）
[0067] 0· 0021-0. 21 克 / 升 α -硫辛酸（〇· Ol-L 〇 毫摩）
[0068] 〇· 25-0. 75毫升/升胰岛素（10晕克/毫升）
[0069] 用于调整pH的Tris-羟甲基氨基甲烷
[0070] (0.01-3.0 升蒸馏水）。
[0071] 例如，所述的溶液中含有：
[0072] 大约0· 14克/升氯化钙
[0073] 大约0· 52克/升氯化钾（7毫摩）
[0074] 大约0· 06克/升磷酸钾（一钾盐）
[0075] 大约0· 10克/升氯化镁（六水合物）
[0076] 大约0· 10克/升硫酸镁（五水合物）
[0077] 大约7. 31克/升氯化钠（125毫摩）
[0078] 大约〇· 35克/升碳酸氢钠
[0079] 大约0· 05克/升磷酸钠（二钠盐；五水合物）
[0080] 大约1. 98克/升葡萄糖/D-葡萄糖（11毫摩）
[0081] 大约0.27克/升腺苷（1毫摩）
[0082] 大约0· 46克/升谷胱甘肽（还原态；L 5毫摩）
[0083] 大约0· 18克/升抗坏血酸（1毫摩）
[0084] 大约0· 21克/升L-精氨酸（1毫摩）
[0085] 大约0· 27克/升肌酸乳清酸（0· 5毫摩）
[0086] 大约0· 30克/升一水合肌酸（2毫摩）
[0087] 大约0· 15克/升L-瓜氨酸苹果酸（1毫摩）
[0088] 大约0.08克/升二氯乙酸（0.5毫摩）
[0089] 大约2. 3克/升L-肌肽（10毫摩）
[0090] 大约2. 0克/升L-肉碱（10毫摩）
[0091] 大约0.021克/升α-硫辛酸（〇· 1毫摩）
[0092] 大约〇· 50毫升/升胰岛素（10晕克/毫升）
[0093] 用于调整pH的Tris-羟甲基氨基甲烷
[0094] (大约1升蒸馏水）。
[0095] 上文中所描述的溶液被用来维持器官的生理学完整性。所述的器官或者组织与其 接触了至少1个小时的时间，其中所述的器官或者组织优选是从人类机体或者动物机体中 分离出来的。或者，所述的器官或者组织是在原位进行灌注的，即，在被从所述的机体中分 离出来之前进行灌注。例如，在尸体或者存活的患者体内使所述的器官或者组织在原位发 生接触。所述的器官或者组织与所述的溶液接触的时间从大约1-5个小时，例如4个小时， 直至几天的时间，例如1天，2天，5天，8天，10天或者更长的时间。
[0096] 使用所述的溶液能够顺利的对各种不同的器官以及组织类型进行存储以及复苏。 例如，所述的器官或者组织是心脏。其他适合的组织/器官包括肾脏，肝脏，胃，脾脏，胰腺， 肺脏，大脑，眼睛，肠，膀胱，皮肤或者真皮组织，血管例如静脉或者动脉，心脏瓣膜，精子，以 及卵母细胞。
[0097] 所述的维持或者恢复器官或者组织的生理学完整性的方法是通过下述手段来实 现的：将所述的器官或者组织与上文中所描述的溶液进行一段时间的接触，这样一来酯酶 活性在> 150任意荧光光子单位的范围内，细胞内一氧化氮（NO)浓度在大于1纳摩的范 围内，并且所述器官中的所述细胞的线粒体膜的膜电位比> 1.00。所述的溶液能够保存完 整的心肌细胞收缩蛋白（肌衆球蛋白重链（HC)，肌衆球蛋白轻链（LC)，acitinin，肌动蛋 白，肌钙蛋白c);内皮型一氧化氮合成酶（eNOS)，窖蛋白（caveolin)，以及瑞斯托霉素辅因 子（vWF)，例如，正如利用Western以及免疫印迹法所评价的，然而使用先前的溶液对例如 心脏这样的组织/器官进行存储能够导致例如肌浆球蛋白重链这样的蛋白发生降解，从而 危及到所述被移植器官的完整性以及功能。这些组分的缺失或者破碎标志着所述器官的退 化。临床参数包括左心室舒张末压（LVEDP) 0-30毫米汞柱，血压（BP) 100-140/60-100, pH >6.8。所述的溶液还能够抑制器官狭窄，斑块，凝结的形成，以及粥瘤（动脉硬化症）的形 成，这在移植案例中是一种严重的问题，其中所述的器官狭窄、斑块、凝结的形成归因于内 皮的损伤。
[0098]同样存在于本发明中的是一种用于鉴定器官或者组织的生理学完整性的方法。将 所述的器官或者组织与上文中所描述的溶液（或者另外一种溶液）进行接触，并且对浓度 水平或者下述参数中的一种或者多种的活性进行检测或者鉴定。需要进行鉴定的生物学指 数包括酯酶，一氧化氮，或者细胞膜电位。酯酶活性在> 150任意（荧光光子）单位的范围 内，细胞内一氧化氮（NO)浓度在大于1纳摩的范围内，并且所述器官中的所述细胞的线粒 体膜的膜电位比> 1. 〇〇 (极化的与去极化的比例，其中，大于1标志着所述的线粒体膜是极 化的并且所述的组织是健康的）。上述的数值标志着所述的器官或者组织适合被移植到作 为接受者的存活的哺乳动物体内，其中所述的器官或者组织例如是心脏。
[0099] 所述的用于制备存储/复苏溶液的组合物任选的以下面所列出的成分/剂量或者 其成倍增加的剂量被包装在试剂盒内，即，扩大规模，从而制备出2倍，3倍，5倍，10倍，20 倍剂量的所述溶液。一种范例性的试剂盒中含有
[0100] 0.1-0. 5克/升氯化钙
[0101] 〇· 25-0. 75克/升氯化钾（7毫摩）
[0102] 0· 01-0. 5克/升磷酸钾（一钾盐）
[0103] 〇· 01-0. 5克/升氯化镁（六水合物）
[0104] 〇· 01-0. 5克/升硫酸镁（五水合物）
[0105] 5. 0-10. 0克/升氯化钠（125毫摩）
[0106] CL Ol-CL 5克/升碳酸氢钠
[0107] 0· 01-0. 5克/升磷酸钠（二钠盐；五水合物）
[0108] 1. 0-5.0克/升D-葡萄糖（11毫摩）
[0109] 0· 01-0. 5克/升腺苷（1毫摩）
[0110] 0.01-0. 75克/升谷胱甘肽（还原态；L 5毫摩）
[0111] 0.01-0. 5克/升抗坏血酸（1毫摩）
[0112] 0.01-0. 5克/升L-精氨酸（1毫摩）
[0113] 0· 01-0. 5克/升肌酸乳清酸（0· 5毫摩）
[0114] 0· 01-0. 5克/升一水合肌酸（2毫摩）
[0115] 0.01-0. 5克/升L-瓜氨酸苹果酸（1毫摩）
[0116] 0· 0卜0· 5克/升二氯乙酸（0· 5晕摩）
[0117] 0· 23-2. 3 克 / 升 L-肌肽（1-10 晕摩）
[0118] 0· 2〇_2· 0 克 / 升 L-肉喊（1-10 晕摩）
[0119] 0· 0021-0. 21 克 / 升 α -硫辛酸（〇· Ol-L 〇 毫摩）
[0120] 〇· 25-0. 75毫升/升胰岛素（10晕克/毫升）
[0121] 用于调整pH的Tris-羟甲基氨基甲烷
[0122] 这些成分与使用说明书一同进行包装，并且将它们与0. 01-2. 0升蒸馏水进行混 合。如上文中所述，在使用之前的短时间里任选的加入胰岛素，即，在向所述的溶液中加入 器官之前的短时间里。将所述的试剂盒包装，并且在不含有无菌水成分的条件下进行出售。 例如，所述的试剂盒中含有
[0123] 大约0. 14克/升氯化钙
[0124] 大约0· 52克/升氯化钾（7毫摩）
[0125] 大约0· 06克/升磷酸钾（一钾盐）
[0126] 大约0· 10克/升氯化镁（六水合物）
[0127] 大约0· 10克/升硫酸镁（五水合物）
[0128] 大约7.31克/升氯化钠（125毫摩）
[0129] 大约0· 35克/升碳酸氢钠
[0130] 大约0· 05克/升磷酸钠（二钠盐；五水合物）
[0131] 大约1. 98克/升葡萄糖/D-葡萄糖（11毫摩）
[0132] 大约0.27克/升腺苷（1毫摩）
[0133] 大约0· 46克/升谷胱甘肽（还原态；1. 5毫摩）
[0134] 大约0· 18克/升抗坏血酸（1毫摩）
[0135] 大约0· 21克/升L-精氨酸（1毫摩）
[0136] 大约0· 27克/升肌酸乳清酸（0· 5毫摩）
[0137] 大约0· 30克/升一水合肌酸（2毫摩）
[0138] 大约0· 15克/升L-瓜氨酸苹果酸（1毫摩）
[0139] 大约0.08克/升二氯乙酸（0.5毫摩）
[0140] 大约2. 3克/升L-肌肽（10毫摩）
[0141] 大约2.0克/升L-肉碱（10毫摩）
[0142] 大约0.021克/升α-硫辛酸（〇· 1毫摩）
[0143] 大约〇· 50毫升/升胰岛素（10晕克/毫升）
[0144] 用于调整pH的Tris-羟甲基氨基甲烷
[0145] 任选的，所述的溶液是纳米尺寸的，从而增加了穿透所述的细胞膜的效率。纳米尺 寸指的是所述的颗粒尺寸被降低到亚微型的范围，所述的最终的颗粒尺寸通常为1-10纳 米（nm)。所述的颗粒尺寸的降低引发了所述溶液穿透所述的细胞膜的效率发生了显著的 提高。在一个方面，所述的效率被提高，使得所述溶液的至少20 %，至少25 %，至少50 %，至 少75%，或者至少100%能够穿透所述的细胞膜。
[0146] 本发明提供了对本发明所述的溶液进行纳米尺寸处理的方法，所述的处理是在将 所述的溶液用于本发明所描述的方法之前进行的。或者，本发明提供了对水进行纳米尺寸 处理的方法，所述的处理是在加入所述溶液的其他化合物/试剂之前进行的。在另外一个 方面，本发明提供了对水进行纳米尺寸处理以及对所述溶液中的每种化合物/试剂进行纳 米尺寸处理的方法，所述的处理是在混合到溶液之前分别进行的。
[0147] 在一个方面，所述的组合物中包括以纳米范围的尺寸存在的水包（water packet) 或者水团（water cluster)。任选的，所述的水包或者水团为1-10纳米（nm)，1-25纳米， 25-50 纳米，50-75 纳米，75-100 纳米，100-200 纳米，200-500 纳米，或者 500-999 纳米。
[0148] 本发明还提供了测量离体心脏的pH的方法，所述的方法包括将所述的心脏与本 发明所述的溶液进行接触，并且测定所述的离体心脏的PH，其中pH在6. 8至7. 0的范围内 标志着所述的心脏适合进行移植。
[0149] 本发明还提供了测量本发明所述溶液的pH的方法，所述的方法包括将一个离体 的心脏与本发明所述的溶液进行接触，并且测定本发明所述溶液的PH，其中pH在6. 8至 7. 0的范围内标志着所述的心脏适合进行移植。
[0150] 除了用于存储/保存器官以及组织的溶液以及方法之外，本发明还包括一种灌注 装置。所述装置的元件包括一个腔室组件，一个灌注回路，以及一个温度控制单元，其中所 述的灌注回路包括一个第一导管，用于向所述的器官提供所述的溶液。所述的装置包括一 个固定化的磷酸烯醇式丙酮酸（PEP)羧酸激酶以及乳酸脱氢酶（LDH)柱，使其成为一个自 我持续性的系统。例如，从心室中流出的所述溶液可能含有一些乳酸，所述的乳酸随后被所 述的乳酸脱氢酶不断的转化成丙酮酸盐，随着所述的溶液一起回流至所述的腔室。之后，丙 酮酸盐进行所述的三羧酸循环，用于连续的生成三磷酸腺苷。相类似的，在所述的三羧酸循 环中生成的草酰乙酸盐被磷酸烯醇式丙酮酸羧酸激酶转化成磷酸烯醇式丙酮酸盐。磷酸烯 醇式丙酮酸盐转化成丙酮酸盐生成性三磷酸腺苷。同样的，丙酮酸盐进行所述的三羧酸循 环中，从而生成更多的三磷酸腺苷。因此，所述的装置允许所述的循环对底物进行连续的再 生。能量代谢在所述的系统中得以维持，直至全部的葡萄糖和/或脂肪酸被消耗掉，这仅能 在长时间的存储情况中发生，例如，超过大约2周或者10天的时间。例如，所述的装置适用 于脉管组织中，例如心、脏以及血管，以及肾脏，肝脏，胃，脾脏，胰腺，肺脏，大脑，眼睛，肠，以 及膀胱。
[0151] 一种用于维护或者复苏哺乳动物器官的系统包括一个容器，用于保持所述的器官 与上文中所描述的组合物或者溶液进行接触，一种递送工具，用于将所述的组合物递送至 所述器官的至少一个脉管中，一种分离工具，用于将所述的组合物转移出所述的器官，温度 控制工具，氧化工具，过滤工具，以及流动控制工具。所述的递送工具，分离工具，温度工具， 氧化工具，过滤工具，以及流动控制工具提供或者重建了一种生理学可接受性的哺乳动物 环境。一种自我持续性的系统包括下述元件：一氧化氮的持续生产，三磷酸腺苷的持续生 成，酸中毒以及氢离子的缓冲，以及氨的淬火。所述的元件之间优选是相互连接的。
[0152] 本发明的其他特征以及优点将通过下述对于优选实施方式的描述以及权利要求 而变得显而易见。本发明中所引用的全部参考文献均在此引入作为参考。
[0153] 附图的简要描述
[0154] 附图1是一系列的显微镜照片，描述的是在收集之后的0分钟，15分钟以及