一种生物酶法制备肝素钠的方法
【专利摘要】本发明公开了一种生物酶法制备肝素钠的方法，通过将猪肺粉碎、酶解后，进行去蛋白处理，在进行氧化脱色后利用树脂交换得肝素钠溶液，将肝素钠溶液实施沉淀、脱水、干燥得到肝素钠精品。本发明原料来源广泛，通用性强，活性收率高，工艺品质稳定，生产成本低廉，实现肝素钠的低投入、低成本、高回收率。
【专利说明】一种生物酶法制备肝素钠的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及粘多糖生物制药领域，尤其涉及一种生物酶法制备肝素钠的方法。
【背景技术】
[0002]肝素钠(Heparin Sodium)肝素钠是粘多糖硫酸酯类抗凝血药。肝素钠是由猪或牛的粘膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属粘多糖类物质。近年来研究证明肝素钠还有降血脂作用。目前市面上肝素钠提取工艺种类繁多，不过多数采用猪肠来制备，但猪肺中肝素含量大大超过了猪肠，现需要提供一种以猪肺为原料生产成本低廉，工艺简单的制备肝素钠的方法。
【发明内容】
[0003]基本【背景技术】存在的技术问题，本发明提出了一种制备肝素钠的方法，原料来源广泛，通用性强，活性收率高，工艺品质稳定，生产成本低廉，实现肝素钠的低投入、低成本、高回收率。
[0004]本发明提出的一种生物酶法制备肝素钠的方法，包括如下步骤:
[0005]S1、将猪肺清洗，去除内外污物和脂肪后，绞碎成糜状，并在充分搅拌下，加入水搅拌得到猪肺混合液，其中猪肺和水的质量比为1: 1-2;
[0006]S2、向猪肺混合液中加入0.2-0.5mol/L的氢氧化钠溶液使PH达到8_9，加入以猪肺混合液为基准0.8-1.0被％猪胰中提取的胰蛋白酶，在室温下以85-95rpm的搅拌速度搅拌70-75min得到一次酶解混合液，然后将一次酶解混合液以2_3°C /min的升温速率升至35-39°C并以30-40rpm的搅拌速度搅拌240_300min得到二次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为7.0-8.5 ；
[0007] S3、将二次酶解混合液以1-2°C /min的升温速率升至61-65°C并以30_40rpm的搅拌速度搅拌150-180min得到三次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为8.2-8.7 ；
[0008]S4、向三次酶解混合液加入0.1-0.2mol/L的盐酸，使液体PH值为4.3-5.4，将温度升至82-84°C并以70-80rpm的搅拌速度搅拌7_12min，再加入以三次酶解混合液为基准2-4wt%硫酸钠晶体后，维持温度为84-85°C并以65_75rpm的搅拌速度搅拌10_15min得到酶失活混合液；
[0009]S5、将酶失活混合液在75_80°C时进行一次过滤得到一次滤液，待一次滤液冷却至36°C时，用0.2-0.5mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9_10进行二次过滤后，再滴加
0.l-ο.2mol/L的盐酸使PH值为8.2-8.7得到二次滤液；
[0010]S6、将二次滤液冷却至室温，以50-60rpm的搅拌速度搅拌5_10min后静置30-40min以进行分层，吸取分层后的下层溶液，将下层溶液升温至55_65°C，加入以下层溶液为基准3.5-4wt% D217树脂，以45_50rpm的搅拌速度搅拌3_3.6h后静置l_2h得到含吸附肝素钠成分D217树脂混合液；
[0011]S7、将含吸附肝素钠成分D217树脂混合液过滤后得到吸附肝素钠成分的D217树月旨，将吸附肝素钠成分的D217树脂充分清洗后，用以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准120-140Wt%硫酸钠溶液进行一次洗脱得到一次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为0.9-1.1mol/L,洗脱时间为4-6h，再以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准40-50wt %进行二次洗脱得到二次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为0.9-1.lmol/L，洗脱时间为l_2h，将一次洗脱液和二次洗脱液混合，用0.02-0.05mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9.5-9.7，以20_25rpm的搅拌速度搅拌2-4h后静置5-6h，分层后吸取上层溶液得到物料A ；
[0012]S8、向物料A中滴加0.1-0.2mol/L的盐酸使PH值为6.0-6.5，加入以物料A为基准120-130wt%乙醇搅拌20-30min，乙醇体积百分比为95%，静置7_8h进行分层，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B ;
[0013]S9、将物料B用浓度为0.2-0.4mol/L的硫酸钠溶液完全溶解，加入0.5-0.7mol/L氢氧化钠溶液调节PH至10.5-11.5，加入以物料B为基准0.1-0.2wt%双氧水，将温度维持在24-260C 10-15h，过滤后加入0.5-0.7mol/L氢氧化钠溶液调节PH至10.5-11.5，以30-40rpm的搅拌速度搅拌0.5-0.6h后加入以物料B为基准0.2-0.3wt%双氧水，将温度维持在23-24°C，保温14-15h，过滤后滴加0.03-0.07mol/L的盐酸调节PH为6.7-7.2，得到二次氧化液，其中双氧水浓度为3-4% ；
[0014]S10、向二次氧化液加入以二次氧化液为基准180_200wt%，乙醇的体积百分比为35%，在3-4 °C沉淀36-40h，过滤后收集一次过滤物，加入以二次氧化液为基准
0.2-0.5wt%硫酸钠溶液溶解，硫酸钠溶液的浓度为8-10%，再加入以二次氧化液为基准120-150wt%乙醇进行沉淀，乙醇的体积百分比为95%，过滤后收集二次过滤物，过滤物脱水、研细后，在35-45°C下真空烘干，即得肝素钠精品。
[0015]优选的，SlO中 真空烘干为红外真空烘干。
[0016]优选的，S9中，将物料B用浓度为0.3mol/L的硫酸钠溶液完全溶解，加入0.6mol/L氢氧化钠溶液调节PH至11，加入以物料B为基准0.15wt %双氧水，将温度维持在250C 13h，过滤后加入0.6mol/L氢氧化钠溶液调节PH至11，以35rpm的搅拌速度搅拌0.55h后加入以物料B为基准0.23wt%双氧水，将温度维持在23.5°C，保温14.5h，过滤后滴加
0.05mol/L的盐酸调节PH为7，得到二次氧化液，其中双氧水浓度为35%。
[0017]本发明通过采用对猪肺进行酶解生产，使原料来源广泛，通用性强，再通过氧化脱色后利用树脂交换得肝素钠溶液，其中采用D217树脂，可有效吸附高分子有机物，吸附稳定，不易破碎，降低生产成本，再将肝素钠溶液实施沉淀、脱水、干燥得到肝素钠精品，活性收率高，工艺品质稳定，生产成本低廉，实现肝素钠的低投入、低成本、高回收率。
【具体实施方式】
[0018]下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
[0019]实施例1
[0020]本发明提出的一种生物酶法制备肝素钠的方法，包括如下步骤:
[0021]S1、将猪肺清洗，去除内外污物和脂肪后，绞碎成糜状，并在充分搅拌下，加入水搅拌得到猪肺混合液，其中猪肺和水的质量比为1: 2;
[0022]S2、向猪肺混合液中加入0.2mol/L的氢氧化钠溶液使PH达到9，加入以猪肺混合液为基准0.8wt %猪胰中提取的胰蛋白酶，在室温下以95rpm的搅拌速度搅拌70min得到一次酶解混合液，然后将一次酶解混合液以3°C /min的升温速率升至35°C并以40rpm的搅拌速度搅拌240min得到二次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为8.5 ；
[0023] S3、将二次酶解混合液以1°C /min的升温速率升至65°C并以30rpm的搅拌速度搅拌180min得到三次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为8.2 ；
[0024]S4、向三次酶解混合液加入0.2mol/L的盐酸，使液体PH值为4.3，将温度升至84°C并以70rpm的搅拌速度搅拌12min，再加入以三次酶解混合液为基准2wt%硫酸钠晶体后，维持温度为85°C并以65rpm的搅拌速度搅拌15min得到酶失活混合液；
[0025]S5、将酶失活混合液在75°C时进行一次过滤得到一次滤液，待一次滤液冷却至36°C时，用0.5mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9进行二次过滤后，再滴加0.2mol/L的盐酸使PH值为8.2得到二次滤液；
[0026]S6、将二次滤液冷却至室温，以60rpm的搅拌速度搅拌5min后静置40min以进行分层，吸取分层后的下层溶液，将下层溶液升温至55°C，加入以下层溶液为基准4wt% D217树脂，以45rpm的搅拌速度搅拌3.6h后静置Ih得到含吸附肝素钠成分D217树脂混合液；
[0027]S7、将含吸附肝素钠成分D217树脂混合液过滤后得到吸附肝素钠成分的D217树月旨，将吸附肝素钠成分的D217树脂充分清洗后，用以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准140wt%硫酸钠溶液进行一次洗脱得到一次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为0.9mol/L，洗脱时间为6h，再以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准40wt%进行二次洗脱得到二次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为1.lmol/L，洗脱时间为lh，将一次洗脱液和二次洗脱液混合，用
0.05mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9.5，以25rpm的搅拌速度搅拌2h后静置6h，分层后吸取上层溶液得到物料A ;
[0028]S8、向物料A中滴加0.lmol/L的盐酸使PH值为6.5，加入以物料A为基准120wt%乙醇搅拌30min，乙醇体积百分比为95%，静置7h进行分层，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B ；
[0029]S9、将物料B用浓度为0.4mol/L的硫酸钠溶液完全溶解，加入0.5mol/L氢氧化钠溶液调节PH至11.5，加入以物料B为基准0.1wt %双氧水，将温度维持在26°C 10h，过滤后加入0.7mol/L氢氧化钠溶液调节PH至10.5，以40rpm的搅拌速度搅拌0.5h后加入以物料B为基准0.3wt%双氧水，将温度维持在23°C，保温15h，过滤后滴加0.03mol/L的盐酸调节PH为7.2，得到二次氧化液，其中双氧水浓度为3% ；
[0030]S10、向二次氧化液加入以二次氧化液为基准200wt%，乙醇的体积百分比为35%，在3°C沉淀40h，过滤后收集一次过滤物，加入以二次氧化液为基准0.2wt%硫酸钠溶液溶解，硫酸钠溶液的浓度为10%，再加入以二次氧化液为基准120wt%乙醇进行沉淀，乙醇的体积百分比为95 %，过滤后收集二次过滤物，过滤物脱水、研细后，在45°C下真空烘干，即得肝素钠精品。
[0031]实施例2
[0032]本发明提出的一种生物酶法制备肝素钠的方法，包括如下步骤:
[0033]S1、将猪肺清洗，去除内外污物和脂肪后，绞碎成糜状，并在充分搅拌下，加入水搅拌得到猪肺混合液，其中猪肺和水的质量比为1:1;
[0034]S2、向猪肺混合液中加入0.5mol/L的氢氧化钠溶液使PH达到8，加入以猪肺混合液为基准Iwt %猪胰中提取的胰蛋白酶，在室温下以85rpm的搅拌速度搅拌75min得到一次酶解混合液，然后将一次酶解混合液以2°C /min的升温速率升至39°C并以30rpm的搅拌速度搅拌300min得到二次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为7 ;
[0035]S3、将二次酶解混合液以2V /min的升温速率升至61°C并以40rpm的搅拌速度搅拌150min得到三次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为8.7 ；
[0036]S4、向三次酶解混合液加入0.lmol/L的盐酸，使液体PH值为5.4，将温度升至82°C并以80rpm的搅拌速度搅拌7min，再加入以三次酶解混合液为基准4wt%硫酸钠晶体后，维持温度为84°C并以75rpm的搅拌速度搅拌IOmin得到酶失活混合液；[0037]S5、将酶失活混合液在80°C时进行一次过滤得到一次滤液，待一次滤液冷却至36°C时，用0.2mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为10进行二次过滤后，再滴加0.lmol/L的盐酸使PH值为8.7得到二次滤液；
[0038]S6、将二次滤液冷却至室温，以50rpm的搅拌速度搅拌IOmin后静置30min以进行分层，吸取分层后的下层溶液，将下层溶液升温至65°C，加入以下层溶液为基准3.5wt%D217树脂，以50rpm的搅拌速度搅拌3h后静置2h得到含吸附肝素钠成分D217树脂混合液；
[0039]S7、将含吸附肝素钠成分D217树脂混合液过滤后得到吸附肝素钠成分的D217树月旨，将吸附肝素钠成分的D217树脂充分清洗后，用以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准120wt%硫酸钠溶液进行一次洗脱得到一次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为1.lmol/L，洗脱时间为4h，再以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准50wt%进行二次洗脱得到二次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为0.9mol/L，洗脱时间为2h，将一次洗脱液和二次洗脱液混合，用
0.02mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9.7，以20rpm的搅拌速度搅拌4h后静置5h，分层后吸取上层溶液得到物料A ;
[0040]S8、向物料A中滴加0.2mol/L的盐酸使PH值为6，加入以物料A为基准130wt%乙醇搅拌20min，乙醇体积百分比为95%，静置8h进行分层，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B ；
[0041]S9、将物料B用浓度为0.2mol/L的硫酸钠溶液完全溶解，加入0.7mol/L氢氧化钠溶液调节PH至10.5，加入以物料B为基准0.2wt%双氧水，将温度维持在24°C 15h，过滤后加入0.5mol/L氢氧化钠溶液调节PH至11.5，以30rpm的搅拌速度搅拌0.6h后加入以物料B为基准0.2wt%双氧水，将温度维持在24°C，保温14h，过滤后滴加0.07mol/L的盐酸调节PH为6.7，得到二次氧化液，其中双氧水浓度为4% ；
[0042]S10、向二次氧化液加入以二次氧化液为基准180wt%，乙醇的体积百分比为35 %，在4°C沉淀36h，过滤后收集一次过滤物，加入以二次氧化液为基准0.5wt %硫酸钠溶液溶解，硫酸钠溶液的浓度为8 %，再加入以二次氧化液为基准150wt%乙醇进行沉淀，乙醇的体积百分比为95 %，过滤后收集二次过滤物，过滤物脱水、研细后，在35°C下真空烘干，即得肝素钠精品。
[0043]实施例3
[0044]本发明提出的一种生物酶法制备肝素钠的方法，包括如下步骤:
[0045]S1、将猪肺清洗，去除内外污物和脂肪后，绞碎成糜状，并在充分搅拌下，加入水搅拌得到猪肺混合液，其中猪肺和水的质量比为1: 1.3;
[0046]S2、向猪肺混合液中加入0.4mol/L的氢氧化钠溶液使PH达到8.7，加入以猪肺混合液为基准0.9wt %猪胰中提取的胰蛋白酶，在室温下以90rpm的搅拌速度搅拌73min得到一次酶解混合液，然后将一次酶解混合液以2.2V /min的升温速率升至37°C并以34rpm的搅拌速度搅拌270min得到二次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为7.6 ；
[0047]S3、将二次酶解混合液以1.50C /min的升温速率升至63°C并以35rpm的搅拌速度搅拌170min得到三次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为8.5 ；
[0048]S4、向三次酶解混合液加入0.15mol/L的盐酸，使液体PH值为5，将温度升至83°C并以76rpm的搅拌速度搅拌IOmin,再加入以三次酶解混合液为基准3wt%硫酸钠晶体后，维持温度为84°C并以70rpm的搅拌速度搅拌13min得到酶失活混合液；
[0049]S5、将酶失活混合液在77°C时进行一次过滤得到一次滤液，待一次滤液冷却至36°C时，用0.3mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9.3进行二次过滤后，再滴加0.13mol/L的盐酸使PH值为8.5得到二次滤液；
[0050]S6、将二次滤液冷却至室温，以53rpm的搅拌速度搅拌7min后静置35min以进行分层，吸取分层后的下层溶液，将下层溶液升温至60°C，加入以下层溶液为基准3.7wt%D217树脂，以47rpm的搅拌速度搅拌3.3h后静置1.6h得到含吸附肝素钠成分D217树脂混合液；
[0051]S7、将含吸附肝素钠成分D217树脂混合液过滤后得到吸附肝素钠成分的D217树月旨，将吸附肝素钠成分的D217树脂充分清洗后，用以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准130wt%硫酸钠溶液进行一次洗脱得到一次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为lmol/L，洗脱时间为5h，再以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准45wt%进行二次洗脱得到二次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为lmol/L，洗脱时间为1.5h，将一次洗脱液和二次洗脱液混合，用0.03mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9.6，以23rpm的搅拌速度搅拌3h后静置5.6h，分层后吸取上层溶液得到物料A ;
[0052] S8、向物料A中滴加0.13mol/L的盐酸使PH值为6.3，加入以物料A为基准126wt%乙醇搅拌27min，乙醇体积百分比为95%，静置7.8h进行分层，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B ；
[0053]S9、将物料B用浓度为0.3mol/L的硫酸钠溶液完全溶解，加入0.6mol/L氢氧化钠溶液调节PH至11，加入以物料B为基准0.15wt%双氧水，将温度维持在25 V 13h，过滤后加入0.6mol/L氢氧化钠溶液调节PH至11，以35rpm的搅拌速度搅拌0.55h后加入以物料B为基准0.23wt%双氧水，将温度维持在23.4°C，保温14.5h，过滤后滴加0.05mol/L的盐酸调节PH为7，得到二次氧化液，其中双氧水浓度为3.5% ;
[0054]S10、向二次氧化液加入以二次氧化液为基准190wt%，乙醇的体积百分比为35%，在3°C沉淀38h，过滤后收集一次过滤物，加入以二次氧化液为基准0.3wt%硫酸钠溶液溶解，硫酸钠溶液的浓度为9 %，再加入以二次氧化液为基准140wt%乙醇进行沉淀，乙醇的体积百分比为95%，过滤后收集二次过滤物，过滤物脱水、研细后，在40°C下真空烘干，即得肝素钠精品。
[0055]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种生物酶法制备肝素钠的方法，其特征在于，包括如下步骤: S1、将猪肺清洗，去除内外污物和脂肪后，绞碎成糜状，并在充分搅拌下，加入水搅拌得到猪肺混合液，其中猪肺和水的质量比为1: 1-2; S2、向猪肺混合液中加入0.2-0.5mol/L的氢氧化钠溶液使PH达到8_9，加入以猪肺混合液为基准0.8-1.0被％猪胰中提取的胰蛋白酶，在室温下以85-95rpm的搅拌速度搅拌70-75min得到一次酶解混合液，然后将一次酶解混合液以2_3°C /min的升温速率升至.35-39°C并以30-40rpm的搅拌速度搅拌240_300min得到二次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为7.0-8.5 ； S3、将二次酶解混合液以1-2°C/min的升温速率升至61_65°C并以30_40rpm的搅拌速度搅拌150-180min得到三次酶解混合液，在搅拌过程中维持液体PH值为8.2-8.7 ； S4、向三次酶解混合液加入0.1-0.2mol/L的盐酸，使液体PH值为4.3-5.4，将温度升至..82-84°C并以70-80rpm的搅拌速度搅拌7_12min，再加入以三次酶解混合液为基准2_4wt%硫酸钠晶体后，维持温度为84-85°C并以65-75rpm的搅拌速度搅拌10_15min得到酶失活混合液； S5、将酶失活混合液在75-80°C时进行一次过滤得到一次滤液，待一次滤液冷却至.36 0C时，用0.2-0.5 mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9_10进行二次过滤后，再滴加.0.1-0.2mol/L的盐酸使PH值为8.2-8.7得到二次滤液； S6、将二次滤液冷却至室温，以50-60rpm的搅拌速度搅拌5_10min后静置30_40min以进行分层，吸取分层后的下层溶液，将下层溶液升温至55-65°C，加入以下层溶液为基准.3.5-4wt% D217树脂，以45_50rpm的搅拌速度搅拌3_3.6h后静置l_2h得到含吸附肝素钠成分D217树脂混合液； S7、将含吸附肝素钠成分D217树脂混合液过滤后得到吸附肝素钠成分的D217树月旨，将吸附肝素钠成分的D217树脂充分清洗后，用以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准.120-140Wt%硫酸钠溶液进行一次洗脱得到一次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为0.9-1.1mol/L,洗脱时间为4-6h，再以吸附肝素钠成分的D217树脂为基准40-50wt%进行二次洗脱得到二次洗脱液，硫酸钠溶液的浓度为0.9-1.lmol/L，洗脱时间为l_2h，将一次洗脱液和二次洗脱液混合，用0.02-0.05mol/L的氢氧化钠溶液调节PH值为9.5-9.7，以20_25rpm的搅拌速度搅拌2-4h后静置5-6h，分层后吸取上层溶液得到物料A ； S8、向物料A中滴加0.1-0.2mol/L的盐酸使PH值为6.0-6.5，加入以物料A为基准.120-130wt %乙醇搅拌20-30min，乙醇体积百分比为95 %，静置7_8h进行分层，再次吸取上次溶液，真空烘干得到物料B; S9、将物料B用浓度为0.2-0.4mol/L的硫酸钠溶液完全溶解，加入0.5-0.7mol/L氢氧化钠溶液调节PH至10.5-11.5，加入以物料B为基准0.1-0.2wt %双氧水，将温度维持在24-26°C 10-15h，过滤后加入0.5-0.7mol/L氢氧化钠溶液调节PH至10.5-11.5，以.30-40rpm的搅拌速度搅拌0.5-0.6h后加入以物料B为基准0.2-0.3wt%双氧水，将温度维持在23-24°C，保温14-15h，过滤后滴加0.03-0.07mol/L的盐酸调节PH为6.7-7.2，得到二次氧化液，其中双氧水浓度为3-4% ； S10、向二次氧化液加入以二次氧化液为基准180-200wt%，乙醇的体积百分比为35%，在3-4 °C沉淀36-40h，过滤后收集一次过滤物，加入以二次氧化液为基准.0.2-0.5wt%硫酸钠溶液溶解，硫酸钠溶液的浓度为8-10%，再加入以二次氧化液为基准.120-150wt%乙醇进行沉淀，乙醇的体积百分比为95%，过滤后收集二次过滤物，过滤物脱水、研细后，在35-45°C下真空烘干，即得肝素钠精品。
2.如权利要求1所述制备肝素钠的方法，其特征在于，SlO中真空烘干为红外真空烘干。
3.如权利要求1所述制备肝素钠的方法，其特征在于，S9中，将物料B用浓度为.0.3mol/L的硫酸钠溶液完全溶解，加入0.6mol/L氢氧化钠溶液调节PH至11，加入以物料B为基准0.15wt%双 氧水，将温度维持在25 V 13h，过滤后加入0.6mol/L氢氧化钠溶液调节PH至11，以35rpm的搅拌速度搅拌0.55h后加入以物料B为基准0.23wt%双氧水，将温度维持在23.50C，保温14.5h，过滤后滴加0.05mol/L的盐酸调节PH为7，得到二次氧化液，其中双氧水浓度为35%。
【文档编号】C08B37/10GK103980387SQ201410235764
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2014年5月26日 优先权日:2014年5月26日
【发明者】赵厚发, 徐宾朋, 郭庆 申请人:安徽科宝生物工程有限公司