剂量有安定作用，大剂量连续使用有抗精神病作用，本品抑制丘脑 下体温调节中枢，使体温随环境温度升降，配合其他药物，使体温降至正常体温之下，代谢 降低，称人工冬眠，主要用于抗精神病、加强催眠剂、麻醉剂、镇痛剂及抗^(厥剂的作用，又 可用于对呕吐和顽固性呃逆的镇吐及引起人工冬眠等。
[0003]由于丙嗪类化合物价格低廉，中枢神经抑制效果确切，常被不法分子添加至中成 药、保健食品或食品中。但丙嗪类化合物使用时存在不良反应和严格的禁忌症，长期大剂量 应用时，可引起特殊持久的运动障碍。因此对中枢神经抑制类药、保健食品或食品中非法添 加丙嗪类化合物的违法行为必须进行长期有效的打击。但这种监督检查涉及范围广，检验 量大，在药品监督部门人力物力财力有限的广大农村地区和经济欠发达城市，彻底开展相 应监管活动有很大难度。
[0004]目前药品检验领域针对这种非法添加丙嗪类化合物的检验方法进行的研究并不 多，主要检测手段大多仍基于高效液相色谱-质谱联用仪和高效液相色谱仪的现代仪器分 析法，以及基于薄层色谱和化学反应的快速鉴别法。但是，快速鉴别筛查技术以其成本低， 覆盖面广等优点也逐渐受到业界许多人士的重视。
[0005]例如，电泳法（参考文献：盐酸氯丙嗪和盐酸异丙嗪制剂的芯片电泳柱后化学发 光检测，《药物分析杂志》，200S年第12期）。该方法利用自制整体浇注式PDMS电泳芯片， 实现药物复方制剂中盐酸氯丙嗪和盐酸异丙嗪的芯片电泳分离和检测。这种方法操作较简 单，但步骤略多，从配制溶液和电泳分离检测开始，完成全部操作约耗时 30-60分钟，且使 用的电泳芯片价格昂贵，成本较高。
[0006]电导率检测仪可用于测量溶液中的电导率。TDS水质检测仪可用于检测水中的总 溶解固体量（Total dissolved s〇lids，TDS)，以评价水质的纯净度。这两种检测仪属于快 速电化学检测仪器，学者经研究发现，其可以用于测定氯化钠水溶液中氯化钠的含量。那 么是否可以直接用检测水中电导率或总溶解固体量的电化学方法检测怀疑可能添加丙嗪 类物质的中枢神经抑制类药品、保健品或食品呢？结果发现效果并不理想，这是因为可能 添加丙嗪类物质的中枢神经抑制类药品、保健品或食品中复杂的基质里含有其它亲水性物 质，会严重干扰样品溶液的电导率和溶液中的总溶解固体量（ TDS)，造成结果与是否添加丙 嗪类物质没有相关性。因此直接用检测溶液中电导率或总溶解固体量的电化学方法检测检 测中枢神经抑制类药品、保健品或食品中是否非法添加丙嗪类物质存在技术困难。
[0007] 因此，人们仍然需要一种操作更简单、速度更快且更安全、污染更小抗干扰能力更 强的检验方法，以便于准确快速的鉴别出药品、保健食品和食品中是否添加丙嗪类物质。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的是提供一种能够快速、简便、安全、和/或低污染地检测怀疑掺有丙 嗉类物质的制品中是否含有丙嗪类物质的方法。本发明人令人惊奇地发现，当使用适当溶 剂时，采用适当的电化学检测仪或电化学检测方法可以方便地在现场对怀疑掺有丙嗪类物 质的制品进行检查，并且方法快速、简便、安全、和/或低污染。本发明基于以上发现而得以 完成。
[0009] 另一方面，在对怀疑掺有丙嗪类物质的制品进行提取后，可能无法立即进行检测， 本发明的另一目的是提供一种能够低温保藏样品的方法。
[0010] 为此，本发明第一方面提供了一种检测怀疑掺有丙嗪类物质的制品中是否含有丙 嗪类物质的方法，该方法包括以下步骤：
[0011] α)取待测的制品适量，与提取溶剂混合（由此，所述提取溶剂可以提供质子，该 质子可以与丙嗪类物质分子以氢键相缔合），振摇或超声辅助溶解后，得混合试液；
[0012] (2)基于溶液中离子在电场下定向移动的电化学方法测定混合试液中的电化学参 数；
[0013] (3)根据参数大小判断制品中是否可能添加（例如非法地添加）有丙嗪类物质。
[0014] 任选地，将步骤（1)获得的混合试液低温保存，需要时按照步骤（2)-(3)继续检 测。
[0015] 本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不 会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实 施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。
[0016] 下面对本发明作进一步的描述。
[0017] 本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文 献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和 短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和 短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表 述的含义为准。
[0018] 本文使用的术语"掺"、"掺有"、"掺入"等，它们可以是有意或者无意地向所述制品 中加入丙嗪类物质。
[0019] 根据本发明第一方面的方法，其中所述的丙嗪类物质选自盐酸异丙嗪和盐酸氯丙 嗪。
[0020] 根据本发明第一方面的方法，其中所述制品，或者所述怀疑掺有丙嗪类物质的制 品，其包括非液体的任何欲意给予哺乳动物例如人类的任何人工制成品，特别是人工混合 制品，其包括不限于药品、保健食品、食品、食品添加剂等。在一个实施方案中，所述的制品 是药品、保健食品。短语"怀疑掺有丙嗪类物质的制品"是指一种制品，本领域技术人员（特 别是健康/卫生/药监主管部门或者其工作人员）主观上或者客观上认为，该制品中可能 有意或者无意地掺入有丙嗪类物质，从而使得该制品能够主要或者次要地产生丙嗪类物质 所具有的生物学效应，例如产生中枢神经抑制的生物学效应。在本发明中，该制品亦可称 为样品、检测样品等，本领域技术人员根据本发明的语境理解指代该制品的不同术语所具 有的含义，例如使该制品与提取溶剂振摇后，得到的混合液体可以称为混合试液。在本发明 中，该制品应是固体，例如粉末或块状物或丸状物或颗粒状物等。
[0021]根据本发明第一方面的方法，步骤（1)中所述提取溶剂为质子溶剂，优选为水、有 机溶剂或有机溶剂与水的混合物。在一个实施方案中，所述的有机溶剂包括但不限于甲醇、 ZJ享、乙酸乙酯、丙酮、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或其组合，或者它们的含其他物质的溶 液。该提取溶剂的作用在于使丙嗪类物质溶解，并提供质子以便于使样品溶液具有适当导 电能力的电化学性质，此外提取溶剂还具有防止水溶性干扰物质溶解并导致导电能力变化 的作用。因此任何能够实现该功能的提取溶液均是适用的。在一个实施方案中，所述的有机 溶剂为乙醇。在一个实施方案中，所述的溶剂为乙醇与水的混合物。乙醇与水的体积比为 1 -99:99-1，优选乙醇与水的体积比为90-95:10-95，特别优选乙醇与水的体积比为90:10。 [0022]根据本发明第一方面的方法，步骤（1)中所述提取溶剂中还包括助溶剂。所述助 溶剂选自丙二醇、丙三醇、苯甲酸、苯甲酸钠、水杨酸、水杨酸钠、对氨基苯甲酸、精氨酸或其 组合。所述助溶剂优选苯甲酸。该助溶剂的作用在于使水溶性丙嗪类物质能够在有机溶 剂或有机溶剂与水的混合物中充分溶解，同时防止水溶性干扰物质溶解并导致导电能力 变化。溶剂与助溶剂的体积/重量比为100:1-20,优选溶剂与助溶剂的体积/重量比为 100:10。
[0023]根据本发明的方法，在步骤（1)中，所述制品和提取溶剂的量和比例不必作特别 的限制，只要制品和提取溶剂混合后，可能存在的丙嗪类物质溶解在溶剂中并达到本发明 方法检测限即可。例如在一个实施方案中，在步骤（1)中的提取溶剂为1?50ml，例如5? 20ml,例如10?20ml ;所取的制品的量为〇· 1?l〇g，例如〇· 5?5g。根据本发明的方法， 其中步骤（1)中待测制品与提取溶剂比为0. 5?5g: 10?20ml。
[0024]根据本发明第一方面的方法，向步骤（1)中所述的提取溶剂中加入稳定剂。所述 稳定剂选自乙二醇、异苯二甲酸双胍胺。所述稳定剂使丙嗪类物质的溶液能够低温下稳定 储藏一段时间。稳定剂在提取溶剂中的量通常可以为1?5%(w/v)。
[0025] 根据本发明第一方面的方法，其中所述步骤（2)的基于电化学方法的检测仪为电 导率仪和/或IDS(即TOTAL DISSOLVED SOLIDS)水质检测仪。为实施或者操作方便的目 的，本发明的电化学检测仪可以是小型仪器或可移动仪器或微型笔状检测仪。在步骤（2) 中测定的电化学参数可以是电导率值和/或TDS值或和上述电化学参数相关的其它参数。 例如在一个实施方案中，使用电导率仪测定样品在特定溶液中的电导率；在另一个实施方 案中，使用TOS水质检测仪测定样品在特定溶液中的TDS值。
[0026] 根据本发明第一方面的方法，其中所述步骤（3)用于判断制品中是否可能含有丙 嗪类物质的参数值与待测制品用量、提取溶剂的类型、提取溶剂的体积以及参数的类型直 接相关。当制品用量为一次服用量，提取溶剂为乙醇，步骤（2)提取溶剂的体积与步骤（3) 判断制品是否可能含有丙嗪类物质的参数值之间成反比关系，具体数值关系为：提取溶剂 的体积X参数值电导率约为400ml · μ S/cm和/或提取溶剂的体积X参数TDS值约为 200ml · ppm。
[0027] 当制品用量为一次服用量，提取溶剂为90%的乙醇，提取溶剂体积为20ml，助溶剂 为本甲酸，助溶剂体积为2ml，测定参数为电导率时，判断制品中是否可能含有丙嗪类物质 的参数值为20 μ S/cm，S卩如果制品溶液的电导率大于等于2〇 μ S/cm,则可判断制品中可能 含有丙嗪类物质。 ^)0^8]当制品用量为一次服用量，提取溶剂体积为l〇ml，提取溶剂为90%的乙醇，助溶剂 为本甲酸，助溶剂体积为lml,测定参数为电导率时，判断制品中是否可能含有丙嗪类物质 的参数值为40μ S/cm，如果制品溶液的电导率大于等于4〇μ S/cm,则可判断制品中可能含 有丙嗪类物质。
[00^9]当制品用量为一次服用量，提取溶剂体积为20ml，提取溶剂为90%的乙醇，助溶剂 为苯甲酸，助溶剂体积为2ml，测定参数为TDS值时，判断制品中是否可能含有丙嗪类物质 的参数值为lOppm，如果制品溶液的TDS值大于等于lOppm，则可判断制品中可能含有丙嗪 类物质。
[00^0]当制品用量为一次服用量，提取溶剂体积为10ml，提取溶剂为90%的乙醇，助溶剂 为苯甲酸，助溶剂体积为lml，测定参数为TDS值时，判断制品中是否可能含有丙嗪类物质 的参数值为20ppm，如果制品溶液的IDS值大于等于20ppm，则可判断制品中可能含有丙嗪 类物质。
[0031]如果所述制品被判定为其中可能含有丙嗪类物质，则该制品可以进一步用其它方 法进行检测，例如通过实验室的方法，例如HPLC法等。这样，本发明的方法特别适用于在市 场上或者其它检测现场进行更大样本的检测和筛查，并进而减少实验室的工作量。
[0032]基于本发明第一方面的方法，本发明第二方面提供了一种成套检测设备，其用于 检测怀疑掺有丙嗪类物质的制品中是否含有丙嗪类物质，所述成套检测设备包括：
[0033] (i)提取溶剂，其封装于溶剂瓶中；
[0034] (ii)基于电化学方法的测定仪；
[0035] (iii)使用说明资料，其上记载有使用该成套检测设备检测怀疑掺有丙嗪类物质 的制品中是否含有丙嗪类物质的操作方法。
[0036]根据本发明第二方面的成套检测设备，所述成套检测设备为试剂盒。
[0037]根据本发明第二方面的成套检测设备，其中所述溶剂瓶是可以反复开启和密封的 溶剂瓶。该溶剂瓶的材质不作特别限制，例如可以是带有瓶塞、瓶盖等的玻璃瓶、塑料瓶等。 在一个优选的实施方案中，所述溶剂瓶内装入的提取溶剂的体积占溶剂瓶容量的：L/ 10? 9/10,例如3/10?8/10。在溶剂瓶中预留一定空间是非常有益的，例如可以直接将待检制 品直接加入到溶剂瓶中，盖严，然后振摇，使待检制品与提取溶剂充分混合，以尽可能地使 可能存在的丙嗪类物质溶解在溶液中；这样本发明提供的成套检测设备非常简单。
[0038]根据本发明第二方面的成套检测设备，其中包括有一个以上的所述封装有提取溶 剂的溶剂瓶。根据这些实施方案，本发明提供了可以在相同地点或者不同地点检测多个制 品所需材料的成套检测设备。
[0039]根据本发明第二方面的成套检测设备，其中包括有基于特定电化学方法的测定 仪，例如电导率测定仪或TDS水质检测仪。
[0040]根据本发明第二方面的成套检测设备，其中所述使用说明资料可以是使用说明 书、检测方法说明、检测判定标准等等，其形式可以是印刷有相应信息的纸张、卡片等，该使 用说明资料基本上记载了本发明第一方面所述的方法。因此，本发明第一方面任一实施方 案中，其中的任一技术特征同样适用于本发明第二方面的成套检测设备或者适用于本发明 的其它方面。
[0041]本发明第三方面提供了一种信息说明资料，其中基本上记载了本发明第一方面任 一项所述的方法。
[0042]在一个实施方案中，该信息说明资料是呈选自下列的形式：纸质文件（包括但不 限于文件单页、小册子、刊物）、磁介质、光盘、软盘、电子出版物、网络出版物等，以及它们的 组合。
[0043]本发明第四方面提供了根据本发明第三方面信息说明资料检测怀疑掺有丙嗪类 物质的制品中是否含有丙嗪类物质的方法。
[0044]本发明第五方面提供了根据本发明第三方面信息说明资料检验怀疑掺有丙嗪类 物质的制品。
[0045]另外，本发明方法中步骤（1)所得混合试液可能是一种混悬液，这种混合试液不 必过滤即可用于下一步骤，这大大简化了操作步骤，亦特别适用于极少量样品的处理。
[0046]因此，在本发明的优选实施方案中，提供了一种药品、保健食品和食品中丙嗪类物 质的检测方法，其包括如下步骤：
[0047] (1)取一次服用量的固态药品、保健食品或食品，加提取溶剂90%的乙醇20ml，力口 苯甲酸2ml，并振摇或超声辅助溶解1分钟获得混合试液；
[0048] ⑵任选地，向步骤⑴获得的混合试液中加入乙二醇，在4?下低温保藏；
[0049] (3)无需过滤，直接用电导率测定仪和/或TDS水质检测仪测定相应电化学参数。
[0050] (4)若电导率大于等于20 μ S/cm和/或TDS值大于等于lOppm，则可判断被测样 品中可能含有丙嗪类物质。
[0051] 本发明与其它丙嗪类物质的快速检测方法相比，具有如下优点：
[0052] (1)结果判断直观：各种方法的结果判断方式比较如下。与其它方法相比较，本发 明根据客观检测数值进行结果判断，判定方式直观，不需仔细观察颜色变化趋势，不受复杂 样品溶液各种颜色的限制和干扰，不易出现无法判断的情况。
[0053] 方法：电泳法(参考文献；盐酸氯丙嗪和盐酸异街嗪删 本发響 剂的芯片电泳柱后化学发光检测:，《药樹分稿杂 志》，2008年第12期）__ 结果_利用自制整麗烧驻式PDMS:电泳芯片，实现药物直接斉看伩器的测定 _ 复貪中毚酸氯肩嗪和盩酸异議醜芯錄电翁果，若电导率大于等 泳分离和检测，通过柱后化学发光_生过程，建于20μ5/伽或TDS值 立微流控芯片化学发光测试方法。 大于等予lOppm，则判 断被测样品中可能# 有丙嗪类物廣。
[0054] (2)快速：使用本发明进行检测时，操作简单，步骤少，整个过程仅需要不到2分钟 (溶解样品需1分钟，仪器测定和结果判断需要5秒钟）。而其它方法耗时至少30?60分 钟。
[0055] (3)简便：与其它文献报道的方法相比，本发明方法无需过滤，操作更加简便。
[0056] (4)检测仪器耐用：与其他方法相比，若进行数百次检测，本发明仅需消耗溶剂， 仪器则不用更换；其他方法则需消耗与之相匹配的数百套化学鉴别试剂。
[0057] (5)安全环保：本发明进行鉴别判断时采用仪器检测。因此本发明方法在鉴别判 断时更加安全环保，对操作人员及环境无任何影响。
【具体实施方式】
[0058] 下面通过具体的实例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实例仅仅是用于 更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
[0059] 本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽 然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此 作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和 操作方法是本领域公知的。
[0060] 实施例1、检测药品/俣傭品中是否含有丙唪类物质的一般操作备件
[0061] 1、取样量：
[0062] 对不同类型样品推荐取样如下：
[0063]
【权利要求】
1. 检测制品中丙嗪类物质的方法，该方法包括以下步骤： (1) 取待测的制品适量，与提取溶剂混合，所述提取溶剂提供质子与丙嗪类物质分子以 氢键相缔合，振摇或超声辅助溶解后,得混合试液； (2) 基于溶液中离子在电场下定向移动的电化学方法测定混合试液中的电化学参数； (3) 根据参数大小判断制品中是否可能非法添加有丙嗪类物质； 任选地，步骤（1)获得的混合试液被低温保存，需要时按照步骤（2)-(3)继续检测。
2. 根据权利要求1的方法，其中所述丙嗪类物质为盐酸异丙嗪和盐酸氯丙嗪。
3. 根据权利要求1的方法，其中步骤（1)所述的提取溶剂为质子溶剂，质子溶剂 选自水、有机溶剂或有机溶剂与水的混合物，有机溶剂包括但不限于甲醇、乙醇、乙酸乙 酯、丙酮、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺或其组合，优选有机溶剂为乙醇，且乙醇与水的体积 比为1-99:99-1，优选乙醇与水的体积比为75-95: 2δ_5，特别优选乙醇与水的体积比为 90-95:10-5。
4. 根据权利要求1的方法，其中步骤⑴中所述提取溶剂中还包括助溶剂，所述助溶 剂选自丙二醇、丙三醇、苯甲酸、苯甲酸钠、水杨酸、水杨酸钠、对氨基苯甲酸、精氨酸或其组 合，所述助溶剂优选苯甲酸。
5. 根据权利要求1的方法，其中步骤（2)所述电化学方法的检测设备为电导率仪和/ 或TDS(Total Dissolved Solids)水质检测仪，步骤（2)所述电化学参数为电导率和/或 TDS 值。
6. 根据权利要求4的方法，其中： 步骤（1)所述待测制品的取量为一次服用量，步骤（2)提取溶剂的体积与步骤（3) 判断制品是否可能含有丙嗪类物质的参数值之间成反比，具体数值关系为：提取溶剂的 体积X参数值电导率约为400ml · μ S/cm和/或提取溶剂的体积X参数TDS值约为 200ml · ppm ； 步骤（1)所述待测制品的取量为一次服用量，步骤（2)提取溶剂体积为20m1，步骤（ 3) 判断制品是否可能含有丙嗪类物质的参数值为电导率20 μ S/cm ; 步骤（1)所述待测制品的取量为一次服用量，步骤（2)提取溶剂体积为10m1，步骤（3) 判断制品是否可能含有丙嗪类物质的参数值为电导率40 P S/cm ; 步骤（1)所述待测制品的取量为一次服用量，步骤（2)提取溶剂体积为20m1，步骤（3) 判断制品是否可能含有丙嗪类物质的参数值为TDS1〇PPm ;和/或 步骤（1)所述待测制品的取量为一次服用量，步骤（2)提取溶剂体积为10m1，步骤（ 3) 判断制品是否可能含有丙嗪类物质的参数值为TDS2〇PPm。
7. -种成套检测设备，其用于检测怀疑掺有丙嗪类物质的制品中是否含有丙嗪类物 质，其特征在于，所述成套检测设备包括： (i) 提取溶剂，其封装于溶剂瓶中； (ii) 基于电化学方法的测定仪； (iii) 使用说明资料，其上记载了权利要求卜6任一项所述的方法。
8. 根据权利要求7的成套检测设备，其特征在于： 所述成套检测设备包括一个以上的所述封装有提取溶剂的溶剂瓶； 所述溶剂瓶是可以反复开启和密封的溶剂瓶，优选是玻璃瓶； 所述溶剂瓶内装入的提取溶剂的体积占溶剂瓶容量的1/10?9/10 ; 所述电化学方法的测定仪是电导率测定仪和/或TDS水质检测仪；和/或 所述使用说明资料基本上记载了权利要求卜6任一项所述的方法。
9. 一种信息说明资料，其特征在于：其中基本上记载了权利要求1-6任一项所述的方 法，进一步地，该信息说明资料是呈选自下列的形式：纸质文件（包括但不限于文件单页、 小册子、刊物）、磁介质、光盘、软盘、电子出版物、网络出版物等，以及它们的组合。
10. -种制品，其未标示含有丙嗪类物质，但是使用权利要求1_9任一项所述方法、试 剂盒和/或信息说明资料检测显示该制品含有丙嗪类物质。
【文档编号】G01N27/26GK104215480SQ201310217314
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2013年6月3日 优先权日:2013年6月3日
【发明者】王铁松, 车宝泉, 纪菁 申请人:北京市药品检验所