专利名称：一种改进的酶法制备阿莫西林的方法
技术领域：
本发明涉及一种阿莫西林的制备方法，具体涉及一种改进的酶法制备阿莫西林的方法。
背景技术：
阿莫西林，化学名为(2S，5R，6R)-3，3-二甲基-6-[(R)-(-)-2-氨基-2-(4-羟基氮基)乙酸氨基]-7-氧代-4-硫杂-I-氮杂双环[3, 2,0]庚烧-2-甲酸二水合物,它是一种常用的青霉素类广谱β_内酰胺类抗生素。阿莫西林杀菌作用、穿透细胞壁的能力很强，是目前应用较为广泛的口服青霉素之一。阿莫西林的制备有化学合成法和酶法制备法，申请号为CN00100579.0、CN02100123. 5、CN200410043624. 8 和 CN201110162540. 6 的发明专利申请公开了阿莫西林 的化学合成方法。化学合成法相对来说，合成路线长(例如，对羟基苯甘氨酸邓钾盐与特戊酰氯混合后经混酐、缩合、水解、结晶、过滤洗涤、干燥等工序)，且生产过程用到大量的溶媒，例如特戊酰氯、吡啶、三乙胺、二氯甲烷等毒性较大的物质，不仅对操作人员毒害大，对环境也造成较大污染；而且化学法合成的阿莫西林具有晶型细小、流动性差、松密度小、分装困难的缺陷。相对于化学合成法，酶法制备阿莫西林的工艺相对流程较短(如对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐与6-ΑΡΑ混合后，加酶催化即得到阿莫西林)，工艺简单，杂质的带入及产生较少，且制备过程中无溶媒及有毒害的试剂的特点；而且酶法所得产品的晶型较大、完整且规贝U，流动性好，操作时粉尘少、松密度大、分装收率高，有利于制剂的生产。其中、GoncalvesL R B, Giordan R L C, Giordano R C. Mathematical modelingof batch and semibatch reactors for the enzymic synthesis of amoxicillin[J].Proc Biochem, 2005,40 (I) :247-256);酶法制备阿莫西林的工艺优化研究(中国抗生素杂志2011年I月第36卷第I期第44-47页);酶法阿莫西林质量研究(河北化工，2008年4月第31卷第4期30-31页)分别介绍了酶法制备阿莫西林的方法，并将所获得的阿莫西林产品与化学法获得的产品进行了质量对比研究。从上述公开的内容可以看出，化学合成法获得的阿莫西林产品中，阿莫西林含量的最高为99. 37%、总杂含量最低为0. 77%、单杂含量最低为0. 17% ;而上述酶法获得的阿莫西林产品中，阿莫西林含量的最高为99. 40%、总杂含量最低为0. 61 %、单杂含量最低为0.21% ;无论从产品的含量、总杂、单杂含量上，目前酶法制备工艺制得的阿莫西林的产品质量与化学合成制得的产品质量相当。然而对于药品而言，产品的质量直接关系到患者的用药安全，国家一直倡导提高药品的质量，确保用药安全，而提高药品的质量也一直是本领域技术人员不断追求的目标。因此，有必要进一步改进酶法制备阿莫西林的工艺，以大幅地提高阿莫西林的产品质量
发明内容
针对以上技术缺陷，本发明提供了一种改进的酶法制备阿莫西林的方法。所述方法包括以下步骤I)在10°C 20°C下，用pH值7. O 8. O的水或/和氨水溶液溶解6-APA，加入对
羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐和青霉素G酰基转移酶；2)将步骤I)所得溶液用氨水调pH值至6. O 6. 5、在21 °C 30°C下进行反应直至6-APA的残留量低于5mg/ml ;得含有阿莫西林产物的溶液；3)将含阿莫西林产物的溶液分离出青霉素G酰基转移酶，用盐酸调pH值到O. 5
2.O以至溶液澄清；然后加入用氨水溶液调节pH值至5. 5 6. 5，并于O 5°C下结晶，即得。本发明的所述步骤I)中，作为实施方式之一，所述pH值7. O 8. O水或氨水溶液，pH值范围包括但不限于7. O 7. 9,7. O 7. 8,7. O 7. 7,7. O 7. 6,7. O 7. 5,7. O 7. 4,7. O 7. 3,7. O 7. 2 ;7. I 8. 0,7. I 7. 9,7. I 7. 8,7. I 7. 7,7. I 7. 6,7. I 7. 5,7. I 7. 4、7. I 7. 3,7. I 7. 2 ;7. 2 8. 0,7. 2 7. 9,7. 2 7. 8,7. 2 7. 7,7. 2 7. 6,7. 2 7. 5,7. 2 7. 4、
7.2 7. 3 ;7. 3 8. 0,7. 3 7. 9,7. 3 7. 8,7. 3 7. 7,7. 3 7. 6,7. 3 7. 5,7. 3 7. 4 ;7. 4 8. 0,7. 4 7. 9,7. 4 7. 8,7. 4 7. 7,7. 4 7. 6,7. 4 7. 5 ;7. 5 8. 0,7. 5 7. 9,7. 5 7. 8,7. 5 7. 7,7. 5 7. 6 ;7. 6 8. 0、7· 6 7. 9、7· 6 7. 8、7· 6 7. 7 ;7. 7 8. 0、7· 7 7. 9、7· 7 7. 8 ;7. 8 8. 0、7· 8 7. 9 ;或7. 9 8. O ;同样pH值可以为 7. 0,7. 1,7. 2,7. 3,7. 4,7. 5,7. 6,7. 7,7. 8、7. 9 或8. O
的水或氨水溶液。作为本发明的实施方式之一，所述氨水溶液进一步优选为pH值7. 5±0. I氨水溶液；所述PH值7. 5±0. I氨水溶液可以采用本领域常规的方法进行制备；既可以采用配制好的pH值7. 5 ± O. I的氨水溶液直接溶解6-APA，也可以先用水溶解6-APA，然后加入一定浓度的氨水调节pH值至7. 5±0. I ;其中所述氨水的浓度可以是本领域常规的浓度，本发明优选为3mol/L浓度的氨水溶液；本发明步骤I)中，更进一步优选为先用适量的水溶解6-APA，然后用3mol/L浓度的氨水调节PH值至7.5±0. I ;再加入对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐和青霉素G酰基转移酶；作为本发明的实施方式之一，本发明所述步骤I)中10°C 20°C温度范围包括但不限于11°C 20°C、12°C 20°C、13°C 20°C、14°C 20°C、15°C 20°C、16°C 20°C、17V 20°C、18°C 20°C、19°C 20°C ；1(TC 19°C、irC 19 、12 19 、13 19 、14 19 、15 19°C、16。。 19。。、17。。 19。。、18。。 19。。；10°C 18°c、irc 18°C、12°C 18°C、13°C 18°C、14°C 18°C、15°C 18°C、16°C 18°C、17°C 18°C ；
1(TC 17°C、irC 17°C、12°C 17°C、13°C 17°C、14°C 17°C、15°C 17°C、16。。 17。。；10°C 16°C、11°C 16°C、12°C 16°C、13°C 16°C、14°C 16°C、15°C 16°C ；10°C 15°C、11°C 15°C、12°C 15°C、13°C 15°C、14°C 15°C ；1(TC 14°C、、11°C 14°C、12°C 14°C、13°C 14°C ；10°C 13°C、11°C 13°C、12°C 13°C ；1(TC 12°C、或 ire 12°C ；也可以是在10°C、11°C、12°C、13°C、14°C、15°C、16°C、17°C、18°C、19°C或 20°C ;本发明进一步优选为14°C 16°C，最佳为15°C ；作为本发明优选的实施方式之一，所述步骤I)中，在14°C 16°C、优选15°C，用水溶解6-APA,并用3. Omol/L的氨水调pH值至7. 5±0. I,然后加入对轻基苯甘氨酸甲酯盐酸
盐和青霉素G酰基转移酶。作为本发明实施方式之一，所述步骤I)中，6-APA与对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐的重比为I : I. 3 I. 6，优选I. 3 1.4;作为本发明实施方式之一，所述步骤I)中，青霉素G酰基转移酶的用量为2. 0-2. 5UK/L ；作为实施方式之一，本发明的所述6-APA、D-对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐、青霉素G酰基转移酶和/或水均为本领域常规的原料，符合本领域常规的质量标准要求，优选符合如下标准的、任意来源(市上购买或制备)的原料或更高标准的原料)
权利要求
1.一种酶法制备阿莫西林的方法，所述方法包括 1)在10°C 20°C下，用pH值7.O 8. O的水或/和氨水溶液溶解6-APA’加入对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐和青霉素G酰基转移酶； 2)将步骤I)所得溶液用氨水调pH值至6.O 6.5、在21°C 30°C下进行反应，直至6-APA的残留量低于5mg/ml ;得含有阿莫西林产物的溶液； 3)将含阿莫西林产物的溶液分离出青霉素G酰基转移酶，用盐酸调pH值到O.5 2. O，以至溶液澄清；然后加入氨水溶液，调节PH值至5. 5 6. 5，并于0°C 5°C下结晶，即得。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，所述步骤I)中，6-APA与对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐的重量比为I : I. 3 I. 6，优选I. 3 1.4;和/或青霉素G酰基转移酶的用量为 2. 0-2. 5UK/L。
3.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，所述步骤I)中，在14°C 16°C、优选15°C，用水溶解6-APA，并用氨水调pH值至7. 5±O. I。
4.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，所述步骤2)中，在21°C 24°C，优选22°C 23 °C下进行反应。
5.根据权利要求I所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中还包括，析出晶体后，先后分别用水和/或80% 95%的甲醇、乙醇或异丙醇、或90-98%的丙酮的有机溶剂洗涤，干燥，即得。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中，水或有机溶剂与阿莫西林的重量比为2 3 I。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中，干燥条件为-0. 06Mpa -O. 09Mpa、50°C 60°C下干燥。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述步骤I)或步骤2)中氨水溶液的浓度为3mol/L ;和/或步骤3)中氨水溶液的浓度为6mol/L。
9.根据权利要求1-8任一所述的方法，其特征在于，所述方法包括 1)6-APA的投料比及溶解 在14°C 16°C条件下将6-APA加入水中，用3mol/L氨水调节pH值7. 5±0. 1，然后加入D-对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐和青霉素G酰基转移酶，其中，6-APA与D-对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐的重量比I : I. 3 I. 4，青霉素G酰基转移酶的量为2. 0KU/L 2. 5KU/L ； 2)反应过程 用3mol/L的氨水调节步骤I)所得溶液的pH值在6. O 6. 5之间，在22°C -23°C下进行反应，用HPLC检测6-APA的转化率，当6-APA的含量低于5mg/ml时，结束反应，得到含阿莫西林产物的溶液； 3)分离、精制 过滤步骤2)所得溶液，以除去青霉素G酰基转移酶，然后加入与阿莫西林的重量比为2/20 3/20的水，用6mol/L盐酸调节pH值O. 5 2. 0，至溶液澄清透明，用O. 22微米滤芯过滤； 然后用6mol/L的氨水调节pH值为5. 5 6. 5之间，降温O 5°C，养晶； 过滤，晶体先后分别用水和/或80% 95%浓度的甲醇、乙醇或异丙醇，或90 98%浓度的丙酮有机溶剂洗涤，其中，水或有机溶剂与阿莫西林重量比为2 3 I。然后在50°C 60°C，真空度-O. 06Mpa -O. 09Mpa下干燥，直至水份低于14. 5%以下，即得。
10.一种权利要求1-9任一所述的方法获得的阿莫西林产品，其特征在于，所述产品的阿莫西林含量大于或等于100. 7%;总杂的含量小于或等于为O. 15%;单杂的含量小于或等于 O. 10%。
全文摘要
本发明涉及制药领域，提供了一种改进的酶法制备阿莫西林的方法以及该方法获得的产品，其包括1)在10℃～20℃下，用pH值7.0～8.0的水或/和氨水溶液溶解6-APA，加入对羟基苯甘氨酸甲酯盐酸盐和青霉素G酰基转移酶；2)将步骤1)所得溶液调pH值至6.0～6.5、在21℃～30℃下进行反应，直至6-APA的残留量低于5mg/ml；得含有阿莫西林产物的溶液；3)将含阿莫西林产物的溶液分离出青霉素G酰基转移酶，用盐酸调至溶液澄清；然后加入氨水溶液，调节pH值为5.5～6.5，0～5℃下结晶，即得。本发明大幅地提升了阿莫西林产品的质量，进一步提升了阿莫西林产品的用药安全。
文档编号C12P37/04GK102660621SQ201210135310
公开日2012年9月12日 申请日期2012年5月4日 优先权日2012年5月4日
发明者刘红池 申请人:联邦制药(内蒙古)有限公司