一种鲍曼不动杆菌及其培养方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种鲍曼不动杆菌及其培养方法和应用，所述鲍曼不动杆菌其将从印染废水取样后接入富集培养基培养，经过传代后分离获得的单株菌落，该鲍曼不动杆菌于2014年5月7日提交保藏，保藏号为：CCTCC NO：M201488。本发明所述的鲍曼不动杆菌具有较高的活性，生长速度快，稳定性好、不易变异。本发明所述的培养方法操作简单，培养周期短。所述鲍曼不动杆菌应用于偶氮染料脱色中，具有良好的脱色效果。CCTCC NO: M 201418820140507
【专利说明】一种鲍曼不动杆菌及其培养方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物【技术领域】，具体涉及一种鲍曼不动杆菌及其培养方法和应用。
【背景技术】
[0002] 鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii)为非发酵革兰阴性杆菌，广泛存在于 自然界，属于条件致病菌。鲍曼不动杆菌有荚膜、菌毛，无芽孢和鞭毛；具有较强的粘附力， 易于附着于物体表面。鲍曼不动杆菌具有复杂的抗原构造，包括菌体抗原以及荚膜抗原，根 据不同的抗原可以将鲍曼不动杆菌分为34个血清型。
[0003] 印染废水主要特征为带有色泽，主要由染料和纤维杂质造成。印染废水处理的突 出问题是色度和难降解有机物的去除问题。带有色泽的水，排放至天然水源，不宜饮用， 必须处理。因此，脱色处理一直是印染废水处理的主要任务。偶氮染料是一类含有一个或 多个-N = N-功能团的芳香类化合物，约占有机染料产品总量的80%以上，偶氮染料大多具 有较好的水溶性，从而也导致了大量未附着在染色物上的染料以废水形式排出，造成水体 污染。
[0004] 近年来研究发现鲍曼不动杆菌可以降解废水中发染料污染物，具有很高的应用价 值。目前，富集培养基和培养方法所获得的鲍曼不动杆菌活性低，容易出现变异；并且富集 时间周期过长,成本高。
【发明内容】
[0005] 为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种鲍曼不动杆菌，具有较高 的活性，生长速度快，稳定性好、不易变异。
[0006] 本发明的另一目的在于提供一种鲍曼不动杆菌的培养方法，简化培养过程，缩短 培养周期，获得稳定性好，活性高的鲍曼不动杆菌。
[0007] 本发明还提供了鲍曼不动杆菌在废水染料脱色中的应用。
[0008] 为解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：
[0009] 一种鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii LCY Jac)，其将从印染废 水取样后接入富集培养基培养，经过传代后分离获得的单株菌落，该鲍曼不动杆菌 (Acinetobacter baumannii LCY Jac)于2014年5 月 7 日提交保藏，保藏号为：CCTCC NO: M201488 ;保减单位：中国典型培养物保减中心；保减地址：中国.武汉.武汉大学；邮编： 430072。
[0010] 具体地，所述鲍曼不动杆菌所述鲍曼不动杆菌的RNA基因序列为SEQ ID NO: 1。
[0011] 一种鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii LCY Jac)的培养方法，其包括如 下步骤：
[0012] 1)接种培养：从印染厂废水处理生化池中采集废水样品，调节废水的pH至6-7. 5， 然后将样品接入到富集培养基中，在恒温培养箱中培养；
[0013] 2)菌种驯化：恒温培养箱中培养后于37°C摇床培养，每次接近全褪色时转至下一 瓶，共筛选5代；
[0014] 3)分离菌株：菌种驯化后在固体培养基平板上经多次划线分离出单株菌落；
[0015] 4)筛选：将分离出的单株菌落对燃料进行脱色，选择脱色好、活性高的菌株；
[0016] 5)鉴定：对步骤4)挑选出的菌株进行形态、生理生化特征采用BiologTM方法进 行鉴定，挑选出鲍曼不动杆菌。
[0017] 具体地，本发明所采用的富集培养基中，每IOOOml富集培养基由含有蛋白胨1%， NaCl 0· 5%，牛肉膏 0· 5%。
[0018] 具体地，步骤1)中，恒温培养箱培养的温度为32-47°C。
[0019] 具体地，步骤2)中，摇床转速为200n/min。
[0020] 本发明所述的鲍曼不动杆菌在偶氮染料脱色中的应用；尤其对含有刚果红和孔雀 绿等燃料的废水进行脱色处理，有着很好的脱色效果。
[0021] 相比现有技术，本发明的有益效果在于：
[0022] 1.本发明所述的鲍曼不动杆菌具有较高的活性，生长速度快，稳定性好、不易变 异，具有良好的脱色效果；
[0023] 2.本发明所述的培养方法操作简单、培养周期短，
[0024] 下面结合附图和【具体实施方式】对本发明作进一步详细说明。
【专利附图】
【附图说明】
[0025] 图1为反应温度对本发明所述的鲍曼不动杆菌的影响结果图；
[0026] 图2为pH值对本发明所述的鲍曼不动杆菌的影响结果图；
[0027] 图3为摇床转速对本发明所述的鲍曼不动杆菌的影响结果图。
【具体实施方式】
[0028] 实施例1
[0029] 一种鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii LCY Jac)，其将从印染废 水取样后接入富集培养基培养，经过传代后分离获得的单株菌落，该鲍曼不动杆菌 (Acinetobacter baumannii LCY Jac)于2014年5月 7 日提交保藏，保藏号为：CCTCC NO: M201488,按照以下步骤培养：：
[0030] 1)接种培养：从伟纶经编织造有限公司水处理生化池中采集废水样品，调节废水 的PH值，然后将样品接入到富集培养基中，在恒温培养箱中培养；
[0031] 2)菌种驯化：恒温培养箱中培养后于3728°C摇床培养，每次接近全褪色时转至下 一瓶，共筛选5代；
[0032] 3)分离菌株：菌种驯化后在固体培养基平板上经多次划线分离出单株菌落；
[0033] 4)筛选：将分离出的单株菌落对燃料进行脱色，选择脱色好、活性高的菌株；
[0034] 5)鉴定：对步骤4)挑选出的菌株进行形态、生理生化特征采用BiologTM方法进 行鉴定，挑选出鲍曼不动杆菌。
[0035] 设定pH值为7. 2,考察不同温度培养箱中培养对菌株生长的影响，其中具体考察 的温度值分别为22°C、27°C、32°C、37°C、42°C、47°C、52°C下菌株的生长速度，结果参见图 1〇
[0036] 图1的结果表明：鲍曼不动杆菌在32°C -47°C温度范围培养，长势较好，生长速度 较快。
[0037] 该鲍曼不动杆菌的鉴定结果如下：
[0038] 1)细菌学形态特征为：不动杆菌在37°C恒温培养箱中培养菌24h后，进行革兰染 色、显微镜下进行观察，结果发现菌株为革兰阴性菌，短杆状。
[0039] 2)生理生化特征为：将zkl菌种接种的LB培养基培养24h后，利用VITEK全自动 细菌鉴定仪，采用革兰氏阴性鉴定卡，7h后读取鉴定结果，zkl菌种生化结果如表1所示。
[0040] 表 1
[0041]
[0042]
【权利要求】
1. 一种鲍曼不动杆菌，其特征在于：其将从印染废水取样后接入富集培养基培养，经 过传代后分离获得的单株菌落，该鲍曼不动杆菌于2014年5月7日提交保藏，保藏号为： CCTCC NO :M201488。
2. 根据权利要求1所述的鲍曼不动杆菌，其特征在于：所述鲍曼不动杆菌的RNA基因 序列为 SEQ ID N0:1。
3. -种如权利要求1所述的鲍曼不动杆菌的培养方法，其特征在于，其包括如下步骤： 1) 接种培养：从印染厂废水处理生化池中采集废水样品，调节废水的pH至6-7. 5,然后 将样品接入到富集培养基中，在恒温培养箱中培养； 2) 菌种驯化：恒温培养箱中培养后于36°C摇床培养，每次接近全褪色时转至下一瓶， 共筛选5代； 3) 分离菌株：菌种驯化后在固体培养基平板上经多次划线分离出单株菌落； 4) 筛选：将分离出的单株菌落对燃料进行脱色，选择脱色好、活性高的菌株； 5) 鉴定：对步骤4)挑选出的菌株进行形态、生理生化特征采用Vitek 2系统方法进行 鉴定，鉴定为出鲍曼不动杆菌。
4. 根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，每1000ml富集培养基由含有蛋白胨 l%，NaCl 0.5%，牛肉膏 0.5%。
5. 根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，步骤1)中，恒温培养箱培养的温度为 32-47。。。
6. 根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，步骤2)中，摇床转速为200n/min。
7. 如权利要求1所述的鲍曼不动杆菌在偶氮染料脱色中的应用。
【文档编号】C12N1/20GK104388366SQ201410779207
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年12月15日 优先权日:2014年12月15日
【发明者】刘锐, 陈英杰, 黄小丹, 刘岩, 黄立芳 申请人:仲恺农业工程学院