噻唑烷二酮能量限制拟似剂的制作方法

专利名称：噻唑烷二酮能量限制拟似剂的制作方法
噻唑烷二酮能量限制拟似剂相关申请的交叉参考
本申请要求2009年10月9日递交的美国临时专利申请第61/250045号和2010年2月16日递交的美国临时专利申请第61/304881号的优先权，其两者均通过引用以其全文结合到本文中。政府资助
本发明至少部分得到政府支持的国立卫生研究院项目(Grant)第CA112250号的资助。政府可拥有该发明的某些权利。 背景
噻唑烷二酮(TZDs)，包括罗格列酮、吡格列酮、曲格列酮和环格列酮，为核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR) Y的选择性配体。通过参与脂肪细胞内葡萄糖体内稳态、脂肪酸代谢和甘油三酯贮存的胰岛素敏感基因的转录激活来调节许多方面的脂肪组织功能，这些TZDs改善胰岛素敏感性。另外，TZD介导的PPAR y激活已经显示通过模拟脂肪细胞上胰岛素的基因组效应促进前脂肪细胞(pre-adipocytes)分化，并且调节脂连蛋白、前炎性细胞因子像IL-6和TNF a和脂肪细胞和巨噬细胞内许多内分泌调节剂的受体(host)。通过这些有益的作用，TZDs通过减少胰岛素抗性和协助血糖控制提供了用于II型糖尿病的新型口服疗法。像脂肪细胞一样，许多人癌细胞系已被报道呈现高水平的PPAR Y表达。这些肿瘤细胞体外暴露于高剂量(>50 y M)的TZDs，尤其是曲格列酮和环格列酮，导致细胞周期阻滞、细胞凋亡和/或再分化，提示PPAR Y信号转导与TZDs的抗肿瘤活性之间存在假定的关联。Grommes等.Lancet Oncol. , 5,第419-429页(2004)。另外，曲格列酮的体内抗癌活性在一些包括患有脂肪肉瘤或前列腺癌的患者在内的临床病例中得到证实。Demetri等Proc Natl Acad Sci USA. 96,第 3951-3956 页(1999)和 Hisatake 等，Cancer Res.,60，第5494-5498页(2000)。积累的证据表明，曲格列酮和环格列酮通过祀向于控制癌细胞的细胞周期进程和生存的多样化信号通路介导不依赖PPAR Y的抗癌作用。Wei等，Cancer Lett. , 276，第 119-124 页(2009)。在已鉴定的各种“脱祀(off-target) ”机制中，通过蛋白酶体降解(proteasomaldegradation)或转录抑制，TZDs对广泛范围的细胞周期-和细胞凋亡-调节蛋白包括￠-联蛋白(catenin)、细胞周期蛋白Dl、Spl、雄激素受体(AR)和表皮生长因子受体(EGFR)表达的作用，尤其值得注意。研究人员已经获得证据表明，该作用可归因于TZDs通过增加该E3泛素连接酶的表达水平激活0 -转导重复序列包含蛋白(repeats containingprotein) ( P-TrCP)介导的革巴蛋白例如P -联蛋白、细胞周期蛋白Dl和Spl的蛋白酶体降解能力。Wei 等，Mol Pharmacol. ; 72，第 725-733 页(2007)和 Wei 等，J Biol Chem.,283，第26759-26770页(2008)。在研究作为TZD诱导的P -TrCP介导的细胞周期蛋白Dl和Spl蛋白水解作用基础的机制过程中，观察到P -TrCP依赖的降解也发生于葡萄糖剥夺的条件下。与癌细胞形成对照，良性细胞对这些不依赖PPAR Y的抗肿瘤作用是抗性的，其强调TZDs作为开发新型抗肿瘤药骨架的潜在性。该前提对两个PPAR Y无活性衍生物STG28和0SU-CG12被证实是真实的，它们呈现比各母体化合物曲格列酮和环格列酮高数倍的抗肿瘤效力。Huang 等，J. Med Chem. , 49,第 4684_4689 页(2OO6)和 Yang 等，J. MedChem.，51，第 2100-2107 页(2008)。噻唑烷二酮的另一个可能的靶标为一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)。AMPK在调节细胞和全身水平两者的能量体内平衡和胰岛素敏感性的功能性作用为已知的。在应答于刺激例如运动、细胞应激和脂肪因子中，该细胞燃料-传感酶经控制养分摄取和能量代谢的多个下游信号转导通路，诱导一系列的代谢变化以抵消能量消耗，包括葡萄糖刺激和脂肪酸摄取、脂肪酸氧化和线粒体生物合成并抑制糖原合成。最近，越来越多的证据提示，根据其激活结节性硬化复症2的能力，一种通过抑制哺乳动物雷帕霉素类似靶标(mTOR)的负调节蛋白合成的肿瘤抑制基因，提示在AMPK与癌细胞生长和生存之间存在关系。Inoki等，Cell, 115，577-590 (2003)。从机理的角度来看，AMPK通过负调节mTOR整合生长因子信号转导与细胞代谢。另外，据报道AMPK通过抑制巨噬细胞内炎性细胞因子，尤其是白 细胞介素(IL)-6的产生来抑制炎性反应。Lihn等，Mol Cell Endocrinol. , 292，36-41(2008)。这些研究结果一同提示AMPK代表用于治疗II型糖尿病、代谢综合征和癌症的治疗性相关靶标。癌细胞通过在其微环境中转变细胞代谢为有氧糖酵解，提供所谓Warburg效应。Samudio 等，Cancer Res. 69,第 2163-2166 页(2009)获得生长优势。Warburg 效应是大多数癌细胞主要通过糖酵解，随后经细胞质内乳酸发酵，而不是像大多数正常细胞那样通过在线粒体内丙酮酸氧化产生能量的观察结果。即使氧气丰富这也会发生。Warburg效应可能是癌中破坏线粒体，适应于肿瘤内低氧环境的后果，或者是肿瘤基因关闭线粒体的结果，因为它们参与细胞凋亡程序。靶向于有氧糖酵解以利用恶性细胞相对于正常细胞对糖酵解抑制作用的不同易感性，因此是癌症疗法的有用方法。靶向于有氧糖酵解也可用于其它目的，例如治疗糖尿病或延长寿命。使用有氧糖酵解用于癌症疗法的实例为在各种自发性或化学诱导的肿瘤动物模型中饮食热量限制在抑制癌变中的体内疗效。参见Jiang等，Cancer Res 68，第5492-5499 页(2008) ; Hursting 等，Annu Rev Med 54，第 131-152 页(2003) ; Thompson等，J. Mammary Gland Biol Neoplasia 8,第 133-142 页(2003);和 Berrigan 等，Carcinogenesis 23，第 817-822 页(2002)。也可获得使用各种化合物例如白藜芦醇(Baur等，NatRevDrugDiscov. 5,第493-506 页(2006)和 Cucciolla 等，Cell Cycle 6，第 2495-2510 页(2007))或者 2-脱氧葡萄糖(Zhu等，CancerRes. 65，第7023页(2005))抑制致癌作用的信息也是可行的。由于它们分别通过抑制葡萄糖代谢和摄取模拟能量限制的有益作用的能力，能量限制拟似剂(mimetic agents) 2-脱氧葡萄糖和白藜芦醇已经受到广泛关注。然而,这些药物的治疗应用受到其相对弱体外效力的限制。仍需要新的能量限制拟似剂，特别是呈现增加效力，用于治疗癌症、代谢紊乱或其它涉及异常糖酵解的病症的那些拟似剂。发明概述
本发明提供在受试者中抑制糖酵解的方法，方法包括给予所述受试者包含噻唑烷二酮衍生物的药用组合物。由于噻唑烷二酮衍生物抑制糖酵解的能力，其代表类似于由于葡萄糖饥饿疗法(glucose starvation)造成的能量限制形式,其代表一类新的能量限制拟似齐U。使用噻唑烷二酮衍生物在受试者中抑制糖酵解的方法可用于抑制肿瘤糖酵解代谢并从而在受试者中治疗或预防癌症，并且也可用于延长受试者的寿命，包括尚未诊断患有癌症的受试者。用于该方法的噻唑烷二酮衍生物用本文提供的式I、II、III和IV进一步定义。本发明也提供用于通过提供有效量的噻唑烷二酮衍生物激活一磷酸腺苷活化蛋白激酶的方法。另外，由于激活AMPK导致IL-6表达的抑制，本发明也提供通过给予是受试者包括噻唑烷二酮衍生物的药用组合物在受试者中抑制IL-6表达的方法。用于激活AMPK和抑制IL-6表达的合适的噻唑烷二酮衍生物包括通过式I、III和IV的具体实施方案定义的那些衍生物。附图简述
通过参照以下绘图可更易于理解本发明，其中
图I提供描绘受到导致其作为能量限制拟似剂起作用的能力的噻唑烷二酮(TZDs)影 响的各种因素的示意图。图2提供显示用于制备大量噻唑烷二酮化合物库的固相方法的示意图和图表。图的上面部分显示推定的合成流程图，而图的下面部分显示存在于组成库的化合物上的R1和R2取代基。图3提供曲线图和显示PPAR Y不依赖的TZDs抗增殖作用的免疫印迹。部分A)显示曲格列酮(TG)、环格列酮(CG)、STG28 (STG)和OSU-CG12 (CG12)相对于两种能量限制拟似剂白藜芦醇(Resv)和2-脱氧葡萄糖(2-DG)在10% FBS-补充的培养基中72小时对LNCaP前列腺和MCF-7乳腺癌细胞相对于非恶性前列腺上皮细胞(PrECs)的活力的剂量依赖性作用。MTT数据表示为平均值±95%置信区间(误差棒)(n = 6)。部分B)显示缺乏0SU-CG12对在PrECs中的P -TrCP, Spl和雄激素受体(AR)表达水平的作用，证实非恶性的PrECs对0SU-CG12的抗增殖活性的抗性。蛋白质印迹为三个独立实验的代表，所有实验具有类似的结果。图4提供TZDs诱导自噬的证据。左小图提供免疫印迹，其显示M 0SU-CG12对LC3-I转变成LC3-II的时间依赖性作用，一种自噬标志物，然而其可通过自噬抑制剂3-MA(I mM)得到阻断。LNCaP细胞用GFP-LC3质粒瞬态转染，随后暴露于M OSU-CG12单独或在3-MA存在下指明的时间间隔。GFP免疫印迹得到实施以检测LC3-II形成。右图提供5u M OSU-CG12单独或在I mM 3-甲基腺嘌呤(3-MA)存在下对GFP-LC3荧光的模式作用的显微分析图像。在CG12组中明显的点状模式(punctuate pattern)表明其积聚进入到自噬泡。在6孔板上培养的表达GFP-LC3的LNCaP细胞经受不同药物处理36小时，然后经荧光显微法检测。免疫印迹和显微镜捡数据为三个实验的代表，所有实验具有类似的结果。图5提供免疫印迹显示能量限制和TZDs共同承担促进P -TrCP介导的糖酵解的能力。如所指明的那样把LNCaP和MCF-7细胞暴露于曲格列酮(TG)、STG28、环格列酮(CG)、0SU-CG12 (CG12)，两种能量限制拟似剂(2-脱氧葡萄糖(2-DG)和白藜芦醇)和不含葡萄糖的培养基(葡萄糖饥饿)，并且对P-TrCP介导的糖酵解的组分的作用经蛋白质印迹来评价。这些端点包括P -TrCP, ^ -TrCP底物和Spl靶基因产物的表达以及参与促进P -TrCP底物识别的激酶磷酸化状态。免疫印迹为三个独立实验的代表。图6提供免疫印迹，其显示TZDs共同承担LNCaP细胞内2_脱氧葡萄糖(2_DG)和葡萄糖饥饿疗法引发与能量限制相关的细胞反应的能力。部分A)显示IOy M OSU-CG12(CG12)相对于10 mM 2-DG和葡萄糖饥饿对各种与能量限制(Sirtl表达的诱导，p53去乙酰化，AMP激活蛋白激酶(AMPK)磷酸化和内质网(ER)应激指示剂GRP78的表达和与P-TrCP依赖的糖酵解_TrCP、Spl和细胞周期蛋白Dl的表达水平)有关的各种标志物的时间依赖作用的蛋白质印迹分析。部分B)显示如在A中那样在用CG12和2-DG处理的LNCaP细胞中经RT-PCR的Sirtl、GRP78、^-TrCP, Spl和细胞周期蛋白Dl的mRNA表达水平的平行分析。部分C)显示TZDs在不同剂量下，相对于2-DG、白藜芦醇和葡萄糖饥饿对LNCaP细胞内ER应激和AMPK/mT0R/p70S6K信号转导作用的蛋白质印迹分析。ER应激的指示剂包括IREl a的表达水平，一种ER应激传感器，GRP78和GADD153。免疫印迹和PCR结果为三个独立实验的代表。图7提供曲线图和免疫印迹，其显示TZDs通过阻断葡萄糖摄取靶向于能量代谢。部分A)显示0SU-CG12 (CG12，左小图)和白藜芦醇(中间图)对[3H]_2_脱氧葡萄糖([3H]-2DG)摄取的剂量和时间依赖作用。数据表示为平均值±95%置信区间(误差棒) (n=3)。右小图，0SU-CG12和白藜芦醇的球棒结构(ball-and-stile)。部分B)显示10 y MOSU-CG12相对于10 mM 2-DG对在LNCaP细胞中糖酵解率(左小图)和NADH (中间图)和乳酸(右小图)的细胞内水平的时间依赖作用。数据表示为平均值±95%置信区间(误差棒)(n=3)。部分C)证实补充葡萄糖在LNCaP细胞内对0SU-CG12的抗增殖活性提供剂量依赖的保护作用。在所指明浓度的葡萄糖存在下培养的细胞生存力在药物处理72小时后经MTT试验测定。数据表示为平均值±95%置信区间(误差棒)(n=6)。在部分D)中左小图证实补充葡萄糖(20 mg/ml)逆转Sirtl的瞬态诱导和随之而来的24小时时间期间内p53经0SU-CG12在LNCaP细胞中的去乙酰化。D)的右小图证实补充葡萄糖抑制PARP裂解，AMPK激活和GRP78、GADD153和P -TrCP在用不同剂量0SU-CG12处理的LNCaP细胞中表达的诱导。免疫印迹结果为三个独立实验的代表。图8提供曲线图和免疫印迹，其显示P -TrCP表达对能量限制拟似剂的抗增殖作用是重要的并且通过Sirtl介导的P-TrCP蛋白稳定化向上调节。部分A)显示野生型(WT)或显性阴性(AF)形式的P-TrCP异位表达对通过0SU-CG12(CG12，左小图)和2-脱氧葡萄糖(2-DG，左小图)的LNCaP细胞生存力的剂量依赖性抑制的作用。细胞生存力通过MTT试验测定。数据表示为平均值±95%置信区间(误差棒)(n=6)。pCMV，用空载体转染的细胞。部分B)显示WT (WT- ^ -TrCP-Myc)和显性阴性(AF- ^ -TrCP-Myc) ^ -TrCP的异位表达对0SU-CG12 (5 u M)和2-DG (5 mM)促进LNCaP细胞中PARP裂解的能力的作用。部分C)显示在0SU-CG12处理的LNCaP细胞内Sirtl向上调节会升高P -TrCP表达水平。左小图，血凝素标记的Sirtl异位表达(HA-Sirtl)以剂量依赖方式增加P-TrCP表达，伴随靶蛋白细胞周期蛋白Dl和Spl表达相应减少。右小图，显性阴性抑制Sirtl阻断0SU-CG12介导的P-TrCP诱导和PARP裂解。部分D)提供Sirtl经蛋白质稳定增加P-TrCP表达的证据。左小图，Sirtl去乙酰化酶活性对P-TrCP蛋白经0SU-CG12的稳定是必要的。通过烟酰胺或splitomicin的Sirtl去乙酰化酶活性的药理抑制逆转0SU-CG12提高P -TrCP蛋白质稳定性的能力。LNCaP细胞用5 u M OSU-CG12单独或在50 mM烟酰胺或200 u Msplitomicin存在下预处理12小时，随后用100 u g/mL放线菌酮处理另外12或24小时。右小图，RT-PCR分析显示如以上所描述的那样处理的LNCaP细胞中P-TrCP mRNA水平保持不变。所有免疫印迹和PCR结果为三个独立实验的代表。图9提供免疫印迹，其显示显性阴性或药理抑制AMPK阻断0SU-CG12介导的自噬，但对细胞凋亡或ER应激没有影响。左小图，野生型(WT)的异位表达相对于K45R激酶死亡、显性阴性(DN)形式的 AMPK 对 0SU-CG12 (5 u M)调节 p-mT0R、p-p70S6K、^ -TrCP 和GADD153的表达水平，GFP-LC3的转变和在表达GFP-LC3的LNCaP细胞中PARP裂解的能力的作用。右小图，化合物C，一种AMPK药理抑制剂的作用平行分析。


图10提供免疫印迹和显微图像，其显示shRNA介导的TSC2的急速下调保护细胞免于0SU-CG12诱导的自噬。左小图，shRNA介导的TSC2急速下调的有效性经TSC2和p-AMPK在0SU-CG12处理细胞中表达的蛋白质印迹分析确认。右小图，用混杂的或TSC2 shRNA转染的表达GFP-LC3的LNCaP细胞被暴露于DMSO或5 y M OSU-CG12 36小时，，然后经荧光显微法检测以评价GFP-LC3荧光的模式。
图11提供曲线图和免疫印迹图，其显示0SU-CG12通过靶向于AMPK/TSC2/mT0R/ P70S6K信号转导途径诱导自噬。部分A)显示显性阴性抑制AMPK部分保护LNCaP细胞免于0SU-CG12介导的抗增殖作用。数据表示为平均值±95%置信区间(误差棒)(n = 6)。部分B)显示siRNA介导的GADD153 (DDIT3)急速下调不影响PARP裂解、P -TrCP诱导或AMPK激活。所有免疫印迹和荧光显微镜捡数据为三个独立实验的代表。
图12，部分(A)提供基于苯亚甲基-噻唑烷二酮的集中化合物库的两层次筛选(two-tiered screening)以鉴定先导AMPK激活剂的示意图。部分(B)提供系列A-C化合物的合成通法。反应条件系列 A a, K2C03/Rl-Br ；b, LAH，THF ；c, (CF3SO2)2O,批啶，CH2Cl2 ；d，K2CO3, DMF ；e, AcOH,哌啶，乙醇 / 回流。系列 B a, AcOH,哌啶，乙醇，回流；b, K2CO3, DMF。系列 C a, K2CO3, DMF ；b,吡啶，CH2Cl2 ；c, LAH，干燥 THF，0°C ；d, MnO2, CH2Cl2,回流；d，哌啶，EtOH，回流；e，AcOH,哌唆，乙醇/回流。
图13提供基于噻唑烷二酮的集中化合物库的化合物1-60的化学结构。
图14，部分(A)提供AMPK作为mTOR-和IL_6/IL_6受体介导的信号转导途径的负调节剂作用的示意图。部分(B)提供环格列酮和62，每一种在IOy M下，对在处理6小时后于含有10% FBS的培养基中相对于LPS处理的和未处理的(Ctr) THP-I巨噬细胞在LPS处理的THP-I细胞内AMPK、p70S6K和Stat3的磷酸化作用的蛋白质印迹分析。(C)左小图，环格列酮(CG)和62在所指明的浓度下于处理6小时后在含有10% FBS的培养基中对THP-I巨噬细胞中LPS刺激的IL-6产生的抑制作用的ELISA分析。柱状图，平均值，棒状图，SD (N=3)。右小图，经MTT试验(N = 6)对THP-I细胞的生存力的相应作用。
图15,部分(A)提供化合物1-60相对于环格列酮(CG),每一种在IOii M下,对处理6小时后在含由10% FBS的培养基中相对于仅用LPS处理的(L)和未处理的(Ctr)THP-I巨噬细胞用LPS处理的THP-I细胞中AMPK、p70S6K和Stat3的磷酸化作用的影响蛋白质印迹分析。部分(B)上图提供化合物1-60相对于环格列酮(CG)，每一种在10 y M下，对处理6小时后在含有10% FBS的培养基中的THP-I巨噬细胞中LPS刺激的IL-6的产生具有抑制作用的ELISA分析。柱状图，平均值，棒状图，SD (N=3)。在下面的小图中，显示了经MTT试验(N = 6)对THP-I细胞的活力的相应作用。
图16，部分(A)显示化合物8、12、31、44、49、53和54相对于环格列酮(CG)相比较，每一种在IOii M下，对分化的THP-I细胞中PPARy激活的作用。THP-I细胞用PPRE-x3-TK-Luc报告基因载体瞬时转染，，然后暴露于在10% FBS补充的RPMI 1640培养基中的各种药物或DMSO媒介物48小时。柱状图，平均值，棒状图，SD (N=3)。部分(B)上图提供化合物8、12、31、44、49、53和54相对于环格列酮(CG)，每一种在I y M下，对处理6小时后在含有10% FBS的培养基中的THP-I巨噬细胞中LPS刺激的IL-6产生的作用的ELISA分析。柱状图，平均值，棒状图，SD (N=3)。下图显示经MTT试验(N = 6)对THP-I细胞生存力的相应作用。
图17，部分(A)提供化合物53对处理6小时后在含有10% FBS的培养基中的THP-I巨噬细胞中LPS刺激的IL-6产生的剂量依赖作用的ELISA分析。柱状图，平均值，棒状图，SD (N=3)。部分(B)显示化合物53对处理6小时后在含有10% FBS的培养基中的LPS处理的THP-I巨噬细胞中的IL-6的mRNA水平的剂量依赖性抑制作用的RT-PCR分析的结果。柱状图，平均值，棒状图，SD (N=3)。部分(C)显示化合物53相对于0. 5 mM AICAR对处理6小时后在含有10% FBS的培养基中LPS处理的THP-I巨噬细胞中AMPK和p70S6K的磷酸化水平的剂量依赖性作用的蛋白质印迹分析。
图18，部分(A)提供在用显性阴性(DN)-AMPK质粒或pCMV空载体瞬时转染的THP-I巨噬细胞中AMPK表达水平的蛋白质印迹分析。部分(B)显示DN-AMPK的异位表达对用或未用10 ii M化合物53共处理的THP-I巨噬细胞中LPS刺激的IL-6产生的保护作用。柱状图，平均值，棒状图，SD (N=3)。部分(C)显示化合物53对在含有10% FBS的培养基中的C-26腺癌细胞中AMPK和p70S6K的磷酸化水平的剂量-和时间-依赖性作用的蛋白质印迹分析。部分(D)显示化合物53相对于PTl和A-769662的表面静电势和结构。
图19提供显示化合物53和54在不同癌细胞系中的细胞生存力的图表。发明详述
本发明提供在受试者中限制能量代谢的方法，方法包括给予所述受试者包含噻唑烷二酮衍生物的药用组合物。具体地讲，本发明提供在受试者中抑制糖酵解的方法，方法包括给予所述受试者包含式I、式II、式III或式IV的噻唑烷二酮衍生物的药用组合物。本发明提供许多先前尚未用于限制能量代谢的噻唑烷二酮衍生物，其中许多呈现比先有技术的能量限制拟似剂更高的效力。另一方面，本发明提供通过传递有效量的噻唑烷二酮衍生物激活一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)的方法。具体地讲，本发明提供通过提供有效量的式I、式III或式IV的噻唑烷二酮衍生物激活AMPK的方法。由于激活AMPK导致抑制IL-6，这些噻唑烷二酮衍生物也可用于通过给予所述受试者包含式I、III或IV的噻唑烷二酮衍生物的药用组合物在受试者中抑制IL-6表达的方法。定义
如本文提出的术语仅用于描述实施方案并且不应在总体上构成对本发明的限制。当用于描述本发明和所附权利要求书时，单数形式“一”、“一”和“该”包括其复数形式，除非有关此类的上下文显示不当。本文使用的术语“有机基团”用于指被分类为脂族基团、环状基团或脂族与环状基 团的组合(例如烷芳基和芳烷基)的烃基。在本发明的上下文中，用于本发明噻唑烷二酮的合适有机基团为不干扰噻唑烷二酮能量限制活性的那些有机基团。在本发明的上下文中，术语“脂族基团”意指饱和或不饱和的线形或分支烃基。该术语用于包括例如烷基、烯基和链炔基。本文使用的术语“烷基”、“烯基”和前缀“烷”包括直链基团和分支链基团。除非另外规定，这些基团含有1-20个碳原子，烯基含有2-20个碳原子。在一些实施方案中，这些基团具有总共至多10个碳原子、至多8个碳原子、至多6个碳原子或至多4个碳原子。包括4或更少碳原子的烷基也可称为低级烷基。烷基也可根据它们包括的碳原子数称谓(即C1-C4烷基为包括1-4个碳原子的烷基)。本文使用的环烷基指形成环结构的烷基(即烷基、烯基或链炔基)。环状基团可为单环或多环并且优选地具有3-10个环碳原子。环烷基可经包括4或更少碳原子的烷基连接于主结构。示例性的环状基团包括环丙基、环丙基甲基、环戊基、环己基、金刚烷基及取代和未取代的冰片基、降冰片基和降冰片烯基。除非另外规定，“亚烷基(alkylene) ”和“亚烯基(alkenylene) ”为以上定义的“烷 基”和“烯基”基团的二价形式。术语“亚烷基(alkylenyl)”和“亚烯基(alkenylenyl) ”为在“亚烷基”和“亚烯基”分别被取代时使用。例如，芳基亚烷基包含芳基被连接于其上的亚烧基部分。术语“卤代烷基”包括用一个或更多个卤素原子取代的基团，包括全氟化基团。这对于其包括前缀“卤代”的其它基团也是真实的。合适卤代烷基的实例为氯甲基、三氟甲基等。卤代部分包括氯、溴、氟和碘。本文使用的术语“芳基”包括碳环芳环或环系统。芳基的实例包括苯基、萘基、联苯基、芴基和茚基。芳基可为取代或未取代的。除非另外指定，术语“杂原子”指原子O、S或N。术语“杂芳基”包括含有至少一个环杂原子(例如0、S、N)的芳环或环系统。在一些实施方案中，术语“杂芳基”包括含有2-12个碳原子、1-3个环、1-4个杂原子且0、S和/或N作为杂原子的环或环系统。合适的杂芳基包括呋喃基、噻吩基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、三唑基、吡咯基、四唑基、咪唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、咔唑基、苯并噁唑基、嘧啶基、苯并咪唑基、喹喔啉基、苯并噻唑基、萘啶基、异噁唑基、异噻唑基、嘌呤基、喹唑啉基、吡嗪基、I -氧化吡啶基、哒嗪基、三嗪基、四嗪基、噁二唑基、噻二唑基等。术语“亚芳基(arylene)”和“亚杂芳基”为以上定义的“芳基”和“杂芳基”基团的二价形式。术语“亚芳基(arylenyl)”和“亚杂芳基”为在“亚芳基”和“亚杂芳基”分别被取代时使用。例如，烷基亚芳基包含烷基被连接于其上的亚芳基部分。当基团在本文所描述的任何结构式或流程中存在多于一次时，每一个基团(或取代基)被独立地选择，无论明确指出与否。例如，对于式-C(O)-NR2，每一个R基团被独立地选择。作为简化，遍及该申请使用的某些术语的讨论和详述的手段，术语“基团”和“部分”用于在其允许取代或其可被取代的化学种类与其不允许如此取代或可不被如此取代的那些化学种类之间进行区别。因此，当术语“基团”用于描述化学取代基时，所描述的化学物质包括未取代的基团和具有非过氧化的0、N、S、Si或F原子的基团，例如在链以及羰基或其它常规取代基上。当术语“部分”用于描述化学化合物或取代基时，仅有未取代的化学物质打算包括在内。例如，短语“烷基”打算不仅包括纯的开链饱和烃烷基取代基例如甲基、乙基、丙基、叔丁基等，而且还包括具有本领域已知的进一步的取代基例如轻基、烧氧基、烧基横酸基、齒原子、氰1基、硝基、氣基、竣基等的烧基取代基。因此，“烧基”包括酿基、齒代烧基、硝基烧基、竣基烧基、轻基烧基、氰1基烧基等。另一方面，短语“烧基部分”限于仅包括纯的开链饱和经烧基取代基例如甲基、乙基、丙基、叔丁基等。本发明包括本文所描述以任何其药学上可接受的盐形式，包括异构体(例如非对映体和对映体)、互变异构体、盐、溶剂合物、多晶型、前药等存在的化合物。具体地讲，如果化合物为光学活性的，本发明特别地包括化合物的对映体中的每一种以及对映体的外消旋混合物。应该理解术语“化合物”包括任何或所有这样的形式，无论明确指出与否(尽管有时“盐”被明确指出)。本文使用的术语噻唑烷二酮衍生物为由如本文所提供的结构式描述的本发明噻唑烷二酮化合物的速记法；并且不打算包括可由本领域技术人员表征为噻唑烷二酮的所有 可能的化合物。本文使用的“治疗”、“医治”和“处理”等指提供给处于病症或疾病例如癌症风险中或罹患这些病症的受试者益处的任何作用，包括通过减轻或抑制至少一种症状、延迟疾病进展、预防或延迟疾病发作等改善病症。受试者可由于暴露于致癌剂、对障碍包括糖酵解有遗传倾向等处于风险中。本文使用的“药学上可接受的”意指化合物或组合物从疾病严重性和治疗的必要性来看适合于给予受试者本文所描述方法，而没有过度有害的副作用。术语“治疗有效的”和“药理有效的”打算使每一种药物的量具有将实现降低疾病严重性同时避免不良副作用例如通常与替代疗法相关的那些副作用目标的资格。治疗有效量可以一个或更多个剂量给药。另一方面，有效量为足以提供显著化学效应的量，例如用可检测量激活AMPK。使用噻唑烷二酮衍生物限制能量代谢
本发明提供通过给予所述受试者一种或多种本发明的噻唑烷二酮衍生物在受试者中限制能量代谢的方法。具体地讲，本发明提供通过给予所述受试者包含一种或多种噻唑烷二酮衍生物的药用组合物在受试者中抑制糖酵解方法。本文定义的受试者为动物，优选地为哺乳动物例如驯养的家畜(例如，牛、马、猪)或宠物(例如狗、猫)。更优选地，受试者为人。受试者也可为需要能量限制的受试者。需要能量限制的受试者为由于通过能量限制引起的各种生化效应而得益于能量限制的受试者。例如，需要减少代谢应激的受试者可为需要能量限制的受试者。由能量限制所引起的另外作用在本文中描述。需要能量限制的受试者也可为对于患有癌症具有升高的风险或已经被诊断为患有癌症的受试者、尚未诊断为患有癌症的受试者、患有糖尿病的受试者、患有代谢紊乱的受试者或者希望延长寿命和/或降低代谢水平的受试者。限制能量代谢指的是可例如通过膳食能量限制例如限制热量摄入(即热量限制)产生的作用。膳食能量限制导致减少葡萄糖可用性，导致葡萄糖代谢和糖酵解减少。糖酵解为一系列代谢过程，通过此过程一个分子的葡萄糖分解代谢成两分子的丙酮酸以提供两个ATP分子的净收益。在正常细胞中，糖酵解提供细胞能量产生的最初步骤并且为三羧酸循环的前体，其在线粒体中进行并产生基本上更大量的ATP每葡萄糖分子。限制能量代谢也可通过给予称为能量限制拟似剂的合适化合物来模拟。例如，
2-脱氧葡萄糖可由于被己糖激酶磷酸化限制能量代谢，其然后被限制在磷酸化状态，该状态聚集并阻止进一步的葡萄糖代谢。本发明人实施并在本文中描述的实验证实本发明的噻唑烷二酮衍生物能够引起与饥饿相关的细胞反应例如沉默信息调控基因I (regulator)(Sirtl)基因诱导、AMPK激活和内质网应激。因为噻唑烷二酮衍生物能够引起与饥饿相关的细胞反应，和由于本文提供的其它原因，噻唑烷二酮衍生物为有效的能量限制拟似剂(ERMs)。抑制糖酵解导致限制能量代谢。糖酵解为使葡萄糖转变成丙酮酸，导致高能量化合物、ATP和NADH的释放的代谢途径。在糖酵解正常水平上任何数量的减少代表关于本文描述的本发明能量代谢的限制。然而，本发明的不同实施方案可导致不同程度的抑制作用。例如，给予噻唑烷二酮衍生物可导致糖酵解的10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或完全抑制，或者在该数目范围内任何其它显著水平的抑制作用。所达到的抑制作用水平可随所使用噻唑烷二酮衍生物的剂量变化，并且因此为剂量依赖的。尽管可获得高水平的糖酵解抑制作用，应该注意的是更温和水平，即50%抑制率或更少通常为临床更加有用的，因为这避免高水平糖酵解抑制作用的潜在毒性。
尽管糖酵解的抑制作用可使用本领域技术人员已知的各种不同化合物和作用进行测量，通常用于测量糖酵解减少的标志物的实例为细胞葡萄糖摄取的速率减少，NADH和乳酸的形成减少及自噬的增加，其可通过自噬体形成的相应增加来鉴定。本发明的噻唑烷二酮衍生物的这些和其它作用在图I中用图表显示。本发明的噻唑烷二酮衍生物扰乱葡萄糖稳态，导致标志细胞反应，包括瞬态Sirtl诱导、AMPK激活和ER应激。这些反应中的每一种在介导TZDs的抗肿瘤作用中起作用。本发明人的数据表明在Sirtl诱导与P-TrCP蛋白积累之间的机械联系，通过一系列凋亡调节蛋白的蛋白酶体降解和转录抑制最终导致细胞凋亡。AMPK激活导致经常规AMPK-TSC2-mT0R-p70S6K途径自噬。ER应激信号引发传感蛋白例如GRP78、GADD153和IREla向上调节，它也可在细胞凋亡诱导中起作用。受试者体内糖酵解的抑制作用可具有一种或多种有益作用。例如，受试者体内糖酵解的抑制作用可提供治疗癌症的方法。糖酵解的抑制作用也可用于在受试者延长寿命(即提供生命延续作用)，包括尚未诊断出患有癌症的受试者。也可进行糖酵解的抑制作用以提供本领域技术人员已知的任何其它作用，例如减少胰岛素水平，治疗代谢紊乱或刺激自噬。各种噻唑烷二酮衍生物抑制癌症生长的能力在以下表I中得到证实。如经
3-(4，5- 二甲基噻唑-2-基)-2，5- 二苯基四唑鎗溴化物)(MTT)试验测量的那样，化合物被试验其减少LNCaP前列腺癌细胞生存力的能力。测试的化合物显示比已知能量限制拟似剂例如2-DG或白藜芦醇显著更高的活性(即更低的IC5tl)。许多噻唑烷二酮衍生物抑制癌细胞增殖的IC5tl值处于低y M范围内，它们分别比白藜芦醇和2-脱氧葡萄糖更有效至少一至三个数量级。表I.噻唑烷二酮衍生物的抗肿瘤效力
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0 __ .........—5j~~j 3-74,2404.54.S如本文指出的那样，恶性细胞相对于正常细胞呈现显著升高的糖酵解活性，称为Warburg效应的作用。几种机制已经提示有助于该作用，包括线粒体缺陷，适合于癌组织中的缺氧环境，致瘤信号和某些代谢酶的异常表达。因为癌细胞使用线粒体呼吸机械产生ATP的能力减少，癌细胞被迫增大其糖酵解活性以维持足够的ATP产生用于持续生长。该代谢适应使癌细胞依赖于糖酵解途径并易受其抑制作用的侵害。另外，因为该代谢变化在癌细胞中几乎是无所不在的，靶向于糖酵解途径代表用于治疗广泛种类的不同类型癌症的有用方法。使用糖酵解抑制作用用于抗癌治疗的进一步讨论，参见Pelicano等，Oncogene,25，第 4633-4646 页(2006)。当糖酵解受到抑制时，正常细胞中完整的线粒体使它们能够使用替代能源例如脂肪酸和氨基酸以产生代谢中间体，其引导至三羧酸循环用于通过呼吸产生ATP。结果，具有 正常线粒体的细胞相对于癌细胞对抑制糖酵解的药物不太敏感，提供治疗选择性。因此，本发明由于噻唑烷二酮衍生物的选择性抑制癌细胞中糖酵解的能力，提供使用它们治疗癌症的方法。癌症治疗的有效性可通过在对给予噻唑烷二酮衍生物有反应的受试者中评价肿瘤负荷的减少或肿瘤生长的降低来测量。肿瘤负荷减少可代表质量直接降低，或者其可根据肿瘤生长延迟来测量，其通过自所治疗肿瘤生长至一定体积所需要的时间减去对照组肿瘤生长至相同体积的平均时间计算。噻唑烷二酮衍生物可用于治疗和预防癌症两者。本文使用的术语“预防”包括在处于风险的个体中或者完全防止临床上明显不需要的细胞增殖发作或者防止不需要的快速细胞增殖的临床前明显阶段的发作。也打算由该定义包括的是预防恶性细胞的转移或者阻止或扭转恶性细胞的进展。这包括预防性治疗具有发展前癌和癌症的升高风险的那些预防。风险升高代表高于受试者患上其可例如通过家族史或检测引起易于发生癌症的基因测定的癌症的平均风险。癌细胞含有已导致细胞相对无限制生长的遗传损伤。存在于癌细胞中的遗传损伤在癌细胞系的后代作为可遗传特征被保持。用本发明方法治疗的癌症可为本领域技术人员已知或在本文得到描述的任何形式的癌症。表现为实体瘤和而是替代形成如在白血病通常所见的非实体瘤的癌症两者的癌症可得到治疗。基于所有类型癌症中有氧糖酵解增加的普遍性，本发明提供用于治疗受到各种不同类型癌症包括癌、肉瘤和淋巴瘤困扰的受试者的方法。本发明人已经证实噻唑烷二酮衍生物可用于抑制多种不同类型癌细胞的生长。例如，已进行实验证实噻唑烷二酮衍生物用于抑制前列腺癌、乳腺癌、白血病、非小细胞肺癌、结肠癌、CNS癌、黑素瘤、卵巢癌和肾癌细胞生长的有效性。这些实验在本文后面提供的实施例2中描述。用噻唑烷二酮衍生物抑制糖酵解也可用于治疗II型糖尿病或代谢综合征。本文定义的代谢综合征为可导致发生心脏病或糖尿病风险增大的疾病组合，并且其特征在于多种选自以下的症状如在2型糖尿病或空腹血糖受损观察到的空腹高血糖、糖耐量受损或胰岛素抗性；高血压、伴有主要围绕腰部的脂肪沉积的中央肥胖、HDL胆固醇减少和甘油三酯升高。通过传递给有需要的受试者药用组合物中治疗有效量的噻唑烷二酮衍生物，噻唑烷二酮衍生物可用于治疗或预防II型糖尿病或代谢综合征。由于它们影响本文描述的糖酵解，并且也由于其对AMPK的作用，噻唑烷二酮衍生物为有效的。已知AMPK系统作为真核细胞内细胞能量状态的传感器起作用，并且对代谢控制和胰岛素信号转导具有重要作用。Towler 等，Circ Res, 100，328-341 (2007)。通过给予噻唑烷二酮衍生物在受试者提供能量代谢限制的另一个潜在益处是其可延长所治疗受试者的寿命，从而提供生命延续(prolongevity)作用。实验室大鼠和小鼠体内重复性的长寿研究已经证实，能量限制可显著增加寿命和延迟年龄相关疾病的发病。类似的作用已在许多无脊椎动物种类观察到，并且在灵长类动物的最近研究已显示能量限制产生与在啮齿类观察到的那些相平行的生理作用。评价能量限制拟似剂对寿命作用的研究也得到实施。参见 Ingram 等，Ann N Y Acad Sci. , 1019 第 412-23 页(2004)。
对能量限制拟似剂的生命延续作用的几种机制已被提出，包括氧化应激减少，炎症控制和防止大分子的糖基化。具体地讲，人们注意到抑制糖酵解可刺激自噬，后者可导致清除释放显著量的活性氧种类的细胞器。已进一步假设能量限制的生命延续作用可为将有机体的能量重定向于针对生存而不是低的能量可用率期间再生的进化上保守的应激反应。生命延续作用为当与未治疗的受试者比较增加用治疗有效剂量的能量限制拟似剂治疗的受试者平均寿命的作用。尽管生命延续作用也可在被诊断患有疾病例如癌症的受试者中实现，生命延续作用可在健康受试者中实现，因为所述作用不依赖于疾病的去除。因为生命延续作用作为预防慢性问题例如氧化应激或炎症的结果被观察到，为观察到显著的生命延续作用受试者必须治疗延长的时间段。基于小鼠中观察到的结果，生命延续作用可提供寿命增加 10%、20%、30% 或 40%。Mattson, M. P. , Annu. Rev. Nutr. 25:第 237-60 页(2005)。生命延续作用可在已诊断为健康的受试者或尚未诊断为患有疾病或紊乱的受试者中提供。例如，生命延续作用可在已诊断为不患有癌症的受试者或尚未诊断患有癌症的受试者中提供。用于诊断癌症的方法为本领域技术人员熟知的。作为他们努力研究多种噻唑烷二酮衍生物活性的一部分，本发明人实施内部基于噻唑烷二酮的集中化合物库的筛选，以鉴定具有介导不依赖过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR) y激活一磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)和抑制白细胞介素(IL)-6产生能力的化合物。与脂多糖(LPS)刺激的THP-I人巨噬细胞内激活状态的AMPK和哺乳动物雷帕霉素靶标的同系物(即AMPK和p70核糖体蛋白S6激酶分别磷酸化)，和IL-6/IL-6受体信号转导(即IL-6产生和信号转导蛋白与转录激活因子3分别磷酸化)有关的基于细胞的试验被用于筛选该化合物库，这导致鉴定各种有活性的噻唑烷二酮衍生物，伴随化合物53(N- {4- [3- (I-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基-甲基]-苯基} -4-硝基-3-三氟甲基-苯磺酰胺)被鉴定为先导化合物。在本文的实施例中描述的证据表明抑制IL-6产生可归因于AMPK激活。噻唑烷二酮衍生物介导的AMPK激活也在C-26结肠腺癌细胞中得到证实，表明该作用不是细胞系特异性的。AMPK代表用于治疗II型糖尿病、代谢综合征和癌症的治疗性相关靶标，进一步支持使用噻唑烷二酮衍生物作为能量限制拟似剂。因此，本发明的另一方面提供通过提供有效量的噻唑烷二酮衍生物激活一磷酸腺苷活化蛋白激酶的方法。另外，本发明的另一方面提供通过给予所述受试者包含一种或多种本文描述的作为AMPK激活剂有效的噻唑烷二酮衍生物的药用组合物在受试者中抑制IL-6表达的方法。噻唑烷二酮衍生物
本发明的噻唑烷二酮衍生物包括式I、II、III和IV的化合物。例如，噻唑烷二酮衍生物可为具有以下式I的化合物
%I
其中R1为氢或羟基；其中R2和R3选自氢、羟基、卤代、氨基、甲基、甲氧基、乙基、乙氧基、硝基、氨基磺酰基、三氟甲基磺酰基和卤代烷基部分；并且其中R4选自烷基、烯基、环烷基和芳基。在本发明的具体实施方案中，R1为羟基。在其它的实施方案中，R2为三氟甲基，而在另外的其它实施方案中，R3为氢。 在其它的实施方案中，式I的噻唑烷二酮衍生物可为以下所显示的任何一种化合物。例如，噻唑烷二酮衍生物可为任何一种以下化合物
(Z)-5-(4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-3-(I-甲基-环己基甲基)-噻唑烷-2，4-二酮(0SU-CG12)
O
(Z) -3-(2-乙基-丁基)-5-(4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮(0SU-CG5)
O
O (
(Z) -3- (2-乙基-戊基)-5- (4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮 (Z) -5- (4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-3- (4-异丙基-苄基)-噻唑烷-2，4- 二酮
权利要求
1.在受试者中抑制糖酵解的方法，该方法包括给予所述受试者包含以下式I化合物的药用组合物
2.权利要求I的方法，其中R1为羟基。
3.权利要求2的方法，其中R2为三氟甲基。
4.权利要求3的方法，其中R3为氢。
5.权利要求4的方法，其中化合物为(Ζ)-5-(4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-3-(I-甲基-环己基甲基)_噻唑烷-2，4-二酮或(Z)-3-(2-乙基-丁基)-5-(4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮。
6.权利要求3的方法，其中R3为羟基。
7.权利要求6的方法，其中化合物选自(Z)-5-(3，4-二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-3- (I-甲基-环己基甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -5- (3，4- 二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-3- (2-乙基-丁基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -5- (3，4- 二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-3- (2-乙基-戊基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -5- (3，4- 二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-3- (4-异丙基-苄基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -3- (4-叔丁基-苄基)-5- (3，4- 二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z)-5-(3，4- 二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-3- (2-三氟甲基-苄基)-噻唑烷_2，4- 二酮、(Z) -3-环己基甲基-5- (3，4- 二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -3-苄基-5- (3，4- 二羟基_5_三氟甲基-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -3-环庚基甲基-5- (3，4- 二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4-二酮和(Z)-5-(3，4-二羟基-5-三氟甲基-苯亚甲基)-3-异丁基-噻唑烷_2，4-二酮。
8.权利要求I的方法，其中R1为氢且R2和R3为卤代部分。
9.权利要求8的方法，其中化合物选自(Z)-5-(3，5-二溴-苯亚甲基)-3-(I-甲基-环己基甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-3- (2-乙基-丁基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-3- (2-乙基-戊基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-3- (4-异丙基-苄基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -3- (4-叔丁基-苄基)-5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-3- (2-三氟甲基-苄基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -3-环己基甲基-5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -3-苄基-5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮、(Z) -3-环庚基甲基-5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮和(Z) -5- (3，5- 二溴-苯亚甲基)-3-异丁基-噻唑烷-2，4- 二酮。
10.权利要求I的方法，其中受试者对于患有癌症具有升高的风险或已经被诊断为患有癌症。
11.用于在受试者中抑制糖酵解的方法，该方法包括给予所述受试者包含以下式II化合物的药用组合物
12.权利要求11的方法，其中R1选自
13.权利要求11的方法，其中R2选自氢、溴、氯、甲基、甲氧基、乙氧基和硝基；和&选自氢、甲基、甲氧基和溴。
14.权利要求11的方法，其中化合物具有以下结构
15.权利要求11的方法，其中受试者对于患有癌症具有升高的风险或已经被诊断为患有癌症。
16.在受试者中抑制糖酵解的方法，该方法包括给予所述受试者包含以下式III化合物的药用组合物
17.权利要求16的方法，其中化合物选自5-[3_溴-4-(6-乙氧基_2，5，7，8-四甲基-色烷-2-基甲氧基)-苯亚甲基]-噻唑烷_2，4- 二酮、5-[4- (6- 丁氧基-2，5，7，8-四甲基-色烷-2-基甲氧基)-3-甲氧基-苯亚甲基]-噻唑烷-2，4- 二酮和4-{2-[2-溴-4-(2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基甲基]-2，5，7，8-四甲基-色烧-6-基氧基} - 丁臆。
18.在受试者中抑制糖酵解的方法，该方法包括给予所述受试者包含以下式IV化合物的药用组合物
19.权利要求18的方法，其中化合物选自4-甲氧基-N-{4-[3-(I-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基]-苯基}-苯磺酰胺、N-{4-[3-(I-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基-甲基]-苯基}-4-硝基-3-三氟甲基-苯磺酰胺和N- {4-[3- (I-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基]-苯基} -4-硝基苯磺酰胺。
20.通过提供有效量的噻唑烷二酮衍生物激活一磷酸腺苷活化蛋白激酶的方法，所述噻唑烷二酮衍生物选自式III化合物
21.权利要求20的方法，其中噻唑烷二酮衍生物为以下式III的化合物
22.权利要求21的方法，其中化合物选自5-[3-溴-4-(6-乙氧基-2，5，7，8-四甲基-色烷-2-基甲氧基)_苯亚甲基]-噻唑烷_2，4- 二酮、5-[4-(6_ 丁氧基-2，5，7，8-四甲基-色烷-2-基甲氧基)-3-甲氧基-苯亚甲基]-噻唑烷-2，4- 二酮和4-{2- [2-溴-4- (2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基甲基]_2，5，7，8-四甲基-色烧-6-基氧基} - 丁臆。
23.权利要求20的方法，其中噻唑烷二酮衍生物为以下式I的化合物
24.权利要求23的方法，其中化合物选自5-(4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-3- (I-甲基-环己基甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮和5- (4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-3-丙基-噻唑烷-2，4- 二酮。
25.权利要求20的方法，其中噻唑烷二酮衍生物为以下式III的化合物
26.权利要求25的方法，其中化合物选自4-甲氧基-N-{4-[3-(I-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基]-苯基}-苯磺酰胺、N-{4-[3-(I-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基-甲基]-苯基}-4-硝基-3-三氟甲基-苯磺酰胺和N- {4-[3- (I-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基]-苯基} -4-硝基苯磺酰胺。
27.在受试者中抑制IL-6表达的方法，该方法包括给予所述受试者包含噻唑烷二酮衍生物的药用组合物，所述噻唑烷二酮衍生物选自式III化合物
28.权利要求27的方法，其中化合物选自5-[3_溴-4-(6-乙氧基_2，5，7，8-四甲基-色烷-2-基甲氧基)-苯亚甲基]-噻唑烷_2，4- 二酮、5-[4- (6- 丁氧基-2，5，7，8-四甲基-色烷-2-基甲氧基)-3-甲氧基-苯亚甲基]-噻唑烷-2，4- 二酮和4-{2-[2-溴-4-(2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基)-苯氧基甲基]-2，5，7，8-四甲基-色烧-6-基氧基} - 丁臆。
29.权利要求27的方法，其中化合物选自5-(4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-3- (I-甲基-环己基甲基)-噻唑烷-2，4- 二酮和5- (4-羟基-3-三氟甲基-苯亚甲基)-3-丙基-噻唑烷-2，4- 二酮。
30.权利要求27的方法，其中化合物选自4-甲氧基-N-{4-[3-(I-甲基-环己基甲 基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基]-苯基}-苯磺酰胺、N-{4-[3-(I-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基-甲基]-苯基}-4-硝基-3-三氟甲基-苯磺酰胺和N-{4-[3-(1-甲基-环己基甲基)-2，4- 二氧代-噻唑烷-5-亚基甲基]-苯基}-4-硝基苯磺酰胺。
全文摘要
通过给予受试者包括噻唑烷二酮衍生物的药用组合物在受试者中抑制糖酵解的方法得到描述。噻唑烷二酮衍生物为有效的能量限制拟似剂，并可因此在受试者用于治疗或预防癌症、治疗代谢紊乱或延长受试者的寿命。各种噻唑烷二酮衍生物也适合于激活一磷酸腺苷活化蛋白激酶或抑制IL-6表达。
文档编号A01N43/40GK102638980SQ201080055915
公开日2012年8月15日 申请日期2010年10月11日 优先权日2009年10月9日
发明者C-S.陈, J-H.古 申请人:俄亥俄州州立大学研究基金会