20的2-吗嘟乙横酸缓冲液10血重 悬，室溫条件下混匀2~化，再磁分离，去上清，用磁微粒缓冲液稀释重悬到0.5mg/mL，在2~ 8°C下平衡16~2地，室溫条件下混匀2~化后，使用超声振荡仪将混悬液中聚集成团的磁珠 分散成单颗粒状态，得到所述Anti-SS-AIgG磁分离试剂。
[0035] 进一步的，本发明还提供所述清洗液的制备步骤：
[0036] 力日800血纯化水、12.1g的Tris和8.5g的化C1于1L容器中，揽拌至完全溶解，再加入 5g的吐溫-20和5g的TritonlOO，揽拌，直至完全混匀，将抑值调为7.5-8.0，定容1L，使用0.2 Ml滤器过滤，将获得的所述清洗液保存在2-8°C待用。
[0037] 本发明还提供了一种使用磁微粒化学发光定量检测抗SS-A抗体IgG的试剂盒的检 测方法，所述试剂盒的检测方法包括W下步骤：
[0038] 步骤1.将Anti-SS-AIgG校准品放到全自动化学发光免疫分析仪测试位置，得到 由全自动化学发光免疫分析仪输出的拟合曲线；
[0039] 步骤2.将Anti-SS-AIgG质控品放到上述分析仪测试位置，得到由全自动化学发 光免疫分析仪输出的所述质控品的测试发光值和通过步骤1得到的拟合曲线拟合得到 Anti-SS-AIgG质控品的浓度值；
[0040] 步骤3.将待测样品放到上述分析仪测试位置，由所述分析仪自动按1:20将样品稀 释，得到由全自动化学发光免疫分析仪输出的待测样品的浓度值。
[0041] 进一步，本发明提供了所述的一种使用磁微粒化学发光定量检测抗SS-A抗体IgG 的试剂盒的检测方法，所述步骤1、步骤2和步骤3均包括全自动化学发光免疫分析仪的全自 动检测步骤：
[0042] 步骤1)加20yL校准品或质控品或1:20稀释后的待测标本至检测管中；
[0043] 步骤2)加50化的Anti-SS-AIgG试剂1号至步骤1)所述检测管中，混匀后，37 ±0.5 °C溫育lOmin;
[0044] 步骤3)加50化的Anti-SS-AIgG磁分离试剂至步骤2)所述检测管中，混匀后，37± 0.5°C溫育5min，进行磁分离，去上清；
[0045] 步骤4)加30化L的清洗液至检测管中，混匀，进行磁分离，去上清；
[0046] 步骤5)重复步骤4)两遍；
[0047] 步骤6)加150μΙAnti-SS-AIgG试剂2号至检测管中，混匀后，37±0.5°C溫育 lOmin，进行磁分离，去上清；
[004引步骤7)加30化L的清洗液至检测管中，混匀，进行磁分离，去上清；
[0049] 步骤8)重复步骤7)两遍；
[0050] 步骤9)加20化L的化学发光底物至检测管中，混匀，检测发光强度。
[0051] 与现有技术相比，有益效果在于：
[0052] 1、所述试剂盒中的Anti-SS-AIgG试剂1 号、Anti-SS-AIgG试剂2号、Anti-SS-A IgG磁分离试剂是该反应体系下的更优配方，给该试剂盒的使用效期及检测性能提供了有 力保障。
[0053] 2、所述试剂盒中的Anti-SS-AIgG磁分离试剂参与反应时间仅为5分钟，大限度地 避免非特异性吸附。
[0054] 3、所述试剂盒中的Anti-SS-AIgG磁分离试剂为高分散性的超顺磁性微粒，保证 磁微粒在保存和使用过程中完全不会发生聚集。
[0055] 4、所述试剂盒中的Anti-SS-AIgG试剂2号中的碱性憐酸酶可催化发光底物发光， 且5秒钟即达发光反应平台期，并保持平稳的光信号，保证高检测精度和效率。
[0056] 5、所述试剂盒中的Anti-SS-AIgG试剂2号是碱性憐酸酶标记的羊抗人多克隆抗 体，羊抗人多克隆抗体的使用，降低了试剂盒的成本。
[0057] 6、本试剂盒成功避免与抗核糖体P蛋白抗体、抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SS-B抗体、 抗Sd-70抗体、抗化-1抗体、抗着丝点抗体的交叉反应。
[0058] 7、所述试剂盒中的待测标本需要量为1:20倍稀释后的20化标本，降低了试剂盒的 成本。
[0059] 8、所述检测方法在传统的膜条免疫法和酶联免疫吸附法的基础上，将灵敏度和线 性范围再提高3-5个数量级、实现真正意义的定量检测，具有灵敏度高、特异性强、准确度好 等特点。
[0060]9、所述检测方法配合全自动化学发光免疫分析仪实现全自动使用，操作简便，结 果判断客观等优点，对于临床诊断具有重要价值，应用前景广阔。
【附图说明】
[0061] 图1为本发明所述抗SS-A抗体IgG的试剂盒的空白限评价测试中A，B点连点拟合曲 线示意图；
[0062] 图2为本发明所述的抗SS-A抗体IgG的试剂盒线性范围评价的曲线图；
[0063]图3为本发明所述的试剂盒的磁微粒化学发光定量测定血清检测结果与商品化的 抗SS-A抗体IgG检测试剂盒酶联免疫吸附法检测结果的相关性评价；
[0064] 图3中的横坐标X为对比方法的试剂盒样品测值，浓度单位为RU/mL，纵坐标y为所 述试剂盒样品测值，浓度单位为RU/mL。
【具体实施方式】[00化]实施例1
[0066] 一种使用磁微粒化学发光定量检测抗SS-A抗体IgG的试剂盒，该试剂盒包括： Anti-SS-AIgG校准品、Anti-SS-AIgG试剂1 号、Anti-SS-AIgG试剂2号、Anti-SS-AIgG磁 分离试剂、Anti-SS-AIgG质控品和清洗液。
[0067] 所述Anti-SS-AIgG校准品包括6个装量为0.5mL的液体校准瓶，所述液体校准瓶 内目标浓度分别为0、5、20、50、100、200抓/1吐的411^-55-4 1邑6和牛血清白蛋白的化13缓冲 液；
[0068] 所述Anti-SS-AIgG试剂1号为1个装量为5血的含有生物素标记的Anti-SS-A抗原 和牛血清白蛋白的Tris缓冲液的瓶；
[0069] 所述Anti-SS-AIgG试剂2号为1个装量为15mL的含有碱性憐酸酶标记的羊抗人多 克隆抗体和牛血清白蛋白的Tris缓冲液的瓶；
[0070] 所述Anti-SS-AIgG磁分离试剂为1个装量为5mL的含有链霉亲和素标记的磁微粒 和牛血清白蛋白的Tris缓冲液瓶；
[0071] 所述Anti-SS-AIgG质控品包括2个装量为ImL的质控瓶，所述质控瓶内的浓度的 范围分别为：16-24抓/mL和80-120抓/mL。
[0072]本发明所述试剂盒的分析性能评价：
[0073]1)准确度评价
[0074] 将浓度约为200RU/mL，允许其浓度偏差为± 20 %的抗SS-A抗体IgG样品A液加入到 血清样品B液中，所加入A液的体积不超过总体积A+B的10%，根据公式（1)计算回收率R，本 方法的回收率在85-115%范围内，数据参见表1。
[0075]
[0076] R:回收率；
[0077]V:样品A液的体积；
[007引Vo:样品B液的体积；
[0079] C:样品B液加入A液后的检测浓度；
[0080] Co:测量B液的检测浓度；
[00川 Cs:样品A液的浓度。
[0082]表1-准确度评价一添加回收实验数据
[0083]
[0084] 2)空白限评价
[0085] 用零浓度校准品作为样品进行检测，重复测定20次，得出20次测量结果的RLU，化U 为相对发光值，计算其平均值Μ和标准差SD，得出M+2SD所对应的化U值，根据零浓度校准品 与相邻校准品之间的浓度-RLU值结果进行两点回归拟合得出一次方程，将M+2SD所对应的 化U值带入上述方程中，求出对应的浓度值，即为空白限。本方法的空白限不大于IRU/mL。具 体数据参见表2，A、B点连点拟合曲线如图1所示。
[0086]表2空白限评价
[0087]
[008引 3)线性范围评价
[0089]将接近线性范围上限为200RU/mL的高值样品按一定比例稀释为至少5种浓度，其 中低值浓度的样品须接近线性范围的下限。按试剂盒说明书进行操作，对每一浓度的样品 均重复检测2次，计算其平均值，将结果平均值和稀释比例用最小二乘法进行直线拟合，并 计算线性相关系数r，本方法的线性范围为2~200RU/mL，相关系数r应> 0.9900。数据参见 表3。曲线见图2。
[0090]表3线性范围评价
[0091]
[0092]4)重复性评价
[0093] 取本实施例中的试剂盒重复检测浓度为20±4RU/mL和100±20抓/mL的样品各10 次，计算10次测量结果的平均值Μ和标准差SD，根据公式CV=SD/MX100%得出变异系数CV， 本方法变异系数(CV)不大于8%。数据参见表4。
[0094]CV=SD/MX100%......(2)
[OOM]式中：CV-变异系数;SD-10次测量结果的标准差;M-10次测量结果的平均值。
[0096] 表4重复性评价
[0097]
[009引 5)批间差评价
[0099] 将实施例的试剂盒取Ξ批，每批试剂盒均测定浓度在20 ± 4抓/血和100 ± 20RU/mL 范围内的样品，每批重复测定10次，计算30次测定结果的平均值(Μ)和标准差(SD)，根据公 式(3)计算变异系数(CV)，本方法变异系数(CV)不大于15%。数据参见表5。
[0100]CV=SD/MX100%......(3)
[0101]公式中：CV-变异系数;SD-30次测定结果的标准差;Μ-30次测定结果的平均值。
[0102] 表5批间差评价
[0103]
[0104] 6)特异性评价
[0105] 取7份Anti-SS-AIgG含量为0的样品，分别加入抗核糖体Ρ蛋白抗体、抗RNP抗体、 抗Sm抗体、抗SS-B抗体、抗Sd-70抗体、