一种高效液相色谱－串联质谱联用检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法
【专利摘要】本发明公开了一种高效液相色谱－串联质谱联用检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法，利用玻璃纤维滤片捕集卷烟侧流烟气中的乌洛托品，用乙腈萃取滤片和清洗鱼尾罩及管路，分别取0.5mL的萃取液和0.5mL的清洗液合并，经有机相滤膜净化，用LC-MS/MS进行检测，分析卷烟侧流烟气中乌洛托品的含量。本发明采用LC-MS/MS测定卷烟侧流烟气中乌洛托品的含量，采用多反应监测模式（MRM）进行定性，能够有效提高定性准确度和方法的灵敏度，适用于各类卷烟侧流烟气中乌洛托品的测定。不仅应用广泛，测定精准，而且方法简单，环境友好，具有很好的实用性。
【专利说明】 一种高效液相色谱一串联质谱联用检测卷烟侧流烟气中乌
洛托品的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于卷烟烟气【技术领域】，具体涉及一种高效液相色谱一串联质谱联用(LC-MS/MS)检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法。
【背景技术】
[0002]环境烟草烟气(ETS)是重要的室内污染物，被动吸烟者感受的就是该种物质，而卷烟的侧流烟气是环境烟气的主要来源，约占环境烟气的85%。目前，加拿大等一些国家和地区已经指定了相关的法律，要求卷烟生产商提供卷烟烟气中有害成分的释放量，有鉴于此，有必要对侧流烟气中的有害成分进行深入分析。侧流烟气是从卷烟燃烧锥直接释放到空气以及从卷烟纸扩散出来的烟气物质，大部分侧流烟气是在卷烟阴燃过程中发生的，也有一小部分是从抽吸过程中生成，因此，主流和侧流烟气的化合物种类基本相同，但是含量有较大差别。乌洛托品在卷烟主流和侧流烟气中均有分布，但是其在侧流烟气中的含量要高于在主流烟气中的含量。
[0003]乌洛托品是是一种有害化学成分，具腐蚀性，可致人体灼伤，其熔点263°C，如超过此熔点即升华并分解，但不熔融。升温至300°C时放出氰化氢，温度再升高时，则分解为甲烷、氢和氮。当人体接触该品时，主要引起皮炎和湿疹。
[0004]随着公众对吸烟与健康问题的日益关注，卷烟烟气中有害成分乌洛托品成为人们关注的焦点问题，由于侧流烟气组成复杂，成分种类繁多，基质干扰严重，而目前国内外尚没有检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的任何文献报道和专利。
【发明内容】
[0005]发明目的:针对现有技术中存在的不足，本发明的目的在于提供一种高效液相色谱一串联质谱联用检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法，能准确灵敏适用于各类卷烟侧流烟气中乌洛托品的测定。
[0006]技术方案:为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案:
一种高效液相色谱一串联质谱联用检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法，利用玻璃纤维滤片捕集卷烟侧流烟气中的乌洛托品，用乙腈萃取滤片和清洗鱼尾罩及管路，分别取0.5mL的萃取液和0.5mL的清洗液合并，经有机相滤膜净化，用LC-MS/MS进行检测，分析卷烟侧流烟气中乌洛托品的含量。
[0007]所述LC-MS/MS联用检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法，具体步骤如下:
I)将待测卷烟在GB/T 16447-2004规定的大气环境条件下平衡48h，然后按照“重量允差±20mg，吸阻允差±50Pa”的要求筛选卷烟，标记卷烟的抽吸停止线，按照YC/T185中侧流烟气抽吸方法，调节侧流吸烟机的抽吸流量为3000mL/min，抽吸2支卷烟，用剑桥滤片和装有25mL乙腈的吸收瓶捕集侧流烟气总粒相物；抽吸完成后，用1/4的滤片擦拭捕集器后与滤片合并置于IOOmL锥形瓶中，向其中加入50mL的乙腈萃取溶液然后将锥形瓶置于调速振荡器上振荡40分钟；用30mL乙腈分2~3次清洗鱼尾罩清洗液合并后定容至50mL ；
2)移取吸收液和萃取液各0.5mL合并后稀释定容于25mL容量瓶中，上LC-MS/MS进行测定；高效液相色谱仪条件为:C18反相柱，检测温度301:，进样量111171(^1^，流速
0.2^0.4mL/min,乙腈和水作为流动相进行等度洗脱；所述质谱仪条件为:离子化模式为电喷雾；扫描模式为正离子；雾化气40psi ;气帘气IOpsi ;辅助加热气40psi ;碰撞气5psi ；离子源射电压400(T5000V ;离子源温度25(T350°C。
[0008]所述高效液相色谱仪流动相A为乙腈，流动相B为lOmmol/L的乙酸铵，A的比例高于70%，B的比例低于30%，进行等度洗脱。
[0009]有益效果:与现有技术相比，本发明采用LC-MS/MS测定卷烟侧流烟气中乌洛托品的含量，采用多反应监测模式(MRM)进行定性，能够有效提高定性准确度和方法的灵敏度，适用于各类卷烟侧流烟气中乌洛托品的测定。不仅应用广泛，测定精准，而且方法简单，环境友好，具有很好的实用性。
【专利附图】
【附图说明】
[0010]图1为标准溶液的色谱图。
【具体实施方式】
[0011]下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。
[0012]以下实施例所使用的主要仪器、试剂如下:
美国Applied Biosystem公司API3200型三重四级杆串联质谱仪,配有电喷雾离子源以及Analyst系统软件,美国Agilent公司1200型高效液相色谱仪,带自动进样器，德国Borgwaldt KC LM5型吸烟机，电子天平(感量0.1mg),回旋可调机械振荡器,上海安谱科学仪器有限公司有机相滤膜(0.45 μ m)。
[0013]乙腈为色谱纯，乙酸铵为分析纯，去离子水；乌洛托品标准品，纯度> 99%。
[0014]实施例1
一种高效液相色谱一串联质谱联用检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法，包括以下步
骤:
抽吸卷烟样品:选择某种市售卷烟A在(22±1) °C、相对湿度(60±3)%条件下平衡48小时，然后按照“重量允差±20mg，吸阻允差±50Pa”的要求筛选卷烟，然后标记卷烟的抽吸停止线，按照YC/T185中侧流烟气抽吸方法，调节侧流吸烟机的抽吸流量为3000mL/min，抽吸2支卷烟，用装有25mL的吸收瓶、鱼尾罩和玻璃纤维滤片捕集侧流烟气的总粒相物。
[0015]抽吸后，用1/4的滤片擦拭捕集器与含有侧流烟气粒相物的滤片合并后放入IOOmL锥形瓶中，向其中加入50mL的乙腈萃取溶液振荡40分钟；30mL乙腈分2~3次清洗鱼尾罩清洗液合并后定容至50mL ;移取上述吸收液和萃取液各0.5mL合并后稀释定容于25mL容量瓶中；取适量溶液过0.45微米有机相滤膜后，得到样品待测液，上LC-MS/MS进行检测分析。高效液相色谱 柱:C18反相柱，检测温度30°C，进样量5 μ L，流速0.2mL/min,乙腈和10mmol/L乙酸铵溶液的比例为80:20等度洗脱。质谱仪的条件参数为:离子化模式为电喷雾；扫描模式为正离子；雾化气40psi ;气帘气IOpsi ;辅助加热气40psi ;碰撞气5psi ；离子源射电压4500V;离子源温度250°C。乌洛托品的定性离子对m/z为141.2/111.9、141.2/97.8,141.2/84.8，驻留时间为 200ms，碰撞能为 15。
[0016]标准储备液的配制:准确称取约IOOyg的乌洛托品于50mL烧杯中，精确至
0.0OOlg，加入约20mL乙腈完全溶解后转移至IOOmL容量瓶中，用少量乙腈荡洗烧杯3~5
次，洗涤液一并转移至容量瓶中，然后用乙腈定容至刻度。
[0017]系列标准工作溶液的配制:分别准确移取lmL、5mL、10mL、15mL、20mL乌洛托品标准储备液至IOOmL容量瓶中得到5级标准溶液,用该系列标准溶液制作外标法校正曲线。在10~200 ng/ml范围内，线性方程为Y=9986X_252，线性相关系数浐为0.9989。。
[0018]标准溶液的色谱图如图1所示，经分析，该卷烟侧流烟气中乌洛托品的释放量为57.23 μ g /cigo
[0019]实施例2
按照实施例1的方法对某卷烟平行测定12次，得到样品的重复性结果如表1所示。
[0020]表1某卷烟样品的平行实验(单位:μ g /cig)
【权利要求】
1.一种高效液相色谱一串联质谱联用检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)将待测卷烟在GB/T16447-2004规定的大气环境条件下平衡48h，然后按照“重量允差±20mg，吸阻允差±50Pa”的要求筛选卷烟，标记卷烟的抽吸停止线，按照YC/T185中侧流烟气抽吸方法，调节侧流吸烟机的抽吸流量为3000mL/min，抽吸2支卷烟，用剑桥滤片和装有25mL乙腈的吸收瓶捕集侧流烟气总粒相物；抽吸完成后，用1/4的滤片擦拭捕集器后与滤片合并置于IOOmL锥形瓶中，向其中加入50mL的乙腈萃取溶液然后将锥形瓶置于调速振荡器上振荡40分钟；用30mL乙腈分2?3次清洗鱼尾罩清洗液合并后定容至50mL ； 2)移取吸收液和萃取液各0.5mL合并后稀释定容于25mL容量瓶中，上LC-MS/MS进行测定；高效液相色谱仪条件为:C18反相柱，检测温度30°C，进样量I μ L?10 μ L，流速0.2"0.4mL/min,乙腈和10mmol/L的乙酸铵作为流动相进行等度洗脱；所述质谱仪条件为:离子化模式为电喷雾；扫描模式为正离子；雾化气40psi ;气帘气IOpsi ;辅助加热气40psi ;碰撞气5psi ;离子源射电压400(T5000V ;离子源温度25(T350°C。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱一串联质谱联用检测卷烟侧流烟气中乌洛托品的方法，其特征在于，步骤2)中，所述高效液相色谱仪流动相A为乙腈，流动相B为IOmmoI/L的乙酸铵，A的比例高于70%，B的比例低于30%，进行等度洗脱。
【文档编号】G01N30/06GK103792317SQ201410068905
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2014年2月28日 优先权日:2014年2月28日
【发明者】沈晓晨, 庄亚东, 张华 , 石怀彬, 王晨辉, 曹毅, 朱怀远, 韩开冬, 张媛, 朱莹, 何红梅, 盛金 申请人:江苏中烟工业有限责任公司