盐酸氨基葡萄糖片的含量测定方法
【专利摘要】本发明公开一种盐酸氨基葡萄糖片的含量测定方法。该方法采用高效液相-蒸发光散射检测法，色谱柱：NH2柱，5um，250×4.6um，流动相组成为乙腈：水=（8-6:2.5-3.5），流速为0.8-1.2ml/min，柱温为30-40℃，检测器为AlltechELSD2000，漂移管温度为65-75℃，氮气压力为0.6-3.0MP；吸取对照贮备液、供试品溶液、阴性辅料溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。计算标准品溶液浓度的值为X与相应峰面积值为Y，进行线性拟合，得出线性回归方程，线性范围为0.2-1.2mg/ml。
【专利说明】盐酸氨基葡萄糖片的含量测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种药物的质量控制方法，特别涉及盐酸氨基葡萄糖片的含量测定方法。
【背景技术】
[0002]盐酸氨基葡萄糖胶囊原国家标准WSl- (x-090) -2005Z采用紫外可见分光光度法测定，该法是通过测定衍生化反应生成物含量间接测定盐酸氨基葡萄糖的含量，但测定的重复性较差。样品处理需衍生化反应，操作较为繁琐，且样品溶液的稳定性不高，重复性不强。
专利申请号:201210012194.8盐酸氨基葡萄糖片的含量测定方法公示了一种盐酸氨基葡萄糖片的测定方法，该方法使用乙腈、水和三氟乙酸为流动相，使用C18为填料的色谱柱。该方法流动相中的三氟乙酸具有腐蚀性，并且色谱图中峰保留时间较短，分离效果较差，该方法的线性范围为0.8^1.2mg/ml，测量浓度范围窄。
[0003]目前盐酸氨基葡萄糖片的质量控制方法尚不完善。
【发明内容】
[0004]本发明目的在于提供盐酸氨基葡萄糖片的含量测定方法。
[0005]本发明的目的是通过如下技术方案实现:
本发明盐酸氨基葡萄糖片的含量测定方法，该方法包括如下步骤:
色谱柱NH2柱，5um，250X4.6um，流动相组成为乙腈:水=(8-6:2.5-3.5)，流速为
0.8-1.2ml/min，柱温为 30_40°C，检测器为 Alltech ELSD 2000，漂移管温度为 65_75°C，氮气压力为0.6-3.0ΜΡ。
[0006]供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
[0007]对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
[0008]阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液。
[0009]在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20u`l、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99 ;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰:本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
[0010]本发明盐酸氨基葡萄糖片含量测定的优选方法如下: 色谱柱NH2柱,5um, 250X4.6mm,流动相组成为乙腈:水(7:3),流速为1.0ml/min,柱温为35°C，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70°C，氮气压力为1.0MP。
[0011]供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置IOOml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
[0012]对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
[0013]阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液。
[0014]在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰:本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
[0015]色谱柱NH2柱，5um,250X4.6mm,流动相组成为乙腈:水(7.5:3),流速为1.2ml/min，柱温为30°C，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为75°C，氮气压力为1.2MP。
[0016]供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置IOOml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
[0017]对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
[0018]阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液。
[0019]在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰:本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
[0020]色谱柱NH2柱，5um,250X4.6mm,流动相组成为乙腈:水(6.5:3),流速为0.9ml/min，柱温为40°C，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为72°C，氮气压力为1.4MP。
[0021]供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置IOOml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
[0022]对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
[0023]阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液。[0024]在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰:本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
[0025]盐酸氨基葡萄糖片由如下方法制成:由盐酸氨基葡萄糖为主药，微晶纤维素为填充剂，经制粒，总混，片填充，包装即得。
[0026]本发明质量控制方法依据试验结果表明其重复性良好，线性关系良好，精密度良好，溶液稳定性好，回收率良好，线性范围广。
[0027]【专利附图】
【附图说明】:图1为系统适用性对照品色谱图；
图2为系统适用性供试品色谱图；
图3为系统适用性阴性色谱图；
图4为线性关系标准曲线图。
[0028]以下通过实施例形式再对本发明的内容作进一步详细说明，但不应就此理解为本发明上述主题范围内仅限于以下实施例。在不脱离本发明上述技术前提下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的相应替换或变更的修改，均包括在本发明的范围内。
[0029]实施例1
系统适用性实验
色谱柱NH2柱,5um, 250X4.6mm,流动相组成为乙腈:水(7:3),流速为1.0ml/min,柱温为35°C，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70°C，氮气压力为1.0MP。
[0030]供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置IOOml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液。
[0031]对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液。2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用。
[0032]阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液。
[0033]在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图。
[0034]结果表明:供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液色谱相同保留时间处，有相同的峰，峰形对称，理论塔板数为2000以上，阴性辅料样品溶液色谱中，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰。结果见图1、图2、图3。
[0035]实施例2 线性关系实验
取对照品忙备液(2mg/ml),分别加水稀释成0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml、0.8mg/ml、1.0mg/ml、1.2mg/ml不同浓度的对照品溶液，分别吸取各对照溶液20ul，注入液相色谱仪。计算浓度值与峰面积值的线性方程及回归系数，结果见表I见图4。
[0036]表I线性关系实验数据表
【权利要求】
1.一种盐酸氨基葡萄糖片的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤: 1)本发明盐酸氨基葡萄糖片的含量测定方法，该方法包括如下步骤: 色谱柱NH2柱，5um，250X4.6um，流动相组成为乙腈:水=(8-6:2.5-3.5)，流速为0.8-1.2ml/min，柱温为 30_40°C，检测器为 Alltech ELSD 2000，漂移管温度为 65_75°C，氮气压力为0.6-3.0MP ； 2)供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液； 3)对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用； 4)阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液； 5)在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰:本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml，所述盐酸氨基葡萄糖片由如下方法制成:由盐酸氨基葡萄糖为主药，微晶纤维素为填充剂，经制粒，总混，压片，包装即得。
2.权利要求1.所述的盐酸氨基葡萄糖片的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤: 1)色谱柱NH2柱,5um,250X4.6mm,流动相组成为乙腈:水(7:3),流速为1.0ml/min,柱温为35°C，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为70°C，氮气压力为1.0MP ； 2)供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液； 3)对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用； 4)阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液； 5)在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰:本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
3.权利要求1.所述的盐酸氨基葡萄糖片的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤:1)色谱柱NH2柱,5um,250X4.6mm,流动相组成为乙腈:水(7.5:3),流速为1.2ml/min,柱温为30°C，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为75°C，氮气压力为1.2MP ； 2)供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液； 3)对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用； 4)阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液； 5)在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰:本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
4.权利要求1.所述的盐酸氨基葡萄糖片的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤:
1)色谱柱NH2柱,5um,250X4.6mm,流动相组成为乙腈:水(6.5:3),流速为0.9ml/min,柱温为40°C，检测器为Alltech ELSD 2000，漂移管温度为72°C，氮气压力为1.4MP ； 2)供试品溶液的制备:取相当于IOOmg盐酸氨基葡萄糖的供试品，精密称定，置100ml容量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，制得浓度lmg/ml的溶液，经0.45um的微孔滤膜滤过，精密量取续滤液作为供试品溶液； 3)对照溶液的制备:取盐酸氨基葡萄糖对照品适量，精密称定，从供试品溶液制备法的浓度1.0mg/ml的溶液作为对照品溶液，2mg/ml对照品溶液作为贮备液备用； 4)阴性辅料溶液的制备:按处方比例称取辅料约lOOmg，制得浓度约lmg/ml的溶液作为阴性辅料液； 5)在上述色谱条件下，精密吸取对照溶液20ul、供试品溶液20ul、阴性辅料溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99;精密吸取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液相同保留时间处有相同的峰，峰形对称，理论塔板数2000以上；阴性辅料样品溶液色谱图，无与盐酸氨基葡萄糖对照品相同的峰出现，即阴性无干扰:本发明供试品含氨基葡萄糖C6H13O5N.HCl应为标示量的95%-105%，浓度范围为0.2-1.2mg/ml。
【文档编号】G01N30/02GK103760244SQ201310569739
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2013年11月13日 优先权日:2013年11月13日
【发明者】王崇益, 张欣, 陈文静 申请人:江苏正大清江制药有限公司