一种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品及其制备方法，由以下成分按重量百分比组成：深海鱼皮胶原肽40％-70％，人参提取物2％-12％，蛹虫草提取物2％-12％，填充剂15％-40％。本发明的优点在于：制备的增强免疫功能的组合物将海洋多肽与传统中药材提取多糖结合，各组分相辅相成，突出增强免疫力功效，并且产品溶解性和稳定性好，口感佳，服用方便。
【专利说明】一种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及保健品及其制备方法【技术领域】，特别涉及一种增强免疫功能的鱼皮胶 原肽复方制品及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 目前普通及功能食品市场上开发出的多肽系列产品越来越多，而以人参提取物及 蛹虫草提取物为原料的产品多为保健食品或药品。将海洋鱼皮胶原肽与人参提取多糖及蛹 虫草提取多糖结合应用开发为功能食品的产品尚未见到报道。
[0003] 本发明主要原料来源特点为：胶原肽提取自深海鱼皮，绿色无污染；人参作为药 食同源的传统中药，功能性明确，适用人群广；蛹虫草作为传统名贵中药材料，同时又是食 品新原料，越来越多的应用于各种食品和保健食品中。
[0004] 由于未提取和加工的人参和蛹虫草，直接食用，其有效成分不能充分被人体吸收 及转化，因此，将蛹虫草及人参经深加工获得提取物，结合具有人体高吸收率的低分子胶原 肽，开发出一种能被人体有效吸收其有益成分、方便服用并获得较理想增强免疫力效果的 功能食品具有广阔的市场前景。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种以深海鱼皮胶原肽、人参提取物、蛹虫草提取物为主 要成分的用于增强免疫功能的复方制品及其制备方法。
[0006] 本发明采用的技术方案是：
[0007] -种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，由以下成分按重量百分比组成： 深海鱼皮胶原肽40 % -70%，人参提取物2 % -12%，蛹虫草提取物2 % -12%，填充剂 15% -40%。
[0008] 在上述方案的基础上，一种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，由以下成分按 重量百分比组成：深海鱼皮胶原肽55 %，人参提取物5 %，蛹虫草提取物7 %，填充剂33 %。
[0009] 在上述方案的基础上，所述填充剂为木糖醇、棉子糖、麦芽糊精、海藻糖、β-环糊 精和甘露醇中的一种或几种。
[0010] 本发明的优点在于：
[0011] 深海鱼胶原肽的制备方法，采用超声波震荡对鱼皮原料进行预处理，热力提取，复 合蛋白酶水解，生物传感器监控，一方面提高了胶原蛋白的抽提率，另一方面可获得特定功 能的肽段产品；人参多糖和蛹虫草多糖的制备，采用真空低温提取，微波干燥和热泵干燥技 术精制多糖提取物粉末，不仅节能省时，提高产品质量，还有效保护了多糖结构及其功能性 的完整性。
[0012] 采用特定工艺方法获得品质较高和功能明确的食品原料，采用本发明方法制备获 得的深海鱼胶原肽精制粉，溶解性较好，透明无色或微黄色，嗅觉上具有淡淡的海水鱼味， 味觉上接近无味，有效肽段含量达90%以上，分子量小，纯度高，动物及人体对其利用吸收 率较高，增强动物免疫力功能较突出；采用本发明方法制备获得人参根提取多糖粉末，复水 溶解性较好，可速溶，溶液呈透明棕黄色，其中，多糖含量可达50%以上，此工艺可提供较高 功能活性的人参多糖；采用此方法提取获得的蛹虫草多糖提取物中，多糖含量可达30%以 上，粉末提取物复水溶解性较好，可速溶，溶液呈透明浅棕黄色；本发明制备的增强免疫功 能的组合物将海洋多肽与传统中药材提取多糖结合，各组分相辅相成，突出增强免疫力功 效，并且产品溶解性和稳定性好，口感佳，服用方便。
【具体实施方式】
[0013] 实施例1
[0014] 一种深海鱼皮胶原肽的制备方法，具体步骤如下：
[0015] (1)原料预处理：将冷冻深海鳕鱼解冻，取其鱼皮，切成lcm*lcm片段，用水冲洗干 净，加入10倍量（w/w) 6 % NaCl浸泡8h，再用水清洗2次，加入10倍量（w/w) 0. 6 % NaOH浸 泡12h，用水清洗3次，去除残留蛋白等非鱼皮杂质；
[0016] (2)匀浆超声：将上述处理后小片段鱼皮，加入10倍量（w/w)0. 1% NaOH水溶 液，经打碎制成匀浆液，然后经超声波细胞破碎仪超声处理，使组织细胞充分破碎，然后用 0. 1 % HC1调整PH值至6. 5 ;超声波细胞破碎仪的工作功率500W，工作10s间隔25s，工作 80次；震荡匀浆在10°C以下低温冰水浴进行。此过程即可保持鱼皮蛋白活性物质生物特 性，又能很好的使鱼皮蛋白组织松弛，肽链展开。
[0017] (3)热力提取：将上述匀浆液加热到90°C，并不断搅拌保温抽提8h，离心过滤，残 渣再加入5倍体积水溶液，90°C保温抽提5h，离心过滤，合并两次加热抽提滤液；
[0018] (4)酶解：将上述溶液用0. 1 % NaOH调整PH值至6. 8,加热抽提水解液温度降至 37°C利用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶进行复合保温酶解20h，其中胰蛋白酶用量为鳕鱼皮重量 的2. 5%，木瓜蛋白酶的用量为鳕鱼皮重量的1. 5% ;
[0019] (5)灭酶超滤：酶解结束后,升温至90°C,保温5min灭酶,待酶解液冷却至室温，利 用超滤技术收集肽段分子量小于3000Da的滤液；
[0020] (6)干燥：将上述收集的滤液脱盐、浓缩至质量分数40%，喷雾干燥，制得低分子 量胶原蛋白肽精制粉。
[0021] 本发明原料鳕鱼鱼皮来源于北大西洋寒冷深海水域野生鳕鱼，经青岛水产市场获 得，采用此方法制备获得的深海鱼胶原蛋白肽精制粉，溶解性较好，透明无色或微黄色，嗅 觉上具有淡淡的海水鱼味，味觉上接近无味，有效肽段蛋白含量达95%，分子量小，纯度高， 动物及人体对其利用吸收率较高，增强动物免疫力功能较突出。
[0022] 实施例2
[0023] -种人参根多糖提取物的制备方法，具体步骤为：
[0024] (1)原料预处理：取人参根须，清洗去泥及其它杂质，自然晾干后打碎过50目筛， 得人参粗粉；
[0025] (2)低温浸泡：将上述人参粗粉，加入15倍量（w/w)水0_4°C浸泡14h ;
[0026] (3)真空低温浸提2次：将上述低温浸泡物料，第一次真空浸提10h，收集滤液，再 向药渣中加入10倍量（w/w)水，第二次真空提取5h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液，真 空环境为140mmHg，浸提温度30°C，浸提搅拌转速为90rpm ;
[0027] (4)过滤：将上述两次真空浸提滤液通过板框压滤，过200目滤布得滤液，滤液静 置2h无沉淀物；
[0028] (5)浓缩：在70°C以下真空浓缩，滤液浓缩至相对密度为1. 2 ;
[0029] (6)醇沉：浓缩液冷却至室温，在向浓缩液中缓慢加入3倍量（v/v) 95%乙醇，加入 乙醇时要充分搅拌，物料混合液中乙醇终浓度为75 %，静置10h，离心，收集静置后醇不溶 沉淀得人参多糖提取物；
[0030] (7)复溶脱醇精制：将上述醇不溶沉淀加等体积50°C热水溶解，搅拌，并在酒精回 收装置中蒸馏脱乙醇；
[0031] (8)再浓缩：将上述复溶脱醇溶液在70°C以下真空浓缩，滤液浓缩至含水量为 30%，得匀浆液；
[0032] (9)微波干燥：将上述浓缩匀浆液进行微波干燥，微波加热功率为0. 2w/g ;
[0033] (10)粉碎过筛：微波干燥后得块状固体提取物，经物理粉碎后粉末过80目筛，得 人参多糖提取物棕褐色粉末。
[0034] 本发明原料人参根须来源于吉林集安山参，采用此方法制备获得人参根提取多糖 粉末，复水溶解性较好，可速溶，溶液呈透明棕黄色，其中，多糖含量可达50%，此工艺可提 供较高功能活性的人参多糖。实施例3
[0035] -种蛹虫草多糖提取物的制备方法，具体步骤为：
[0036] (1)原料预处理：将蛹虫草去霉变，清洗去泥及其它杂质，自然晾干后打碎成40目 粗粉；
[0037] ⑵低温浸泡：将上述蛹虫草粗粉，加入15倍量（w/w)水0°C浸泡16h ;
[0038] (3)低温真空浸提3次：将上述低温浸泡物料，第一次真空浸提8h，收集滤液，向 药渣中加入10倍量（w/w)水，第二次真空提取5h，收集滤液，再向药渣中加入5倍量（w/w) 水，第三次真空提取3h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液，真空环境为140mmHg，浸提温度 30°C，浸提搅拌转速为90rpm ;
[0039] (4)过滤：将上述三次真空浸提滤液通过板框压滤，过200目滤布得滤液，滤液静 置2h无沉淀物；
[0040] (5)浓缩：在70°C真空浓缩，滤液浓缩至相当于每ml含生药0. 5g ;
[0041] (6)醇析：浓缩液冷却至室温，在向浓缩液中缓慢加入3倍量（v/v) 95%乙醇，加入 乙醇时要充分搅拌，物料混合液中乙醇终浓度为75 %，静置12h，去掉上清乙醇溶液，收集 静置后沉淀的浸膏；
[0042] (7)复溶脱醇精制：将上述沉淀的浸膏加等体积50°C热水溶解，搅拌，并在酒精回 收装置中蒸馏脱乙醇；
[0043] (8)再浓缩：将上述复溶脱醇溶液在70°C以下真空浓缩，滤液浓缩至含水量为 35%，得匀浆液；
[0044] (9)热泵干燥：将上述浓缩匀浆液进行热泵干燥，干燥温度为60°C ;与采用喷雾干 燥方法获得粉末提取物相比，采用此方法大大降低了能耗，节能省时，物料内外干燥去水均 匀，物理粉碎无黑点、焦头等杂质，产品质量高。
[0045] (10)粉碎过筛：微波干燥后得块状固体提取物，经物理粉碎后粉末过100目筛，得 蛹虫草多糖提取物棕黄色粉末。
[0046] 本发明原料蛹虫草来源于甘肃甘南人工培育蛹虫草，采用此方法提取获得的蛹虫 草多糖提取物中，多糖含量可达30%，粉末提取物复水溶解性较好，可速溶，溶液呈透明浅 棕黄色。
[0047] 实施例4
[0048] 一种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复合物，由以下成分按重量百分比组成：深海鱼 皮胶原肽55 %，人参提取物5 %，蛹虫草提取物7 %，棉籽糖33 %。所述深海鱼皮胶原肽、人 参提取物、蛹虫草提取物分别为实施例1-3所制备的深海鱼皮胶原肽、人参提取物和蛹虫 草提取物。
[0049] 实施例5
[0050] -种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复合物，由以下成分按重量百分比组成：深海鱼 皮胶原肽60 %，人参提取物8 %，蛹虫草提取物6 %，木糖醇26 %。所述深海鱼皮胶原肽、人 参提取物、蛹虫草提取物分别为实施例1-3所制备的深海鱼皮胶原肽、人参提取物和蛹虫 草提取物。
[0051] 实施例6
[0052] -种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复合物，由以下成分按重量百分比组成：深海鱼 皮胶原肽48%，人参提取物10%，蛹虫草提取物3%，麦芽糊精39 %。所述深海鱼皮胶原 肽、人参提取物、蛹虫草提取物分别为实施例1-3所制备的深海鱼皮胶原肽、人参提取物和 蛹虫草提取物。
[0053] 实施例1-4制备的鱼皮胶原肽复合物增强免疫力效果试验评价如下：
[0054] 试验动物：12-16g BALB/c幼鼠85只，随机分为9组，8个试验组每组10只，对照 组5只。
[0055] 试验设计
[0056] 试验组1 :市售蛋白含量90 %鱼皮胶原蛋白肽（1. 65g溶解于200ml温水）
[0057] 试验组2 :市售含量为30 %人参提取多糖（0· 15g溶解于200ml温水）；
[0058] 试验组3 :市售含量30 %蛹虫草提取多糖（0. 21g溶解于200ml温水）；
[0059] 试验组4 :本发明实施例1所制备的蛋白含量90%鱼皮胶原蛋白肽（1. 65g溶解于 200ml温水）
[0060] 试验组5 :本发明实施例2所制备的含量为30%人参提取多糖（0. 15g溶解于 200ml 温水）；
[0061] 试验组6 :本发明实施例3所制备的含量30 %蛹虫草提取多糖（0.21g溶解于 200ml 温水）；
[0062] 试验组7 :本发明实施例4提取深海鱼胶原蛋白肽、蛹虫草提取多糖和人参根提取 多糖等复合物（低剂量，1. 5g溶解于200ml温水）；
[0063] 试验组8 :本发明实施例4提取深海鱼胶原蛋白肽、蛹虫草提取多糖和人参根提取 多糖等复合物（3g溶解于200ml温水）；
[0064] 试验组9 :本发明实施例4提取深海鱼胶原蛋白肽、蛹虫草提取多糖和人参根提取 多糖等复合物（高剂量，30g溶解于200ml温水）；
[0065] 对照组：等剂量生理盐水灌服。
[〇〇66] 其中，试验组1-3鱼皮胶原肽、人参提取多糖、虫草提取多糖的含量与本发明实施
【权利要求】
1. 一种增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，其特征在于由以下成分按重量百分比组 成：深海鱼皮胶原肽40 % -70%，人参提取物2 % -12%，蛹虫草提取物2 % -12%，填充剂 15% -40%。
2. 根据权利要求1所述的增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，其特征在于由以下成 分按重量百分比组成：深海鱼皮胶原肽55 %，人参提取物5 %，蛹虫草提取物7 %，填充剂 33%。
3. 根据权利要求1或2所述的增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，其特征在于所述 填充剂为木糖醇、棉子糖、麦芽糊精、海藻糖、β-环糊精和甘露醇中的一种或几种。
4. 根据权利要求3所述的增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，其特征在于所述深海 鱼皮胶原肽由鳕鱼鱼皮制得；所述人参提取物为由人参根须提取的人参多糖提取物；所述 蛹虫草提取物为蛹虫草多糖提取物。
5. 根据权利要求4所述的增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，其特征在于具体的制 备方法如下： 将深海鱼皮胶原肽、人参提取物和蛹虫草提取物分别过80目筛，按照各自的重量配比 与填充剂混匀，制剂，即得该复方制品。
6. 根据权利要求1或2所述的增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，其特征在于所述 深海鱼皮胶原肽的制备方法如下： (1) 原料预处理：将冷冻深海鳕鱼解冻，取其鱼皮，切成片段，用水冲洗干净， 加入10倍量（w/w) 4% -8 % NaCl浸泡6-8h，再用水清洗2-3次，加入5-10倍量（w/w) 0. 6 % NaOH浸泡8-12h，用水清洗2-3次，去除残留蛋白等非鱼皮杂质； (2) 匀浆超声：将上述处理后小片段鱼皮，加入10-15倍量（w/w) 0. 1 % NaOH水溶液，经 打碎制成匀浆液，然后经超声波细胞破碎仪超声处理，使组织细胞充分破碎，然后用0. 1% HC1调整PH值至6. 5 ;超声波细胞破碎仪工作功率300-500W，工作10s间隔25s，工作80次； 震荡匀浆在l〇°C以下低温水浴进行； (3) 热力提取：将上述匀浆液加热到80-90°C，并不断搅拌保温抽提5-10h，离心过滤， 残渣再加入5倍体积水溶液，80-9(TC保温抽提5h，离心过滤，合并两次加热抽提滤液； (4) 酶解：将上述滤液用0. 1 % NaOH调整PH值至6. 5-7. 0,加热抽提水解液温度降至 37-45°C，利用胰蛋白酶（鳕鱼皮重量的2.5% )和木瓜蛋白酶（鳕鱼皮重量的L5% )进 行复合保温酶解16_20h ; (5) 灭酶超滤：酶解结束后，升温至90°C，保温5min灭酶，待酶解液冷却至室温，利用超 滤技术收集肽段分子量小于3000Da的滤液；（6)干燥：将上述收集的滤液脱盐、浓缩至质量 分数35-40%，喷雾干燥，制得低分子量胶原蛋白肽精制粉。
7. 根据权利要求1或2所述的增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，其特征在于所述 人参提取物的制备方法为： (1) 原料预处理：取人参根须，清洗去泥及其它杂质，自然晾干后打碎过40-50目筛，得 人参粗粉； (2) 低温浸泡：将上述人参粗粉，加入10-15倍量（w/w)水0-4°C浸泡12-18h ; (3) 真空低温浸提2次：将上述低温浸泡物料，第一次真空浸提8-12h，收集滤液，再向 药渣中加入5-10倍量（w/w)水，第二次真空提取4-6h，收集滤液，合并两次真空浸提滤液， 真空环境为120-160mmHg，浸提温度30-40°C，浸提搅拌转速为60-100rpm ; (4) 过滤：将上述两次真空浸提滤液通过板框压滤，过200-300目滤布得滤液，滤液静 置2h无沉淀物； (5) 浓缩：在70°C以下真空浓缩，滤液浓缩至相对密度为1. 2 ; (6) 醇沉：浓缩液冷却至室温，向浓缩液中缓慢加入3倍量（v/v) 95%乙醇，加入乙醇时 要充分搅拌，物料混合液中乙醇终浓度为75 %，静置8-15h，离心，收集静置后醇不溶沉淀 得人参多糖提取物； (7) 复溶脱醇精制：将上述醇不溶沉淀加等体积50°C热水溶解，搅拌，并在酒精回收装 置中蒸馏脱乙醇； (8) 再浓缩：将上述复溶脱醇溶液在70°C以下真空浓缩，滤液浓缩至含水量为 30% -40%，得匀浆液； (9) 微波干燥：将上述浓缩匀浆液进行微波干燥，微波加热功率为0. 2w/g ; (10) 粉碎过筛：微波干燥后得块状固体提取物，经物理粉碎后粉末过80-100目筛，得 人参多糖提取物棕褐色粉末。
8.根据权利要求3所述的增强免疫功能的鱼皮胶原肽复方制品，其特征在于所述蛹虫 草提取物的制备方法为： (1) 原料预处理：将蛹虫草去霉变，清洗去泥及其它杂质，自然晾干后打碎成30-50目 粗粉； (2) 低温浸泡：将上述蛹虫草粗粉，加入10-15倍量（w/w)水0-4°C浸泡12-18h ; (3) 低温真空浸提3次：将上述低温浸泡物料，第一次真空浸提8-10h，收集滤液，向 药渣中加入5-10倍量（w/w)水，第二次真空提取5-8h，收集滤液，再向药渣中加入3-5 倍量（w/w)水，第三次真空提取3-5h，收集滤液，合并三次真空浸提滤液，真空环境为 120-160mmHg，浸提温度30-40°C，浸提搅拌转速为60-100rpm ; (4) 过滤：将上述三次真空浸提滤液通过板框压滤，过200-300目滤布得滤液，滤液静 置2h无沉淀物； (5) 浓缩：在70°C真空浓缩，滤液浓缩至相当于每ml含生药0. 5g ; (6) 醇析：浓缩液冷却至室温，向浓缩液中缓慢加入3倍量（v/v) 95%乙醇，加入乙醇时 要充分搅拌，物料混合液中乙醇终浓度为75%，静置10-15h，去掉上清乙醇溶液，收集静置 后沉淀的浸骨； (7) 复溶脱醇精制：将上述沉淀的浸膏加等体积50°C热水溶解，搅拌，并在酒精回收装 置中蒸馏脱乙醇； (8) 再浓缩：将上述复溶脱醇溶液在70°C以下真空浓缩，滤液浓缩至含水量为 30% -40%，得匀浆液； (9) 热泵干燥：将上述浓缩匀浆液进行热泵干燥，干燥温度为60°C ; (10) 粉碎过筛：微波干燥后得块状固体提取物，经粉碎后粉末过80-100目筛，得蛹虫 草多糖提取物棕黄色粉末。
【文档编号】A23L1/305GK104041830SQ201410276999
【公开日】2014年9月17日 申请日期:2014年6月19日 优先权日:2014年6月19日
【发明者】李丽杰, 李八方, 王尚龙 申请人:青岛银色世纪健康产业集团有限公司