专利名称：一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法
技术领域：
本发明涉及一种重金属的控制方法，尤其涉及一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法，属于生物工程技术领域。
背景技术：
雨生红球藻(Haematococcuspluvialis)属于绿藻门(Chiorophata),绿藻纲(Chiorophyceae),团藻目(Volvocales),红球藻科(Haematococcaceae),红球藻属 (Haematococcus)。在特定生态环境中能形成厚壁孢子,积累大量的奸青素,是自然界中最能够大量合成和积累虾青素的生物，也是自然界中天然虾青素含量最高的生物。虾青素是一种生物抗氧化剂，具有极强的去除自由基的能力，保护细胞和组织免受脂质氧化和过氧化的损伤，在人类功能食品、药品和珍贵水产品养殖方面具有广阔的应用前景。大规模养殖雨生红球藻生产天然奸青素(Astaxanthin)是国际上近年来兴起的微藻生物技术产业。由于受培养条件及雨生红球藻的生理及生长特性等因素的影响，在规模化养殖雨生红球藻过程中，将会富集一定的重金属。重金属在人体内超过一定浓度后将会对人体产生毒害作用， 它可以导致人体致癌、慢性中毒、致突变、致畸形。因此，控制雨生红球藻产品的重金属含量，已成为雨生红球藻规模化养殖过程中必须解决的问题。目前暂未发现相关的技术报道。
发明内容
因此，本发明的目的是针对目前对雨生红球藻规模化养殖过程中重金属控制的不足，提供一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法，以使雨生红球藻产品的重金属浓度得到有效地控制，能够更好地满足人们使用。针对上述目的，本发明的技术方案如下本发明提供一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法，包括以下步骤I)将雨生红球藻泥与清洗剂按I : I I : 8的质量体积比混合为混合物；2)将步骤I)中所得混合物置于摇床上，清洗I 15h ;3)将步骤2)中清洗后的混合物离心，去除上清，收集藻泥；4)再将步骤3)收集的藻泥用水洗2 3次；5)将步骤4)中清洗后的藻泥离心，收集藻泥；6)再将步骤5)中收集的藻泥烘干，粉碎为雨生红球藻藻粉，检测制得的雨生红球藻藻粉中Pb、Cd含量。优选地，在步骤I)中，将所述雨生红球藻泥与清洗剂按I : 4的质量体积比混合。优选地，在步骤I)中，所述清洗剂为HCl或HNO3,更优选地，所述HCl或HNO3为体积比为O. 25% 4%的HCl或HNO3,最优选地，所述HCl或HNO3为体积比为I %的HCl或 HNO3。优选地,在步骤2)中，清洗于3000r/min 4000r/min转速下进行。优选地,在步骤2)中，所述清洗于3500r/min转速下进行。
优选地，在步骤4)中，用水清洗的具体步骤为将雨生红球藻泥与水按I : 4的质量体积比混合为混合物，所述混合物经3500r/min转速离心，去除上清液，收集藻泥。优选地，在步骤6)中，通过石墨炉原子吸收光谱法检测。优选地，在步骤6)中，所述雨生红球藻藻粉中Pb的含量为O. 98 I. 86mg/kg，所述雨生红球藻藻粉中Cd的含量为O. 01 O. 08mg/kgo优选地，在步骤6)中，所述雨生红球藻藻粉中Pb的含量为I. 46mg/kg，所述雨生红球藻藻粉中CM的含量为O. 04mg/kg。本发明的方法简单，易于操作，没有副作用；并且将其应用于实际雨生红球藻粉的培养，可将雨生红球藻粉Pb含量控制在2. Omg/Kg以下，Cd含量控制在O. lmg/Kg以下；采用本发明的方法生产的雨生红球藻粉，经分光光度法检测，未发现虾青素含量有明显降低情况；经比较分光光度法及HPLC方法所检测虾青素含量，未发现虾青素含量有明显差异；经 HPLC方法检测比较虾青素结构变化，从检测图谱看顺反式虾青素与正常生产藻粉比较， 结构均无明显变化。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图I为常规方法获得的雨生红球藻中顺反式虾青素检测结果；图2为本发明所述的方法获得的雨生红球藻中顺反式虾青素检测结果。
具体实施例方式除非特别指明，以下实施例中的雨生红球藻藻粉均通过石墨炉原子吸收光谱法检测Pb、Cd含量，该方法参见中国药典2010版第一部附录IXB铅、镉、砷、汞、铜测定方法。除非特别指明，以下实施例中分光光度法参见Spectrophotometric andHPLC Analysis Method for Determinig Astaxanthin Content in AstaREAL _PZAF, FUJI chemical industry CO.，LTD,V4.APR28. 2009。实施例I试验设置表I用于试验的各参数
权利要求
1.一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法，包括以下步骤1)将雨生红球藻泥与清洗剂按I: I I : 8的质量体积比混合为混合物；2)将步骤I)中所得混合物置于摇床上，清洗I 15h;3)将步骤2)中清洗后的混合物离心，去除上清，收集藻泥；4)再将步骤3)收集的藻泥用水洗2 3次；5)将步骤4)中清洗后的藻泥离心，收集藻泥；6)再将步骤5)中收集的藻泥烘干，粉碎为雨生红球藻粉，检测所述雨生红球藻粉中 Pb、Cd含量。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，在步骤I)中，将所述雨生红球藻泥与清洗剂按I : 4的质量体积比混合。
3.根据权利要求I或2所述的方法，其特征在于，在步骤I)中，所述清洗剂为HCl或 HNO3,优选地，所述HCl或HNO3为体积比为O. 25 % 4%的HCl或HNO3,更优选地，所述HCl 或HNO3为体积比为I %的HCl或HNO3。
4.根据权利要求I至3中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤2)中，所述清洗于 3000r/min-4000r/min 转速下进行。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在步骤2)中,所述清洗于3500r/min转速下进行。
6.根据权利要求I至5中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤4)中，用水清洗的具体步骤为将雨生红球藻泥与水按I : 4的质量体积比混合为混合物，所述混合物经 3500r/min转速离心,去除上清液,收集藻泥。
7.根据权利要求I至6中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤6)中，通过石墨炉原子吸收光谱法检测。
8.根据权利要求I至7中任一项所述的方法，其特征在于，所述雨生红球藻粉中Pb的含量为O. 98 I. 86mg/kg，所述雨生红球藻粉中Cd的含量为O. 01 O. 08mg/kg。
9.根据权利要求I至8中任一项所述的方法，其特征在于，所述雨生红球藻粉中Pb的含量为I. 46mg/kg,所述雨生红球藻粉中Cd的含量为O. 04mg/kg。
全文摘要
本发明提供一种雨生红球藻养殖过程中重金属的控制方法，包括以下步骤1)将雨生红球藻泥与清洗剂按1∶1～1∶8的质量体积比混合为混合物；2)将步骤1)中所得混合物置于摇床上，清洗1-15h；3)将步骤2)中清洗后的混合物离心，去除上清，收集藻泥；4)再将步骤3)收集的藻泥用水洗2～3次；5)将步骤4)中清洗后的藻泥离心，收集藻泥；6)再将步骤5)中收集的藻泥烘干粉碎，检测其Pb、Cd含量；本发明的方法应用于雨生红球藻粉的生产，可将雨生红球藻粉Pb含量控制在2.0mg/Kg以下，Cd含量控制在0.1mg/Kg以下；经分光光度法检测虾青素含量未受明显影响，经HPLC检测，顺反式虾青素结构均无明显变化。
文档编号C12Q3/00GK102586490SQ201210053019
公开日2012年7月18日 申请日期2012年3月2日 优先权日2012年3月2日
发明者张瑶, 杜伟春, 陈建荣, 鸭乔 申请人:云南绿A生物工程有限公司