专利名称：一种混合酶酶解制备花生蛋白活性肽的方法
技术领域：
本发明涉及一种活性肽的制备方法，尤其涉及一种混合酶酶解制备花生蛋白活性肽的方法。
背景技术：
随着现代蛋白质工程、生物酶工程技术的发展，大量的生物活性肽被发现，由生物技术的应用生产出的生物活性肽已广泛应用于食品、医药、化妆品、饲料、和农业等领域。生物活性肽的研究领域发展迅速，已经受到了世界各国科学家及政府的高度重视。花生蛋白活性肽作为生物活性肽的一种，其具有粉末状、无结块、无杂质、无异味、 有花生原有的清香气味、良好的水溶性、持水性，与其他食品配料完全融合保持各有的物化营养特性等特点。花生蛋白活性肽氨基酸组成均衡、全面，含人体必需的8种氨基酸，特别是谷氨酸和天门冬氨酸的含量较高，对促进人体脑细胞发育和增加记忆力都有良好的作用；花生蛋白活性肽氨基酸与人体氨基酸的组成非常相近，极易被人体吸收利用，且不含胆固醇；因此花生蛋白活性肽具有易于消化吸收、恢复体力、增强免疫力、降低血压、促进脂肪代谢、保健养生等功效。目前，花生蛋白活性肽所采取的水解制备工艺中存在着酶解时间过长(一般在 6 13小时)，工艺过程复杂，活性肽得率较低(传统得率在70%以下)，致使花生蛋白活性肽制备成本高，且生产过程中由于调节PH值加入碱溶液，极易造成环境污染。
发明内容
本发明为解决上述工艺中存在的不足，提供一种混合酶酶解制备花生蛋白活性肽的方法。本发明采用的技术方案是一种混合酶酶解制备花生蛋白活性肽的方法，其步骤如下1、蛋白钝化，取花生分离蛋白粉加入蒸馏水，使之溶解后，放入80 90°C恒温水浴中保持20分钟，使花生分离蛋白钝化；2、酶解，冷却至室温，加入混合蛋白酶，所述混合蛋白酶包含碱性蛋白酶37% 39%、中性蛋白酶37% 39%和风味蛋白酶22% ，在 50 60°C的恒温水浴振荡器中反应12 15分钟；3、酶灭活，反应结束后立即取出，放入 100°C水浴中保持5分钟，使酶失活；4、得到活性肽，冷水冷却，测定水解液中可溶性氮含量，冷冻干燥得到花生蛋白活性肽。本发明的有益效果在于花生蛋白活性肽的制备时间大大缩短，制备时间由传统的6 13小时缩短到40分钟以下，花生蛋白活性肽得率从传统的70%以下提高到75% 95%。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明作详细描述。实施例1
取10克蛋白质含量在70%以上的花生分离蛋白粉，溶解入盛有80克蒸馏水的三角瓶中，花生分离蛋白粉和蒸馏水的质量比设置在1 8 1 11的范围内，根据不同的量在此范围内相应调整 ’放入80°C恒温水浴中保持20分钟，使花生分离蛋白钝化；冷却至室温，加入混合蛋白酶，所述混合蛋白酶包含12140u/g碱性蛋白酶、12000u/g中性蛋白酶和7390u/g风味蛋白酶；在50°C的恒温水浴振荡器中反应12分钟；反应结束后立即取出， 放入100°C水浴中保持5分钟，使酶失活；冷水冷却，测定水解液中可溶性氮含量达到19mg/ ml，冷冻干燥得到花生活性肽。实施例2取5克蛋白质含量在70%以上的花生分离蛋白粉，溶解入盛有50克蒸馏水的三角瓶中，放入90°C恒温水浴中保持20分钟，使花生分离蛋白钝化；冷却至室温，加入混合蛋白酶，所述混合蛋白酶包含6072u/g的碱性蛋白酶、6001u/g的中性蛋白酶和3690u/g风味蛋白酶；在60°C的恒温水浴振荡器中反应15分钟；反应结束后立即取出，放入100°C水浴中保持5分钟，使酶失活；冷水冷却，测定水解液中可溶性氮含量达到20mg/ml，冷冻干燥得到花生活性肽。
权利要求
1.一种混合酶酶解制备花生蛋白活性肽的方法，其特征在于步骤如下1、蛋白钝化， 取花生分离蛋白粉加入蒸馏水，使之溶解后，放入80 90°C恒温水浴中保持20分钟，使花生分离蛋白钝化；2、酶解，冷却至室温，加入混合蛋白酶，所述混合蛋白酶包含碱性蛋白酶 37% 39%、中性蛋白酶37% 39%和风味蛋白酶22% M%，在50 60°C的恒温水浴振荡器中反应12 15分钟；3、酶灭活，反应结束后立即取出，放入100°C水浴中保持5分钟，使酶失活；4、得到活性肽，冷水冷却，测定水解液中可溶性氮含量，冷冻干燥得到花生蛋白活性肽。
2.根据权利要求1所述的混合酶酶解制备花生蛋白活性肽的方法，其特征在于所述花生分离蛋白粉和蒸馏水取用的质量比设置在1 8 1 11的范围内。
全文摘要
本发明公开了一种混合酶酶解制备花生蛋白活性肽的方法，通过蛋白钝化、酶解、酶灭活、得到活性肽四个步骤，利用包含碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的混合蛋白酶，使花生蛋白活性肽的制备时间大大缩短，制备时间由传统的6～13小时缩短到40分钟以下，花生蛋白活性肽得率从传统的70％以下提高到75％～95％。
文档编号C12P21/06GK102242175SQ20111010583
公开日2011年11月16日 申请日期2011年4月27日 优先权日2011年4月27日
发明者于丽娜, 孙杰, 张会翠, 张初署, 朱凤, 杨庆利, 毕杰, 高俊安 申请人:山东省花生研究所