专利名称：耐受除草剂的植物的制作方法
耐受除草剂的植物
相关申请的交叉引用
本申请要求2010年I月7日提交的美国临时申请号61/293，165的权益，该美国临时申请通过提及而以其整体合并入本文。发明领域
本发明涉及耐受除草剂的植物。
发明背景
P450形成一个大的多样化的基因家族,在拟南芥属(Arabidopsis)中鉴定出了大约246种同种型，和在水稻中鉴定出了 372种同种型。P450是血红素蛋白，其将广大范围的底物转化为或多或少具有生物活性的产物。P450在众多代谢途径(包括木质素和色素生物合成，有害化合物的解毒)中是关键性的，并且被认为在陆生植物的进化中是重要的。P450 活性的抑制剂包括I-氨基苯并三唑、四环唑、胡椒基丁醚和灭草环。
苯喃磺草胺(saflufenacil)是喃唳二酮化学类别的除草剂活性成分(A. I.)。苯嘧磺草胺是与丙炔氟草胺和甲磺草胺类似并且容易被植物的叶、根和茎干组织吸收的活性成分。据信苯嘧磺草胺在原卟啉原氧化酶(PPO)处抑制色素生物合成途径，这引起快速损害细胞膜的光动力的毒性化合物的积累，并导致细胞死亡。可以使用这样的除草组合物，其具有苯嘧磺草胺作为唯一 A. I.或者补充有草甘膦以管理广谱的双子叶杂草。已经将包含苯喃磺草胺的除草组合物列为用于在玉米、高粱、小麦、大麦、燕麦、黑麦、黑小麦 (triticale)、大豆和树/坚果/藤蔓农作制度中的植前或苗前处理。含有苯嘧磺草胺的除草组合物在免耕和耕作农作制度这两者中对于阔叶杂草均具有良好的叶和残留活性。但是，在出苗后施用苯嘧磺草胺可以导致迅速且明显的作物损伤。
在本领域中对于这样的植物或植物部分仍然存在着需要，所述植物或植物部分展示出对于包含苯嘧磺草胺的除草组合物的耐受性。
发明简述
在一个方面，本发明提供了植物或植物部分，其包含编码CYP81A或CYP73A多肽的重组多核苷酸，所述CYP81A或CYP73A多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽，所述CYP72A15 多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一些方面，本发明提供了能够萌发成为植物的种子，所述植物在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯B密磺草胺的耐受性。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽,所述 CYP72A15多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一个方面，本发明提供了植物的植物细胞或能够再生出植物的植物细胞，所述植物在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物细胞包含与启动子可操作地连接的所述重组多核苷酸。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽，所述 CYP72A15多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在另一个方面，本发明提供了植物细胞，其包含与在所述细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A或 CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予所述细胞以对于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表达赋予所述细胞以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在其他方面，本发明提供了从植物或植物部分制备的植物产品，所述植物或植物部分在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一些方面，本发明提供了后代或后裔植物，其源自在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸的植物，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述后代或后裔植物在至少一些其细胞中包含与所述启动子可操作地连接的所述重组多核苷酸，所述多肽在所述后代或后裔植物中的表达赋予所述后代或后裔植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15 多肽，所述CYP72A15多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在其他方面，本发明提供了用于在用于植物生长的地点处控制杂草的方法，所述方法包括(a)向所述地点施用包含苯嘧磺草胺的除草剂组合物；和6)在所述地点种植种子，其中所述种子能够产生在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸的植物，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A或 CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一些方面，本发明提供了用于在用于植物生长的地点处控制杂草的方法，所述方法包括向所述地点施用包含苯嘧磺草胺的除草组合物；其中所述地点为(a)包含植物或能够产生所述植物的种子的地点；或者(b)待在进行所述施用后包含所述植物或所述种子的地点；其中所述植物或所述种子在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素 P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些实施方案中， 所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型。
在其他方面，本发明提供了产生具有对于苯嘧磺草胺的耐受性的植物的方法，所述方法包括从植物细胞再生出植物，所述植物细胞用与在所述细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸进行转化，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A 或CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一个方面，本发明提供了产生具有对于苯嘧磺草胺的耐受性的后代植物的方法，所述方法包括使耐受苯嘧磺草胺的第一植物与第二植物杂交以产生耐受苯嘧磺草胺的后代植物，其中所述第一植物和所述后代植物在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予对于苯嘧磺草胺的耐受性。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽，所述CYP72A15多肽的表达赋予对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在更进一步的方面，本发明提供了植物或植物部分，所述植物或植物部分在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的CYP81A或CYP73A多肽，所述多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物或植物部分进一步展示出第二除草剂耐受性状。在一些实施方案中，所述重组多核苷酸编码CYP72A15多肽，所述CYP72A15 多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
附图
简述
图I :呈现了安全剂和苯嘧磺草胺诱导的水稻和玉米P450基因表达的图。将水稻、 小麦和玉米P450基因的表达显示为相对于未喷洒的校验对照而言的倍数变化(经log2变换的)。
图2 :示意性的引导树(guide tree)。将被鉴定用于在玉米、水稻和大豆转基因系统中进行测试的序列进行比对，并制作引导树。命名为0sCYP72Al、0sCYP72A15、NSFl的基因在本文所公开的一种或多种转基因植物系统中赋予对于苯嘧磺草胺的耐受性。用在所有成对序列之间的距离的矩阵上工作的邻接法(Neighbor Joining method (NJ)),使用 AlignX程序来产生所述引导树，并且这些距离与所述序列之间的趋异水平相关。将计算出的关于每个分子的距离值展示在括号中。
图3 :关于用200g ai/ha苯卩密磺草胺+1%MS0处理的独立TO玉米事件的除草剂损伤得分。数字指明了落在特定的损伤得分内的事件的数目。损伤得分为0-9 :0为无损伤， 而9为死亡。未转化的J553是对照。
图4:关于用240g ai/ha Kixor+l%MS0处理的分离性独立Tl玉米事件的除草剂损伤得分。数字指明了落在特定的损伤得分内的植物的数目。损伤得分为0-9 :0为无损伤， 而9为死亡。未转化的J553是对照。
图5 :关于用25g ai/ha苯卩密磺草胺+1%MS0处理的独立TO转基因大豆事件和野生型大豆事件(栽品种Williams 82)的插条的除草剂损伤得分。数字指明了落在特定的损伤得分内的事件的数目。损伤得分为0-9 0为无损伤，而9为死亡。
图6 :来自如所示的那样进行处理的TO大豆事件的插条的除草剂损伤。标明了苯嘧磺草胺的施用率。
图7 :来自RTP3173 (ZmNSFl)转化体的TO大豆插条的苯嘧磺草胺耐受性喷洒测试。在植物下面以g ai/ha标明了苯嘧磺草胺喷洒率。
发明详述
定义
如本文中所使用的，“耐受...的”或“耐受除草剂的”是指在通常在非耐受性(例如，野生型)植物或其部分中引起生长抑制的除草剂量存在下能够生长的植物或其植物部分。通常抑制非耐受性植物生长的除草剂水平是已知的，并且可由本领域技术人员容易地确定。实例包括由制造商推荐用于施用的量。最大比率是通常会抑制非耐受性植物生长的除草剂量的实例。
对于本发明，术语“耐受除草剂的”和“抗除草剂的”可互换使用，并且意在具有相等的含义和相等的范围。类似地，术语“除草剂耐受性”和“除草剂抗性”可互换使用，并且意在具有相等的含义和相等的范围。类似地，术语“耐受...的”和“抗...的”可互换使用，并且意在具有相等的含义和相等的范围。
如本文中关于在其各种实施方案中有用的除草组合物而使用的，诸如PPO抑制剂 (例如，苯嘧磺草胺)、乙酰羟酸合酶(AHAS)抑制剂、乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)抑制剂、 5_烯醇丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)抑制剂、咪唑啉酮类、磺酰脲类等的术语，是指那些在本领域中认可的在农艺学上可接受的除草剂活性成分(A. I.)。类似地，诸如杀真菌剂、杀线虫剂、杀虫剂等的术语，是指其他在本领域中认可的在农艺学上可接受的活性成分。
当关于特定的突变型酶或多肽进行使用时，诸如“耐受除草剂的”和“除草剂耐受性”的术语是指此类酶或多肽在通常会使所述酶或多肽的野生型(非突变型)形式的活性失活或抑制所述酶或多肽的野生型(非突变型)形式的活性的除草剂A. I.量存在下执行其生理学活性的能力。例如，当特别地关于AHAS酶或AHASL多肽进行使用时，它特别地是指耐受AHAS抑制剂的能力。AHAS抑制剂的类别包括，磺酰脲类、咪唑啉酮类、三唑并嘧啶类、磺酰基氨基羰基三唑啉酮类和嘧啶基氧基[硫基]苯甲酸酯类。在其中待使用咪唑啉酮类除草剂的一些实施方案中，所述AHASL优选地为包含至少一个位于氨基酸残基位置122、205、 574或653 (拟南芥(Arabidopsis thaliana)AHASL编号)处的除草剂耐受性突变的AHASL ； 和在其中待使用磺酰脲类除草剂的一些实施方案中，所述AHASL优选地为包含至少一个位于氨基酸残基位置197或574 (拟南芥AHASL编号)处的除草剂耐受性突变的AHASL。
如本文中所使用的，“重组(的)”，当涉及核酸或多肽时，是指此类物质已经由于人工应用重组技术(例如通过多核苷酸限制酶切和连接，通过多核苷酸重叠延伸，或者通过基因组插入或转化)而被改变了。基因序列开放阅读框是重组的，如果该核苷酸序列已从其天然环境中移除并克隆到任何类型的人工核酸载体中。术语“重组(的)”还可以指具有重组物质的生物，例如包含重组核酸的植物可以被认为是重组植物。
术语“转基因植物”是指包含异源多核苷酸的植物。优选地，所述异源多核苷酸稳定地整合在基因组内，从而该多核苷酸传递至相继世代。可将所述异源多核苷酸单独地或者以作为重组表达盒的一部分的方式整合到基因组中。本文中所使用的“转基因(的)”是指其基因型已通过异源核酸的存在而如此改变了的任何细胞、细胞系、愈伤组织、组织、植物部分或植物，包括最初就如此改变了的那些转基因生物或细胞，以及从最初的转基因生物或细胞通过杂交或无性繁殖而产生的那些。在一些实施方案中，“重组(的)”生物是“转基因(的)”生物。如本文中所使用的，术语“转基因(的)”并不意在包括通过常规的植物育种方法(例如，杂交)或者通过天然发生的事件(例如，自体受精、随机杂交-受精、非重组病毒感染、非重组细菌转化、非重组转座或自发突变)而引起的基因组(染色体的或染色体外的) 的改变。
如本文中所使用的，“经诱变的”是指相比于相应野生型生物的遗传物质或DNA的序列而言在其天然遗传物质的生物分子序列中具有改变的生物或其DNA，其中所述在遗传物质中的改变通过人工作用来进行诱导和/或选择。可以用于产生经诱变的生物或DNA的人工作用的实例包括但不限于，如关于除草剂耐受性而举例说明的植物细胞(例如，愈伤组织)的组织培养和用除草剂(例如，苯嘧磺草胺)进行的其选择；用化学诱变剂处理植物细胞，并随后用除草剂进行选择；或者，用X-射线处理植物细胞，并随后用除草剂进行选择。 可以使用本领域中已知的任何方法来诱导突变。诱导突变的方法可以在遗传物质中的随机位置处诱导突变，或者可以在遗传物质中的特定位置处诱导突变(即，可以为定向诱变技术)，例如通过使用基因整形术(genoplasty)技术。
如本文中所使用的，“基因改造生物”(GMO)是其遗传特征包含通过引起转染的人工努力而产生的改变的生物，所述转染导致用来自另一或“源”生物的遗传物质或者用合成的或经修饰的天然遗传物质转化了靶生物；或者是作为保留了所插入的遗传物质的其后裔的生物。源生物可以为不同的生物类型(例如，GMO植物可以包含细菌的遗传物质)，或者来自相同的生物类型(例如，GMO植物可以包含来自另一植物的遗传物质)。如本文中关于植物和其他生物而使用的，“重组的/重组体”、“转基因的”和“GM0”被认为是同义词，并且表明来自不同来源的遗传物质的存在；相反地，“经诱变的”用于指这样的植物或其他生物，或者其DNA，其中没有此类转基因物质存在，但其中天然遗传物质已被突变从而不同于相应野生型生物或DNA。
如本文中所使用的，“野生型”或“相应野生型植物”表示生物或其遗传物质的典型形式，正如它通常出现的那样，其区别于例如经诱变的和/或重组的形式。
如本文中所使用的，“后裔(descendant)”是指任何代的植物。在一些实施方案中， 后裔为第一、第二、第三、第四、第五、第六、第七、第八、第九或第十代的植物。
如本文中所使用的，“后代(progeny)”是指第一代的植物。
术语“种子”包括所有类型的种子，例如真正的种子(或实生种子)(true seed)、 颖果、瘦果、果实、块莖、幼苗和类似形式。在芸苔属(Brassica)和白芥属(Sinapis)物种的情形下，“种子”是指真正的种子，除非另有说明。例如，该种子可以是转基因植物或通过传统育种方法获得的植物的种子。传统育种方法的实例可以包括，杂交育种、自交、回交、胚胎拯救、品种内异系杂交(in-crossing)、异型杂交(out-crossing)、近交、选择、无性繁殖和其他本领域中已知的传统技术。
尽管关于特定的植物或植物品种及其杂种进行了举例，但在各种不同的实施方案中，可以将目前所描述的使用苯嘧磺草胺的方法用于各种商业上有价值的植物。可以将在本文中被描述为有用的耐受苯嘧磺草胺的植物品系直接地或间接地(即要么作为用于除草剂处理的作物；要么作为苯嘧磺草胺耐受性性状供体品系以用于进行开发，如通过传统植物育种，从而产生包含此类性状的其他变种作物和/或杂种作物)用在杂草控制方法中。在本文中可以将所有此类所得的包含祖先苯嘧磺草胺耐受性性状的品种或杂种作物都称为祖先的耐受苯嘧磺草胺的品系的后代或后裔。可以说此类所得的植物保留了祖先植物的 “除草剂耐受性特征”，即意味着它们具有并表达负责该性状的祖先遗传分子组分。721jmaflgwavdi vqrsqf tnhl qrIspdsqqvThllleaqapl llgrgnggaa spgcarecftvglmsgliagtdpdtdmsverrlidaerrrsewamslllnlphessadckgmgrrrcpgerdamggvlreardsgasssv apangtgggg svlaeshcdl gikadalsqi rlppgppavp ehdvtfanrp evramvrrmy aqef kqwde lddgdegekk hpdtIkkaqa vggyniprgs tlalrtrvglv IvTltcdgygsasrtgvkeeasasgnwkeisiaavhqslirnt i IghlhlTkk rfesqllraf raaaaspaga iiphigaanl smiavlltlq eidasvgnsr mllinayaih X g tlx cjc f (3wlyfspwdsvp evlswpptsk Mikkmpsstt shirelslam pmhatmsrla ngaalatasy ariqlkrrlf wdyipalrwf ktepevytdn litaddvtrl rdpavweepe ervdgvevdmlpataspddg qsvrrlevae tktttpsrda dnayiiails erygpvfslr gahwrnlrri evslsvlmet dvfgvrrkil mitaltanlf gylqcivret kfmperfedg tegggltipkfllprfpdvc hwyrlyktdn wivsarsdpf vailfllhyy Igsrravws vavqllsahr iahtkatrpe aavsrrdafI gagtettstt lrlypaapml gcdgnllmpf wpleamcrp
编码CYP81A6多肽的核酸序列显示在表2中。
表2. SEQ ID NO:2。
在一个方面，本发明提供了植物或植物部分，其包含编码细胞色素P450多肽的重组多核苷酸，所述细胞色素P450多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
在一些实施方案中，所述细胞色素P450多肽为CYP81A同种型或CY73A同种型多肽。在其他实施方案中，所述细胞色素P450多肽为CYP81A6、NSF1、CYP73A38或CYP72A15。 在一个实施方案中，所述CYP81A同种型为CYP81A6或NSF1。
在其他实施方案中，本发明提供了植物或植物部分，其包含编码细胞色素P450多肽的重组多核苷酸，所述细胞色素P450多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯喃磺草胺的耐受性，条件是所述P450多肽为除了 NSFl之外的其他细胞色素P450。在另一个实施方案中，所述NSFl是除了玉米NSFl之外的。
CYP81A6氨基酸序列由例如GenBank登录号AAK63920. I (其通过提及而以其整体合并入本文)公开。
在一个实施方案中，本发明的植物或植物部分包含编码CYP81A6多肽的重组多核苷酸，所述CYP81A6多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性。在另一个实施方案中，所述CYP81A6多肽为水稻多肽。在其他实施方案中，所述CYP81A6多肽具有SEQ ID NO: I中所示的氨基酸序列(表I)。
表I. SEQ ID NO: I。
I611211812413013614214815416016611权利要求
1.植物或植物部分，其包含编码细胞色素P450多肽的重组多核苷酸，所述细胞色素 P450多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽为 CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
2.权利要求I的植物或植物部分，其中CYP72A15多肽为水稻多肽或其直向同源物，其中所述水稻多肽具有SEQ ID NO:7中所示的氨基酸序列。
3.权利要求I的植物或植物部分，其中CYP81A的同种型为水稻CYP81A6多肽或其直向同源物，其中所述水稻CYP81A6多肽具有SEQ ID NO: I或SEQ ID NO: 29中所示的氨基酸序列。
4.权利要求I的植物或植物部分，其中CYP73多肽为水稻CYP73A38多肽或其直向同源物，其中所述水稻CYP73A38多肽具有SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列。
5.能够萌发成为植物的种子，所述植物在至少一些其细胞中包含与在所述植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
6.植物的植物细胞或能够再生出植物的植物细胞，所述植物在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物细胞包含与启动子可操作地连接的所述重组多核苷酸，其中所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米 NSFl多肽。
7.植物细胞，其包含与在所述细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸， 所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予所述细胞以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A 的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
8.从植物或植物部分制备的植物产品，所述植物或植物部分在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
9.后代或后裔植物，其源自在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸的植物，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述后代或后裔植物在至少一些其细胞中包含与所述调控序列可操作地连接的所述重组多核苷酸，所述多肽在所述后代或后裔植物中的表达赋予所述后代或后裔植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
10.用于在用于植物生长的地点处控制杂草的方法，所述方法包括向所述地点施用包含苯嘧磺草胺的除草剂组合物；其中所述地点为(a)包含植物或能够产生所述植物的种子的地点；或者(b)待在进行所述施用后包含所述植物或所述种子的地点；其中所述植物或所述种子在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素 P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽为 CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
11.权利要求10的方法，其中步骤(a)在步骤(b)之前、在步骤(b)之后或与步骤(b) 同时发生。
12.权利要求10的方法，其中向所述杂草和向由所述种子产生的植物施用除草剂组合物。
13.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含除草有效的咪唑啉酮类。
14.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含咪唑乙烟酸。
15.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含甲咪唑烟酸。
16.权利要求10的方法,其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含咪唑喹啉酸。
17.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含咪草啶酸。
18.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含咪唑烟酸。
19.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含除草有效的磺酰脲类。
20.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含烟嘧磺隆。
21.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含甲磺隆。
22.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含噻吩磺隆。
23.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含苯磺隆。
24.权利要求10的方法，其中向所述地点施用的所述除草剂组合物进一步包含嘧草硫醚。
25.产生具有对于苯嘧磺草胺的耐受性的植物的方法，所述方法包括从植物细胞再生出植物，所述植物细胞用与在所述细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸进行转化，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A 或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
26.产生具有对于苯嘧磺草胺的耐受性的后代植物的方法，所述方法包括使耐受苯嘧磺草胺的第一植物与第二植物杂交以产生耐受苯嘧磺草胺的后代植物，其中所述第一植物和所述后代植物在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A或 CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
27.植物或植物部分，所述植物或植物部分在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物或植物部分进一步展示出第二除草剂耐受特征，其中所述多肽为 CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
28.权利要求27的植物，其中所述第二除草剂耐受特征为咪唑啉酮类除草剂耐受性。
29.权利要求5的种子，其中所述种子具有布置在其表面上的包含至少一种农艺学上可接受的活性成分(A. I.)的组合物。
30.权利要求5的种子，其中所述种子具有布置在其表面上的包含至少一种农艺学上可接受的杀真菌、杀线虫或杀昆虫的A. I.或其组合的组合物。
31.权利要求5的种子，其中所述种子具有布置在其表面上的包含至少一种农艺学上可接受的除草、杀真菌、杀线虫或杀昆虫的A. I.或其组合的组合物，条件是所述除草的 A. I.不是苯嘧磺草胺A. I.。
32.用于制备经处理的种子的方法，所述方法包括提供权利要求5的种子，并且对其施用种子处理组合物。
33.用于用农艺学上可接受的组合物来处理权利要求I的植物的方法，所述方法包括使所述农艺学上可接受的组合物与所述植物相接触，其中所述组合物包含苯嘧磺草胺。
34.用于用农艺学上可接受的组合物来处理权利要求I的植物的方法，所述方法包括使所述农艺学上可接受的组合物与所述植物相接触，条件是所述组合物不含苯嘧磺草胺 A. I.。
35.权利要求33的方法，其中所述组合物进一步包含杀真菌剂、杀昆虫剂或杀线虫剂。
36.用于用农艺学上可接受的组合物来处理权利要求I的种子的方法，所述方法包括使所述农艺学上可接受的组合物与所述种子相接触，其中所述组合物包含苯嘧磺草胺。
37.权利要求36的方法，其中所述组合物进一步包含杀真菌剂、杀昆虫剂或杀线虫剂。
38.用于制备后裔种子的方法，所述方法包括种植权利要求I的植物的种子或能够产生权利要求I的植物的种子。
39.权利要求38的方法，其进一步包括从所述种子生长出后裔植物。
40.权利要求39的方法，其进一步包括从所述后裔植物收获后裔种子。
41.权利要求39的方法，其进一步包括向所述后裔植物施用生长素除草组合物。
42.用于从权利要求I的植物生产植物产品的方法，所述方法包括加工所述植物或其植物部分以获得植物产品。
43.权利要求42的方法，其中所述植物产品为草料、种 子磨粉、油或种子处理包衣种子。
44.权利要求42的方法，其中所述植物部分为种子。
45.从植物或其植物部分获得的植物产品，其中所述植物或植物部分在至少一些其细胞中包含与在植物细胞中可操作的启动子可操作地连接的重组多核苷酸，所述启动子能够表达由所述多核苷酸编码的细胞色素P450多肽，所述多肽的表达赋予所述植物或植物部分以对于苯嘧磺草胺的耐受性，其中所述植物或植物部分进一步展示出第二除草剂耐受特征，其中所述多肽为CYP72A15多肽或者CYP81A或CYP73A的同种型，条件是CYP81A的同种型不是玉米NSFl多肽。
46.权利要求45的植物产品，其中所述产品为草料、种子磨粉、油或种子处理包衣种子。
全文摘要
本发明提供了耐受苯嘧磺草胺(saflufenacil)的植物。本发明还提供了用于通过施用本发明的耐受苯嘧磺草胺的植物对其耐受的苯嘧磺草胺来控制杂草生长的方法。本发明的植物表达细胞色素P450多肽，所述细胞色素P450多肽的表达赋予所述植物以对于苯嘧磺草胺的耐受性。
文档编号A01H5/10GK102946715SQ201180009409
公开日2013年2月27日 申请日期2011年1月7日 优先权日2010年1月7日
发明者S·L·麦金, D·R·卡尔森, R·赖尔布尔, J·M·史蒂文逊-鲍利克, M·帕斯特纳克, A·韦尔泽尔 申请人:巴斯福农业有限责任公司阿纳姆(荷兰)韦登斯维尔分公司