抗化-1抗体、抗着丝点抗体，使样品中交叉反应物浓 度为200RU/mL，使用该试剂盒对该样品进行检测，测定样品中的Anti-SS-AIgG含量。结果 见表6，本方法与抗核糖体P蛋白抗体、抗RNP抗体、抗Sm抗体、抗SS-B抗体、抗Sc^70抗体、抗 化-1抗体、抗着丝点抗体无交叉反应。数据参见表6。
[0106] 表6特异性实验
[0107]
[010引7)相关性评价
[0109]用实施例的试剂盒和商品化的抗SS-A抗体IgG检测试剂盒酶联免疫吸附法对240份人血清样品同时进行检测。其检测结果如图3所示，W抗SS-A抗体IgG检测试剂盒酶联免 疫吸附法测定的结果为横坐标，W本发明方法的测定的结果为纵坐标作回归分析，相关方 程:y= 0.9519x+0.2352,相关系数为R2:0.9855。经统计学处理结果表明，本方法同其他方 法的试剂盒临床样品测值相关性良好。
[0110] 8)稳定性评价
[0111] 取所述试剂盒分别在4°C下12个月实时稳定性实验和在37°C下7天的进行稳定性 实验，结果表明试剂盒准确度、空白限、线性、重复性和质控品的赋值有效性等指标均在正 常范围之内，试剂盒有效期可达12个月。数据见表7和表8。
[0112] 表7试剂盒4°C稳定性实验
[0113]
[0116] 实施例2
[0117] -种使用磁微粒化学发光定量检测抗SS-A抗体IgG的试剂盒的制备方法包括W下 步骤：
[011引步骤1.制备所述Anti-SS-AIgG校准品包括:Anti-SS-AIgG校准品稀释液配制步 骤和Anti-SS-AIgG校准品配制步骤：
[0119] 所述Anti-SS-AIgG校准品稀释液的配制步骤包括：
[0120] 力日800血纯化水和11.地的化is到容器中，揽拌混合均匀，再加8.5g的氯化钢和2mL 的Proclin300,揽拌至完全溶解，将抑值调为7.0-7.5，加40邑的牛血清白蛋白到容器中，揽 拌至完全溶解，再将pH值调为7.0-7.5,用纯化水定容至1L，使用0.2皿滤器过滤，将获得的 所述校准品稀释液保存在2-8°C待用；
[0121 ] 所述Anti-SS-AIgG校准品的配制步骤包括：
[0122] 用上述Anti-SS-AIgG校准品稀释液将抗SS-A抗体IgG分别配制为0、5、20、50、 100、200抓/mL共6个浓度点；
[0123] 步骤2.制备所述Anti-SS-AIgG试剂1号包括:Anti-SS-AIgG试剂1号稀释液配制 步骤和Anti-SS-AIgG试剂1号配制步骤：
[0124] 所述Anti-SS-AIgG试剂1号稀释液的配制步骤：
[01巧]力日800血纯化水、12.Ig的Tris和5.8g的化C1于1L容器中，揽拌至完全溶解，再加入 2mL的Proclin300，揽拌至完全溶解，再加入5g的牛血清白蛋白，揽拌至完全溶解，将抑值调 为7.0-7.5,用纯化水定容至1L，使用0.2WI1滤器过滤，将获得的所述试剂1号稀释液保存在 2-8°C待用；
[0126] 所述Anti-SS-AIgG试剂1号的配制步骤：
[0127] 用0.2mol/L的抑9.0碳酸盐缓冲液配制0.5mg/mL的生物素溶液，按照SS-A抗原与 生物素溶液质量比为10:1的比例在SS-A抗原溶液中加入到上述0.5mg/mL的生物素溶液，混 合均匀，室溫静置1她，反应生成SS-A抗原-生物素连接物的反应液，将得到的SS-A抗原-生 物素连接物反应液通过G-25凝胶柱进行分离，除去未反应的生物素，得到SS-A抗原-生物素 连接物，再用所述试剂1号稀释液将SS-A抗原-生物素连接物稀释到0.1-0.化g/mL，得到所 述的试剂1号；
[0128] 步骤3.制备所述Anti-SS-AIgG试剂2号包括:Anti-SS-AIgG试剂2号稀释液配制 步骤和Anti-SS-AIgG试剂2号的配制步骤：
[01巧]所述Anti-SS-AIgG试剂2号稀释液的配制步骤：
[0130] 力日800mL纯化水、6.06g的4-径乙基赃嗦乙横和8.5g的化C1到容器中，揽拌至完全 溶解，再加入5g的牛血清白蛋白、O.lg的化Cl2、0.2血的Proclin300和O.lg的MgCl2,揽拌至 完全溶解，将抑值调为7.5-8.0,用纯化水定容至1L，使用0.2皿滤器过滤，将获得的所述试 剂2号稀释液保存在2-8°C待用；
[0131] 所述Anti-SS-AIgG试剂2号的配制步骤：
[0132] 将Img的羊抗人抗体和2-4化的lOmg/mL的偶联剂为2-亚胺四氨嚷吩溶液，室溫静 置20min，加入0.Imol/L的甘氨酸溶液10化，室溫静置5min，用G-25凝胶柱除盐，收集活化后 抗体，将活化后的抗体保存在2-8°C备用，取1.5mg的碱性憐酸酶，加入5mg/mL的4-(N-马来 酷亚胺基甲基)环己烧-1-簇酸班巧酷亚胺醋溶液10-2化L，室溫静置30min，用G-25凝胶柱 除盐，收集活化后碱性憐酸酶，将活化后的碱性憐酸酶保存在2-8°C备用，再将上述活化的 羊抗人抗体与活化的碱性憐酸酶混合，在2-8°C条件下静置12-24h，用Supperdex200凝胶纯 化柱纯化，获得羊抗人抗体-碱性憐酸酶连接物浓溶液，置于2-8°C保存备用，将羊抗人抗 体-碱性憐酸酶连接物浓溶液用所述试剂2号稀释液稀释到0.02-0.lyg/mL，得到所述的试 剂2号；
[0133] 步骤4.制备所述Anti-SS-AIgG磁分离试剂包括:Anti-SS-AIgG磁分离试剂稀释 液配制步骤和Anti-SS-AIgG磁分离试剂配制步骤：
[0134] 所述Anti-SS-AIgG磁分离试剂稀释液配制步骤：
[0135] 力日800血纯化水、12.1g的Tris和8.5g的化C1到容器中，揽拌至完全溶解，再加5g的 牛血清白蛋白、50mL的新生牛血清和0.2mL的Proclin300，揽拌至完全溶解，将pH值调为 7.9-8.1，用纯化水定容至IL，使用ο. 2μπι滤器过滤，将获得的所述磁分离试剂稀释液保存在 2-8°C待用；
[0136] 所述Anti-SS-AIgG磁分离试剂配制步骤：
[0137] 取lOOmg磁微粒，磁分离去上清，取用0.025mol/L的pH值为4.5-6的2-吗嘟乙横酸 缓冲液10血重悬，室溫下混匀2~化，加入0.5-1 .OmL新配制的浓度为lOmg/血的碳二亚胺和 N-径基硫代班巧酷亚胺的吗嘟乙横酸缓冲液，室溫振荡混悬30-60min，使磁珠充分活化，磁 分离，去上清，用0. 〇25mol/L的抑值为4.5-6的2-吗嘟乙横酸缓冲液10血重悬，加入4-8mg的 链霉亲和素，室溫混悬16-2化，再进行磁分离，去上清，用百分比浓度0.5%的牛血清白蛋 白，百分比浓度0.5%脱脂奶粉和百分比浓度0.05%吐溫-20的2-吗嘟乙横酸缓冲液10血重 悬，室溫条件下混匀2~化，再磁分离，去上清，用磁微粒缓冲液稀释重悬到0.5mg/mL，在2~ 8°C下平衡16~2地，室溫条件下混匀2~化后，使用超声振荡仪将混悬液中聚集成团的磁珠 分散成单颗粒状态，得到所述Anti-SS-AIgG磁分离试剂。
[013引实施例3
[0139] 在实施例2的基础上，所述试剂盒还包括清洗液，所述清洗液的制备步骤：
[0140] 力日800血纯化水、Tris12.1g和化C1 8.5g于1L容器中，充分揽拌至完全溶解;再加 入5g的吐溫-20和5g的TritonlOO，充分揽拌，直至完全混匀，调pH值控制在7.5-8.0，定容 1L，用0.2皿滤器过滤，溫度为2-8°C范围进行保存。实验前将所述清洗液按照每7.5mL加纯 化水至lOOmL比例稀释并混匀后再使用。
[0141] 实施例4
[0142] 采用所述试剂盒应用于一种抗SS-A抗体IgG的检测方法，包括的检测步骤：
[0143] 1)将试剂盒中的Anti-SS-AIgG-Rl，Anti-SS-AIgG-R2,Anti-SS-AIgG-MS个组 分放置于本公司研制的全自动化学发光免疫分析仪试剂舱中；
[0144] 2)在仪器软件上进行定标曲线，将Anti-SS-AIgG校准品放到仪器测试位置，得到 由全自动化学发光免疫分析仪输出拟合曲线；
[0145] 3)如果仪器提示拟合通过，则在仪器软件上进行质控品测试申请，将Anti-SS-A IgG质控品放到仪器指定位置。得到由全自动化学发光免疫分析仪输出质控品测试发光值 和通过标准曲线拟合得到的质控品的浓度值。
[0146] 4)如果质控测值在预定范围内，即可进行样品测试申请，将样品放到仪器测试位 置。由全自动化学发光免疫分析仪输出样品测试发光值和通过标准曲线拟合得到的浓度 值。
[0147] 5)全自动化学发光免疫分析仪检测步骤如下：
[0148] 步骤1)加20yL校准品或质控品或1:20稀释后的待测标本至检测管中；
[0149] 步骤2)加50化Anti-SS-AIgG试剂1号至步骤1)所述检测管中，混匀后，37±0.5 °C溫育10分钟；
[01加]步骤3)加50化Anti-SS-AIgG磁分离试剂至步骤2)所述检测管中，混匀后，37± 0.5°C溫育5分钟;进行磁分离，去上清；
[0151] 步骤4)加3(Κ)化清洗液至检测管中，混匀;进行磁分离去上清；
[0152] 步骤5)重复步骤4)两遍；
[0153] 步骤6)加150μΙAnti-SS-AIgG试剂2号至检测管中，混匀后，37±0.5°C溫育10分 钟;进行磁分离去上清；
[0154]步骤7)加3(Κ)化清洗液至检测管中，混匀;进行磁分离去上清；
[0Κ5] 步骤8)重复步骤7)两遍；
[0156] 步骤9)加2(Κ)化化学发光底物至检测管中，混匀，检测发光强度。
[0157] 上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人 ±能够了解本发明