一种稳定的α-淀粉酶检测试剂盒的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，包括试剂R1及试剂R2；所述试剂R1的各组分及浓度为：缓冲液0.5～100mM，NaCl20～200mM，CaCl210～100mM，十二烷基苯磺酸钠1～10g/L，α-葡萄糖苷酶0.1～10KU/L，稳定剂0.1～10g/L，防腐剂0.1～10g/L；所述试剂R2的各组分及浓度为：缓冲液0.5～100mM，4,6-亚乙基-对硝基苯-α-D-麦芽七糖苷0.5～10g/L，十二烷基苯磺酸钠1～10g/L，稳定剂0.1～10g/L，防腐剂0.1～10g/L。本发明通过加入十二烷基苯磺酸钠改善试剂盒性能，本发明重复性好，试剂稳定，灵敏度高，线性范围广。
【专利说明】一种稳定的α-淀粉酶检测试剂盒
【技术领域】
[0001]本发明涉及医学免疫体外诊断领域，具体地，涉及一种稳定的α -淀粉酶检测试剂盒。
【背景技术】
[0002]淀粉酶(a -Amylase)简称AMS或AMY，一类能将淀粉分子水解的酶，一般作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖元等α-1，4-葡聚糖，水解α-1，4-糖苷键，产生葡聚糖、麦芽糖和葡萄糖分子。淀粉酶在胰腺和唾液腺中含量丰富，胰淀粉酶由胰腺以活性状态排入消化道，是最重要的水解碳水化合物的酶，和唾液腺分泌的淀粉酶一样都属于α-淀粉酶。淀粉酶分子量小，可通过肾小球滤过，随尿排出。当罹患胰腺疾病或有胰腺外分泌功能障碍时可引起淀粉酶活性升高或降低，因此，测定血清和尿液中的淀粉酶对胰腺炎的诊断具有重要意义。尿淀粉酶水平波动较大，所以优选血清淀粉酶检测，或两者同时测定。
[0003]α -淀粉酶是最早应用于临床检验的一个酶，早在20世纪初，就用来诊断急性胰腺炎，但是血清和尿液中的α -淀粉酶测定，长期以来一直是最难标准化的分析法。
[0004]其诊断方法:血、尿α -淀粉酶(AMY)测定在临床上的应用已有很长的历史，到目前为止，测定方法已不下200种。应用于淀粉酶测定的底物种类繁多，早期的测定方法所采用的底物是淀粉，六十年代出现了以染色淀粉为底物的测定方法，由于淀粉结构组成的不确定性及酶解产物的不均一性，使酶促反应不能按化学式量进行计算。应用不同来源、厂家、批号的淀粉作底物时，测得结果差别较大，方法不易标准化。染色淀粉中色素的加入量不易控制，操作繁杂，不适合自动分析。七十年代后期，国外出现了以具有明确结构组成的人工合成底物进行α-淀粉酶测定的方法，这些方法成为现在检测α-淀粉酶的主流，但是各个方法也存在着一些弊端，IFCC批准了用亚乙基封闭的G7-PNP作底物的酶偶联法(EPS法)作为临时推荐方法。
【发明内容】
[0005]针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种稳定的α -淀粉酶检测试剂盒，本发明采用IFCC批准的对于α-淀粉酶检测的参考方法，将其制备成适用于全自动生化仪的试剂盒，使得操作更为简便，同时通过加入十二烷基苯磺酸钠改善了试剂盒的性能。采用此方法重复性好，试剂稳定，灵敏度高，线性范围广。
[0006]本发明是通过以下技术方案实现的:
[0007]本发明涉及一种稳定的α -淀粉酶检测试剂盒，包括试剂Rl及试剂R2，所述试剂Rl的各组分及浓度包括:
[0008]
【权利要求】
1.一种稳定的α -淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，包括试剂Rl及试剂R2 ;所述试剂Rl的各组分及浓度包括:缓冲液0.5?100mmol/L，NaCl20?200mmol/L，CaCl210?lOOmmol/L，
十二焼基苯磺酸钠I?10g/L，α -葡萄糖苷酶0.1?10KU/L，稳定剂0.1?10 g/L，防腐剂0.1?10 g/L ； 所述试剂R2的各组分及浓度包括:缓冲液0.5?100 mmol/L，
4，6-亚乙基-对硝基苯-a -D-麦芽七糖苷0.5?10g/L，
十二焼基苯磺酸钠I?10g/L， 稳定剂0.1?10g/L, 防腐剂0.1?10g/L。
2.如权利要求1所述的稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂Rl中的缓冲液的pH 7.0?8.0。
3.如权利要求1所述的稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂Rl中的缓冲液包括甘氨酸缓冲液、Tris缓冲液、甘氨酸-NaOH缓冲液、HEPES缓冲液中的一种或几种的混合。
4.如权利要求1所述的稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂Rl中的稳定剂包括牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、螯合剂EDTA中的一种。
5.如权利要求1所述的稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂Rl中的防腐剂为叠氮钠或proclin300防腐剂。
6.如权利要求1所述的稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的缓冲液的pH 7.0?8.0。
7.如权利要求1所述的稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的缓冲液包括甘氨酸缓冲液、Tris缓冲液、甘氨酸-NaOH缓冲液、HEPES缓冲液中的一种或几种的混合。
8.如权利要求1所述的稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的稳定剂包括牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、螯合剂EDTA类中的一种。
9.如权利要求1所述的稳定的α-淀粉酶检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R2中的防腐剂为叠氮钠或proclin300防腐剂。
【文档编号】G01N33/52GK104198691SQ201410401270
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年8月14日 优先权日:2014年8月14日
【发明者】李伟奇, 李 杰, 房君江, 张秀文, 林清玉 申请人:上海睿康生物科技有限公司