多菌种微生物猪饲料添加剂及其生产方法
【专利摘要】本发明涉及一种多菌种微生物猪饲料添加剂及其生产方法，添加剂按枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌以2：1：1：1：2的比例接种于发酵培养基中，经固体发酵后得到成品。本发明的微生物制剂配伍合理，制剂中各类微生物能发挥各自作用，相互依赖，利于发挥微生物制剂的整体优势，有利于宿主的生长发育和抗病能力的提高，使用安全，能提高动物的免疫力，防病抗病，促进动物生长，提高饲料利用率，改善饲料品质。
【专利说明】多菌种微生物猪饲料添加剂及其生产方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种微生物饲料制剂，特别是涉及一种多菌种微生物猪饲料添加剂及
其生产方法。
【背景技术】
[0002]药物饲料添加剂是一种由抗生素或化学药物制成的添加剂，使用成本高，杀灭病原菌的同时也杀灭动物肠道正常菌群，并且易产生药物残留，使畜产品质量降低，加之，连续单一地使用会引起病原菌产生抗药性。
[0003]微生物饲料添加剂是一种取代或平衡动物生态系统中一种或多种菌系的微生物制品。狭义上讲，它是一种能激发自身有益菌种繁殖增长，同时抵制有害菌系生长的微生物制品。其中含有大量的有益菌，复合酶，鳌合肤，脱霉剂等，作为饲料进入畜禽体内后，能迅速繁殖，一方面投入菌种的代谢物中和肠内毒素，抑制了其它有害菌丛的生长，另一方面在宿主体内形成了正常微生物菌群，为宿主合成主要的维生素，提供营养和阻止致病菌的入侵。
[0004]因此，研制绿色、新型、易推广的微生物饲料添加剂，从调动和增强动物机体自身抵抗力，调节胃肠道菌群平衡，利用优势菌株的抗菌作用逐步取代抗生素，合成一种具有上述作用的微生物饲料添加剂，增加各微生物之间的协同作用，提高养殖效益，已成为饲料工业面临的重要课题和紧迫任务。
【发明内容】
[0005]本发明提供一种多菌种微生物猪饲料添加剂及其生产方法，该饲料添加剂可降低生产成本和能耗，菌种间协同作用好，能提高饲料利用率，提高动物的免疫力，促进动物健康生长。
[0006]本发明的技术方案:
一种多菌种微生物猪饲料添加剂，按枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌，以2:1:1:1:2的比例接种于发酵培养基中，经固体发酵后得到的。
[0007]其中枯草芽孢杆菌的培养基和培养条件为:取蛋白胨10g、牛肉膏3g、NaCl 5g、琼脂粉20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值为7.0-7.2，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30°C，pH7.0，摇床转速220r/min，装液量50%，接种量4%，培养24h。
[0008]其中德氏乳杆菌的培养基和培养条件为:取牛肉膏10g、蛋白胨10g、酵母浸膏5g、葡萄糖20g、吐温801ml、无水乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、柠檬氢二铵2g、水合硫酸镁0.58g、水合硫酸锰0.28g、琼脂20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值至6.5，121°C高压灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度37°C，pH值6.5，接种量为3%，装液量为60%，厌氧培养72h。
[0009]其中酿酒酵母菌的培养基和培养条件为:取黄豆芽IOOg放入烧杯中，加水1000ml，煮沸约30min，用纱布过滤，补足水量，制成10%豆芽汁；再加入蔗糖50g，煮沸溶化，加入20克琼脂，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30°C，pH5.5，摇床转速180r/min，装液量为40%，接种量为3%，培养48h。
[0010]其中光合细菌的培养基和培养条件为:培养基以每升发酵液中的质量含量计:氯化铵20g/L、磷酸二氢钾2 g/L、乙酸钠40g/L、碳酸氢钠20g/L、氯化钠10g/L、酵母膏1.5 g/L、硫酸镁2 g/L，调节pH至6.5，高压120°C灭菌20分钟，备用；
将上述种子液按1-3%的体积比接种于培养基中，于25?39 °C、光照强度2000-50001x,厌氧培养16?24小时，测定光合细菌总菌数不低于30亿/ml，活菌数不低于20 亿 /ml。
[0011]其中假丝酵母的培养基和培养条件为:培养基以每升发酵液中的质量含量计:葡萄糖40-60g/L、玉米浆30-40g/L、磷酸氢二铵8-10g/L、磷酸二氢钾6-10g/L、硫酸镁3_6g/L、硝酸钠4-6g/L ;培养条件:种子液的培养温度28°C，pH值为6，接种量为3%，装液量为60%，培养 72h。
[0012]—种多菌种混合培养生产微生物猪饲料添加剂的方法,包括将枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌分别进行活化、筛选，经扩大培养后，将枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌按2:1:1:1:2的比例接种于发酵培养基中，经固体发酵后得到成品。
[0013]其中，光合细菌是一种营养丰富、营养价值高的细菌，菌体含有丰富的氨基酸、维生素和生物素，还有生理活性物质辅酶Q。光合细菌作为饲料添加剂添加在饲料中，可以促进动物对饲料的消化吸收，提高饲料利用率，同时还可显著提高动物的生长速度。
[0014]德氏乳杆菌是一种喜欢在厌氧环境中生存的微生物，是动物消化道内正常微生物区系中的优势菌群，能降低胆固醇，中和肠毒素，合成营养物质和产生消化酶，具有调节畜禽营养代谢的功能。
[0015]酿酒酵母菌是耗氧微生物，它不仅能帮助动物消化，还能促进消化道内原有益微生物的活力，补充B族维生素，其细胞壁多糖还具有刺激动物免疫力、提高抗病力的功效。
[0016]枯草芽孢杆菌，属于耗氧型微生物，能产生过氧化氢、细菌素，建立微生态平衡，促进有益厌氧微生物的繁殖，进入消化道后能迅速生长，产生蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶等活性物质，对蛋白质、脂肪、碳水化合物等营养物质的消化、吸收和利用发挥调控作用，同对有害微生物起抑制和杀灭作用，在饲料加工、贮存及消化道中稳定性好，无需特殊保护性处理，就能存活很长时间，可广泛适用于猪、牛、鸡等家畜家禽的饲料中。
[0017]本发明的积极有益效果:
(I)本发明的微生物制剂由安全高效有益的枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌组成，产品的目标菌纯度高，功效明确，菌种属于《允许使用饲料添加剂品种目录》，可以直接饲喂，是绿色、安全、无公害的制剂，可广泛用于畜禽饲料，特别适用于猪饲料的添加。
[0018](2)本发明的微生物制剂配伍合理，制剂中各类微生物能发挥作用，相互依赖，相互之间形成共生共荣关系，能保持微生物的稳定状态，利于发挥微生物制剂的整体优势。
[0019](3)本发明的微生物制剂易于繁殖，该制剂能合成对大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、梭状芽孢杆菌等肠道致病菌的抑制物，有利于宿主的生长发育和抗病能力的提高，使用安全。[0020]( 4 )本发明的微生物制剂用于猪饲料后，和普通饲料相比具有明显优点，普通饲料往往是通过添加抗生素、激素和促生长剂促进动物生长，本发明通过添加微生物制剂促生长，微生物能将饲料中的大分子有机物分解为小分子有机物，其中枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母能分解饲料中常温下不能分解的植物细胞壁等成分如纤维素、木质素等，将大分子蛋白降解为小肽或寡肽类物质，将多糖类降解为单糖或寡糖，有利于动物对营养成分的充分吸收；光合菌添加在饲料中，可以促进动物对饲料的消化吸收，提高饲料利用率，同时还能显著提高动物的生长速度。
[0021 ] ( 5 )本发明的微生物制剂用于蛋白饲料，饲料进入动物肠道后与肠道内有益菌一同形成强力的优势种群，能抑制和消灭致病菌群，同时能合成大量氨基酸、蛋白质、各种生化酶、促生长因子等营养类物质；能调整和提高畜禽肌体各器官的功能，提高饲料转化率，防病治病，提高成活率，促进生长和繁殖，增产增收，减少粪尿臭味，净化环境。
【具体实施方式】
[0022]实施例1 一种多菌种微生物饲料添加剂，按枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌以2:1:1:1:2的比例接种于发酵培养基中，经固体发酵后得到。
[0023]其中枯草芽孢杆菌的培养基和培养条件为:取蛋白胨10g、牛肉膏3g、NaCl 5g、琼脂粉20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值为7.0-7.2，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度为30°C，pH7.0，摇床转速220r/min，装液量50%，接种量4%，培养24h。
[0024]德氏乳杆菌的培养基和培养条件为:取牛肉膏10g、蛋白胨10g、酵母浸膏5g、葡萄糖20g、吐温801ml、无水乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、朽1檬氢二铵2g、水合硫酸镁0.58g、水合硫酸锰0.28g、琼脂20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值至6.5，121°C高压灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度37°C，pH值6.5，接种量为3%，装液量为60%，厌氧培养72h。
[0025]酿酒酵母菌的培养基和培养条件为:取黄豆芽IOOg放入烧杯中，加水1000ml，煮沸约30min，用纱布过滤，补足水量，制成10%豆芽汁；再加入蔗糖50g，煮沸溶化，加入20克琼脂，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30°C，pH5.5，摇床转速180r/min，装液量为40%，接种量为3%，培养48h。
[0026]其中光合细菌的培养基和培养条件为:培养基以每升发酵液中的质量含量计:氯化铵20g/L、磷酸二氢钾2 g/L、乙酸钠40g/L、碳酸氢钠20g/L、氯化钠10g/L、酵母膏1.5 g/L、硫酸镁2 g/L，调节pH至6.5，高压120°C灭菌20分钟，备用；
将上述种子液按1-3%的体积比接种于培养基中，于25?39 °C、光照强度2000-50001x,厌氧培养16?24小时，测定光合细菌总菌数不低于30亿/ml，活菌数不低于20 亿 /ml。
[0027]假丝酵母光的培养基和培养条件为:培养基以每升发酵液中的质量含量计:葡萄糖40-60g/L、玉米浆30-40g/L、磷酸氢二铵8-10g/L、磷酸二氢钾6-10g/L，硫酸镁3_6g/L，硝酸钠4-6g/L ;培养条件:种子液的培养温度28°C，pH值6，接种量为3%，装液量为60%，培养72h。
[0028]实施例2 —种多菌种混合培养生产微生物饲料添加剂的方法,将枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌分别进行活化、筛选，经扩大培养后，将枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌按2:1:1:1:2的比例接种于发酵培养基中，经固体发酵后得到成品。
[0029]其中枯草芽孢杆菌固体发酵时的培养基和培养条件:取蛋白胨10g、牛肉膏3g、NaCl 5g、琼脂粉20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值为7.0-7.2，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30°C，pH7.0，摇床转速220r/min，装液量50%，接种量4%，培养24h ；
德氏乳杆菌固体发酵时的培养基和培养条件:取牛肉膏10g、蛋白胨10g、酵母浸膏5g、葡萄糖20g、吐温801ml、无水乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、柠檬氢二铵2g、水合硫酸镁
0.58g、水合硫酸锰0.28g、琼脂20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值至6.5，121 °C高压灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度37 °C，pH值6.5，接种量为3%，装液量为60%，厌氧培养72h。
[0030]其中酿酒酵母菌固体发酵时的培养基和培养条件:
取黄豆芽100g放入烧杯中，加水1000ml，煮沸约30min，用纱布过滤，补足水量，制成10%豆芽汁；再加入蔗糖50g，煮沸溶化，加入20克琼脂，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30°C，pH5.5，摇床转速180r/min，装液量为40%，接种量为3%，培养48h ；其中光合细菌的培养基和培养条件为:培养基以每升发酵液中的质量含量计:氯化铵20g/L、磷酸二氢钾2 g/L、乙酸钠40g/L、碳酸氢钠20g/L、氯化钠10g/L、酵母膏1.5 g/L、硫酸镁2 g/L，调节pH至6.5，高压120°C灭菌20分钟，备用；
将上述种子液按1-3%的体积比接种于培养基中，于25~39 °C、光照强度2000-50001x,厌氧培养16~24小时，测定光合细菌总菌数不低于30亿/ml，活菌数不低于20 亿 /ml。
[0031]其中假丝酵母固体 发酵时的培养基和培养条件:培养基以每升发酵液中的质量含量配制:葡萄糖50-50g/L、玉米浆32-35g/L、磷酸氢二铵5_7g/L、磷酸二氢钾7_9g/L，硫酸镁4-5g/L，硝酸钠4-6g/L ;培养条件:种子液培养温度28°C，pH值为6，接种量为3%，装液量为50%，培养60h。
[0032]最后将各菌种的发酵产物低温干燥、混合均匀、样品分析、包装，得到成品。经产品质量检测合格后验收。
[0033]将本发明所制得的产品，在饲料中按日粮的0.3-0.5%的重量比添加直接饲喂，其效果明显。
[0034]为验证本发明的微生物饲料添加剂的使用效果，在某猪场进行了试验。
[0035]表1育肥期猪饲料对猪生产性能的影响
【权利要求】
1.一种多菌种微生物猪饲料添加剂，其特征在于，所述微生物猪饲料添加剂按枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌，以2:1:1:1:2的比例接种于发酵培养基中，经固体发酵后得到的。
2.如权利要求1所述的微生物猪饲料添加剂，其特征在于，其中枯草芽孢杆菌的培养基和培养条件为:取蛋白胨10g、牛肉膏3g、NaCl 5g、琼脂粉20g，混合后加蒸馏水1000ml，调PH值为7.0-7.2，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30°C，pH7.0，摇床转速220r/min,装液量50%，接种量4%，培养24h。
3.如权利要求1所述的微生物猪饲料添加剂，其特征在于，其中德氏乳杆菌的培养基和培养条件为:取牛肉膏10g、蛋白胨10g、酵母浸膏5g、葡萄糖20g、吐温801ml、无水乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、柠檬氢二铵2g、水合硫酸镁0.58g、水合硫酸锰0.28g、琼脂20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值至6.5，121°C高压灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度370C，pH值6.5，接种量为3%，装液量为60%，厌氧培养72h。
4.如权利要求1所述的微生物猪饲料添加剂，其特征在于，其中酿酒酵母菌的培养基和培养条件为:取黄豆芽100g放入烧杯中，加水1000ml，煮沸约30min，用纱布过滤，补足水量，制成10%豆芽汁；再加入蔗糖50g，煮沸溶化，加入20克琼脂，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30°C，pH5.5，摇床转速180r/min，装液量为40%，接种量为3%，培养48h。
5.如权利要求1所述的微生物猪饲料添加剂，其特征在于，其中光合细菌的培养基和培养条件为:培养基以每升发酵液中的质量含量计:氯化铵20g/L、磷酸二氢钾2 g/L、乙酸钠40g/L、碳酸氢钠20g/L、氯化钠10g/L、酵母膏1.5 g/L、硫酸镁2 g/L，调节pH至6.5，高压120°C灭菌20分钟，备用； 将上述种子液按1-3%的体积比接种于培养基中，于25~39 °C、光照强度2000-50001x,厌氧培养16~24小时，测定光合细菌总菌数不低于30亿/ml，活菌数不低于20 亿 /ml。
6.如权利要求1-5任一项所述的微生物猪饲料添加剂，其特征在于，其中假丝酵母的培养基和培养条件为:培养基以每升发酵液中的质量含量计:葡萄糖40-60g/L、玉米浆30-40g/L、磷酸氢二铵8-10g/L、磷酸二氢钾6-lOg/L、硫酸镁3_6g/L、硝酸钠4_6g/L ;培养条件:种子液的培养温度28°C，pH值为6，接种量为3%，装液量为60%，培养72h。
7.一种多菌种混合培养生产微生物猪饲料添加剂的方法，其特征在于，将枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌分别进行活化、筛选，经扩大培养后，将枯草芽孢杆菌、德氏乳杆菌、酿酒酵母菌、假丝酵母、光合细菌按2:1:1:1:2的比例接种于发酵培养基中，经固体发酵后得到成品。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，其中枯草芽孢杆菌固体发酵时的培养基和培养条件:取蛋白胨IOgl肉膏3g、NaCl 5g、琼脂粉20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值为7.0-7.2，121。。灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30。。，ρΗ7.0，摇床转速220r/min，装液量50%，接种量4%，培养24h ； 德氏乳杆菌固体发酵时的培养基和培养条件为:取牛肉膏10g、蛋白胨10g、酵母浸膏5g、葡萄糖20g、吐温801ml、无水乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、柠檬氢二铵2g、水合硫酸镁0.58g、水合硫酸锰0.28g、琼脂20g，混合后加蒸馏水1000ml，调pH值至6.5，121°C高压灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度37 °C，pH值6.5，接种量为3%，装液量为60%，厌氧培养72h。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，其中酿酒酵母菌固体发酵时的培养基和培养条件为: 取黄豆芽100g放入烧杯中，加水1000ml，煮沸约30min，用纱布过滤，补足水量，制成10%豆芽汁；再加入蔗糖50g，煮沸溶化，加入20克琼脂，121°C灭菌20min ;培养条件:种子液的培养温度30°C，pH5.5，摇床转速180r/min，装液量为40%，接种量为3%，培养48h ； 其中光合细菌的培养基和培养条件为:培养基以每升发酵液中的质量含量计:氯化铵20g/L、磷酸二氢钾2 g/L、乙酸钠40g/L、碳酸氢钠20g/L、氯化钠10g/L、酵母膏1.5 g/L、硫酸镁2 g/L，调节pH至6.5，高压120°C灭菌20分钟，备用； 将上述种子液按1-3%的体积比接种于培养基中，于25~39 °C、光照强度2000-50001x,厌氧培养16~24小时，测定光合细菌总菌数不低于30亿/ml，活菌数不低于20 亿 /ml。
10.如权利要求7-9任一项所述的方法，其特征在于，其中假丝酵母固体发酵时的培养基和培养条件:培养基以每升发酵液中的质量含量计:葡萄糖50-50g/L、玉米浆32-35g/L、磷酸氢二铵5-7g/L、磷酸二氢钾7 -9g/L、硫酸镁4-5g/L、硝酸钠4_6g/L ;培养条件:种子液培养温度28°C，pH值为6，接种量为3%，装液量为50%，培养60h。
【文档编号】A23K1/18GK103798540SQ201310709666
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2013年12月21日 优先权日:2013年12月21日
【发明者】职爱民, 贾国超, 郑春华, 周志友, 赵强, 赵蕾, 赵金胜, 邱国平, 邱国庆 申请人:河南旭瑞食品有限公司