一种奥硝唑注射液质量控制方法
【专利摘要】本发明涉及一种奥硝唑注射液质量控制方法，具体涉及采用气相色谱法对奥硝唑注射液中助溶剂1,2-丙二醇及其杂质二甘醇进行定量测定，包括如下步骤：（1）对照品溶液的制备与气相色谱测试；（2）样品溶液的制备与气相色谱测试；（3）按外标法以峰面积计算含量。本发明可准确的检测到奥硝唑注射液中1,2-丙二醇及其杂质二甘醇的含量，保证了奥硝唑注射液的安全性；同时操作简便，安全可靠，是一种全新的奥硝唑注射液质量控制方法。
【专利说明】一种奥硝唑注射液质量控制方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种奥硝唑注射液质量控制方法，具体涉及一种奥硝唑注射液中助溶剂1，2-丙二醇及其杂质二甘醇的含量测定方法，属于药物分析领域。
【背景技术】
[0002]奥硝唑为第三代硝基咪唑类衍生物，用于治疗厌氧菌、原虫和滴虫感染。其发挥抗微生物作用的机理可能是:通过其分子中的硝基，在无氧环境中还原成氨基或通过自由基的形成，与细胞成分相互作用，从而导致微生物死亡。奥硝唑的血浆消除半衰期为14小时，血浆蛋白结合率为15%，广泛分布于组织和体液中，包括脑脊液。奥硝唑在肝中代谢，在尿中主要以轭合物和代谢物排泄，小量在粪便中排泄。
[0003]1，2-丙二醇已收载于《药用辅料手册》。最新版本《Handbook of PharmaceuticalExcipients, 6th Edition》中规定，1，2-丙二醇在注射剂中常规用量为10?60%。二甘醇属于低毒类化学物质，但大剂量摄入可引起肾脏及中枢神经损害。欧盟食品科学委员会制定的标准规定，每人每天摄入不超过0.5mg/kg的二甘醇不会对人体造成危害。奥硝唑注射液上市制剂中均采用了 1，2-丙二醇作为助溶剂，但上市品未对1，2-丙二醇进行研究并订入质量标准。我们翻阅了国内外其他资料，也未见有对奥硝唑注射液中1，2-丙二醇及其杂质二甘醇的质量控制的报道。为了更好的控制产品质量，我们按照《中国药典》2010年版二部拟增修订附录I制剂通则要求:注射剂中的非水性溶剂，应严格限制其用量，并应在品种项下进行相应的检查”。我公司对1，2-丙二醇及其杂质二甘醇进行了详细的方法学研究，丙二醇限度确定为270?330mg/ml，二甘醇限度为不得过0.5mg/g，并订入了质量标准。
【发明内容】
[0004]本发明的目的在于提供一种奥硝唑注射液质量控制方法，定量测定奥硝唑注射液中其助溶剂1，2-丙二醇及其杂质二甘醇，本方法操作简便，安全可靠，适用性强。
[0005]为了达到以上目的，本发明采用的技术方案为:一种奥硝唑注射液质量控制方法，其特征在于采用气相色谱法对奥硝唑注射液中的助溶剂1，2-丙二醇及其杂质二甘醇进行定量测定。
[0006]其中，所述的助溶剂1，2-丙二醇定量测定方法步骤如下:
(1)对照品溶液的制备与气相色谱测试:取1，2_丙二醇对照品适量，精密称定，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含6mg的溶液，作为对照品贮备溶液；精密量取对照品贮备溶液适量，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含0.6mg的溶液，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图，积分得对照品溶液中1，2-丙二醇峰面积；
(2)样品溶液的制备与气相色谱测试:精密量取奥硝唑注射液2ml置IOOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。精密量取样品溶液I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图，积分得样品溶液中1，2-丙二醇峰面积； (3)按外标法以峰面积计算1，2-丙二醇含量；
其中气相色谱测试条件:
色谱柱填料:(14%-氰丙基-苯基)甲基聚硅氧烷；
载气:氮气；
检测器:FID ；
柱流量:2.0ml/min ；
恒压模式:74.5Kpa ；
柱温箱温度:80°C，维持3分钟；以每分钟15?20°C的速率升至240°C，维持5分钟； 进样口温度:24(T260°C ；
检测器温度:27(T290°C ；
进样量:lul ；
进样方式:直接进样。
[0007]所述的杂质二甘醇定量测定方法步骤如下:
(1)对照品溶液的制备与气相色谱测试:精密称取二甘醇对照品约25mg置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取贮备液Iml置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为二甘醇对照品溶液。精密量取样品溶液I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图，积分得对照品溶液中二甘醇峰面积；
(2)样品溶液的制备与气相色谱测试:精密称取奥硝唑注射液约1.0g，置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液。精密量取样品溶液I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图，积分得样品溶液中二甘醇的峰面积；
(3)按外标法以峰面积计算二甘醇含量；
其中气相色谱测试条件:
色谱柱填料:(14%-氰丙基-苯基)甲基聚硅氧烷；
载气:氮气；
检测器:FID ；
柱流量:2.0ml/min ；
恒压模式:74.5Kpa ；
柱温箱温度:80°C，维持3分钟；以每分钟15?20°C的速率升至240°C，维持5分钟； 进样口温度:24(T260°C ；
检测器温度:27(T290°C ；
进样量:lul ；
进样方式:直接进样。
[0008]本发明提供的1，2-丙二醇及二甘醇的测定方法，可准确的检测到奥硝唑注射液中1，2-丙二醇及其杂质二甘醇的含量，保证了奥硝唑注射液质量的安全性；同时操作简便，安全可靠，是一种全新的奥硝唑注射液质量控制方法。
【专利附图】
【附图说明】
[0009]图1为本发明实施例1中1，2-丙二醇对照品溶液的色谱图；
图2为本发明实施例1中1，2-丙二醇样品溶液的色谱图；图3为本发明实施例1二甘醇对照品溶液的色谱图；
图4为本发明实施例1二甘醇样品溶液的色谱图；
图5为本发明实施例2中1，2-丙二醇对照品溶液的色谱图；
图6为本发明实施例2中1，2-丙二醇样品溶液的色谱图；
图7为本发明实施例2 二甘醇对照品溶液的色谱图；
图8为本发明实施例2 二甘醇样品溶液的色谱图；
图9为本发明实施例3中1，2-丙二醇对照品溶液的色谱图；
图10为本发明实施例3中1，2-丙二醇样品溶液的色谱图；
图11为本发明实施例3 二甘醇对照品溶液的色谱图；
图12为本发明实施例3 二甘醇样品溶液的色谱图。
[0010]【具体实施方式】
下面结合【具体实施方式】对本发明作进一步详细描述:
实施例1:气相色谱法测定奥硝唑注射液中1，2-丙二醇及其杂质二甘醇的含量色谱条件及系统适用性试验:以(14%-氰丙基-苯基)-甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱，起始温度80°C，维持3分钟，以每分钟20°C的速率升温至240°C，维持5分钟；进样口温度为240°C ;检测器(FID)温度为270°C。
`[0011]1，2-丙二醇对照品溶液的制备:取1，2_丙二醇对照品适量，精密称定，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含6mg的溶液，作为对照品贮备溶液；精密量取对照品贮备溶液适量，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含0.6mg的溶液。精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到对照品溶液峰面积。
[0012]I, 2-丙二醇样品溶液的制备:精密量取奥硝唑注射液2ml置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到样品溶液峰面积。
[0013]二甘醇对照品溶液的制备:精密称取二甘醇对照品约25mg置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取贮备液Iml置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到对照品溶液峰面积。
[0014]二甘醇样品溶液的制备:精密称取奥硝唑注射液约lg，置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到样品溶液峰面积。
测定法:精密量取上述样品溶液和对照品溶液各ιμ?，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。1，2-丙二醇对照品溶液色谱图见图1，样品溶液色谱图见图2 ；二甘醇对照品溶液色谱图如图3，样品溶液色谱图如图4。
[0015]实施例2:气相色谱法测定奥硝唑注射液中1，2-丙二醇及其杂质二甘醇的含量 色谱条件及系统适用性试验:以(14%-氰丙基-苯基)-甲基聚硅氧烷(或极性相近)
为固定液的毛细管柱为色谱柱，起始温度80°C，维持3分钟，以每分钟20°C的速率升温至240°C，维持5分钟；进样口温度为250°C ;检测器(FID)温度为280°C。
[0016]1，2-丙二醇对照品溶液的制备:取1，2-丙二醇对照品适量，精密称定，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含6mg的溶液，作为对照品贮备溶液；精密量取对照品贮备溶液适量，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含0.6mg的溶液。精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到对照品溶液峰面积。[0017]I, 2-丙二醇样品溶液的制备:精密量取奥硝唑注射液2ml置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到样品溶液峰面积。
[0018]二甘醇对照品溶液的制备:精密称取二甘醇对照品约25mg置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取贮备液Iml置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到对照品溶液峰面积。
[0019]二甘醇样品溶液的制备:精密称取奥硝唑注射液约lg，置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到样品溶液峰面积。
测定法:精密量取上述样品溶液和对照品溶液各ιμ?，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。1，2-丙二醇对照品溶液色谱图见图5，样品溶液色谱图见图6 ;二甘醇对照品溶液色谱图如图7，样品溶液色谱图如图8。
[0020]实施例3:气相色谱法测定奥硝唑注射液中1，2-丙二醇及其杂质二甘醇的含量 色谱条件及系统适用性试验以(14%-氰丙基-苯基)-甲基聚硅氧烷(或极性相近)
为固定液的毛细管柱为色谱柱，起始温度80°C，维持3分钟，以每分钟20°C的速率升温至240°C，维持5分钟；进样口温度为260°C ;检测器(FID)温度为290°C。
[0021]1，2-丙二醇对照品溶液的制备:取1，2-丙二醇对照品适量，精密称定，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含6mg的溶液，作为对照品贮备溶液；精密量取对照品贮备溶液适量，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含0.6mg的溶液。精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到对照品溶液峰面积。
[0022]1, 2-丙二醇样品溶液的制备:精密量取奥硝唑注射液2ml置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到样品溶液峰面积。
[0023]二甘醇对照品溶液的制备:精密称取二甘醇对照品约25mg置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取贮备液Iml置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到对照品溶液峰面积。
[0024]二甘醇样品溶液的制备:精密称取奥硝唑注射液约lg，置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取Iul注入气相色谱仪，得到色谱图，积分得到样品溶液峰面积。
[0025]测定法:精密量取上述样品溶液和对照品溶液各?μ?，分别注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。1，2-丙二醇对照品溶液色谱图见图9，样品溶液色谱图见图10 ;二甘醇对照品溶液色谱图如图11，样品溶液色谱图如图12。
【权利要求】
1.一种奥硝唑注射液质量控制方法，其特征在于采用气相色谱法对奥硝唑注射液中的助溶剂1，2-丙二醇及其杂质二甘醇进行定量测定。
2.根据权利要求1所述的一种奥硝唑注射液质量控制方法，其特征在于所述的助溶剂1，2-丙二醇的定量测定方法步骤如下: (1)对照品溶液的制备与气相色谱测试:取1，2_丙二醇对照品适量，精密称定，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含6mg的溶液，作为对照品贮备溶液；精密量取对照品贮备溶液适量，用甲醇定量稀释制成每Iml中约含0.6mg的溶液，作为对照品溶液；精密量取对照品溶液I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图，积分得对照品溶液中1，2-丙二醇峰面积； (2)样品溶液的制备与气相色谱测试:精密量取奥硝唑注射液2ml置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液；精密量取样品溶液I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图，积分得样品溶液中1，2-丙二醇峰面积； (3)按外标法以峰面积计算1，2-丙二醇含量； 其中，所述的气相色谱测试条件: 色谱柱填料:甲基聚硅氧烷； 载气:氮气； 检测器=FID ； 柱流量:2.0ml/min ； 恒压模式:74.5Kpa ； 柱温箱温度:80°C，维持3分钟；以每分钟15~20°C的速率升至240°C，维持5分钟； 进样口温度:24(T260°C ； 检测器温度:27(T290°C ； 进样量:lul ； 进样方式:直接进样。
3.根据权利要求1所述的一种奥硝唑注射液质量控制方法，其特征在于所述的杂质二甘醇的定量测定方法步骤如下: (1)对照品溶液的制备与气相色谱测试:精密称取二甘醇对照品约25mg置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液；精密量取贮备液Iml置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为二甘醇对照品溶液；精密量取样品溶液I μ I注入气相色谱仪，记录色谱图，积分得对照品溶液中二甘醇峰面积； (2)样品溶液的制备与气相色谱测试:精密称取奥硝唑注射液约1.0g，置IOml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液；精密量取样品溶液1μ I注入气相色谱仪，记录色谱图，积分得样品溶液中二甘醇的峰面积； (3)按外标法以峰面积计算二甘醇含量； 其中，所述的气相色谱测试条件: 色谱柱填料:甲基聚硅氧烷； 载气:氮气； 检测器=FID ； 柱流量:2.0ml/min ；恒压模式:74.5Kpa ；柱温箱温度:80°C，维持3分钟；以每分钟15~20°C的速率升至240°C，维持5分钟；进样口温度:24(T260°C ；检测器温度:27(T290°C ；进样量:lul ；进样方式:直 接进样。
【文档编号】G01N30/02GK103675137SQ201310672149
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年12月12日 优先权日:2013年12月12日
【发明者】路云, 刘绪贵, 陈鸣远, 臧隽忻 申请人:山东齐都药业有限公司