尿分析装置及尿或体液中异型细胞的分析方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种测定混合尿和试剂制备的测定试样并由此分析尿中异型细胞的方法及尿分析装置。本发明还涉及一种测定混合体液和试剂制备的测定试样并由此分析体液中异型细胞的方法。
【背景技术】
[0002]专利文献1公开了一种用流式细胞法分析尿中所含有的粒子的粒子分析装置。专利文献1记述的粒子分析装置是让含有粒子的试样液流过鞘流室。粒子分析装置向鞘流室照射激光，从粒子检测光检测信号。粒子分析装置根据光检测信号的信号波形差分积分值及波峰水平，将尿中粒子分为包括有内含物的管型、上皮细胞和接近通过的白细胞的群体与其他群体。粒子分析装置根据光检测信号的脉冲宽度分类管型、上皮细胞及接近通过的白细胞。
[0003]专利文献
专利文献1:日本专利公报特开2002-188993号。
【发明内容】
[0004]发明要解决的技术问题
尿道系统癌症患者的尿有时含有异型细胞。所谓异型细胞是恶性细胞和疑似恶性细胞，指表现出伴有核酸量增大的核增大、染色质增量等异型性的细胞。检出尿中含有的异型细胞对于肾病或尿道系统癌症的早期发现来说在临床上非常重要。
[0005]专利文献1中未记述将尿中异型细胞与尿中其他有形成分区分并检测出来。
[0006]本发明的目的之一就是将尿中异型细胞与尿中其他有形成分区分开并检测出来。
[0007]本发明的另一个目标在于将体液中的异型细胞与其他体液中有形成分区分开并检测出来。
[0008]解决技术问题所采取的技术
一种尿中异型细胞的分析方法，其将尿、含表面活性剂的稀释液和核酸染色试剂混合，制备测定试样，用光照射测定试样，检测出从核酸染色的细胞发出的散射光和荧光，根据基于散射光的第一特征参数和基于荧光的第二特征参数将测定试样中所含有的异型细胞与白细胞区分开并检测出来。
[0009]优选地，在检测所述异型细胞的步骤中计数检测出的异型细胞；所述分析方法还包括当异型细胞多于一定值时输出表示存在异型细胞的信息的步骤。
[0010]优选地，在检测所述异型细胞的步骤中，计数检测出的白细胞和异型细胞；所述分析方法还包括与白细胞的计数结果一起显示基于异型细胞数量的信息的步骤。
[0011]优选地，在检测所述异型细胞的步骤中，根据所述第一特征参数和所述第二特征参数将所述测定试样中所含有的异型细胞与白细胞和上皮细胞区分开并检测出来。
[0012]优选地，在检测所述异型细胞的步骤中，根据所述第一特征参数和所述第二特征参数将所述测定试样中所含有的异型细胞与细菌或真菌区分开并检测出来。
[0013]优选地，在检测所述荧光的步骤中，以第一灵敏度检测出所述测定试样中的细胞发出的荧光，将荧光的检测灵敏度切换到比所述第一灵敏度高的第二灵敏度，以所述第二灵敏度检测出所述测定试样中的细胞发出的荧光；在检测所述异型细胞的步骤中，根据基于以所述第一灵敏度检测出的荧光的所述第二特征参数检测出异型细胞，根据基于以所述第二灵敏度检测出的荧光的所述第二特征参数检测出细菌。
[0014]优选地，所述第一特征参数是反映细胞大小的参数；所述第二特征参数是反映细胞核酸量的参数。
[0015]优选地，在检测所述异型细胞的步骤中，根据所述第一特征参数和第二特征参数，对所述测定试样中所含有的至少一部分有核细胞群体进行检测:将第一和第二特征参数在一定范围内的第一细胞群体作为白细胞检测出来；将具有比所述第一细胞群体高的第一特征参数的第二细胞群体作为上皮细胞检测出来；将具有比所述第一细胞群体高的第一特征参数、且具有比所述第二群体高的第二特征参数的第三细胞群体作为异型细胞检测出来。
[0016]优选地，还包括至少将尿分配为第一等分物和第二等分物的步骤；在制备所述测定试样的步骤中，将所述第一等分物与所述稀释液和所述核酸染色试剂混合，制备第一测定试样作为所述测定试样，将所述第二等分物与不同于所述稀释液的稀释液和不同于所述核酸染色试剂的试剂混合，制备第二测定试样；在检测所述异型细胞的步骤中，检测出所述第一测定试样中所含有的白细胞和异型细胞，检测出所述第二测定试样中所含有的红细胞。
[0017]优选地，在检测所述异型细胞的步骤中，除了所述第一特征参数和所述第二特征参数外，还根据基于所述散射光或所述荧光的第三特征参数，将所述测定试样中所含有的异型细胞与白细胞和白细胞凝集区分开并检测出来。
[0018]优选地，在检测所述异型细胞的步骤中，将所述测定试样中所含有的白细胞凝集与异型细胞区分开并检测出来并计数；所述分析方法还包括输出基于白细胞凝集的数量的信息的步骤。
[0019]优选地，所述第三特征参数是反映在表示所述散射光或所述荧光的强度随时间变化的信号中所含有的脉冲是单峰性还是多峰性的参数。
[0020]优选地，所述第三特征参数是所述脉冲的差分积分值与波峰值之比。
[0021]优选地，所述第一特征参数是表示检测出的所述散射光的强度随时间变化的散射光信号中所含有的脉冲的波峰值、所述脉冲的宽度或所述脉冲的面积。
[0022]优选地，所述第二特征参数是表示检测出的所述荧光的强度随时间变化的荧光信号中所含有的脉冲的宽度或所述脉冲的面积。
[0023]一种尿分析装置，其具有:试样制备部件，用于将尿、染色核酸的第一试剂和含表面活性剂的稀释液混合，制备测定试样；光学检测部件，用光照射测定试样，根据核酸染色的细胞发出的散射光和荧光输出散射光信号和荧光信号；信息处理部件，根据基于散射光信号的第一特征参数和基于荧光信号的第二特征参数，将测定试样中所含有的异型细胞与白细胞区分开并检测出来。
[0024]优选地，还包括样本分配部件，所述样本分配部件用于吸移尿并将所吸移的尿至少分配为第一等分物和第二等分物；所述试样制备部件将所述第一等分物与所述第一试剂和所述稀释液混合，制备第一测定试样作为所述测定试样，将所述第二等分物与不同于所述第一试剂的第二试剂混合，制备第二测定试样；所述光学检测部件用光照射所述第二测定试样，根据细胞发出的散射光和荧光输出第二散射光信号和第二荧光信号；所述信息处理部件根据所述第二散射光信号和所述第二荧光信号，检测出所述第二测定试样中含有的红细胞。
[0025]一种体液中异型细胞的分析方法:其将除了尿和血液以外的体液、含表面活性剂的稀释液和核酸染色试剂混合，制备测定试样，用光照射测定试样，检测从核酸染色的测定试样中的细胞发出的散射光和荧光，根据基于反映细胞大小的散射光的第一特征参数和基于反映细胞核酸量的荧光的第二特征参数将测定试样中所含有的异型细胞与白细胞区分开并检测出来。
【附图说明】
[0026]图1为实施方式涉及的尿样本分析装置的结构框图；
图2为试样制备部件和光学检测部件的简要功能结构图；
图3为光学检测部件的结构图；
图4为信息处理部件的结构框图；
图5为样本测定处理的步骤流程图；
图6为测定试样制备处理的步骤流程图；
图7为有核成分测定处理的步骤流程图；
图8A为说明光学信号强度的示意图；
图8B为说明光学信号脉冲宽度的示意图；
图8C为说明光学信号脉冲面积的示意图；
图8D为说明光学信号脉冲差分积分值的示意图；
图9A为说明单峰脉冲的差分积分值的示意图；
图9B为说明多峰脉冲的差分积分值的示意图；
图10为测定数据分析处理的步骤流程图；
图11为前向散射光强度和前向散射光脉冲宽度划定的特征参数空间内有核有形成分出现区域的示图；
图12为前向散射光强度和第一高灵敏度荧光强度划定的特征参数空间内有核有形成分出现区域的示图；
图13为前向散射光脉冲宽度和低灵敏度荧光脉冲面积划定的特征参数空间内有核有形成分出现区域的示图；
图14A为白细胞检测结果的一例不散点图；
图14B为上皮细胞检测结果的一例示散点图；
图14C为第三群粒子群体的检测结果的一例示散点图；
图15A为说明异型细胞光学信号波形的示意图；
图15B为说明白细胞凝集的光学信号波形的示意图；
图16为前向散射光差分积分值一波峰水平比和荧光差分积分值一波峰水平比划定的特征参数空间中有核有形成分出现区域的示图；图17为异型细胞检测处理的步骤流程图；
图18A为异型细胞检测结果的一例示散点图；
图18B为白细胞凝集检测结果的一例示散点图；
图19为前向散射光强度和第一高灵敏度荧光强度划定的特征参数空间内有核有形成分出现区域的示图；
图20A为真菌检测结果的一例示散点图；
图20B为毛滴虫检测结果的一例示散点图；
图20C为精子检测结果的一例示散点图；
图21为前向散射光强度和第二高灵敏度荧光强度划定的特征参数空间内细菌出现区域的示图；
图22为细菌检测结果的一例示散点图；
图23为分析结果界面的示图；
图24为前向散射光脉冲宽度和低灵敏度荧光脉冲面积划定的特征参数空间内有核有形成分出现区域的另一例示图。
【具体实施方式】
[〇〇27] 以下参照【附图说明】本发明的优选实施方式。
[〇〇28](尿样本分析装置的结构）
本实施方式就分析尿中有形成分的尿样本分析装置进行说明。本实施方式涉及的尿样本分析装置将尿样本取入装置内，分析尿中有形成分(红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌、异型细胞、白细胞凝集等)。
[0029]参照图1就尿样本分析装置的结构进行说明。尿样本分析装置100有测定单元10和信息处理部件13。测定单元10包括：从试管吸移尿样本并将其分成两份等分物的样本分配部件1、制备测定试样的试样制备部件2、从测定试样中检测有形成分信息的光学检测部件5。
[0030]如图2所示，样本分配部件1包括吸管17,用吸管17吸移装在试管TB的尿样本。试样制备部件2包括反应槽2u和反应槽2b，样本分配部件1分别向反应