专利名称：新型含异羟肟酸的氨基酸衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型含异羟肟酸的氨基酸衍生物。
背景技术：
本发明涉及用于治疗免疫疾病或炎症的组合物，特别是用于治疗由细胞因子介导的疾病。免疫系统的主要成员为巨噬细胞或抗原呈递细胞，T细胞和B细胞。巨噬细胞为重要的炎症介质，并为T细胞/刺激和增殖提供必要的“帮助”作用。例如，巨噬细胞产生细胞因子IL-1、IL-6、IL-12和TNF-α，这些都是潜在的促炎症分子。
TNF-α是由各种细胞产生的促炎症因子，其作为233-氨基酸26kDa膜结合的前体蛋白形式表达在细胞表面。TNF-α转换酶(TACE)蛋白水解性地断裂膜结合的TNF-α，产生成熟的、可溶的17kDa细胞因子，该因子以非共价结合三聚体形式存在。TNF-α的生物作用由两个膜结合受体介导，分别命名为p55和p75。如果TNF-α生成失调则会导致许多病症包括糖尿病、多发性硬化病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、牛皮癣、颈椎性关节炎、类风湿性关节炎、慢性心力衰竭和其它可能的疾病。因此，TNF-α抑制剂可用于治疗多种疾病。
细胞因子IL-1β也参与炎症反应。该因子可刺激胸腺细胞增生、刺激纤维原细胞生长因子活性和刺激前列腺素从滑膜细胞中释放出来。细胞因子IL-1β含量升高或水平失调将导致多种炎症疾病和其它疾病，这些疾病包括但不限于阿尔茨海默尔病、成人呼吸窘迫综合症、过敏、哮喘、厌食症、动脉粥状硬化和由损伤、扭伤、创伤、外科手术、感染或其它疾病引起的疼痛及炎症。既然IL-1β的过量产生与多种疾病有关，因此人们希望能开发出一种能抑制IL-1β产生或抑制其活性的化合物。
IL-6参与免疫响应、造血和发炎过程。其为肝急性相反应的有效诱导物和下丘脑-垂体-肾上腺轴的强大刺激物，该下丘脑-垂体-肾上腺轴受糖皮质激素的负控制。IL-6能促进生长激素的分泌，但会抑制促甲状腺激素的释放。在一些炎症疾病中发现IL-6水平升高，且人们已经设计了通过抑制IL-6细胞因子亚族来提高类风湿性关节炎治疗效果的方案(Carroll等，Inflamm Res，471-7，1998)。此外，IL-6还在动脉硬化和冠心病的进一步发展中起到一定作用(Yudkin等，Atherosclerosis，148209-14，1999)。鉴于IL-6在某些疾病中的角色，人们希望能开发出抑制IL-6分泌的化合物。
IL-12为杂二聚体细胞因子，其由p40和p35亚基组成，具有蛋白免疫调节特性，主要由负责应答细菌产物和免疫信号的抗原提呈细胞、树突状细胞和单核巨噬细胞释放。该因子可提高自然杀伤(NK)-介导的细胞毒性和诱导经由NK细胞和T淋巴细胞产生的干扰素-γ(IFN-γ)。IL-12在促进Th1免疫应答方面具有重要作用，这一点在体内和体外实验中都得到证实。已经发现，IL-12的抗体针对由Th1导致的免疫疾病的实验模型具有有益效果，这样的模型如实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型和2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎模型和人炎症性肠病。
小鼠胶原诱导的关节炎(CIA)为针对风湿性关节炎(RA)的实验模型，其可通过在DBA/1小鼠中通过用乳化在弗氏完全佐剂(FCA)中的异源II型胶原(CII)进行免疫而诱导。最近已经证明，当用CII免疫DBA/1小鼠时，IL-12可代替结核菌，会导致严重的关节炎，该疾病与经由体外CII刺激的脾细胞产生的IFN-γ量增大和胶原特异性IgG2a抗体应答的增加有关(Stern，A.S.，等，Proc.Natl.Acad.Sc.i，1990，87，6808)。通过给药抗IL-12MoAb来阻断IL-12是不能阻止CIA的发生的，但可明显地降低关节炎的严重性(Malfait，A.M.等.，Clin.Exp.Immunol.，1998，111，377-383)。
克罗恩病的特征为位于肠组织中的抗原提呈细胞产生的IL-12的增加和由肠淋巴细胞和巨噬细胞产生的干扰素-γ和TNF-α的增加(Fuss，I.J.等，J.Immunol.，1996，157，1261；Parronchi，P.，等，Am.J.Pathol.，1997，150，823；Plevy，S.E.等，J.Immunol.，1997，159，627)。这些炎症因子反之会诱导肉芽肿性发炎和导致肠壁增厚并使这些症状持续发展，这些症状也是克罗恩病的特征。在小鼠中，给药IL-12的单克隆抗体可使已经形成的结肠炎得到缓解，并且如果在结肠炎诱导时给药则可能防止炎症发生(Neurath，M.F.等，J.Exp.Med.，1995，182，1281)。抗IL-12也可预防和治疗在Th1介导的炎症模型中发生的继发性结肠炎，Th1介导的炎症模型如过表达人CD3ε基因的小鼠模型和白细胞介素-10缺乏的小鼠模型(Simpson，S.J.等，J.Exp.Med.，1998，187，1225)。
与IL-12相似，相关的异二聚体蛋白IL-23由p19和p40亚基组成。因此，直接对抗p40的人抗体可有效地阻断IL-12和IL-23的作用。IL-12和IL-23都是由活化的(成熟的)树突状细胞产生，而且它们对于促进1型细胞因子产生的原态和记忆T细胞的分化和增生是重要的。皮肤病变中表现出如下物质的过表达(1)活化的树突状细胞；(2)IL-23和IL-12；和(3)1型细胞因子产生的CD4+和CD8+记忆T细胞。因此，I1-23/I1-12的p40亚基在皮肤病治疗中是很有前景的治疗靶点。Walter及其同事(J.Exp.Med.，2001，193，339)已经证明了IL-12和IL-12p40的细胞源可经病毒性感染诱导，并且证明体内具有新的IL-12p40生成功能序列，该序列不依赖于IL-12p70或IFN-γ的作用，这些发现证明了表皮IL-12p40表达程序在哮喘中是异常的。
多发性硬化症(MS)为中枢神经系统(CNS)炎症性脱髓鞘疾病，全世界有约100万人感染该疾病。目前还没有治疗MS的方法。EAE/MS的发病机理复杂，其涉及巨噬细胞/小胶质细胞的活化，致脑炎Th1细胞的分化和CNS中炎症因子的分泌。白细胞介素-12主要是由巨噬细胞/小胶质细胞产生的，其在致脑炎Th1细胞的分化以及EAE和MS发病机理中具有重要作用(Nararajan，C.和Bright，J.J.，Genes andImmunity.，2000，3，59-70)。这说明IL-12在关节炎、多发性硬化症、哮喘、克罗恩病、炎症性肠病、皮肤病和相关自免疫疾病中扮演重要角色。
通过上述描述可知，尽管人们已经投入大量精力开发能抑制例如TNF-α、IL-1β、IL-6，IL-12，或其它与炎症或炎症疾病(如关节炎)有关的试剂的化合物，但目前仍需要开发出能有效治疗获抑制上述疾病的化合物。
发明内容
本发明涉及具有如下通式(I)的新型氨基酸衍生物
本发明也涉及制备上述新型化合物、它们的衍生物、立体异构体、它们药学上可接受的盐和含有它们的药物组合物的方法；其中A为5-18元芳基或杂芳基，包括但不限于取代或未取代的苯基、吲哚基和咪唑基；B代表环系，选自取代或未取代的5-18元芳基或5-6元饱和或不饱和的、含有1-4个杂原子的杂环，所述杂原子选自N、O和S；R1代表-OR10，其中R10代表氢、取代或未取代的基团，该基团选自烷基、烯基、芳基、芳烷基、杂芳基，或反离子；NR11R12，其中R11和R12可以相同或不同，并且各自代表H、取代或未取代基团，该基团选自烷基、烯基、芳基或R11和R12与N一起可代表取代或未取代的单或双环饱和或未饱和环系，该环系可以含有一个或多个选自O、S或N的杂原子；R2和R3可以相同或不同，并各自代表H、COR13，取代或未取代的基团，该基团选自烷基、烯基、芳基、杂芳基、烷基磺酰基、烷基亚磺酰基、芳基磺酰基、芳基亚磺酰基、烷基硫代、芳基硫代或杂环基；其中R13代表H、取代或未取代的基团，该基团选自烷基、芳基、链烯氧基、芳氧基、烷氧基或芳烷氧基；或R2和R3可以结合在一起形成杂环，如哌啶、吗啉等；Z代表O、S或NR14，R14代表氢或烷基；当Z代表O或S时，R6代表氢或取代或未取代的基团，该基团选自烷基、烯基、芳基、芳烷基、环烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基；当Z代表NR14时，R6代表H、羟基、经保护的羟基、氨基、取代或未取代的基团，该基团选自烷基、卤代烷基、烯基、单烷基氨基、二烷基氨基、芳基、芳烷基、环烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基；Y代表O、S或NR14；n为0-4的整数；R4，R5和R7可以相同或不同，代表氢、硝基、羟基、甲酰基、叠氮基、卤素、或取代或未取代的基团，该基团选自烷基、烷氧基、酰基、环烷基、卤代烷基、氨基、肼、单烷基氨基、二烷基氨基、酰氨基、烷基磺酰基、烷基亚磺酰基、芳基磺酰基、芳基亚磺酰基、烷基硫代、芳基硫代、烷氧基羰基、芳氧基羰基、烷氧基烷基、氨磺酰、羧酸或其衍生物；X代表键接(bond)、O、S、SO或SO2。
本发明的化合物可用于治疗诸如炎症、炎性和免疫性疾病，特别是那些由前炎性因子如肿瘤坏死性因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和IL-12介导的疾病。本发明化合物也可用于降低血糖、血清胰岛素、游离氨基酸、胆固醇和甘油三酸酯的水平和用于治疗和/或预防代谢疾病。
图1为三组曲线图，这些图说明本发明三个化合物对胶原诱导的小鼠关节炎模型的效果。
图2为两组曲线图，这些图说明本发明三个化合物对小鼠经诱导的实验性变态反应性脑脊髓炎的效果。
图3为柱状图，该图显示了角叉菜胶诱导的大鼠炎症情况的缓解。
图4为三组图，这些图显示了小鼠巨噬细胞中IL-2的抑制。
图5为柱状图，该图显示了本发明化合物对CD40配体介导的IL-12合成的抑制。
图6为柱状图，该图显示了本发明化合物对髓鞘碱性蛋白诱导的IFN-γ的抑制。
图7的图显示了本发明化合物对大鼠助剂诱导的关节炎的缓解。
图8为柱状图，该图显示了本发明化合物对LPS诱导的pyresis小鼠模型的TNF-α水平的抑制。
图9为两组图，这些图说明本发明化合物对炎症性肠病的效果。
发明详述 对于本发明中使用的词语和短语，除非特别指出，它们的含义如下所述。
“烷基”包括直链、支链或环烃结构和它们的组合。低级烷基指具有1-6个碳原子的烷基。低级烷基的例子包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲和叔丁基等。优选的烷基为C20或以下的那些烷基。更优选的烷基为C13或以下的那些烷基。更优选的烷基为C6或以下的那些烷基。环烷基为烷基的下位概念，其包括具有3-13个碳原子的环烃基团。环烷基的例子包括环-丙基、环-丁基、环-戊基、降冰片基、金刚烷基等。在本发明中，烷基是指饱和烷基、烯基和炔基；其包括环己基甲基、乙烯基、烯丙基、异戊二烯基等。
“亚烷基”是烷基的另一个下位概念，其是指与烷基相同的基团，但是其上有两个连接位点。亚烷基的例子包括亚乙基(-CH2CH2-)、亚丙基(-CH2CH2CH2-)、二甲基亚丙基(-CH2C(CH3)2CH2-)和环己基亚丙基(-CH2CH2CH(C6H13)-)。当给具有特定碳原子数的烷基命名后，所有具有相同碳原子数的几何异构体都包括在内；因此，例如，“丁基”包括正丁基、仲丁基、异丁基和叔丁基；“丙基”包括正丙基和异丙基。
术语“烷氧基”或“烷基氧基”是指-O-烷基，优选具有1-6个碳原子的直链、支链、环状构型和它们的组合，它们通过氧原子与母体结构相联。这样的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、环丙氧基、环己氧基等。低级烷氧基是指含有1至4个碳原子的基团。
术语“氨基”指-NH2。术语“经取代的氨基”是指单或二-取代的基团-NHR或-NRR，其中每一个R独立地选自任选经取代的烷基、任选经取代的烷氧基、任选经取代的氨基、任选经取代的芳基、任选经取代的杂芳基、任选经取代的杂环基、酰基、烷氧基羰基、硫烷基、亚磺酰基和磺酰基，例如二乙基氨基、甲基磺酰氨基、呋喃基-氧-磺酰氨基。
“芳基”和“杂芳基”是指5-18元环。这样的实例包括5-、6-或7-元芳基或含有0-4个杂原子的杂芳环，所述杂原子选自O、N或S；双环9-或10-元芳环或杂芳环系统，其含有0-4(或更多个)杂原子，该杂原子选自O、N或S；或三环，12-14元芳环或杂芳环系统，其含有0-4个(或更多个)杂原子，该杂原子选自O、N或S。芳香碳环包括如苯基、萘、二氢化茚、四氢萘和芴和芳香杂环包括如咪唑、唑、异唑、二唑、吡啶、吲哚、噻吩、苯并吡喃酮、噻唑、呋喃、苯并咪唑、喹啉、异喹啉、喹啉、嘧啶、吡嗪、四唑和吡唑。
“卤素”或“卤素基团”是指氟、氯、溴或碘。氟、氯、溴是优选的。二卤代芳基、二卤代烷基、三卤代芳基等是指经多个卤素基团取代的芳基和烷基，但不一定是多个相同的卤素基团；因此，4-氯-3-氟苯基落在二卤代芳基的范围内。
“杂环”是指具有5-14个碳原子的环烷基，其中一个至四个碳原子经杂原子如氧、氮或硫取代。本发明范围内的杂环的例子包括咪唑啉、吡咯烷、吡唑、吡咯、吲哚、喹啉、异喹啉、四氢异喹啉、苯并呋喃、苯并二烷、苯并间二氧杂环戊烯(当作为取代基时，通常是指亚甲基二氧基苯基)、四唑、吗啉、噻唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、噻吩、呋喃、唑、唑啉、异唑、二唑、二烷、四氢呋喃等。
“取代的-”烷基、芳基、杂芳基和杂环分别是指烷基、芳基、杂芳基和杂环基，其中一个或多个(最多5个，优选至多约3个)氢原子经取代基取代，该取代基独立地选自任选经取代的烷基(如，氟代烷基)、任选经取代的烷氧基、亚烷基二氧基(如，亚甲基二氧基)、任选经取代的氨基(如，烷基氨基和二烷基氨基)、任选经取代的脒基、任选经取代的芳基(如，苯基)、任选经取代的芳烷基(如，苄基)、任选经取代的芳氧基(如，苯氧基)、任选经取代的芳烷氧基(如，苄氧基)、羧基(-COOH)、羰基烷氧基(即，酰氧基或-OOCR)、羧基烷基(即，酯或-COOR)、甲酰氨基、氨基羰基、苄氧羰基氨基(CBZ-氨基)、氰基、羰基、卤素、羟基、任选经取代的杂芳基、任选经取代的杂芳烷基、任选经取代的杂芳氧基、任选经取代的杂芳烷氧基、硝基、硫烷基、亚磺酰基、磺酰基和硫基。
术语“任选的”或“任选地”是指后续描述的情况或条件可能存在也可能不存在，而且说明书包括所述情况或条件发生的例子和所述情况或条件没有发生的例子。例如，“任选经取代的烷基”是指“烷基”或“经取代的烷基”，如下所述。本领域技术人员会明白当谈到含有一个或多个取代基的任何基团时，这样的基团不是指引入立体不相容、合成不可实施和/或本身不稳定的任何取代基或取代部分。
“异构体”为具有相同分子式的不同化合物。“立体异构体”是指仅原子空间排列不同的异构体。“对映体”为一对立体异构体，它们彼此之间为非重叠镜像关系。一对对映体的1∶1混合物为“外消旋”混合物。术语“(±)”在合适的情况下用于定义外消旋混合物。“非对映异构体”为具有至少两个非对称原子的立体异构体，但彼此之间并不是镜像关系。绝对的立体化学是根据凯恩-英格尔德-泼莱劳格(Cahn-Ingold-Prelog)R-S体系指定的。当化合物为纯的对映体时，每一个手性碳的立体化学可以指定为R或S。绝对构型未知的消旋化合物可定义为(+)或(-)，其可根据以钠D线(sodium D line)的波长旋转平面偏振光的方向(右旋或左旋)确定。本发明描述的某些化合物含有一个或多个非对称中心，从而就会产生对映体、非对映体和其它立体异构体，这些异构体根据绝对立体化学可以定义为(R)-或(S)-。本发明意欲包括所有可能的异构体，包括外消旋混合物，光学纯形式和中间体混合物。光学活性(R)-和(S)-异构体可利用手性合成子或手性试剂制备，或采用常规技术进行制备。当本发明的化合物含有烯烃类双键或其它几何非对称中心时，除非另有说明，否则这些化合物即包括E又包括Z几何异构体。同样，本发明也包括所有互变异构体形式。
术语“药学可接受的载体”或“药学可接受的赋型剂”包括任何一种或所有溶剂、分散介质、包衣物、抗菌和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。针对药学活性物质采用的介质和制剂是本领域已知的。只要某种介质或制剂与活性药物相容，则就可以考虑将其用于本发明的组合物中。也可在组合物中加入补充活性成分。
如下所述，术语“治疗有效量”或“有效量”是指将所述化合物给药至需要治疗的哺乳动物(包括人)的量足以实现有效治疗。治疗有效量会根据进行治疗的病人和病情、病人的体重和年龄、病情的严重程度、所选择的具体化合物、采用的给药方案、给药时间、给药方式等进行改变，所有这些都可由本领域技术人员很容易地决定。
术语“治疗”是指治疗哺乳动物患有的疾病，包括 a)防治疾病，即，使疾病的临床症状不会进一步发展； b)抑制疾病，即，使临床症状恶化减慢或停止；和/或 c)缓解疾病，即，使临床症状消失。
术语“类似物”是指一系列化合物，仅通过用不同的杂原子替换一个或多个杂原子(如O、S或N)就可以使这些化合物彼此不同。
术语“互变异构体形式”是指快速平衡中的结构异构体，如乙酰基丙酮的酮和烯醇形式。互变异构体形式可以根据任何一种形式进行反应。
术语“多形体”是指多形化合物的形式。多形化合物是指可以以两种或更多种形式存在的化合物，如两种或更多种结晶形式。
术语“衍生物”是指通过简单的化学方法从另一个化合物得到的化合物；如醋酸为乙醇经氧化得到的衍生物；N-乙酰基乙胺为乙胺经乙酰化的衍生物。
在通式(I)中，A代表的合适基团包括取代的或未取代的苯基、吡啶基、吲哚基、二吖嗪基或咪唑基。
B代表的合适基团选自5-18元芳基如苯基、萘基等，它们可进一步经取代或未取代的5-6元饱和或不饱和杂环取代，所述杂环选自吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、异唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、四唑基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基等。特别合适的化合物包括其中B为取代的或未取代的苯基、吡啶基或噻唑基。
R1代表的合适的基团包括氨基、二烷基氨基、异丙氧基、羟基、苄氧基、N-乙酰基-全氢-1，4-二噻茚基(dithiaindinyl)和全氢-1，4-氧氮杂-茚基(indinyl)。
R2和R3代表的合适基团选自H、COR13、取代的或未取代的直链或支链C1-C20烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、己基等；取代或未取代的直链或支链C2-C20链烯基如乙烯基、丙烯基、丁烯基等；芳基如苯基、萘基等，该芳基可经取代；烷基磺酰基如甲基磺酰基、乙基磺酰基、正丙基磺酰基、异丙基磺酰基等，该烷基磺酰基可经取代；芳基磺酰基如苯基磺酰基、甲苯基磺酰基或萘基磺酰基，所述芳基磺酰基可经取代；烷基亚磺酰基如甲基亚磺酰基、乙基亚磺酰基、正丙基亚磺酰基、异丙基亚磺酰基等，该烷基亚磺酰基可经取代；芳基亚磺酰基如苯基亚磺酰基或萘基亚磺酰基，该芳基亚磺酰基可经取代；烷基硫代如甲基硫代、乙基硫代、正丙基硫代等，该烷基硫代可经取代；芳基硫代如苯基硫代或萘基硫代，该芳基硫代可经取代；杂芳基如吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、异唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、四唑基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、喹啉基、二氢喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基等，这些基团可经取代；杂环基如吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、哌啶基、哌嗪基等，这些基团可经取代。R2和R3基团可以结合在一起形成杂环。其中R2和R3各自为氢或对甲苯磺酰基的化合物是特别合适的。
R6代表的合适基团选自H、羟基、经保护的羟基，其可以是醚、酯、经取代的苄基乙基醚等；氨基，经取代的或未经取代的直链或支链C1-C20烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、己基等；取代或未经取代的直链或支链C2-C20链烯基如乙烯基、丙烯基、丁烯基等；卤代烷基如氯代烷基如氯代甲基、氯代乙基、三氟甲基、三氟乙基、二氯甲基、二氯乙基、三氯甲基、二氟甲基等，它们可经取代；单烷基氨基如-NHCH3、-NHC2H5、-NHC3H7、-NHC6H13，等等，它们可经取代；二烷基氨基如-N(CH3)2、-NCH3(C2H5)、-N(C2H5)2，等等，它们可经取代；芳基如苯基、萘基等，该芳基可经取代；芳烷基如苄基、苯基乙基、苯基丙基等，它们可经取代；环(C3-C6)烷基如环丙基、环丁基、环戊基、环己基，等等，该环烷基可经取代；杂芳基如吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、异唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、四唑基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、喹啉基、二氢喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基，等等，这些基团可经取代；杂环基如吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、哌啶基、哌嗪基等，这些基团可经取代；杂芳烷基，其中杂芳基如上所述。其中R6为羟基、氢或二烷基氨基的化合物是特别合适的。
R4、R5和R7代表的合适基团选自氢、硝基、羟基、甲酰基、叠氮、卤素原子如氟、氯、溴或碘；取代的或未经取代的直链或支链C1-C20烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、己基，等等；烷氧基，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基等等，这些基团可经取代；酰基如C(＝O)CH3、-C(＝O)C2H5、-C(＝O)C3H7、-C(＝O)C6H13、苯甲酰基、-C(＝S)CH3、-C(＝S)C2H5、C(＝S)C3H7、-C(＝S)C6H13等等，这些基团可经取代；环(C3-C6)烷基如环丙基、环丁基、环戊基、环己基，等等，该环烷基可经取代；卤代烷基如氯代甲基、氯代乙基、三氟甲基、三氟乙基、二氯甲基、二氯乙基、三氯甲基、二氟甲基，等等，这些基团可经取代；氨基，其可经取代；肼，单烷基氨基如NHCH3、-NHC2H5、-NHC3H7、-NHC6H13，等等，它们可经取代；二烷基氨基如-N(CH3)2、-NCH3(C2H5)、-N(C2H5)2，等等，这些基团可经取代；酰基氨基如-NHC(＝O)CH3、-NHC(＝O)C2H5、-NHC(＝O)C3H7、-NHC(＝O)C6H13，等等，它们可经取代；烷基磺酰基如甲基磺酰基、乙基磺酰基、正丙基磺酰基、异丙基磺酰基等等，该烷基磺酰基可经取代；芳基磺酰基如苯基磺酰基或萘基磺酰基，该芳基磺酰基可经取代；烷基亚磺酰基如甲基亚磺酰基、乙基亚磺酰基、正丙基亚磺酰基、异丙基亚磺酰基等等，该烷基亚磺酰基可经取代；芳基亚磺酰基如苯基亚磺酰基或萘基亚磺酰基，该芳基亚磺酰基可经取代；烷基硫代如甲基硫代、乙基硫代、正丙基硫代、异丙基硫代，等等，该烷基硫代可经取代；芳基硫代如苯基硫代或萘基硫代，该芳基硫代可经取代；烷氧羰基如甲氧羰基、乙氧羰基、正丙氧基羰基、异丙氧基羰基，等等，该烷氧基羰基可经取代；芳氧基羰基如苯氧基羰基、萘氧基羰基，该芳氧基羰基可经取代；烷氧基烷基如甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基，等等，该烷氧基烷基可经取代；氨磺酰、羧酸或其衍生物。其中R4、R5和R7为氢的化合物是特别适合的。
由R10代表的合适基团选自氢、取代的或未取代的直链或支链C1-C20烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、己基，等等；取代的或未取代的直链或支链C2-C20链烯基如乙烯基、丙烯基、丁烯基，等等；芳基如苯基、萘基等等，该芳基可经取代；芳烷基如苄基、苯基乙基、苯基丙基等等，该芳烷基可经取代；杂芳基如吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、异唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、四唑基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、苯并吡喃基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并噻唑基、苯并吡咯基、苯并二唑基、苯并噻二唑基、苯并二唑基、喹啉基、二氢喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基等等，这些基团可经取代；反离子，选自碱金属如Li，Na和K；碱土碱金属如Ca和Mg；碱盐如铵或取代的铵盐，二乙醇胺，α-苯基乙基胺、苄胺、哌啶、吗啉、吡啶、羟乙基吡咯烷、羟乙基哌啶、胆碱、氨丁三醇，等等。
R11和R12代表的合适基团选自氢、取代或未取代的直链或直链C1-C20烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、己基，等等；取代的或未取代的直链或支链C2-C20链烯基如乙烯基、丙烯基、丁烯基，等等；芳基如苯基、萘基等等，该芳基可经取代；或R11和R12与氮一起代表取代的或未取代的单或双环饱和或不饱和环系，该环系选自吡啶基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、异唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、四唑基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并噻唑基、苯并吡咯基、苯并二唑基、苯并噻二唑基、苯并二唑基、喹啉基、二氢喹啉基、四氢喹啉基、异喹啉基、二氢异喹啉基、四氢异喹啉基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、哌啶基、哌嗪基，等等，这些基团可经取代。所述取代基选自硝基、羟基、卤素、甲酰基、叠氮、烷基、烷氧基、酰基、环烷基、卤代烷基、氨基、肼、单烷基氨基、二烷基氨基、乙酰氨基、烷基磺酰基、烷基亚磺酰基、芳基磺酰基、芳基亚磺酰基、烷基硫代、芳基硫代、烷氧基羰基、芳氧基羰基、烷氧基烷基、氨磺酰、羧酸或其衍生物，其中R13代表H、取代或未取代的烷基、芳基、链烯基氧基、芳氧基、烷氧基或芳烷氧基；如直链或支链C1-C20烷基，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、己基，等等；取代的或未取代的直链或支链C2-C20链烯氧基如乙烯氧基、丙烯氧基、丁烯氧基，等等；芳基如苯基、萘基等等；直链或支链C2-C20烷氧基如正丁基氧基、异丁基氧基、叔丁基氧基，等等；芳氧基如苯氧基等等；芳烷氧基如苄氧基等。
R14代表的合适基团选自H、取代的或未取代的直链或支链C1-C20烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、己基等。
X代表的合适基团选自键接、O、S、SO、SO2。其中X代表键接或O的化合物是特别合适的。
Y代表的合适基团选自O、S或NR14。其中Y为O的化合物是特别合适的。
合适的n为0-4的整数。其中n为0、1或2的化合物是特别合适的。
Z代表的合适基团选自O、S或NR14。其中Z为NH或O的化合物是特别合适的。
由R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R10、R11、R12、R13、R14代表的基团上合适的取代基选自硝基、羟基、卤素、甲酰基、叠氮、烷基、烷氧基、酰基、环烷基、卤代烷基、氨基、肼、单烷基氨基、二烷基氨基、酰胺基、烷基磺酰基、烷基亚磺酰基、芳基磺酰基、芳基亚磺酰基、烷基硫代、芳基硫代、烷氧基羰基、芳氧基羰基、烷氧基烷基、氨磺酰、羧酸和它们的衍生物。
本发明药学可接受的盐包括与碱金属的反离子形成的盐，如Li、Na和K，碱土金属如Ca何Mg，有机碱的盐如二乙醇胺、α-苯基乙基胺、苄胺、哌啶、吗啉、吡啶、羟乙基吡咯啶、羟乙基哌啶、胆碱等，铵或取代的铵盐和铝盐。盐还包括那些带有反离子氨基酸的盐，如甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、胍等。盐还包括合适的酸加成盐，如硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、高氯酸盐、硼酸盐、氢卤化物、乙酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、棕榈酸盐(palmoate)、甲烷磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、羟萘酸盐、苯磺酸盐、抗坏血酸盐、甘油磷酸盐、酮戊二酸盐，等等。药学可接受的溶剂化物可以为水合物或包括其它结晶化的溶剂如乙醇。
下述化合物为通式(I)化合物的优选化合物的代表
制备通式(I)化合物的方法如下述方案I所示 方案I
通式(I)化合物是通过如下步骤制备的 步骤-(I) 将通式(Ia)化合物的氨基酸衍生物(其中P代表保护基团)与经取代的卤素-芳基醛(W＝卤素)在溶剂和碱的存在下进行缩合以得到通式(2a)化合物，其中所述溶剂选自甲苯、DMF、四氢呋喃、氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、乙酸乙酯、邻二氯苯或它们的混合物，其中所述的碱为如三乙胺、二乙胺、吡啶、DMAP、碱金属氢氧化物、碱土金属氢氧化物、碱金属碳酸盐如氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾等。该反应在温度范围为室温至0-100℃的回流温度下进行。
步骤-(II)通式(2a)化合物上的游离醛在溶剂THF和水的存在下用氧化剂如高锰酸钾等氧化得到通式(3a)化合物。
步骤-(III)为了制备酰胺(Z＝N)，通式(3a)化合物与H2N-R6在试剂、碱和溶剂存在下反应产生通式(4a)化合物，其中R6如上所定义，所述试剂选自二环己基碳二亚胺(DCC)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)、苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸盐(BOP)、1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDAC)、1-羟基苯并三唑水合物(HOBt)，所述的碱如三乙胺、吡啶、DMAP等，所述的溶剂如甲苯、甲醇、乙醇、四氢呋喃、氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、乙酸乙酯、邻二氯苯或它们的混合物。为了制备酯(Z＝O)或硫代酯(Z＝S)，采用通式(3a)化合物的合适活化酸形式，如经活化的酯或酰基卤与Z-R6反应。
步骤-(IVa)通式(4a)化合物的脱保护可利用Pd/C或HCl在溶剂存在下进行。或者，该脱保护也可在溶剂存在下通过HCl气进行，所述溶剂选自乙腈、二氯甲烷、甲醇、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、四氢呋喃、三氟乙酸、1-甲基-2-吡咯烷酮、N，N-二甲基乙酰胺等，或它们的混合物。
步骤-(IVb)经脱保护的酰胺氮通过常规方法用R2和/或R3衍生化。
应当理解的是，在上述任一反应中，底物分子上的任何反应基团可根据常规化学方法进行保护。在上述任一反应中的合适保护基团都是本领域使用的。所述保护基团的形成和去除方法都是适合要进行保护的分子的方法。本发明中采用的保护基团P为如叔丁氧基羰基(t-Boc)、三苯甲基、三氟乙酰基、苄氧基、苄氧羰基(Cbz)等。
本发明所述的药学可接受的盐可通过使通式(I)化合物与1-4当量的碱在溶剂存在下反应进行制备，其中所述的碱为如氢氧化钠、甲醇钠、氢化钠、叔丁醇钾、氢氧化钙、氢氧化镁等，所述溶剂如醚、THF、甲醇、叔丁醇、二烷、异丙醇、乙醇等。也可使用溶剂混合物。也可使用有机碱如赖氨酸、精氨酸、二乙醇胺、胆碱、胍和它们的衍生物。或者，可以用酸如盐酸、溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、对甲苯磺酸、甲烷磺酸、乙酸、柠檬酸、马来酸、水杨酸、羟基萘酸、抗坏血酸、棕榈酸、琥珀酸、苯甲酸、苯磺酸、酒石酸等在溶剂存在下处理而制备酸加成盐，所述的溶剂如乙酸乙酯、醚、醇、丙酮、THF、二烷等。也可使用溶剂混合物。
本发明也提供药物组合物，该组合物含有一种或多种上述通式(I)所述的化合物，它们的互变异构体形式、它们的衍生物、它们的类似物、它们的立体异构体、它们的多形物、它们药学可接受的盐、它们药学可接受的溶剂，和含有药物可接受的载体、稀释剂等。
所述药物组合物可采用常用的剂型如片剂、胶囊、粉末、糖浆、溶液、悬浮液等。该组合物也可含有香料、甜味剂等，在合适的固体或液体载体或稀释剂，或在合适的无菌介质中形成可注射的溶液或悬浮液。这样的组合物通常含有1-25wt％，优选1-15wt％的活性化合物，组合物的其余部分为药学可接受的载体、稀释剂、赋型剂或溶剂。
合适的药学可接受的载体包括固体填充剂或稀释剂和无菌含水或有机溶液。所述活性化合物在所述药物组合物中的量为足以提供上述所述的所需剂量范围。因此，为了口服给药，所述化合物可与合适的固体或液体载体或稀释剂结合形成胶囊、片剂、粉末、糖浆、溶液、悬浮液等。如果需要，所述药学组合物可以含有其它组分如香料、甜味剂、赋型剂等。为了实现非肠道给药，所述化合物可与无菌含水或有机介质混合形成可注射溶液或悬浮液。例如，可使用芝麻油或花生油溶液，丙二醇水溶液等，以及所述化合物的水溶性药学可接受的酸加成盐或碱金属或碱土金属盐。采用该方法制备的可注射溶液然后可经静脉、腹腔、皮下或肌肉注射给药，其中肌肉给药对于人类是优选的。
本发明的药物组合物可用于治疗炎症和免疫性疾病，特别是那些经细胞因子如TNF-α、IL-1、IL-6、IL-12和环氧化酶如COX-2介导的疾病，并用于治疗与胰岛素耐受有关的疾病，如多囊性卵巢症，及高血脂症、冠状动脉疾病、外周血管疾病和糖尿病及相关疾病。
这些化合物也可以用于治疗或抑制炎症或炎症性疾病如炎性胶原血管疾病和关节炎，这些疾病是由细胞因子或可诱导酶如TNF-α、IL-1、IL-6导致的。所述化合物也可用于IL-12介导的免疫调节效果如哮喘、慢性支气管炎、炎症性肠病、银屑病、多发性硬化症和其它疾病。
本发明通过如下实施例进行说明，这些实施例仅用于说明，而不应当理解为是对本发明的限制。
实施例1 2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸苄酯盐酸盐(6)的制备
步骤-I 2-叔丁氧羰基氨基-3-[4-(4-甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸(2)
将碳酸钾(14.74g，107mmol)和4-氟苯甲醛(18.6mL，180mmol)加入到无水DMF(35mL)的氨基酸(N-叔丁氧羰基-L-酪氨酸)(10.0g，36mmol)溶液中。所得悬浮液在氩气保护下在75±5℃回流。48小时后，将反应混合物冷却到室温，用水稀释(200mL)并用EtOAc(2×100mL)萃取。合并含水层，用5.0M HCl酸化至pH～2.0，并用EtOAc(2×150mL)萃取。所得EtOAc层用水(1×150mL)和盐水(1×150mL)萃取，经无水硫酸镁干燥、过滤、减压浓缩得到作为低熔点固体的所需醛(13.7g，～99％)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)9.89(s，1H)，7.82(d，J＝8.4Hz，2H)，7.23(d，J＝8.4Hz，2H)，7.00(重叠d，J＝9.0Hz，4H)，4.63(m，1H)，3.2(m，1H)，3.06(m，1H)，1.40(s，9H). 步骤II 2-叔丁氧羰基氨基-3-[4-(4-甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸苄基酯(3)的制备
将2-N-叔丁氧羰基-3-[4-(4-甲酰苯氧基)苯基]-丙酸2(4.3g，11.16mmol)溶解在二氯甲烷(30mL)中，冷却到0-5℃。加入N，N′-二环己基氨甲酰(3.0g，14.5mmol)、无水苄醇(1.2mL，11.16mmol)和4-二甲氨基吡啶(0.27g，2.23mmol)，所得混合物在氩气气氛下在上述温度下搅拌。30分钟后，将反应混合物升温到室温并继续搅拌。2小时后，用冰浴将反应混合物冷却使副反应产物N，N′-二环己基脲沉淀出来，过滤除去该副产物，得到的透明滤液真空浓缩。将所得油状物溶解于乙酸乙酯中(2×100mL)，用10％柠檬酸(1×100mL)、水(1×100mL)和盐水(1×100mL)洗涤，经无水硫酸镁干燥，减压浓缩得到粗产物。该粗产物用甲苯-乙酸乙酯(93∶7)混合物经硅胶快速色谱纯化得到苄基酯3(4.7g，88.6％)。
1HNMR(DMSO-d6)9.91(s，1H)，7.89(d，J＝8.0Hz，2H)，7.42(d，J＝8.4Hz，2H)，7.31-7.43(m，7H)，7.06(d，J＝8.8Hz，2H)，7.05(d，J＝8.4Hz，2H)，5.12(s，2H)，4.23-4.29(m，1H)，3.05(dd，J＝13.6和5.2Hz，1H)，2.91(dd，J＝14.0和10.2Hz，1H)，1.33(s，9H). 步骤III 4-[4-(2-苄氧羰基2-叔丁氧羰基氨基-乙基)-苯氧]-苯甲酸(4)的制备
将苄酯3(4.6g，9.7mmol)溶解在THF(100mL)中，所得溶液在70℃搅拌。将溶解在水中(125mL)的高锰酸钾(7.7g，48.5mmol)通过滴液漏斗在2小时内缓慢滴加到上述溶液中。加完后，将反应混合物在70℃搅拌30分钟，冷却到室温。通过Celite床将棕色沉淀物过滤除去，将滤液减压浓缩。残余的油放在EtOAc(100mL)中，用2.0M HCl酸化。分离有机层，用水(1×100mL)和盐水(1×100mL)洗涤，干燥，减压浓缩得到所需酸化合物4(4.5g，94％)。
1H NMR(DMSO-d6)12.7(br，1H)，7.91(d，J＝8.8Hz，2H)，7.42(d，J＝8.4Hz)，7.30-7.37(m，7H)，7.03(d，J＝8.8Hz，2H)，6.97(d，J ＝8.8Hz，2H)，5.12(s，2H)，4.24-4.28(m，1H)，3.04(dd，J ＝13.6和5.2Hz，1H)，2.91(dd，J＝13.6和9.6Hz，1H)，1.33(s，9H). 步骤IV 2-叔丁氧羰基氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸苄酯(5)的制备
将酸化合物4(1.1g，2.24mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中，氩气气氛下搅拌。加入N-甲基吗啉(1.0mL，8.96mmol)，反应混合物冷却到0℃，加入BOP试剂(1.09g，2.46mmol)。20分钟后，加入盐酸羟胺(0.31g，4.48mmol)，将反应混合物升温到室温，搅拌过夜。减压除去溶剂，残留物在EtOAc(50mL)和饱和NH4Cl溶液(1×30mL)溶液间分配。有机层经干燥、浓缩得粗产物。利用含有1％乙酸的己烷-乙酸乙酯(1∶1)混合物经SiO2硅胶快速色谱得所需异羟肟酸5(0.5g，44％)。
1H NMR(DMSO-d6)11.20(br，1H)，9.00(br，1H)，7.76(d，J＝8.8Hz，2H)，7.42(d，J＝8.0Hz，2H)，7.28-7.38(m，7H)，6.98(重叠d，J＝8.4Hz，4H)，5.12(s，2H)，4.21-4.27(m，1H)，3.03(dd，J＝13.6和5.6Hz，1H)，2.89(dd，J＝10.0和14.0Hz，1H)，1.33(s，9H). 步骤V 2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸苄酯盐酸盐(6)的制备
将异羟肟酸酯(hydroxamate)5(0.4g)溶解在CH2Cl2中，冷却到0-5℃。用氯化氢气鼓泡通过该溶液20分钟。停止鼓泡，将反应混合物在室温搅拌1小时。将过量HCl脱气并除去CH2Cl2。残留的固体用EtOAc(2×50mL)溶解，倒出，干燥得白色无定形固体状的所需化合物6(0.25g，71.4％)。
1H NMR(DMSO-d6)11.18(s，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，2H)，731-7.39(m，5H)，7.24(d，J＝8.4Hz，2H)，6.99(d，J＝8.4Hz，2H)，6.98(d，J＝8.8Hz，2H)，5.19(s，2H)，4.40(m，1H)，3.07-3.18(m，2H)LCMS(m/e)Obsd，407.0；Calcd，406.43. 实施例2 2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰基-苯氧基)-苯基]-丙酸盐酸盐(9)的制备
步骤I 3-[4-(4-苄氧基氨甲酰苯氧基)-苯基]-2-叔丁氧羰基氨基-丙酸苄酯(7)的制备
将酸化合物4(0.6g，1.22mmol)溶解在干燥DMF(15mL)中，冷却到0-5℃。向上述混合物中加入1-羟基苯并三唑(0.18g，1.34mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.23g，1.22mmol)和三乙胺(0.6mL，3.66mmol)，然后搅拌15分钟。将盐酸邻苄基羟胺(0.22g，1.34mmol)加入其中，所得混合物恢复到室温，搅拌18小时。减压蒸发溶剂，残留的油用EtOAc(50mL)提取。有机层用2.0M HCl(1×10mL)、饱和NaHCO3(1×10mL)、水(1×25mL)和盐水(1×25mL)萃取。所得EtOAc层干燥并浓缩得到粗产物。利用己烷-乙酸乙酯(1∶1)经快速色谱得到所需的苄基异羟肟酯7(0.4g，56％)。
1H NMR(DMSO-d6)11.73(s.1H)，7.75(d，J＝8.4Hz，2H)，7.29-7.47(m，13H)，6.99(d，J＝8.8Hz，2H)，6.99(5.12(s，2H)，4.92(s，2H)，4.23-4.28(m，1H)，3.03(dd，J＝13.6和5.2Hz，1H)，2.90(dd，J ＝13.6和10.0Hz，1H)，1.33(s，9H). 步骤II 2-叔丁氧羰基氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸(8)的制备
将钯炭(5％，0.3g)加入到经脱气的MeOH(25mL)苄基异羟肟酸酯7(0.4g)溶液中，所得悬浮液常压下用氢气处理4小时。用Celite床过滤所述悬浮液，浓缩得所需的异羟肟酸酯8(0.2g，72％)。
1H NMR(DMSO-d6)11.20(s，1H)，9.02(br，1H)，7.75(d，J＝8.8Hz，2H)，7.30(d，J＝8.8Hz，2H)，7.11(d，J＝8.8Hz，1H)，6.99(d，J＝8.8Hz，2H)，6.96(d，J＝8.8Hz，2H)，4.10(ddd，J＝12.810.0，和4.4Hz，1H)，3.03(dd，J＝13.6和4.4Hz，1H)，2.82(dd，J＝13.6和10.4Hz，1H)，1.33(s，9H). 步骤III 2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰基-苯氧基)-苯基]-丙酸盐酸盐(9)的制备
将异羟肟酸酯8(0.2g)溶解在CH2Cl2中，冷却到0-5℃。用氯化氢气鼓泡通过该溶液20分钟。停止鼓泡，将反应混合物在室温搅拌1小时。将过量HCl脱气并除去CH2Cl2。残留的固体用EtOAc(2×25mL)研磨，倒出，干燥得白色无定形固体状的所需化合物9(0.17g，定量收率)。
1H NMR(360MHz，DMSO-d6)11.15(s，1H)，8.96(br，1H)，7.77(d，J＝9.0Hz，2H)，7.32(d，J＝7.9Hz，2H)，7.04(d，J＝9.0Hz，2H)，6.99(d，J ＝8.6Hz，2H)，4.16(m，1H)，3.09-3.14(m，2H).LCMS(m/e)Obsd.317.0，Calcd.316.31. 实施例3 4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺盐酸盐(13)的制备
步骤I {1-二甲基氨甲酰基-2-[4-(4-甲酰苯氧基)-苯基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(10)
将醛化合物2(2.0g，5.2mmol)溶解在CH2Cl2(30mL)中，氩气气氛下室温搅拌。加入三乙胺(0.87mL，6.23mmol)和BOP试剂(2.53g，5.7mmol)，将反应混合物搅拌15分钟。加入二甲胺(2.0M THF溶液，13.0mL，26.0mmol)，将所得溶液室温搅拌约2-3小时。将溶剂减压除去，所得的油溶解(take up)在EtOAc(100mL)中。有机层用0.5NNaOH(1×10mL)、水(2×50mL)和盐水(1×50mL)萃取。干燥浓缩有机层得到所需酰胺10(2.1g，～98％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)9.91(s，1H)，7.90(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝8.4Hz，2H)，7.15(d，J＝8.4Hz，1H)，7.06(d，J＝8.8Hz，2H)，7.05(d，J＝8.4Hz，2H)，4.57(m，1H)，2.94(s，3H)，2.75-2.91(m，5H)，1.31(s，9H). 步骤II 4-[4-(2-叔丁氧羰基氨基-2-二甲基氨甲酰基-乙基)-苯氧基]-苯甲酸(11)的制备
将酰胺化合物10(2.0g，4.85mmol)溶解在THF(50mL)中，所得溶液在70℃搅拌。将溶解在水(50mL)中的高锰酸钾(3.06g，19.4mmol)通过滴液漏斗(5mL/分钟)在2小时内缓慢滴加到上述溶液中。加完后，将反应混合物在70℃搅拌30分钟，冷却到室温。通过Celite床将棕色沉淀物过滤除去，滤液加压浓缩。所得的油溶解在EtOAc(100mL)中，用2.0M HCl酸化。分离有机层，用水(1×50mL)和盐水(1×50mL)洗涤，干燥，减压浓缩得到所需酸化合物11(1.9g，91％)。
1H NMR(DMSO-d6)12.7(br，1H)，7.91(d，J＝8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，2H)，7.13(d，J＝8.8Hz，1H)，7.04(d，J＝8.4Hz，2H)，6.96(d，J＝8.8Hz，2H)，4.56(ddd，J＝13.6，9.2，和6.0Hz，1H)，2.93(s，3H)，2.74-2.91(m，5H)，1.31(s，9H). 步骤III {1-二甲基氨甲酰基-2-[4-(4-羟基氨甲酰-苯氧基)-苯基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(12)的制备
将酸化合物11(1.9g，4.43mmol)溶解在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中，氩气气氛下搅拌。加入N-甲基吗啉(1.95mL，18.0mmol)，反应混合物冷却到0℃，加入BOP试剂(2.16g，4.88mmol)。20分钟后，加入盐酸羟胺(0.62g，8.87mmol)，将反应混合物升温到室温，搅拌过夜。减压除去溶剂，残留物在EtOAc(50mL)和饱和NH4Cl溶液(1×30mL)溶液之间分配。有机层经干燥、浓缩得粗产物。利用氯仿-甲醇(19∶1)混合物经硅胶快速色谱得所需异羟肟酸化合物12(0.9g，46％)。
1H NMR(DMSO-d6)8.95(br，1H)，7.73(d，J＝9.2Hz，2H)，7.28(d，J＝8.4Hz，2H)，7.18(d，J＝8.4Hz，1H)，7.00(d，J＝8.8Hz，2H)，6.95(d，J＝8.8Hz，2H)，4.55(m，1H)，2.91(s，3H)，2.70-2.90(m，5H)，1.30(s，9H). 步骤IV 4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺盐酸盐(13)的制备
将异羟肟酸酯12(0.8g)溶解在CH2Cl2(25mL)中，冷却到0-5℃。用氯化氢气鼓泡通过该溶液20分钟。停止鼓泡，将反应混合物在室温搅拌1小时。将过量HCl脱气并除去CH2Cl2。残留的固体用EtOAc(2×25mL)研磨，倒出，干燥得作为白色无定形固体的所需化合物13(0.34g)。
1H NMR(DMSO-d6)11.20(s，1H)，7.76(d，J＝8.8Hz，2H)，7.24(d，J＝8.8Hz，2H)，7.02(d，J＝8.4Hz，2H)，6.95(d，J＝8.8Hz，2H)，4.52(m，1H)，2.92-3.05(m，1H)，2.76(s，3H)，2.71(s，3H).LCMSObsd 344.0，calcd 343.48. 实施例4 4-{4-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰基氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基-苯甲酰胺(14)
题述化合物为低熔点固体。
1H NMR(DMSO-d6)11.90(br，1H)，11.14(br，1H)，8.98(s，1H)，7.76(d，J＝9.2Hz，2H)，7.55(d，J ＝8.0Hz，2H)，7.30(d，J＝8.0Hz，2H)，7.17(d，J＝8.4Hz，2H)，6.95(d，J＝7.2Hz，2H)，6.93(d，J ＝7.2Hz，2H)，4.32(m，1H)，2.81(dd，J＝13.2和7.2Hz，1H)，2.71(s，3H)，2.64(dd，J＝13.2和8.0Hz，1H)，2.53(s，3H)，2.35(s，3H). 实施例5 4-[4-(2-氨基-2-异丙氧基羰基乙基)-苯氧基]-苯甲酸(15)
分离所得到的题述化合物15为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6)7.93(d，J＝8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.8Hz，2H)，7.09(d，J＝8.4Hz，2H)，7.05(d，J＝8.4Hz，2H)，4.92(m，1H)，4.22(m，1H)，3.19(dd，J＝14.0和6.0Hz，1H)，3.06(dd，J＝14.0和8.0Hz，1H)，1.18(d，J＝6.4Hz，3H)，1.09(d，J＝6.4Hz，3H). 实施例6 2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰基苯氧基)-苯基]-丙酸异丙基酯(16)
分离得到题述白色固体化合物16。
1H NMR(DMSO-d6)11.16(br，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，2H)，7.31(d，J ＝8.4Hz，2H)，7.06(d，J ＝8.8Hz，2H)，6.98(d，J＝8.8Hz，2H)，4.92(m，1H)，4.22(m，1H)，3.18(dd，J＝14.0和6.0Hz，1H)，3.06(dd，J＝14.0和8.0Hz，1H)，1.18(d，J＝6.4Hz，3H)，1.08(d，J＝6.4Hz，3H). 实施例7 L-6-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰基-乙基)-苯氧基]-N-羟基-烟酰胺盐酸(21)的合成
步骤I 6-[4-(2-叔丁氧羰基氨基-2-羧基-乙基)-苯氧基]-烟酸甲酯(17)的制备
将碳酸钾(1.23g，8.9mmol)和甲基6-氯烟酸酯(1.8g，10.66mmol)加入到Boc-酪氨酸(1.0g，3.55mmol)的无水DMF(15mL)溶液中。所得悬浮液在氩气气氛下在70℃回流。72小时后，将反应混合物冷却到室温，用水(100mL)稀释，并用EtOAc(2×100mL)萃取。收集含水层，用5.0M HCl酸化至pH～2.5，并用EtOAc(2×100mL)萃取。所得EtOAc层用水(1×150mL)和盐水(1×150mL)萃取，经无水硫酸镁干燥、过滤、浓缩并经快速色谱分离(含30-40％乙酸乙酯和1％乙酸的己烷)得到作为固体的所需酯17(1.4g)。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)12.45(s，1H)，8.68(br，1H)，8.29(dd，J＝8.4和2.4Hz，1H)，7.31(d，J＝8.4Hz，2H)，7.14(d，J＝8.8Hz，1H)，7.08(m，3H)，4.12(m，1H)，3.85(s，3H)，3.05(dd，J＝14.0和4.0Hz，1H)，2.84(dd，J＝14.0和10.8Hz，1H)1.33(s，9H) 步骤II 6-[4-(2-叔丁氧羰基氨基-2-二甲基氨甲酰-乙基)-苯氧基]-烟酸甲酯(18)的制备
将化合物17(2.2g，5.28mmol)溶解在CH2Cl2中，氩气气氛下室温搅拌。加入三乙胺(0.883mL，6.33mmol)和苯并三唑-1-基氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸盐(BOP试剂，2.5g，5.80mmol)，将反应混合物搅拌15分钟。加入二甲胺(2.0M THF溶液，13.2mL，26.4mmol)，将所得溶液室温搅拌约2-3小时。将溶剂减压除去，所得的油溶解在EtOAc(200mL)中。有机层用0.5N NaOH(1×30mL)、水(2×100mL)和盐水(1×100mL)萃取。干燥浓缩有机层得到所需酰胺18(1.3g，～98％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)8.67(br，1H)，8.29(dd，J＝8.8和2.4Hz，1H)7.31(d，J ＝8.4Hz，2H)，7.11(d，J＝8.8Hz，1H)，7.08(m，3H)，4.57(m，1H)，3.85(s，3H)，2.93(s，3H)，2.85-2.75(m，2H)，2.80(s，3H)，1.32(s，9H). 步骤III 6-[4-(2-叔丁氧羰基氨基-2-二甲基氨甲酰-乙基)-苯氧基]-烟酸(19)的制备
将酰胺18(1.0g，2.25mmol)溶解在THF(10mL)中并用水(10mL)稀释。加入氢氧化锂(0.107g，4.5mmol)，反应混合物在室温搅拌约2小时。将THF蒸发除去，所得水层用2.0M HCl酸化并用EtOAc(2×100mL)萃取。有机层用水(1×100mL)和盐水(1×100mL)洗涤，干燥浓缩得到所需酸化合物19(1.0g，97％)。
1HNMR(400MHz，DMSO-d6)13.1(s，1H)，8.64(br，1H)，8.27(dd，J＝8.4和2.0Hz，1H)，7.30(d，J ＝8.4Hz，2H)，7.11(d，J＝8.8Hz，1H)，7.08(m，3H)，4.56(m，1H)，2.94(s，3H)，2.85-2.75(m，2H)，2.81(s，3H)，1.18(s，9H). 步骤IV {1-二甲基氨甲酰基-2-[4-(5-羟基氨甲酰基-吡啶-2-基氧基)-苯基]-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(20)的制备
将酸化合物19(1.0g，2.328mmol)溶解在DMF中，氩气气氛下搅拌。加入N-甲基吗啉(1.02mL，9.32mmol)。20分钟后，加入盐酸羟胺(0.323g，4.66mmol)，并将该反应混合物升温至室温，搅拌过夜。减压除去溶剂，残留物在EtOAc(50mL)和饱和NH4Cl溶液(1×30mL)溶液间分配。有机层经干燥、浓缩得粗产物。利用含有1％乙酸的己烷-乙酸乙酯(70-60％)混合物经SiO2凝胶快速色谱得所需异羟肟酸化合物20(0.5g，98％)。
1H NMR(400MHz，DMS0-d6)8.47(br，IH)8.14(dd，J＝8.8和2.4Hz，IH)，7.29(d，J＝8.4Hz，2H)，7.11(d，J＝8.8Hz，IH)，7.05(m，3H)，4.56(m，IH)，2.93(s，3H)2.85-2.75(m，2H)，2.79(s，3H)，1.32(s，9H) 步骤V L-6-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰基乙基)-苯氧基]-N-羟基烟酰胺盐酸盐(21)的制备
将异异羟肟酸酯20(0.5g)溶解在CH2Cl2中，冷却到0-5℃。用氯化氢气鼓泡通过该溶液20分钟。停止鼓泡，将反应混合物在室温搅拌1小时。将过量HCl脱气并除去CH2Cl2。残留的固体用EtOAc(2×50mL)溶解，倒出，干燥得作为白色无定形固体的所需化合物21(0.4g，98％)。
1H NMR(DMSO-d6)8.49(d，J＝2.4Hz，1H)，8.31(br，2H)，8.17(dd，J＝8.8和2.4Hz，1H)，7.40(br，1H)，7.27(d，J＝8.4Hz，2H)，7.13(d，J＝8.4Hz，2H)，7.07(d，J＝8.8Hz，1H)，4.58(br，1H)，3.08(dd，J＝13.6和6Hz，1H)，2.98(dd，J＝14.0和7.6Hz，1H)，2.81(s，3H)，2.73(s，3H). 实施例8 2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰基-苯氧基)-苯基]-丙酸钠盐(22)的制备
将化合物35(0.3g，0.85mmol)溶解在氢氧化钠水溶液中(1M，1.7mL)。在30℃在CentriVap中减压除去水得到作为白色无定形固体的化合物85(0.33g，定量)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6+DCl)7.88(d，J＝8.8Hz，2H)，7.31(d，J＝8.4Hz，2H)，7.01(d，J＝8.4Hz，2H)，6.96(d，J ＝8.8Hz，2H)，4.13(t，J＝6.4Hz，1H)，3.13(d，J＝6.4Hz，2H).LCMSObsd.339，Calcd.338.3 Obsd-观测值，calcd-计算值 生物实验方案 用本发明化合物在不同模型中针对它们的生物活性对降低炎症因子水平、化学诱导的炎症、免疫调节和血糖进行了测试。所附图1-9说明了本发明代表化合物的活性。
表I对THP-1细胞中主要前炎性因子具有抑制作用的化合物 以不同化合物浓度培养和培育人THP-1单核细胞。然后用浓度为1μg/mL的脂多糖(LPS)激发细胞24小时。通过从R&D System，Minneapolis，USA购得的抗体指向的酶连接的免疫检测技术分析细胞上清液中TNF-α因子的存在。如表I所示，代表性化合物可以以剂量依赖方式抑制三种主要前炎性因子的产生。对于用化合物最高浓度培养的细胞，没有观察到明显的细胞活性的变化。
表II对人外周单核(hPBMC)细胞中前炎性因子具有抑制作用的化合物 以不同化合物浓度培养和培育人PBMC单核细胞。然后用浓度为1μg/mL的脂多糖(LPS)激发细胞24小时。通过抗体指向的酶连接的免疫检测技术分析细胞上清液中TNF-α，IL-6和IL-1β细胞因子的存在。实验中，地塞米松用作阳性对照。如表II所示，化合物可以以剂量依赖方式抑制三种主要前炎性因子的产生。对于用化合物最高浓度培养的细胞，没有观察到明显的细胞活性的变化。
表III对小鼠LPS诱导的脓毒症中的TNF-α和IL-6的抑制 在LPS注射(10μg/小鼠，腹腔注射(ip))1小时之前，以50mg/kg体重口服赋形剂、地塞米松(5mg/kg)和化合物来治疗SW小鼠，90分钟后采集血液，通过ELISA检测血清TNF-α和IL-6水平。所述化合物可明显降低该模型中TNF-α和IL-6水平。
表IV化合物对TACE、MMP-1、MMP-9、PDE-3和PDE-4的效果 基质金属蛋白酶(MMP)家族具有明显的序列同源性和共同的多域结构。根据它们优选的底物可以将它们分为四类胶原酶、明胶酶、基质溶素(stromelysin)和膜-型MMP。这些酶在正常组织中具有非常低的活性，但在应答特定刺激物包括细胞因子、生长因子和细胞外基质相互作用的炎症中和物理重塑过程中表现出上调和/或活化。所述抑制剂可用于治疗癌症、风湿性关节炎、自身免疫疾病、牙周病、组织溃疡、动脉硬化、动脉瘤和心衰。
MMP-1 使用酶MMP-1(间质胶原酶；EC 3.4.24.7，人类风湿性滑模成纤维细胞，Calbiochem Cat，444208)。MMP-1首先用APMA在37℃活化60分钟。然后用活性酶(8nM)在含有50mM MOPS(pH7.2)、10mMCaCl2和10μM ZnCl2的反应混合物中在37℃预培养实验化合物和/或赋型剂60分钟。加入Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2(SEQ.IDNO.1)(4μM)引发反应，并在37℃培养120分钟。N-终端的保护基团Mca为7-甲氧基香豆素-4-基乙酰基。氨基酸Dpa为N3-(2，4-二硝基苯基)-L-二氨基丙酰基。酶活性是通过检测荧光Mca-Pro-Leu-Gly(SEQ.ID No.2)的形成经分光荧光计测定的。化合物的筛选浓度为10μM。
MMP-9 采用酶MMP-9(明胶B；EC3.4.24.35，人重组，CalbiochemCat.PF024-5UG)。MMP-9首先用APMA在37℃活化60分钟。然后用活化酶(11nM)在含有50mM MOPS(pH7.2)、10mM CaCl2和10μMZnCl2的反应混合物中在37℃预培养实验化合物和/或赋型剂60分钟。加入4μM Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2(SEQ.IO NO.1)引发反应，在37℃培养120分钟。酶活性是通过检测荧光Mca-Pro-Leu-Gly(SEQ.ID NO.2)的形成经分光荧光计测定的。化合物的筛选浓度为10μM。
TACE 肿瘤坏死因子-α转化酶(TACE/ADAM-17)负责TNF-α的释放，TNF-α为与许多慢性衰竭性疾病如风湿性关节炎和多发性硬化病有关的有力前炎性细胞因子。TNF-α还能诱导血管生成、促进成纤维细胞增生，并能与特定肿瘤细胞上的受体结合以诱导细胞溶解。一般认为TACE也参与淀粉样前体蛋白的分泌。本实验使用的是表达在Sf21细胞(R&D system，930-ADB)上的人重组TACE。实验化合物和/或赋型剂与酶(25ng/ml)和10μM Mca-P-L-A-Q-A-V-Dpa-R-S-S-S-R-NH2(SEQ.ID NO.3)在25℃在改性的Tris-缓冲液pH9.0中培养30分钟。酶活性是通过检测荧光Mca-P-L-A-Q-A-NH2(SEQ.ID NO.4)的形成经分光荧光计测定的。化合物的筛选浓度为10μM。
PDE-3 本实验采用的是专门从人血小板中纯化得到的磷酸二酯酶-3(PDE3)。实验化合物和/或赋型剂与1μg酶和1μM cAMP在25℃在Tris-缓冲液pH7.5中培养20分钟，其中1μM cAMP含有0.01μM[3H]cAMP。通过沸腾2分钟来终止反应。加入10mg/ml蛇毒核苷酸酶将所得AMP转化为腺苷酸，并进一步在37℃培养10分钟。未水解的cAMP与AG 1-X2树脂结合，保留在水相中的[3H]腺苷酸通过闪烁计数进行定量。化合物的筛选浓度为10μM。
PDE-4 磷酸二酯酶4型(PDE4)催化cAMP或cGMP转化为它们各自的单磷酸酯形式。PDE4对Ca2+/钙调蛋白或cGMP调解敏感，表现出cAMP底物依赖性，并能被特定抑制剂Ro-20-1724抑制。既然环核苷酸为许多组织和器官细胞中的重要第二信使，因此人们认为开发选择性靶向特定PDE异构体的治疗剂会是非常重要的。PDE4被认为是在支气管舒张、过敏和炎症中最重要的PDE异构体。因此选择性抑制PDE4的抑制剂可用于治疗哮喘、过敏和炎症疾病。本实验采用的是从人U-937慢性髓系白血病部分纯化得到的PDE4。实验化合物和/或赋型剂由0.2μg酶与1μM cAMP在25℃在Tris-缓冲液pH7.5中培养20分钟，其中1μM cAMP含有0.01μM[3H]cAMP。通过沸腾2分钟来终止反应，并加入10mg/ml蛇毒核苷酸酶将所得AMP转化为腺苷酸，并进一步在37℃培养10分钟。未水解的cAMP与AG1-X2树脂结合，保留在水相中的[3H]腺苷酸通过闪烁计数进行定量。化合物的筛选浓度为10μM。
表V小鼠脾巨噬细胞中IL-12的分泌 本发明化合物6抑制小鼠脾巨噬细胞由LPS刺激导致的IL-12的生成72小时。表V中的化合物抑制这些细胞中IL-12的生成。该实验中将选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂罗非考昔并列进行对比，没有观察到该化合物的效果。
表VI 在完全弗氏佐剂(CFA)中用钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)免疫SJL小鼠。12天后，分离局部淋巴结，观察到在存在或不存在药物的情况下针对KLH的增值应答(在3H胸腺嘧啶存在的情况下)。结果表达为刺激指数(CPM+抗原/CPM无抗原)。相似地，表VI中显示了在化合物存在的情况下检测到了有丝分裂原诱导的刀豆球蛋白A(CON-A)、IL-4、IL-2诱导的T细胞增殖。COX-2抑制剂，罗非考昔用于该实验中，其对T细胞没有任何效果。
表I浓度为10μM时对THP-1单核细胞中LPS诱导的TNF-α的抑制 表II浓度为10μM时对hPBMC中LPS诱导的细胞因子的抑制 *两次实验的平均值；ND＝没有完成的实验 表III化合物对小鼠中LPS诱导的脓毒症的效果(50mg/kg体重) 表IV化合物6对TACE、MMP-1、MMP-9、PDE-3和PDE-4酶的抑制效果 表V以浓度为10μM的LPS刺激小鼠脾巨噬细胞后一氧化氮和TNF-α的分泌 表-VI浓度为10μM时对T细胞增殖的抑制 抑制+＝0-20％，++＝21-60％，+++＝61-80％，++++＝＜80％；所有结果对应的药物浓度都是10μM 图1化合物对胶原诱导的关节炎模型的效果 用骨胶原(100μg/小鼠)诱导雄性DBZ/1Lac小鼠患有关节炎。第21天时开始给予加强剂量，当临床分数(clinical score)为约2时开始进行治疗。化合物6、9和22(口服50mg/kg每天)能明显改善这些动物的关节炎分数。地塞米松作为阳性对照。每一个足爪的分数被定义为0-4，其中0＝没有红斑，4＝严重关节炎，对于肿胀的足爪，最大可能分数为16，因为每只动物有四只足爪(4×4)。
图2化合物对小鼠EAE模型的效果 多发性硬化症(MS)为自免疫疾病，其由细胞因子水平调节。为了测试本发明化合物对多发性硬化症(MS)模型的作用效果，在SJL/J小鼠身上诱导实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)。EAE为中枢神经系统(CNS)的自免疫炎症疾病。该疾病与人MS具有许多相似之处，因此被用于测试可用于治疗MS的新药的作用效果。通过注射脊椎骨匀浆诱导EAE，其中该动物用实验化合物进行治疗。EAE的严重性通过麻痹的临床分数进行评估。如图2所示，本新化合物治疗的组表现出对EAE的完全防治。这些结果说明了实验化合物对MS和其它神经疾病治疗具有一致性。
图3卡拉胶诱导的小鼠炎症的缓解 平均体重为250g(6-7周大)的Sprague-Dowley大鼠随机分成三个组，口服给药实施例6化合物，剂量为50mg/kg。30分钟后，在右后足爪的下足跖(sub-planter)处给予卡拉胶。对照组给予了同样体积的不含化合物的水。2和3小时后测量足爪体积。本实验中，采用浓度为5mg/kg的地塞米松作为阳性对照。所述化合物表现出实质性降低由卡拉胶诱导的炎症。
图4对小鼠巨噬细胞中IL-2的抑制 在96孔板上培养小鼠腹膜巨噬细胞，密度为105细胞/mL。在用LPS(1μg/mL)、干扰素-γ(20μg/mL或抗CD40抗体(2μg/mL)对它们分别激发之前，用化合物22预处理30分钟。继续培养24小时，最后通过ELISA检测IL-12(p40)。
图5对CD40配体介导的IL-12(p40)合成的抑制 为了进一步证实对由CD40介导的IL-12分泌的抑制，通过可溶性CD40配体、CD 154活化巨噬细胞后，来检查IL-12(p40)的诱导。在化合物22存在的情况下，用2μg/mL可溶CD145(Immunex)刺激小鼠腹膜巨噬细胞。化合物具有显著的对IL-12的抑制作用。
图6对髓鞘碱性蛋白(MBP)诱导的干扰素-γ的抑制 在第0天和第7天用在CFA中的400μg髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫SJL小鼠，第14天开始收集局部淋巴结，并在化合物22存在或不存在的情况下用MBP培养72小时。通过胸腺嘧啶核苷掺入法测定淋巴细胞增生。对来自MBP刺激的和化合物22处理的细胞的细胞培养上清液利用ELISA对它们的γ干扰素进行分析。尽管在化合物22处理的细胞培养物中观察到正常的T细胞增生性应答，但也注意到γ干扰素水平的降低。
图7小鼠中助剂诱导的关节炎的缓解 用在弗氏不完全佐剂中的乳酪分支杆菌(1mg)免疫雄性Lewis大鼠(～150g)。在第12-14天之间观察到关节炎的临床症状。将所述大鼠随机分组，每天用赋型剂或药物处理。关机炎的临床分数一周记录两次。
图8对小鼠中LPS诱导的pyresis中TNF-α水平的抑制 向SW小鼠口服给予地塞米松(5mg/kg体重)，将化合物22以不同剂量溶解在水中。给药1小时后，给予LPS(400μg/kg，IP)，90分钟后采集血液。通过ELISA检测血清中TNF-α水平。
图9化合物22对炎症性肠病(IBD)的效果 组A显示了雄性SW小鼠由硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导的炎症性肠病(IBD)的疾病活性指数(DAI)的降低。DAI是由诸如体重、排便质量和隐血含量之类的因素组成。DSS的4％溶液作为饮用水，针对疾病诱导，每周两次检测DAI。之后，所述动物用每日剂量50mg/kg体重的化合物22(在PEG400制剂中)处理，每周2次监测活性指数。
组B显示了在大鼠中2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的IBD中对体重的改善，该体重的改善为IBD改善的参数。将TNBS(30mg)溶解在50％乙醇(0.25mL)中，并将其直肠灌药到雌性大鼠(～250-300g)。治疗化合物针对所述动物的给药剂量为100mg/kg PO，给药15天。体重变化表示为它们开始时体重值的百分比。
权利要求
1.一种通式(I)的化合物、其衍生物、立体异构体和其药学上可接受的盐，
其中
A代表取代或未取代的5-18元芳基或杂环体系；
B代表取代或未取代的5-18元芳基或5-6元杂环；
R1代表-OR10；NR11R12；
R2和R3可以相同或不同，各自独立地代表H、COR13，选自如下群组的取代或未取代的基团烷基、烯基、芳基、杂芳基、烷基磺酰基、烷基亚磺酰基、芳基磺酰基、芳基亚磺酰基、烷基硫代、芳基硫代和杂环基；或R2和R3可以一起形成杂环；
Z代表O、S或NR14；当Z代表O或S时，R6代表氢或选自如下群组的取代或未取代的基团烷基、烯基、芳基、芳烷基、环烷基、杂芳基、杂芳烷基和杂环基；当Z代表NR14时，R6代表H、羟基、经保护的羟基、氨基、选自如下群组的取代或未取代的基团烷基、卤代烷基、烯基、单烷基氨基、二烷基氨基、芳基、芳烷基、环烷基、杂芳基、杂芳烷基和杂环基；
Y代表O、S或NR14；
n为0-4的整数；
R4、R5和R7可以相同或不同，代表氢、硝基、羟基、甲酰基、叠氮、卤素或选自如下群组的取代或未取代的基团烷基、烷氧基、酰基、环烷基、卤代烷基、氨基、肼、单烷基氨基、二烷基氨基、酰基氨基、烷基磺酰基、烷基亚磺酰基、芳基磺酰基、芳基亚磺酰基、烷基硫代、芳基硫代、烷氧基羰基、芳氧基羰基、烷氧基烷基、氨磺酰和羧酸及其衍生物；
R10代表氢、选自如下群组的取代或未取代的基团烷基、烯基、芳基、芳烷基、杂芳基和反离子；
R11和R12可以相同或不同，并各自独立地代表H、选自如下群组的取代或未取代的基团烷基、烯基和芳基，或R11和R12与N一起可代表取代或未取代的单或二环饱和或不饱和环系，该环系可以含有一个或多个选自O、S或N的杂原子；
R13代表H、选自如下群组的取代或未取代的基团烷基、芳基、烯氧基、芳氧基、烷氧基和芳烷氧基；
R14代表氢或烷基；
X代表键接、O、S、SO、SO2。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中B代表的环系选自取代或未取代的苯基、萘基、和进一步经5-6元饱和或不饱和杂环取代的苯基和萘基，该杂环选自取代和未取代的吡啶基、噻吩基、呋喃基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、异唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、四唑基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基。
3.根据权利要求2所述的化合物，其中B选自取代和未取代的苯基、吡啶基和噻唑基。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中A选自苯基、吡啶基、吲哚基和二嗪基。
5.根据权利要求1所述的化合物，其中R1选自氨基、二烷基氨基、异丙氧基、羟基、苄氧基、N-乙酰基-全氢-1，4-二噻茚基和全氢-1，4-唑-茚基。
6.根据权利要求1所述的化合物，其中R2和R3独立地选自氢和对甲苯磺酰基。
7.根据权利要求1所述的化合物，其中R6选自羟基、氢和二烷基氨基。
8.根据权利要求1所述的化合物，其中X选自键接或O。
9.根据权利要求1所述的化合物，其中Y为O。
10.根据权利要求1所述的化合物，其中Z选自NH或O。
11.根据权利要求1所述的化合物，其中n为0、1或2。
12.根据权利要求1所述的化合物，其中R4、R5和R7为氢。
13.根据权利要求1所述的化合物，该化合物选自
i)2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸苄酯盐酸盐，
ii)2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸盐酸盐，
iii)4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺盐酸盐，
iv)4-{4-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基-苯甲酰胺，
v)4-[4-(2-氨基-2-异丙氧羰基乙基)-苯氧基]-苯甲酸，
vi)2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸异丙酯，
vii)6-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰基乙基)-苯氧基]-N-羟基烟酰胺盐酸盐，
viii)2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸钠盐，
ix)2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸，
x)2-氨基-3-[4-(3-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸，
xi)2-氨基-3-[3-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸，
xii)3-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺，
xiii)4-[3-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺，
xiv)3-[4-(2-氨基-3-氧代-3-哌啶-1-基-丙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺，
xv)4-{3-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基苯甲酰胺，
xvi)3-[4-(2-氨基-3-氧代-3-哌嗪-1-基-丙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺，
xvii)4-{3-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基-苯甲酰胺，
xviii)3-[4-(2-氨基-3-吗啉-4-基-3-氧代-丙基)-苯氧基]-N-羟基-苯甲酰胺，
xix)3-[4-(3-羟基氨甲酰基-苯氧基)-苯基]-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-丙酸甲酯，
xx)3-{4-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基-苯甲酰胺，
xxi)4-[4-(2-氨基-3-氧代-3-哌啶-1-基-丙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺，
xxii)2-氨基-3-[4-(4-羟基氨甲酰苯氧基)-苯基]-丙酸，
xxiii)4-[4-(2-氨基-3-吗啉-4-基-3-氧代丙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺，
xxiv)4-[4-(2-氨基-2-氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺，
xxv)4-{4-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基苯甲酰胺，
xxvi)4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苄基]-N-羟基苯甲酰胺，
xxvii)4-{4-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基-苯甲酰胺，
xxviii)4′-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-联苯-4-羧酸羟基酰胺，
xxix)2-氨基-3-(4′-羟基氨甲酰联苯-4-基)-丙酸甲酯，
xxx)4′-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-联苯-4-羧酸羟基酰胺，
xxxi)4-{4-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基-2-甲基苯甲酰胺，
xxxii)4-{4-[2-二甲基氨甲酰基-2-(甲苯-4-磺酰氨基)-乙基]-苯氧基}-N-羟基-3-甲基苯甲酰胺，
xxxiii)4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰基-乙基)-苯氧基]-N-羟基-2-甲基-苯甲酰胺，
xxxiv)4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基-2-三氟甲基苯甲酰胺，
xxxv)4-[4-(2-氨基-2-二-甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基-2-三氟甲氧基苯甲酰胺，
xxxvi)4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-N-羟基-2-甲氧基苯甲酰胺，
xxxvii)4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-2-氟-N-羟基苯甲酰胺，
xxxviii)4-[4-(2-氨基-2-二甲基氨甲酰乙基)-苯氧基]-3-氟-N-羟基苯甲酰胺，
xxxix)4-[4-(氨基-二甲基氨甲酰甲基)-苯氧基]-N-羟基-2-三氟甲基苯甲酰胺，和
xxxx)4-[4-(1-氨基-2-氧代-2-哌啶-1-基乙基)-苯氧基]-N-羟基苯甲酰胺。
14.一种药物组合物，其含有药学有效量的如权利要求1所述的通式(I)化合物和药学可接受的载体、稀释剂、赋型剂或溶剂
15.根据权利要求14所述的药物组合物，其采用片剂、胶囊、粉末、糖浆、溶液、气雾剂或悬浮液形式。
16.一种降低血浆中血糖、游离脂肪酸、胆固醇或三甘油酯含量或降低它们中任何一种含量的方法，该方法为给药宿主根据权利要求1所述的化合物。
17.一种治疗炎症的方法，该方法包括向需要的患者给药有效量的权利要求1所定义的通式(I)化合物。
18.一种治疗免疫疾病的方法，该方法包括向需要的患者给药有效量的权利要求1所定义的通式(I)化合物。
19.根据权利要求18所述的方法，其中所述免疫疾病为由细胞因子介导的疾病。
20.根据权利要求19所述的方法，其中所述细胞因子为TNF-α或IL-12。
21.根据权利要求1所述的化合物，其中所述药学可接受的盐选自盐酸盐、溴酸盐、钾或镁盐。
22.一种制备如下通式化合物的方法
其中，A、B、X、Y、Z、R1至R3、R6至R9和n如权利要求1所定义，p为保护基团，所述方法包括如下步骤
(a)使通式化合物
与通式化合物
反应形成通式为
的化合物，其中W为卤素；
(b)氧化步骤(a)的产物以形成如下通式化合物
(c)使步骤(b)的产物与Z-R6反应。
23.根据权利要求22所述的方法，进一步包括步骤(d)，该步骤从步骤(c)得到的产物脱去保护基团P。
24.根据权利要求23所述的方法，进一步包括步骤(e)，该步骤使步骤(d)的产物与W’R2和/或W’R3反应以形成如下通式化合物，其中W’为卤素
全文摘要
本发明涉及新型含异羟肟酸的氨基酸衍生物，该衍生物用于治疗发炎、炎症和免疫疾病；用于降低血糖；血清胰岛素、游离脂肪酸、胆固醇和甘油三酯含量；和用于治疗或预防代谢性疾病。
文档编号A01N37/28GK101252838SQ200680031982
公开日2008年8月27日 申请日期2006年6月29日 优先权日2005年6月30日
发明者P·内奥吉, D·迪, A·纳格, S·内奥吉, B·纳格 申请人:贝克塞尔药品公司