注射液中有效成分的含量测定方法
【专利摘要】注射液中有效成分的含量测定方法 属于 含量测定【技术领域】，尤其涉及一种注射液中有效成分的含量测定方法。本发明提供一种 色谱图显示效果好、灵敏可靠、重现性好 的注射液中有效成分的含量测定方法。本发明包括以下步骤：1）称取5F对照品，加适量甲醇溶解，转入瓶中，加甲醇定容至刻度，作为5F对照品储备液。2）量取半边旗注射液放入量瓶中，加甲醇定容至刻度，得到供试品溶液。3）取空白溶剂放入量瓶中，加甲醇定容至刻度，得阴性对照品溶液。4）取对照品储备液、供试品溶液和阴性对照品溶液，分别进样HPLC分析，记录色谱图。
【专利说明】注射液中有效成分的含量测定方法
【技术领域】
[0001]本发明属于含量测定【技术领域】，尤其涉及一种注射液中有效成分的含量测定方法。
【背景技术】
[0002]半边旗为凤尾属蕨类植物，收载于《中华药物大词典》，广泛分布于我国南方各省，民问常用于治疗蛇伤、外伤出血、抗菌痢、肠炎、肝炎等。。本课题组在筛选抗肿瘤植物药时发现，半边旗的乙醇及水提取物显示良好的体内外抗肿瘤活性，进一步分离纯化得到一种贝壳杉烷删二萜化合物。该物质具有刚性四环二萜结构，其抗肿瘤活性可能与分子中d、B-不饱和环戊囿与结构有关。该物质疏水性强，难溶于水，影响了药效发挥。通过增加药物的溶解度，制成主要成分是5F的半边旗注射液单方制剂。药理学研究表明半边旗5F注射液对瘤株有旺著的体外抗肿瘤活性，对荷瘤小鼠肝癌，在体内也有抗肿瘤活性。目前关于半边旗5F注射液中有效成分的含量测定方法未见报道。
【发明内容】
[0003]本发明就是针对上述问题，提供一种色谱图显示效果好、灵敏可靠、重现性好的注射液中有效成分的含量测定方法。
[0004]为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案，本发明包括以下步骤。
[0005]称取5F对照品，加适量甲醇溶解，转入瓶中，加甲醇定容至刻度，作为5F对照品储备液。
[0006]量取半边旗注射液放入量瓶中，加甲醇定容至刻度，得到供试品溶液。
[0007]取空白溶剂放入量瓶中，加甲醇定容至刻度，得阴性对照品溶液。
[0008]取对照品储备液、供试品溶液和阴性对照品溶液，分别进样HPLC分析，记录色谱图。
[0009]作为一种优选方案，本发明所述HPLC分析的色谱条件为:流动相为甲醇、水、冰醋酸；检测波长为254nm ;流速为1.0mL.mirT1 ;柱温为35。。。
[0010]作为另一种优选方案，本发明所述甲醇、水、冰醋酸的重量比为55:45:0.045。
[0011]本发明有益效果。
[0012]本发明在HPLC测定前无需萃取分离，选用甲醇作为稀释溶剂，所得色谱图的峰形明显，色谱峰对称性好，无拖尾。另外，实践证明本发明灵敏可靠、重现性好。
【具体实施方式】
[0013]本发明包括以下步骤。
[0014]称取5F对照品，加适量甲醇溶解，转入瓶中，加甲醇定容至刻度，作为5F对照品储备液。
[0015]量取半边旗注射液放入量瓶中，加甲醇定容至刻度，得到供试品溶液。
[0016]取空白溶剂放入量瓶中，加甲醇定容至刻度，得阴性对照品溶液。
[0017]取对照品储备液、供试品溶液和阴性对照品溶液，分别进样HPLC分析，记录色谱图。
[0018]所述HPLC分析的色谱条件为:流动相为甲醇、水、冰醋酸；检测波长为254nm;流速为 1.0mL.mirT1 ;柱温为 35。。。
[0019]所述甲醇、水、冰醋酸的重量比为55:45:0.045。
[0020]可取同批号供试品6份，按供试品溶液配制方法制样，每份进样20UL，记录峰面积，测定5F含量，计算得供试品5F含量的RSD为1.67%，表明本方法的重复性良好。
[0021]可取相同供试样品溶液，分别在0，1,2,4, 29h进样HPLC测定5F的峰面积，计算峰面积相对标准偏差RSD。计算得RSD为0.92%，表明样品溶液在29h内稳定。
[0022]可取相同批号供试品溶液9份，按处方量分别加入100%，80%和120%的对照品各3份，按供试品溶液制备方法制样，每份进样20UL，测定5F回收率。
[0023]可取3个批号的注射液样品，按照供试品溶液配制方法制样。精密吸取对照品溶液和各供试品溶液20UL，进样高效液相色谱，分别测得3批注射液样品中5F的含量。
[0024]以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明，对于本发明所属【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明所提交的权利要求书确定的保护范围。
【权利要求】
1.注射液中有效成分的含量测定方法，其特征在于包括以下步骤: 1)称取5F对照品，加适量甲醇溶解，转入瓶中，加甲醇定容至刻度，作为5F对照品储备液； 2)量取半边旗注射液放入量瓶中，加甲醇定容至刻度，得到供试品溶液； 3)取空白溶剂放入量瓶中，加甲醇定容至刻度，得阴性对照品溶液； 4)取对照品储备液、供试品溶液和阴性对照品溶液，分别进样HPLC分析，记录色谱图。
2.根据权利要求1所述注射液中有效成分的含量测定方法，其特征在于所述HPLC分析的色谱条件为:流动相为甲醇、水、冰醋酸；检测波长为254nm ;流速为1.0mL ?mirT1 ;柱温为35。。。
3.根据权利要求2所述注射液中有效成分的含量测定方法，其特征在于所述甲醇、水、冰醋酸的重量比为55:45:0.045。
【文档编号】G01N30/02GK104458971SQ201310417770
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2013年9月15日 优先权日:2013年9月15日
【发明者】李志刚, 尹敏达, 鲍明煦 申请人:李志刚