蘑菇的菌床栽培方法

文档序号:321841阅读:564来源:国知局

专利名称::蘑菇的菌床栽培方法麟的菌床繊方法狱领域本发明涉及大型的具有良好的形态和有嚼头的口感的蘑燕的菌床栽培方法,对于该皿方法有用的蘑燕的插芽L芽),移植了芽的菌床栽培用培养基,以皿合菌床栽培的菌床織用蹄基。背景駄作为AX織蘑菇的方法,可以列举菌床栽培。该菌床栽培,首先織培瓶中填充菌床培养基,开用于接种固体或液,菌的L,将该菌^#基杀菌。然后,通常是将合适的种菌接种在该菌床培养基中并培养后,根据需要进行搔菌(菌搔s)等操作,经过出芽(芽出L)从菌床面产生株状的子实体,收获株状的蘑燕。现在,因为株状的蘑燕在市场大量上市,对于一股消辩不再騎了。甚至即使开发了与传统品种相比具有味觉,秀待点的品种,只要形态相似,就难以与传统品种区别,因此需要开发出是大型、与琳状的、即使l付实体就具有足够,感的蘑菇。但是,j顿传统方法获得的具有株状群生麟的蘑燕,柄的粗细或伞的大小^^异,难以織鄉的品质一致的、商品价值高的蘑菇。因此,近年来研究了魏薛的菌床栽培中获得鄉子实体的方法。例如,在杏鲍燕(工U>《)的栽培方法中,提出了在环:tM度为50-100%的范围内,舰将不足75%的低鹏环境和75%以上的髙鹏环境保^"定的间隔,进行出芽管理,进行使原基形成时生成的发芽7jC在5天内消失的原基繁殖(例如专利文献l、专利文献2)。对于shimeji属(乂^^JR)的,,特另!』是真姬燕(7于^夕)的菌床栽培,报道了在皿瓶的口部进行出芽,M:盖顶面的、有^i:径设定为5-30mm的圆形或者类似靴的开口部織鄉shimeji(例如专利文献3)。船卜,还公开了以錢菇的菌床栽培中,在菌床蹄基中體的孔的侧面i部产生多根芽,从所述芽中选择一个认为生长良好的芽,将除了该芽以外的其它芽全部摘除,进行,高难度操作后,进行子实体的生长,以每一个孔形成一个子实体为特征的蘑薛的菌床i^方法(例如专利文献4)。专利文献1日本特开2000-20994专利文献2日本特开2002-233239专利文献3日本特开平11-196668号专利文献4日本特开2006-115834号
发明内容但是,由于记载^J^专利娜1或2中的方法,必需在中途改变出芽室的环埭湿度,或者必需多个环境鹏不同的出芽室,因雌作鋭。Itt^卜,记载^J^专利文献3中的方法由于是以从开口部开始打开的方式形成多个株状的子实体,因此难以获得形态良好的子实体,此外,由于子实体的根部密集,因此尤其不能满足柄部的脇、大小。h,对于蘑燕的菌床栽培,特别是真姬离褶伞LyophyllumShimejO的皿,随着子实体大型化,有在柄的部分产生空洞的情况,从而降低了商品价值。本发明人为了获得鄉的蘑燕子实体,如专利文献4中的记载,在培养基中设置孔,一边衫腿从该孔的侧面或底部长出的多根芽一iiit行生长,使一个孔中只产生一行实体,发现可得到例如1根子实体鹏20g的鄉、直柄粗壮、菌丝密度高、肉质致密、夕卜观和口感好的子实体,但在该情况下,也有孔中没有产生芽的情况,或者在产生多根芽的情况下,从其中杉腿一个芽变得困难,由于不能从该孔中收获所需靴的子实体,难以获得稳定的产量。因此,在商业栽培中期待开发出更稳定的栽培方法。itl外,还期待开发可以在稳定的栽培方法中^ffl的菌床,用^基。因此,本发明的课题是,提供特别容易生产管理的、稳定辦一琳状的大型的、形状良好、商品价格高的蘑茹的子实体:^法。为了稳定地获得大型子实体,本发明人专'。顺究的结果是,如果将M^菇原基分化的蘑菇的子实体、,幼子实体从菌床,用培养^离,作为插芽移植到菌丝蔓延的菌床栽培用培养基中继续生长,令人惊奇的发现,分化后的从菌床中分离的蘑燕子实体与培养基的菌丝再结合、融合,成长为可作为商品出售的成熟子实体。还成功的开发了菌床辦用培养基,臓培养基适合本发明的,教培品种真姬离褶伞的大^^皿培,从而M了本发明。即概括本发明的话,本发明的第一方面发明涉,菇的菌床栽培方法,所述方g含将分离的蘑恭的插芽移植到菌床栽培用培养基中的步骤。在本发明的第一方面发明方式中,蘑菇的插芽是菌床栽培的蘑菇子实体,作为其方式为幼子实体。此外,菌床栽培用培养基歸薛菌丝舰的培养基。而且在本发明的第一方面发明中,适合真姬离褶伞(Lyophyllumshimeji)的栽培。船卜,作为移t歸芽的菌床栽培用培养基,可以是分离了插芽的原培养基,也可以是另夕卜制造的蘑菇菌丝蔓延状态的菌床栽培用培养基。Jtl^卜,可以在分离插芽后适当使用,也可以保存在清洁的场所后使用。可以根据插芽的状态适当的决定保存时间。本发明的第二方面发明涉及用于本发明的第一方面发明中的分离的蘑燕插芽,作为其方式,该插芽是菌床栽培的蘑菇子实体,,是幼子实体。itMh作为本发明的第二方面发明的优选方式,插芽是真姬离褶伞(Lyophyllumshimeji)的插芽。本发明的第三方面发明涉及移植了本发明的第二方面发明的蘑燕插芽的蘑菇菌床栽培用培养基。船卜,作为本发明的第四方面发明,皿适于真姬离褶伞的菌床栽培的栽培用培养基。该培养基是含有锯屑和玉米类的真姬离褶伞的菌床栽培用培养基,是以只使用针叶树来源的锯屑作为锯屑为特征的真姬离褶伞的菌床栽培用培养基。#卜,提供真姬离褶伞的菌床栽培方法,^ir征在于在处于水湿润状态的本发明第四方面发明的菌床栽培用培养基上接种真姬离褶伞,,生子实体。当然,本发明的第四方面发明的^#基可以适用于本发明的第一方面发明的菌床栽培方法中。根据本发明,提供了向,,IM燕插芽的蘑苑栽培方法。JH外,提供了可以在该栽培方法中适用的菌床栽培用培养基。M使用本发明,蘑菇的发生位置、收获时间、皿均一性等的^管理变得容易。iti外,根据本发明,可以稳定地获得一滩状的大型的皿良好的蘑薛子实体。具体实施方式以下具体的说明本发明。在本发明中,所,燕的插芽意指^述的插芽移植步骤中使用的子实体。作为蘑燕的插芽的例子,可以舰菌床栽培的蘑薛子实体,可以雌柳幼子实体。此外,在将蘑燕进行菌床栽培后,照射了一定时期光生长的子实体、优选幼子实体在本发明中也可以作为蘑菇的插芽使用。作为可以适合本发明的蘑菇的品种,是可以作为本发明的插芽在后述的栽培方法中使用的即可,没有特殊的限定,例如可列举真姬离褶伞、糙皮侧耳(匕?夕少)、真姬燕、荷叶离褶伞("夕少〉jy、)、香燕(-X夕少)、杏鲍燕(工'J>年)、姬松茸(AgaricusblazeiMurril)等食用蘑菇。其中,作为本发明优选的一种方式,有真姬离裙伞,作为优选的真姬离褶伞,只要是真姬离褶伞U01-27(LyophyllumshimejiLa01-27)(FERMBP-廳0)、真姬离褶伞La01-20(LyophyllumshimejiLa01-20)(FERMBP-10959)等會辦菌床栽培的菌株、是可itffl于本发明的菌株则没有《if可限定。财卜,在本说明书中,戶刑胃真姬离褶伞是指在分类学上分类在Ly叩hyllumshimeji的蘑燕。以往,虽然真姬燕被称为"山野真姬离褶伞(々i":/uL力G)"、"真姬离褶伞"而,但其被分数d"Hypsizigusmarmoreus"中(以fr^分凝ljLyophyllumulmarium中)(含w:栽培指棵,平舰年l月,锁县,,县农业协同组合中^、长野县经济事业农业共同组合连合会、长野县森林组^i合,辑发行;山溪力,一名鑑日本的蘑菇昭和63年11月10日,株式会社山和溪谷社发行),与本说明书中记载的真姬离褶伞是不同的。Jtl洲,真姬离褶伞被分类到菌根菌中,与之相对,真姬燕倍分凝l^^才鹏菌中,两者明显是不同的蘑燕。作为蘑燕的插芽,可以分离、使用例如从M3i菌床栽培获得的蘑薛原基分化的子实体。例如从原基分化的幼子实体(达至赃原基的顶端部形成灰白色的菌伞的状态)是^g的,更^S的是JOT长度为5mm以上的幼子实体作为插芽。虽然蘑薛的插芽的长度不足5mm的,在栽培中,作,例如直立的移植是困难的,它们的4柳也是本发明的范围。0卜,插芽的长度上限可以根据插芽的成长性适当决定。一般的情况下,t^分离、选取长度是5-20mm的幼子实体作为插芽使用。此外,插芽虽然可以在分离后立即使用,也可以使用保管在清洁场所的插芽。保管时间可以根据插芽的状态适当决定。关于保管割牛没有特殊的限定,可以适当决定,例如招驢下保管Ji^S的。作为本发明的蘑菇的菌床,方法,可以适用培、,培、箱敏咅等。作为一个例子,描述利用瓶栽培的本发明的蘑燕的栽培方法,该方雜含培养基配制、装瓶、杀菌、接种、培养、根据需要的搔菌、出芽、插芽的分离、插芽的移植、生长、收获等各步骤。下面具体说明,但本发明不限定于这些。所述培养繩制步骤,是衞tl在菌床栽培中舰的各种對才,搅拌、加水使成为适合蘑燕的菌床栽培的水湿润状态的7jC分调整步骤。例如真姬离褶伞的菌床栽培用培养基(也称为培养基)可以由麦类、玉米类、锯屑和其它营养齐轉的组維当配制。对于織基,如果是可以在本发明中鹏的则没有限定。繊步骤是将培养魏充到腿的步骤。具体的Ji^样的步骤,一般在容积为400-2300mL的耐热,口蹄瓶中压填配制的蹄基,例如1100mL瓶的情况是800-1100g,优选900-1050g,更,750-850g,在中央部附近打1个或多个口径是0.5-7cm,l-5cm左右,更,24cm左右,深度是0.5cm-16cm,雌2cm-15cm、更雌7-13cm左右的孔、加盖(打栓)的步骤。关于娜的孔数,可以根据瓶口的大小、孔的大小适当决定,例如1-10个,理想的l-8个,更亂想l"6个Ji^的。杀菌步骤是使培养基中的实质上所有的微生物死亡的步骤,一般在利用蒸气的常压灭菌中在98-100'C进行4-12小时,在高压灭菌中在101-125'C、雌118。C进行30-90併中。接种步骤是将种菌接种到培养基上的步骤,皿,基是在灭菌后mP到2(TC左右的培养基。以真姬离褶伞为例说明,一般,作为种菌,将真姬离褶伞菌丝在PGY液体i歸基、1/2PGY液鹏养基等以葡萄糖、蛋白胨部酵母提取物为主要成分的培养基上在25'C培养10-15天后,作为液,菌使用,无菌接种约10-50mL。还可以j顿公知的固柳菌,例如,将至此说明的步骤中获得的接种了液体种菌的培养基在25'C培养60-150天,进行菌蔓延(瞎通。)得到的物质也可作为固術中菌鹏。在此情况下,例如,^:无菌接种15g左右的固,菌。固,菌没有特殊的P艮定,可以接种在^基配制步骤中设置的孔中。培养步骤是使菌丝生长、熟成(熟成)的步骤。以真姬离褶伞为例说明,一般,,种了种菌的,,持在20-25'C的温度、湿度50-80%,使菌丝蔓延,荆吏其熟成。此外,还可以省略熟成。蹄步骤在850mL瓶的情况下一般进行60-150天,^S行100魅右。出芽步骤(芽出L工程)是在培养步骤结束以后去掉盖子,必要的话进行搔菌,从子实体原基形成幼子实体(在原基的顶端部分形戯白色的菌伞的麟),荆吏其发育的步骤,一般在10醫20。C,雌15'C左右、繊80%以上,照度誦勒克斯以下进行5-i5天。此外,在战培养步mt前離出芽步ai^前,还可以在菌床面形成多个孔。M:形成该孔,改善了培养基的通气性。由于在出芽步骤中ilil加湿容易产生结露水,出于防潮的目的可以在菌床面MM有孔聚乙烯片材、波郷(波板)等,也可以将培养臓倒蹄。插芽的分离步骤是指分离出芽步骤中发育的子实体的步骤。插芽的分离可以根据蘑菇的品种选择最合适的方法。例如,如果是容易分离的蘑燕,可以用手或镊子从菌床采取,如果是难以分离的蘑薛,可以使用手术刀、菜刀、刮铲^{勤可工具分离、釆取所需的子实体。插芽的移植的步骤是将从插芽的分离步骤获得的插芽,移植到希望发育子实体的培养基的樹可^g的步骤。作为移植插芽的培养基,可以是細芽的分离中舰的培养基(插辦离后的培养基),而且该培养基也可以是另夕卜制造的蘑薛菌丝蔓延的^#基,例如培养步骤中的培养基、出芽步骤中的麟基。船卜,在这些培养基中,移植了插芽、获得成熟子实体后的蹄基也肖嫩再次鹏。作为蹄步骤中的蹄基,可以使用从菌丝刚,后到熟成结束为止的任it^基。优选的是经过70天以上的、更优选的是经过80-120天的麟步骤的培养物。财卜,作为出芽步骤中的培养基,可以使用从出芽刚开始后到出芽结束为止的任^养基。在移植侧的培养基中形成子实体原基、幼子实体等的情况下,在除去这些子实体原基、幼子实体等后,就可以在希望的位置移植作为插^用的幼子实体。此外,不言而喻,被除去的幼子实体肖離为在本发明的移植中使用的插芽使用。移植的方法只要是移植的插芽与菌床上的菌丝融合、生长的方法则没有特殊的限定。插芽肖辦移植到培养基面的任何體。例如,嵌合到培养步骤之前或出芽步骤之前形自菌床上的孔部,例如植菌孔、通气孔等是适合的,M31^发明发现駄法对插芽与菌床上的菌丝的融合是最^i的。船卜,可以鄉芽步骤之前新开孔,插入到其中。这些孔的口径只要是与插芽嵌合的口径则没有特别的限定,直径一般可以是2-20mm,,4-10mm。M31相对于^#基上的1个孔移植、生长1芽,例如幼子实体,可以^不形^状,而1根1根鹏te的靴良好的鄉子实体。船卜,对1个L^植多铺子实体也是本发明的一种方式。此时,各子实体的根部粘连(癞着),^株状,由于粘连的部分仅仅P艮于子实体根部的一部分,因此可以简单的1^Kh分开,获得与对1个孔移植1根幼子实体所获得的子实体相同的、1根1根独立的皿良好的大型成熟子实体。此外,将作为插芽使用的子实体的大小分类,在培养基中移植、栽培管理同等離大小的插芽,肯辦获得大小一致的成熟子实体。M芽例如幼子实^植到孔中,例如插入时,以幼子实体M立的、且幼子实体的一部分劍虫歸基的方式插入是^g的。生长步骤是指使子实体原基、幼子实体生长为肖^收获的成熟子实体的步骤,在本发明中题移植的插芽形鹏熟子实体的步骤。一鹏度在2000勒克斯以下,除此以夕卜在与出芽步聽本相同的剝牛下进行5-15天。#卜,在生长步骤中,生长室中的结露7jC^^子实体的影响很小。M3ii^步骤可以获得成熟子实体。收获成实体^^培的全部步骤。以上,以真姬离褶伞的,培方法为例说明了本发明,当然本发明并不限定为上述真姬离褶伞的培。例如在荷叶离褶伞的情况下,可以用例如曰本特PF04-211308号记载的方法进行菌床栽培,将其子实体作为插,用。在香燕的情况下,可以用例如日本特开平044)75538号记载的方法进行菌床栽培,将其子实体作为插芽使用。船卜,在例如真姬菇(Hypsizigusmarmoreus,以前分类为Lyophyllumulmarium)的情况下,可以用例如日,开平05-268942号记载的方法进行菌床栽培,将其子实体作为插^^吏用。其它的蘑菇的情况也可以选髓当的辦方法,鹏栽培的子实体、雌幼子实体作为插芽。M3tt发明,以往菌床驗中困难的蘑燕成好实体产生錢的管理变得很容易。此外,成熟子实体的收获时间、皿的均一性管理变容易也是本发明的^t一。本发明的第四方面发明,提供适^"般的真姬离齢菌床辦的栽培用培养基。该培养基是含有锯屑和玉米类的真姬离褶伞的菌床鹏用麟基是以只使用针叶树来源的锯屑作为锯屑为特征的真姬离褶伞的i^用培养基。提供真姬离褶伞的菌床栽培方法,其ir征在于将真姬离褶伞接种于处于7K湿润状态的本发明的第四方面发明的菌床,用培养基,产生子实体。当然,本发明的第四方面发明的培养基可适用于本发明的第一方面发明的菌床栽培方法中。以往,真姬离褶伞的菌床栽培是滋贺县森林中心的太田开始成功的,在日本特开平07-115844号公报中公开了舰麦类的真姬离褶伞的菌床毅咅方法,日本菌学会报,第39巻,第13-20页,1998年公开了〗顿麦类的培养基中真姬离褶伞子实体的发生实验。it^卜,日本特肝06"153695号公报中公开了禾佣将泥炭薛(t'一卜:e;O作为基质、添加淀粉等的培养基进行的菌根菌的菌丝培养方法,相同发明人在日本菌学会报,第35巻,第192-195页,1994年鹏了在以、皿藓作为基质,添加淀,的培养基上的真姬离褶伞的子实体发生实验。但是,在日本特开平07-115844号公报的方法中,由于蹄基中l顿的麦魏高价的,增加了線基淋。lt^卜,日本特肝06-153695号公报的方法中,产生的子实体的产量低,还没有iil摘业生产的7jC平。,来,公开了以真姬离褶伞的商业栽培为目的的真姬离褶伞的栽培方法。日本特开2000-106752号公报中公开了以含有黍亚科(*e'亜科〉植物为特征的真姬离褶伞的菌床栽培用培养基,以及使用该,基的真姬离褶伞的,方法。财卜,曰本特开2002-247917号公报中公开了真姬离褶伞的菌床栽培方法,其特征在于配制至^^有S^和阔叶树锯屑的混合歸基,将该培养基置于水湿润状态,接种真姬离褶伞的菌丝,在30'C以下的mSig^产生子实体。日本特开2005-27585号公报中,公开了真姬离褶伞的菌床皿方法,,征在于在真姬离褶伞的栽培方法中,对于在水湿润状态下接种、歸真姬离褶伞的菌丝旨辦产生子实体的培养基,添加混^^碎的牡蛎壳,且调整培养基的pH不舰7。日本特开2007-54044号公报中,公开了真姬离褶伞的菌床栽培方法,征在于^ffl在含有S^锯屑的培养基中添加混合少量麦类禾n/^^,制的混合培养基,7jC湿润状态下将真姬离褶伞接种培^该混合,基后,产生子实体。本发明人以日本特开2000-106752号公报公开的S^:为基础,不同于本发明的第一方面发明的蘑燕的菌床栽培方法,M:不使用插芽的一般的菌床,方法开始真姬离褶伞的商业栽培,清楚了在一般的菌床栽培方法中,生产规模以歸基制备Mi十在一批中一旦舰4吨,贝陏大M^培弓胞麟的不稳定性,产生了稳定的商M培的课题。本发明人为了消除该不稳定性,对影响一般的真姬离褶伞菌床栽培的各种因子进行了栽培研究,探讨了对大M^栽培的影响。據燕的^t咅中,已知〗顿的锯屑的,会影响蘑燕的生长。在真姬离褶伞的菌床栽培中,根据J^曰本特开平07-115844号公报和日本菌学会报,第39巻,第13-20页,1998年中的记载,报告了阔叶树的锯屑是理想的,针叶树的锯屑的生产性差。在前述的其它公报类中,也认为阔叶树锯屑是合适的。例如,日本特开2007-54044号公报记载了阔叶树的锯屑是合适的。日,开2005-27585号公报使用了阔叶树锯屑。日本特开2002-247917号公报以阔叶树锯屑作为发明的构成要件。日本特开2000-106752号公报中娜阔叶树锯屑实施发明。如前所述,清楚了真姬离褶伞的^^J^,基配制量一旦,皿4吨时栽培的不稳定性,由于成熟子实体的生产率随生产批次不稳定,对蘑燕制造设备、环境设定、,基配置方法等影响菌床栽培的各种因素进行了栽培研究,探讨了对大规模栽培的影响,深入探讨了其最优化。其结果,意外的证实被认为适合真姬离褶伞的一般菌床栽培的阔叶树锯屑是不适合商业大^^皿的事实,从真姬离褶賴培的传统駄中按一般的技术认识,发现了il51R使用针叶树锯屑,舰行生产率高、稳定的大夫鹏辦成为可能,从而完成了本发明的第四方面发明。it^卜,对于第五方面发明,提供了使用即使在一般的大规模商业栽培中也肯嫩稳定生产真姬离褶伞的菌床栽培用培养基的菌床i^方法。以下,具体的说明本发明的第四、第五方面发明。作为本发明的方式,,了含有锯屑和玉米类的真姬离褶伞的菌床,用培养基,是只含有针叶树来源的锯屑作为锯屑的真姬离褶伞的菌床栽培用培养基。这里的针叶树来源的锯屑,可以l顿杉来源的锯屑。对锯屑没有特殊的限定,可以f顿一般的锯屑。锯屑的粒度可以从一鹏燕的菌床驗中鄉的范围中选择使用。0卜,对于锯屑,可以j顿锯末(千'7》卜),锯末的鄉也包含在本发明中。作为本发明的方式,提供了实质上使用玉米类作为真姬离褶伞的营4顿的菌床栽培用培养基。所赵米类JK米的果实,例如可以是含有选自就的果实的粉碎物、加热鹏物、鹏(圧"V)鹏物等的物质。在本发明中,即使只以玉米类作为营养源也可以高,培真姬离褶伞。作为本发明的方式,4顿这些菌床栽培培养基配制在一般的蘑菇栽培中舰的7jC湿润状态的培养基MM^种真姬离褶伞,可以进行髙效而且再现性良好的真姬离褶伞的大夫Mi^咅,其商业的大M^^第一M为可能。对在本发明的第四、第五方面发明中使用的真姬离褶伞的菌株没有ft^限定,魏合该培养基、培养方法的菌株即可,作为适合舰的菌株可列举日本特开2001-120059号公报中记载的真姬离褶4KLyophyl!umshimeji)菌株等。在本申i青说明书中,玉米类^有玉米的果实的物质即可,可以是,物也可以是^P^1。此外,可以使用果实的全部,也可以^会^1加工分开的果实的一部分。財卜,可以将分开的部分之间混合,也可以将果实的全部与分开的部分混合^顿。作为加工抓可以列举出粉碎的果实、或在粉碎后筛舰的调整了粒度的物质、力卩热碾压的物质、或者鹏为颗粒状或丸状的物质,本发明不论加工方法或加工物的皿、粒度等都可以使用,Ji^卜,还可以并用两种以上的加工物、可以并用果实的全部和加工物。对于本发明适合使用的玉米类,可列對乍为,广泛的加^3。在本发明中舰针叶树来源的锯屑,针叶树驗包括松科、杉科、柏科、纽杉科(4科)、三尖杉科(4-力'《科)等的裸子植物的一类。本发明中如果是从这些植物中获得的锯屑,任一种都可以使用,可以单3喊者混合使用。砂卜,获得的锯屑不to即娜,本发明中可以雌娜SMia疔洒水堆积舰,7K鄉持能力提髙的锯屑。对于本发明的第五方面发明的真姬离旨的皿方法,可以{^培、,培、箱栽培等的菌床方法栽培。作为一个例子,通ilim描述本发明的第五方面发明的蘑燕的菌床辦方法,所述的该方魏^#基配制、装瓶、杀菌、接种、培养,必要的话进行搔菌、出芽、生长、收获等的各步骤。接下来具体的说明这些步骤,但本发明不限定于这些步骤。以下详细说明i^SSS制。本发明的第四方面发明的真姬离褶伞的菌床栽培用,基,可以含有i^类和只以针叶树来源的锯屑作为锯屑。以加繊狂斜卩来源于杉的锯屑(杉木屑)的情况为例,说明玉米类和针叶树来源的锯屑的混合比例。玉米类和针叶树来源的锯屑的混合比例是可以使用本发明的培养基,真姬离褶伞的比例即可,从实现髙产量的角度考虑,加mE玉米含量的下限是以其千燥重量比计为菌床i^用培养基中的40%以上,雌50%以上,更雌60%以上。不到40%的话获得的真姬离褶伞的产量显著下降,不Ji^选的瞎况。Jtt外,由于加热mE玉米的吸水性低,菌床栽培用培养基中的含量一旦过髙,菌床栽培用培养基的水分保持力下降,培养瓶下部滞留水,其结果使菌蔓延不良。艮P,加热鹏就含量的上限以其千燥重量比计为菌床i^用,基中的80。/。以下,,75%以下,更^70%以下。财卜,以加热mE5賴彬木屑的情况说明菌床辦用織基的水始量。菌床辦用培养基的7jC始量Ji^l本领域狱人员的常识,调M培养瓶下留水的禾號是^1的,没有麟的限定。例如为682*%以下,雌66S1T。以下。但是,妇K^M^!64重*%的情况下,雜蹄基中空隙减少,产生菌蔓延不良的情况,其结果是获得的子实体的产量和品质低,因此调整到64重量%以下是更优选的。船卜,即使水MK1低时,由于培养基的干燥等的影响,也会产生菌蔓延不良或子实体畸形、生长不良,因此调整7JCM量至雌50%以上,更雌55%以上。对于这些7K始量,可以观察水分调整了的培养基的性状,适当确定。对于装瓶、杀菌、接种、培养、出芽步骤,可以与上述使用插芽的真姬离褶伞的菌床辦方法同样地实施。经过出芽步骤形成的子实体原基、幼子实体,可以直接实施生长步骤,此外,也可以作为i^燕的插芽在真姬离褶伞的菌床辦方法中鹏。生长步骤与Jl^使用插芽的真姬离褶伞的菌床,方法相同地实施。通过使用本发明的第四方面发明的培养基的第五方面发明的菌床栽培方法,可以获得成熟子实体,进行收获,完成辦的所有步骤。M3tt发明的第四、第五项的发明,真姬离褶伞的商业栽培变得非常稳定,显著的改善了驗批次间的收获的不均一性。此外,本发明的第四、第五方面发明虽然^:培方法进行了说明,但是本发明可以适用于蘑菇的菌床栽培,不限定于J^瓶栽培。以下M3i实施例更具体地说明本发明,但是,本发明不限定于以下实施例。实施例1在100mL的PGY液体培养基(组成葡萄糖2.0%(w/v)、蛋白胨0.2%(w/v)、酵母提取物0.2%(w/v)、KH2PO40.05%(w/v)、MgS04,7H2O0.05%(w/v)、)中接种真姬离褶4KLyophyllumshimeji)La01-27株(FERMBP-10960)的菌丝,在25'C振荡培养(100rpm)7天后,将2mL接种到200mL的相同培养基中,继续振荡培养(100ipm)7^M,鹏鄉i^l接种至咖入了160L相同培养基的200L容积发,(小松川制itB^iJ)中,进行6天搅拌培养(搅拌速度100ipm,通气量251V分),配制赚体种菌。另一方面,)imEi米(饭坂精麦社4^)和针叶树锯屑的杉木屑((有)h乇工物产)按,錢比2:1(碾压玉米针叶树锯屑)混合,加水使水分最终为62重量%,充分搅拌、混合后,在聚丙烯制的广口培养瓶(llOOmL)中各压填800g。分别在压填物表面的中央幵口径1.5cm的孔,在以压i繊表面中央为中心的直径4咖的圆周上均等地开4个口径lcm的孔,共计5个深度分别为10cm左右的孑Ug,麟鋤口盖,进行30併中的118。C的高压蒸气灭菌,放冷至20'C,配制成菌床辦用培养基(固体培养基)。在该固体蹄基上接种约25mL战液,菌,在暗处在20。C,湿度70-75%的^#下培养104天菌丝,使菌丝在培养^:体1^。然后,去掉盖子,颠倒瓶子,移动到,控制为15。C,加,制为匕-一$7一100((株)鹭宫制作戶賴隨)的显示值为115-120%的出芽室中,在100勒克斯以下的照明下进行出芽。在出芽的第5、7、8、9、10和13天时各lc/s(16根)正置瓶子,将固体培养驗面生长的子实体原辭呦子实体一次锁摘除,从中分离出幼子实体,从该幼子实体中衫隨出表1中所示长度的幼子实体作为插芽。然后,在被除掉子实体原寂喻子实体的原固体培养基的5个孔中,用镊子各移植l根该插芽。然后,将该培养驗动到、鹏控制为15'C,力鹏控制为匕二一3T^IOO((株)鹭宫伟I炸所制造)的显示值为105-120%的生长室中,在50-100勒克斯以下的照明中,生长8-16天,生长为成熟的子实体,进行收获。表1中显示了各试验区的*瓶的子实体产量。表1<table>complextableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>由此可知,在真姬离褶伞的菌床辦中M:将子实体作为插芽移植,使真姬离褶伞的,成为可能。特别是在出芽7-10天区获得了足够产量的子实体。此外,在各瓶中获得的子实体的大小的一致性良好,明示了适合商业栽培。在出芽5天区,因为插芽的长度为3mm,小,^^f^中损伤,剤艮多还在生长中倒伏的、没有生长的幼子实体,因此无法获得足够量的皿良好的子实体。财卜,在出芽13天区,插芽不能充分发育,只获得了柄细、伞平、商品价值低的子实体。实施例2按实施例1记载的方法进1培,在出芽第9天终止出芽步骤,颠倒后,将子实体原基和幼子实体一次全部摘除,从摘除的幼子实体中衫腿插芽。在除掉子实体原基和幼子实体的原固体培养基中用铲新制作5个直径5mm、深度5mm的圆柱状的孔,旨孔中各移植1t前分离的插芽中长度15mm的插芽,进行生长,获得与实施例1的出芽9天区相同的良好结果。实施例3按实施例1记载的方法进,培,在出芽第9天将长度约为15mm的幼子实体作为插教离。然后,按实施例1记载的方法进行到赚步骤结束,在除去产生的子实体原辭卩幼子实体的其它固体歸基的5个孔中,WSl中各移植1繊芽之后,和实施例1进行同样的生长,获得与实施例1的出芽9天区相同的良好结果。实施例4按日本特JPP04-211308号记载的方法进行荷叶离褶伞的菌床,,将其幼子实体作为插芽分离。该插芽移植到菌丝蔓延的菌床栽培用培养基上,可以获得成熟子实体。实施例5按曰本特,04^075538号记载的方法进行香薛的菌床,,将其幼子实体作为插芽分离。该插芽移植到菌丝蔓延的菌床栽培用培养基上,可以获得成熟子实体。实施例6按日本特W05-268942号记载的方法进行真姬燕的菌床栽培,将其幼子实体作为插芽分离。繊芽移植到菌丝舰的菌床栽培用麟基上,可以获得成熟子实体。实施例7在100mL的PGY液体培养基(组成葡萄糖2.0%(w/v)、蛋白胨0.2%(w/v)、酵母提取物0.2。/。(w/v)、KH2PO40.05%(w/v)、MgS(V7H2O0.05%(w/v)、)中接种真姬离^(Lyophyll咖shimeji)La01-27株(FERMBP-10960)的菌丝,在25'C振荡培养G00ipm)7天后,取2mL接种到200mL的同^#基中,继续振荡培养G00ipm)7琉,再将鄉培^)^种至咖入了160L相同i歸基的200L容禾碟,(小松川制^f^J)中,进行6^i拌麟(搅拌JUS:100ipm,通气量251V分),配制成液,菌。另一方面,(饭坂,社生产)和针叶树锯屑的杉木屑((有)卜乇工物产)按,重量比2:1(mES米针叶树锯屑)混合,加7k銜K诚终为62将充分搅拌、混合后的物质,每1批次按旨800g压填约5000个聚丙m啲广口培养瓶(U00mL)。分别在压填物表面的中央开口径1.5cm的孔,在以压填物表面中央为中心的直径4cm的圆周上均等地开4个口径lcm的孔,深度分别为10cm左右,然后,^J^养船卩盖,进行30併中的m'C的高压蒸气灭菌,放冷至20'C,配制成菌床辦用^^基(固体培养基)。在该固体麟基上接种约25mLid^液術中菌,在暗处鹏20'C、鹏70-75%的^{牛下培养110天菌丝,使菌丝在培养基雖蔓延。其后,去掉盖子,颠但搬子,移动到控制为温度15'C,加湿到匕-一$了<100((株)鹭宫帝怖所库隨)的显示^/115-120%的出芽室中,在100勒克斯以下的照明下,进行10天出芽。然后,繊子正置,由培养歸面生长的多个芽用小铲去除成长为子实体的4-5个^的芽以外的不要的芽之后,再过10-11天,移动到、M^制为15°C,力,制为匕二一^7一100((株)鹭宫制作所制造)的显示值为105-120%的生长室中,在5(M00勒克斯以下的照明下,生长9-ll天,获得成熟子实体,进行收获。以下显示了按,方法制造的10批次的结果。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>^^杉木屑的栽培,批次间每1个培养瓶的平均产量的变化幅度小,育辦进行稳定的生产,是对于商业,满意的结果。[比较例]将锯屑置换为阔叶树来源的锯屑(阔叶树木屑(旬卜乇工物产生产),除Ife^卜,使用与实施例7相同的,方法进皿培,结果显示如下。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>^ffl阔叶树木屑的皿,与《OT杉木屑的栽培相比,显示了随批次每1个培养瓶的平均产量的不均匀,船卜,其产量比战实施例1少,作为商^方法不能令人满意。实施例8在100mL的PGY液体培养基(组成葡萄糖2.0%(w/v)、蛋白胨0.2%(w/v)、酵母提取物0.2%(Wv)、KH2P040.05o/。(w/v)、MgS04.7H2O0.05%(w/v)、)中接禾中真姬离褶^(Lyophyllumshimeji)La01-27株(FERMBP-10960)的菌丝,在25'C振荡蹄(lOOrpm)7天后,取2mL接种到200mL的同麟基中,继续振荡培养(100rpm)7琉,再将鄉培糊接种到加入了160L相同i歸基的200L容积发,(小松川制itMiJ)中,进行6纖拌培养(搅拌100ipm,通气量25I7分),配制成液,菌。另一方面,mES^(饭坂,社生产)和针叶树锯屑的杉木屑((有)卜乇工物产)按^PW量比2:1(mE5米针叶树锯屑)混合,加水銜JC诚终为62充分搅拌、混合后,在聚丙繊啲广口織瓶(U00mL)中各压填800g(计入瓶、盖重量、分别鄉糊表面的中央开口径2cm的孔,在以压^/表面中央为中心的直径4cm的圆周上均等地开4个口径lcm的孔,共计5个深度分别为10cm左右的孔,然后,培养M卩盖,迸行30併中的118'C的髙压蒸气灭菌,放冷至20'C,配制成菌床織用培养基(固体培养基)。在该固体歸基中接种约25mL战液慚中菌,在暗处在、鹏20'C,湿度70-75%的^#下蹄111-113天菌丝,使菌丝在培养基整体蔓延。其后,去掉盖子,颠倒瓶子,雜制为温度15'C,加湿到匕-一^7一100((株)鹭宫制作所制造)的显示戯115-120%,照度20勒克斯以下(明BIHO併中30併中)的出芽室中进行出芽。出芽第7天将瓶子正置,移动至IJ驗控制为15。C,加湿控制为匕工一^7一100((株)鹭宫制作所制造)的显示值为100-110%,照度50-100勒克斯(明B^30辦中30併中)的出芽室中,再进行3天出芽,获得用條芽的幼子实体。另一方面,作为移ttt芽的培养吻,按与实施例1相同的方法,将进行了70、77、92、99、113、121或128天赚的培养备了各16楸例(本/亇—x.),每1瓶移植4職芽,在4个口径lcm的孔中各移植1根,在控制加湿到匕-一S7M100((株)鹭宫制作所律隨)的显示值为105-120%的相同生长室中生长11-14天,获得成熟子实体。下表中显示从各微区获得的每1瓶的平均收获量(g)。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>根据,结果可知,在经过70天~128^养期的培养物上移TO芽获得了成熟子实体。实施例9培养天数104天,除iifc^卜按与实施例8相同的方法进fi^养获得培糊,将戶腐培糊去掉盖子,颠倒后移动到控制在鹏15。C,力皭到匕二一$了,100((株)鹭宫制作所制造)的显示戯115-120%,照渡20勒克斯以下(明日^30併中30併中)的出芽室中进行出芽。出芽4、5、6、7、8、9或10天后进行正置,移动到MJt控制为15'C、力口湿以匕工一《了一IOO[(株)鹭宫制作戶賴隨]的标值为10(M10%、照度为5(M00勒克斯(明8^=30分30分)的生育室中进一步进行出芽,分别在6、5、4、3、2、l或O琉得到用條芽的幼子实体。作为移植插芽的i^tl,歸鄉为105天,除此以外,与实施例8相同的进蹄养,对所得培糊每1繊植4職芽,4个口径lcm的孔中各移植1根,力卩湿控制到fc$7一100((株)鹭宫制作所帝媳)的显示敬105-120%(明日1=30射中30併中)的逵出芽室中粒生长10-14天,获得成熟子实体。下表中显示从各微区(16樹伊j)获得的每1瓶的平均收^ft(g)。<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>根据以上结果可知,錢获得幼子实体的出芽步骤中,使繊和照度变化的所有试验区中都获得了足够量的平均收获量。实施例10!^i歸天数是102天以外,按实施例8记载的方法进fi^,去掉盖子,颠倒后在鹏控制为15'C,力口鹏制为匕-一$7一100((株)鹭宫伟怖M!J造)的显示值为115-120%,照度20勒克斯以下(明0|=30併中30餅)的出芽室中进行出芽。在出芽第7^束出芽步骤,获得作为插芽的幼子实体。在除^#天数是102天以外,按实施例8记载的方法进皿养的:l^物的口径lcm的4个接种孔,鋼小伊重新制作的直径5咖、深度5mm的圆柱状孔中各移植l職芽后,在^aS^制为15。C,力口湿控制为匕-一$7,100((株)鹭宫制作所制造)的歸值为105-120%,照度50-100勒克斯(明Bf=30併中30併中)的生长室中生长14天,获得成熟子实体。各微区获得的每1瓶的平均收获量(g)显示在下表中。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>如上述结果,即使在接种孔以外的新制作的孔中移植幼子实体进行生长,也可以获得不逊色于移植到接种孔中的^的收^M。实施例11麟养天数是113天以外,按实施例10记载的方法进行到出芽,从培养基分离出芽第7天获得的幼子实体作为插芽。其后,在控制为驗15'C,力皤到t二一^7V100((株)鹭宫伟怖Mi腊)的显示值为约105%,鹏5(M00勒克斯(明130颁30洲)的生长室中,保存O、1、2天后,在除培养天数是112天以外、按实施例8记载的方法进行培养的培养物的4个口径lcm的接种孔中各移植1根后,在控制为15C,力湿到匕-一$7一100((株)鹭宫制作所制造)的显示值105-120%,照度50-100勒克斯(明暗=30分钟30分钟)的生长室中生长14天,获得成熟子实体。各微区获得的每l瓶的平均收获量(g)显示在下表中。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>如上述结果,即使在保存1、2天区中,也可以获得与保存O天区几乎相等的收获量,明示了保存幼子实体2天的可能性。产业实用性根据本发明,鄉了在:的靴良好的商品价值髙的蘑燕子实体的菌床繊方法中4顿的插芽,移植该插芽的菌法栽培用培养基以及舰该插芽的蘑藉菌床栽培方法。此外,提供了能够以一般的菌床栽培方法可稳定生产真姬离褶伞的菌床栽培培养基,以及4訓盖培养基的菌床敏咅方法。131柳该S^才的真姬离褶伞的i^方法,提供了真姬离褶伞的产量增加的、稳定的栽培方法用培养基。真姬离褶伞La01-20于1998年6月16日保藏于M行政法A^业^^合研^f1ti午生物寄托中心(日本国茨城县筑波市东1丁目1番地中央第6,邮政编码305-8566),其保藏编号为FERMBR-10959,微生物分类命名为LyophyllumshimejiLa01-20。真姬离裙伞La01-27于1999年7月13日保藏于多te行政法A^业^^合研鄉^i午生物寄托中心(日本国茨城县筑波市东1丁目1番地中鄉6,邮政编码305-8566),其保藏编号为FERMBR-10960,微生物分类命名为LyophyllumshimejiLa01-27。权利要求1、蘑菇菌床栽培方法,其包含将分离的蘑菇的插芽移植到菌床栽培用培养基的步骤。2、权利要求1所述的蘑恭菌床栽培方法,其中,蘑薛的插芽是菌床栽培的蘑燕子实体。3、权利要求1所述的蘑燕菌床栽培方法,其中,蘑燕繊芽是菌床辦的蘑菇幼子实体。4、权利要求l至3中任一项戶腿的菌床栽培方法,其中,菌床繊用培养基麴燕菌丝蔓延的培养基。5、权利要求1至4中任一:iI^M的菌床栽培方法,其中,蘑菇是真姬离褶伞(Lyophyll咖ShimejO。6、用于权利要求1所述的方法中的分离的蘑燕的插芽。7、权利要求6所述的蘑菇的插芽,其中,蘑薛的插芽是菌床麟的蘑燕子实体。8、权利要求6所述的蘑菇的插芽,其中,蘑燕的插芽是菌床栽培的蘑燕幼子实体。9、权利要求6至8中任一I砂服的蘑薛的插芽,其中,蘑燕是真姬离褶伞(Lyophyll咖Shimeji)。10、移植了权利要求6至9中任一项所述的插芽的蘑燕菌床,用,基。全文摘要本发明提供大型、形态良好、具有有嚼头的口感的蘑菇的菌床栽培方法,还提供对该栽培方法有用的蘑菇的插芽,移植了该插芽的菌床栽培用培养基,以及适于菌床栽培的菌床栽培用培养基。通过包含向菌床栽培用培养基移植分离的蘑菇插芽的步骤的蘑菇菌床栽培方法、用于该方法中的分离的蘑菇插芽、移植了该插芽的蘑菇菌床栽培用培养基达成。文档编号A01G1/04GK101356884SQ20081014288公开日2009年2月4日申请日期2008年5月29日优先权日2007年5月29日发明者加藤郁之进,喜多昭彦,太田裕子,日下部克彦,河合高志申请人:宝生物工程株式会社
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