高效玉米秸秆生物饲料的集成化加工方法

文档序号:10558356阅读:732来源:国知局
高效玉米秸秆生物饲料的集成化加工方法
【专利摘要】本发明公开了高效玉米秸秆生物饲料的集成化加工方法,属于生物饲料领域。涉及玉米秸秆经三步发酵,规模化生产一种高效低成本的反刍动物优质微生物粗饲料。首先基于玉米秸秆高效纯种固态培养白腐菌菌酶制剂,再以大接种量转接到玉米秸秆一期发酵培养基中,同时再接种系列木质纤维素降解菌和产朊假丝酵母,协同快速降解和转化,再添加芽孢杆菌和酿酒酵母进行二期发酵,乳酸菌三期厌氧发酵获得成品。本发明原料不需灭菌,成品不需干燥,菌酶丰富,成本低,木质素显著降低,真蛋白提高到12%以上,可以作为牛羊优质粗饲料和蛋白精料,添加量可达60%以上,也可10%左右添加量用于单胃动物,技术规模化集成度高,经济和社会效益显著。
【专利说明】
高效玉米稻轩生物饲料的集成化加工方法
技术领域
[0001] 本发明属于生物饲料领域,特别是设及基于玉米黄熟賴杆为原料的高效低成本的 新型微生物粗饲料。
【背景技术】
[0002] 玉米賴杆是中国最多的賴杆之一,如果当作发电、沼气、气化、固化成型等能源化 物质利用,经济效益低下;賴杆乙醇,其生产成本7千多元每吨,没有国家补贴,不易赢利;月己 料化实际上也是巨大的资源浪费;用于板才等加工总量有限;相对于稻草、小麦杆等,玉米 賴杆具有较好的营养指标,不少地方收购价比小麦杆低一倍,玉米賴杆用于饲料是较好的 出路,但目前收获玉米后的賴杆大多数没有加工处理直接饲喂存在适口性差、采食量低、消 化率不高、营养价值极低等缺点,而且农村里大多数玉米賴杆甚至都没有粉碎,牛羊只吃叶 片部分,50 %左右浪费掉。总体上讲,目前黄熟玉米賴杆利用层次较低,附加值低,不易市场 化,跟本原因是科技创新不足。
[0003] 另一方面,目前饲料绝大多数是W粮食为原料进行配合,成本难W下降。中国的饲 料用粮已超过粮食消费总量的40%,粮食安全问题严重,所非粮原料(賴杆、菌慷、杂巧 等),通过系列微生物处理生产价廉物美的生物饲料,是今后的主要方向,同时化废为宝,有 利于废弃物及养殖环境的生物治理。农区牛羊养殖主要瓶颈是质优价廉的粗饲料,种植首 猜等牧草或青胆等造成了人畜争地矛盾,成本也高,而且青胆品质也不稳定,木质素没有降 低,真蛋白没有提高。
[0004] 黄熟的玉米賴杆总能含量相当于干草,但其营养价值不到干草的一半,主要原因 是可利用营养不足。众所周知,賴杆含有较多纤维素、半纤维和木质素。但木质素是由香豆 醇、松柏醇、芥子醇和愈伤木基醇等交联聚合形成的苯基丙烷类聚合物,是植物细胞壁中主 要支撑结构,并保持细胞壁的不通透性,抵抗微生物攻击及抗氧化等。木质素和半纤维素形 成牢固结合层,紧紧地包围着纤维素,阻碍酶和其他物质与纤维素的接触,大大降低了纤维 素的消化率。另一方面,虽然反当动物瘤胃内含有大量微生物,可分泌纤维素酶,分解利用 纤维素和半纤维素,但缺乏降解木质素的酶,木质素不能被瘤胃微生物降解,也直接影响了 被木质素保护着的纤维素和半纤维素的有效降解和释放,运就限制了反当动物对可消化的 纤维素和半纤维素等营养成分的消化利用,运是导致賴杆的利用率降低的主要因素。因此, 合理利用賴杆资源的前提就是极大程度地去除其中的木质素。加上玉米賴杆的氮素、维生 素 A、D、巧、儀、憐、锋等都很贫乏,玉米賴杆必须经系列有效加工,提高真蛋白等含量,降低 木质素,才能真正具有饲用价值。
[0005] 賴杆处理方法大体上可分为物理、化学和生物Ξ大类,其中物理方法包括切割、揉 丝、粉碎、娠压、热喷、汽爆等,主要是部分提高消化率、适口性,但不改变賴杆的化学组成, 不能提高賴杆的营养成分,效果好些的蒸汽爆破设备投资大,特别是大规模生产时爆破设 备产能跟不上,能耗要求较高,投入大,进而使得生产成本过高,不易推广。化学方法传统上 包括碱化处理、酸化处理或其他药剂处理,虽然可W部分改变賴杆的化学组成,提高玉米賴 杆的消化率,但是污染高成本大使运一技术不能很好地推广。氨化饲料经常有导致动物中 毒的情况发生,对设备的要求较高,环境污染严重,氨的损失率大,并污染空气,真蛋白增加 有限,纤维降解少,木质素只有部分溶解但并不降解。运一系列问题都成了化学法处理賴杆 饲料技术的瓶颈,总体上讲,运些方法都没有提高真蛋白和有机功能物质含量。
[0006] 与之相比,微生物处理具有环保、高效率等特点,賴杆生物饲料适口性好、消化率 高、营养价值高。青胆、微胆、黄胆是目前賴杆生物处理的主要方法,也是主要的賴杆发酵饲 料,即使有时添加了各种辅料或酶的发酵也是微胆范畴。青胆主要是利用不用于粮食生产 的青賴杆的厌氧保存,在农区造成人畜争粮争地的矛盾。收获粮食后的賴杆用于微胆、黄胆 又往往营养不够,木质纤维太多,处理很容易失败,如果加了其它较多高成本的辅料共发 酵,饲用成本也增加。总体上讲,青胆、微胆、黄胆运些处理方法,主要是延长胆存保质期,并 能够改善賴杆饲料的适口性,适当提高牲畜的采食量和采食速度,可W提高牲畜的机体免 疫能力,预防并治疗肠道疾病,但是青胆、微胆、黄胆都不会真正明显提高真蛋白含量,没有 降低木质素含量,纤维素和半维素转化也很有限,对动物的賴杆消化率没有明显提高,加上 大规模青、黄胆在制作和饲用时都容易染菌而失败。
[0007] 因此,人们一直在研究提高賴杆生物处理的效果,提高蛋白质含量,降低木质纤维 素,提高饲用效果。纤维降解菌和部分益生菌好氧共发酵賴杆研究较多,如发明专利 (CN102696865B)、(CN103392918B)、(CN100337555C)、(CN101690554B)、(CN102132762B)、 (CN102113622B)、(CN101946853B)、(CN102578441B)和(CN102488084B)等,一般选用木霉、 白地霉、黑曲霉、米曲霉、酵母、芽抱杆菌、乳酸菌等几种进行好氧发酵,没有白腐菌对木质 素的降解,自然也会影响纤维素的降解,也导致好氧发酵增加真蛋白不明显,有些靠辅料本 身蛋白源增加蛋白质量,有些好氧发酵时间太长(如10天)易染菌,耗时长,成本也更高。W 粗蛋白计算蛋白的增加量本来就不准确,发酵成品用干燥的处理方法也不太好,菌酶失活 严重,能耗高,适口性也往往不太好,后续处理没有优化集成。有些专利如(CN1319464C),賴 杆封膜包装厌氧共发酵,但会使好氧的木霉、白地霉发挥作用有限,尿素变真蛋白有限,木 质纤维降解更有限。
[0008] 为了提高木质素的降解,有些相对科学的发明专利进行纤维降解菌和白腐菌共发 酵,如(103146606B)和(103549129B),前者用黄抱原毛平革菌、木霉、酵母菌、枯草杆菌和乳 酸菌的等共发酵,賴杆好氧发酵并和厌氧菌一起发酵,但是白腐菌生长慢和木霉生长快不 协调,导致好氧发酵时间太长,成本高,易染菌。后者也用生长慢的黄胞原毛平革菌,同生长 快的木霉、青霉、曲霉共发酵会出现不协调,发酵时间长,木质素产酶高峰一般在7天后,发 酵时间也要10天,压实和密封下木质素降解不显著,降解率一般不到20%。
[0009] 本发明采用生长速度比木霉、青霉、曲霉等更快的脉抱霉,纤维素酶系和半纤维素 酶系比较全,其中不同种脉抱霉各含有漆酶化acs)、儘过氧化物酶(M吨S),配合好可加快木 质素降解。在脉抱霉为优势菌群的同时,也配W能附带降解木质素酶的特殊米曲霉、青霉或 木霉,进行共发酵。考虑到黄胞原毛平革菌是降解木质素最好的菌种之一,但生长慢,本发 明特意另外固体纯种发酵,发酵至木质素酶积累高峰期,再W大接种量接到脉抱霉培养基 中,和脉抱霉及其它几种霉菌共发酵,高效快速降解木质素。之后,再加酵母菌和芽抱杆菌 揽拌混合二次发酵,经一天的菌群演变后,再添加乳酸菌等厌氧益生菌进行Ξ次厌氧发酵, 成品不需要干燥,菌酶活性全保留,能耗低,适口性好,饲用效果显著。

【发明内容】

[0010] 本发明目的是提供一种基于玉米黄熟賴杆的微生物饲料的规模化加工方法,使其 真蛋白大幅度增加,木质素大幅度降解,纤维素和半维素有效转化,益生菌、功能酶、功能营 养物质丰富,必需氨基酸匀恒,饲养效果显著,价廉物美,保存期长,主要用于反当动物,也 可10%左右添加到单位动物中,市场容量大,环境友好,社会和经济效益明显。
[0011] 本发明所述的基于玉米賴杆的微生物粗饲料是W粉碎的玉米賴杆为主要碳源,添 加尿素等无机氮为主要氮源,再大量添加预先发酵的白腐菌,然后经生长迅速且具有降解 木质素能力的系列食品级纤维降解霉菌一期发酵预处理,再W好氧益生菌芽抱杆菌和酵母 菌为发酵菌种进行二期发酵,最后再添加部分教皮、米慷、白酒糟或醋糟等低价干料调低水 分,接种乳酸菌等充分混匀后,分装在单向膜厌氧袋中密封保存或发酵桶(池)厌氧发酵,即 Ξ期发酵获得成品。
[0012] 本发明所有菌种中,纤维降解霉菌为:粗糖脉抱霉(Neurospora crassa),好食脉 抱霉(Neurospora sitophila),间型脉抱霉(Neurospora intermedia),米曲霉 (Aspergillus oryzae),木霉属(Trichoderma sp.)的任意一种或多种;白腐菌为黄胞原毛 平革菌(Panerochaete chrysosporium);酵母菌为:热带假丝酵母(Candida tropicalis), 产航假丝酵母(Candida utilis),酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)等的任意一种或 多种;乳酸菌为:植物乳杆菌(Lac tobac i 11 US P 1 an tarum ),保加利亚乳杆菌 化actobacillus bulgaricus),嗜酸乳杆菌化actobacillus acido地ilus),乳酸乳杆菌 (Lactobacillus lactis),干酪乳杆菌(Xactobacillus casei)等的任意一种或多种;芽抱 杆菌为:地衣芽抱杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽抱杆菌(Bacillus subtil is)的 任意一种或多种。
[0013] 本发明的目的是运样实现的,一种高效玉米賴杆微生物饲料的集成化加工方法, 按照下述步骤进行:
[0014] (一)白腐菌菌酶制剂预生产:
[0015] (1)白腐菌培养基:
[0016] 斜面培养基和平板培养基:马铃馨200g,薦糖20g,琼脂20g,定容1L中,pH 5.0,110 。(:灭菌30min。接种37°C培养4-10天。
[0017]种子液体培养基:K此P〇4 2g,MgS〇4 0.3g,CaCl2 0.3g,蛋白腺5g,酵母浸膏3g,麦 芽汁3g,酒石酸氨Ig,定容于IL中,其中化S化· 7出OJnS化XuS化· 5出0、MnS化.4出0和CoCl2 各0.000001-0.01%(质量比),抑5.5。5001111^角瓶中加1001111培养基,110°(:灭菌30111111。
[0018] 白腐菌固态纯种发酵培养基:按重量计,切割、揉丝、粉碎后的玉米賴杆(20mmW 下)占培养基的70-90% (W干料计),教皮或米慷占10-30%,酒石酸胺、硝酸氨、硫酸氨或氯 化氨占 0.01-1%,〔曰(:03占0.1-2%,1(出口04占0.1-3%,]\%504、]\%(^3)2、或1邑(:12占0.01-1%, 尸6504*7出0占0.0.01-0.05%。211504、加504*5出0、]?11504*4出0、(:〇(:12、化]?〇04各占 0.000001-0.01 %,吐溫80 占 0.01-1 %,襲芦醇(3,4-二甲氧基苯甲醇,Verat巧1 曰1 coho 1) 占0.001-0.1 %,草酸占0.001-0.1 %,培养基最终含水量为45-65%,用巧樣酸调整到抑5- 6。
[0019] (2)培养方法
[0020] 将白腐菌在斜面培养基上划单菌落复壮,再挑选强壮的单菌落,各接种在新的白 腐菌斜面培养基30-4(TC生长,斜面培养基菌种中的抱子用无菌水洗下接种于摇瓶培养基 中,装液量l〇〇-250ml/LS角瓶,150-220r/min,25-38°C,培养48-192h,再各W〇. 1-1% (V/ V)接种量,混合转接到20化-100化的种子罐中,于30-40°C,150-220r/min通无菌空气培养 24-4她,活菌总数为1 X 107c化/ml W上,再W1-10%接种量(重量)转接到上述白腐菌固态 发酵种子培养基(气相脉动双动态固态发酵罐),充分揽拌后,30-40°C,发酵48-192h,获得 高活性白腐菌菌酶制剂,大生产可W多级放大生产种子。
[0021] (二)第一期玉米賴杆发酵
[0022] (1)脉抱霉纤维降解菌种子培养基和生产培养基
[0023] 脉抱霉等斜面培养基和平板培养基:马铃馨200g,薦糖20g,琼脂20g,定容1L中,pH 5.0,110°C 灭菌 30min。接种 32°C 培养 2-5 天。
[0024] 脉抱霉等种子液体培养基:K出P〇4 2g,MgS化0.3g,化Cl2 0.3g,蛋白腺5g,酵母浸 膏3g,麦芽汁或红糖3g,硫酸氨或尿素5g,FeS〇4 · 7出0 0.005g,ZnS〇4 0.0014g,MnS〇4 · 4出0 0.0016g,CoCl20.002g,定容于 1L中,pH 5.5D500mlS角瓶中加 100ml培养基,110°C灭菌 30min〇
[0025] 产航假丝酵母菌斜面培养基和平板菌种培养基(100ml):葡萄糖2g、酵母浸出物 1邑、蛋白腺Ig、尿素 Ig,琼脂2g,pH值约6.0。
[0026] 产航假丝酵母液态培养基:成分同斜面培养基,不加琼脂。
[0027] 脉抱霉等固态发酵种子培养基:按重量计,切割、揉丝、粉碎后的玉米賴杆(20mmW 下化培养基的70-95% m干料计),教皮或米慷占5-30%,硝酸氨、硫酸氨或氯化氨占0.1- 2 %,尿素0.1-2 %,碳酸巧0.1-5 %,憐酸二氨钟0.1-3 %,硫酸儀、硝酸儀、或氯化儀占0.01- 1%,培养基最终含水量为53-65%,用巧樣酸调整到抑5-6。
[00%]玉米賴杆一期发酵培养基:按重量计,切割、粉碎后的玉米賴杆(20mmW下)占培养 基的90% W上干料计),教皮、米慷、白酒糟或醋糟占0-5%,硝酸氨、硫酸氨或氯化氨占 0.5-5 %,尿素0.5-5玉米%,碳酸巧0.1 -5 %,憐酸二氨钟0.1-3 %,硫酸儀、硝酸儀、或氯化 儀占0.01-1%。尸6504*7此0,化504,化504*5此0,]\111504.4此0,(:〇(:12,化]\1〇04各占0.000001- 0.01 %,吐溫80占0.01-1 %,培养基最终含水量为45-65%,用巧樣酸调整到抑5-6。
[0029] (2)培养方法
[0030] 将脉抱霉、米曲霉、木霉等分别在斜面培养基上划单菌落复壮,再分别挑选强壮的 单菌落,各接种在新的脉抱菌等斜面培养基25-38Γ生长,斜面培养基菌种中的抱子分别用 无菌水洗下接种于摇瓶培养基中,装液量100-250ml/LS角瓶,150-220r/min,25-38°C,培 养24-4化,再各W0.1-1 % (V/V)接种量(脉抱霉、米曲霉、木霉比例为8 :1:1),混合转接到 20化-1000L的种子罐中,于25-38°C,150-220r/min培养24-4化,活菌总数为1 X 107c化/ml W上。再WO. 1-10%接种量(重量,下同)转接到上述脉抱霉等固态发酵种子培养基,充分揽 拌后,25-38°C,通无菌空气发酵24-9化,作为固态发酵生产种子。
[0031 ]产航假丝酵母或热带假丝酵母在上述酵母液态培养基上培养放大,根据生产规模 确定放大级别。
[0032]脉抱霉等固态发酵生产种子W1-15%接种量(重量)接种到上述玉米賴杆发酵培 养基,另加0.1-1 %上述酵母液,再W 1-15 %接种量接入上述自制的白腐菌菌酶制剂,和 0.01-0.5%的商品漆酶,充分揽拌后,移入发酵室通气规模发酵(室内分层通气、散热),25- 38Γ,发酵24-7化,完成一期发酵。进入连续生产阶段,一期固态发酵接种生产种子为上次 一期賴杆发酵后的固态菌剂,按1-15%接种量(重量比)接种,另加1-15% (重量比)新鲜的 白腐菌菌酶制剂,及0.01到0.1% (重量比)的商品漆酶,再充分揽拌后好氧发酵。
[0033] (Ξ)第二期玉米賴杆发酵
[0034] (1)芽抱杆菌培养基
[0035] 芽抱杆菌斜面和平板菌种培养基:蛋白腺lOg,牛肉膏粉5g,氯化钢5g,琼脂15g,葡 萄糖20g,蒸馈水 1000ml,最终抑7.0 ± 0.2。110-121°C灭菌20-30min。
[0036] 芽抱杆菌摇瓶种子培养基和种子罐液态培养基:牛肉膏5.Og/L,蛋白腺20.Og/L, 葡萄糖5.0g/L,FeCl2·細2〇 0.07g/L,MnCl2*7H2〇 0.01g/L,MgS〇4?7H2〇 0.15g/L,pH 6.5-7.0,110-12rC 灭菌 20-30min。
[0037] (2)酿酒酵母培养基
[003引酵母菌斜面培养基和平板菌种培养基(100ml):葡萄糖2g、酵母浸出物Ig、蛋白腺 2邑、琼脂2邑,口巧直约6.0。
[0039] 摇瓶种子培养基和种子罐液态培养基:成分同斜面培养基,不加琼脂。
[0040] (3)二期玉米賴杆固态发酵培养基由一期发酵产物,加5-15%玉米賴杆粉组成(重 量比),含水量为40-50% (重量比)。首次启动二期发酵要制作酿酒酵母菌和芽抱杆菌液体 种子液,W0.1-5%接种量(重量比,下同)接到一期賴杆发酵产物中。
[0041] (4)培养方法
[0042] 芽抱杆菌液体菌种培养:
[0043] 无菌条件下分别将4°C保存的芽抱杆菌菌种,即地衣芽抱杆菌(Bacillus licheniformis)、枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis)各接一环至斜面培养基中,32-37°C 培养12-3化复苏菌种。再在平板上划单菌落,挑取健壮种子,分别接种到上述芽抱杆菌摇瓶 种子培养基,装液量100-300ml/LS角瓶,150-240r/min,28-38°C,培养12-2地,再各W0.1- 1%的接种量接种到同一 10化-1〇〇化种子罐培养基混合扩大培养,150-240r/min,通气量为 20-5化/min,培养12-24h后制得复合芽抱杆菌液体种子,活菌总数为2X108c化/mlW上。
[0044] 酵母菌液体菌种培养:
[0045] 无菌条件下分别将4°C保存的酿酒酵母菌种(Saccharomyces cerevisiae),接一 环至斜面培养基中,28-38Γ培养24-4化复苏菌种。再挑单菌落各在平板上划单菌落,挑取 健壮种子,分别接种到上述酵母菌摇瓶种子培养基,装液量100-300ml/LS角瓶,150-240r/ min,28-38°C,培养12-3化,再各W0.1-1%的接种量接种10化-100化种子罐培养基扩大培 养,150-240r/min,通气量为20-5化/min,培养24-4化后制得酿酒酵母液体种子,活菌总数 为2Xl〇8cfu/mlW上。
[0046] 二期玉米賴杆固态发酵:
[0047] 上述一期玉米賴杆发酵活性产物通过输送带送到开放式大型揽拌罐上,添加 5- 15% (重量比)玉米賴杆粉组成二期发酵培养基,上述芽抱杆菌液体种子W0.1-5% (重量 比)接种量,酿酒酵母菌液W0.1-5%接种量(重量比),都接种到二期玉米賴杆发酵培养基 中,充分揽拌,28-38°C好氧发酵12-7化,基本完成菌群演变,得到第一批二期玉米賴杆固态 发酵产物。进入连续生产阶段,种子为上次第二期玉米賴杆发酵的剩余产物(活性固态菌 剂),按1-20%接种量(重量比),接种到下次二期玉米賴杆发酵培养基中,运样循环接种利 用。
[004引(四)第Ξ期玉米賴杆固态发酵
[0049] (1)乳酸菌培养基
[0050] MRS斜面培养基(g/L):蛋白腺10,酵母粉5,牛肉膏5,葡萄糖20,巧樣酸二锭2,吐溫 80 1.0ml,乙酸钢25,K2HP04 2,MgS04·7出0 0.58,MnS04·4出0 0.25,琼脂20,pH7.0。
[0051] 摇瓶和种子罐乳酸菌种子液态培养基:大豆低聚糖2.25 %、葡萄糖2.00 %、蛋白腺 1.25 %、酵母粉1.25 %、番茄汁6.50 %、吐溫80.10 %、憐酸氨二钟0.20%。抑6.5,1L的Ξ角 瓶装液量200ml。
[0化2] W上培养基配好后均在115-120。(:条件下高压灭菌2〇-3〇111111。
[0053] (2)Ξ期发酵培养基
[0054] 在二期玉米賴杆固态好氧发酵后的产物上,加5-15%教皮、米慷、白酒糟或醋糟, 充分混匀,组成Ξ期发酵培养基,含水量为33-40%。首次启动Ξ期发酵要制作乳酸菌液体 种子液,W 0.1-3 %接种量接到Ξ期发酵培养基进行Ξ期发酵。
[0055] (3)培养方法
[0056]乳酸菌液态种子培养:
[0057] 将植物乳杆菌化actobacillus plantarum),保加利亚乳杆菌化actobacillus bulgariCUS),嗜酸乳杆菌化actobacillus acidophilus),乳酸乳杆菌化actobacillus lactis),干酪乳杆菌(Xactobacillus casei)等在MRS斜面培养基上划线活化,在33-38°C 培养24-7化进行复壮,并形成单菌落,再各挑取单菌落,接种到摇瓶乳酸菌种子培养基,通 入氮气,35-38 °C静置培养24-7化,定时取样,测定生物量。再各按0.1-1 %接种量(重量比) 接种到种子罐乳酸菌种子培养基,通入氮气,静置混合培养24-6化,定时取样,测定生物量, 活菌总数为5X 108c化/ml W上。
[0化引第Ξ期玉米賴杆固态发酵:
[0059] 在Ξ期玉米賴杆固态发酵培养基上,W0.1-3%接种量(重量比)接种乳酸菌种子 液到Ξ期发酵培养基上,经开放式大型揽拌罐中充分揽拌后,尽快装入单向膜厌氧袋、厌氧 桶或厌氧池中常溫下保存,即进行Ξ期厌氧发酵,含水量33-40%,(重量比)产品保质期可 达1到2年,保存二到Ξ个星期活菌数达到高峰,可达1亿cfu/g固体。
[0060] 进入连续发酵阶段,Ξ期发酵二个星期后,W此成品为种子,按1-10%接种量(重 量比),接到上述Ξ期玉米賴杆固态发酵培养基中,揽拌充分后,装入单向膜厌氧袋、厌氧桶 或厌氧池,常溫下保存,即进行Ξ期厌氧发酵。
[0061] 本发明有明显的W下优点:
[0062] (1)技术集成度高,产品附加值高。玉米賴杆经粉碎及添加自制的白腐菌高活性菌 酶制剂,经系列木质纤维素降解菌和益生菌Ξ步发酵成成品,木质素大幅度降低,真蛋白从 3.5%提高到12% W上,只需添加一定的能量饲料,就可W用于反当动物,基本不需很贵的 蛋白精料,产品品质明显好于青胆,保质期一年W上。由于成品不需要干燥处理,活菌数极 高,酶量丰富,杂菌极少,木质纤维素已大幅度降解,也可W10%添加量用于单位动物,饲养 效果明显:大幅度提高饲料利用率,提高产量,改善肠道环境,提高免疫力和抵抗力,代替抗 生素,改善肉质。
[0063] (2)设备投资少,但适合大规模产业化。賴杆饲料靠一般小农作坊实行不太现实, 多少年来一直得不到真正推广,本发明賴杆不需要蒸煮或汽爆预先处理,只是种子罐才需 要纯种培养,生产物料不需要高溫灭菌处理,可W好氧粗放式大规模发酵,厌氧发酵灵活 化,产品不需干燥处理,因此设备投资少,适合大规模化生产。
[0064] (3)产品成本低,市场规模和潜力巨大。本发明固体原料价格低廉,不需高溫灭菌, 基本不需要购买木质素酶、纤维素酶制剂来降解木质纤维质原料,成品不需要干燥处理。本 玉米賴杆饲料产品的原料为170元每吨,包括前处理是粉碎等,Ξ个期发酵水、电40元每吨, 人工费用80元每吨,添加教皮、米慷、白酒糟或醋糟等为100元每吨,尿素等氮素及微量元素 共计40元,菌种培养费用为40元每吨产品计,设备折旧和厂房租费为30元每吨产品计,本发 明玉米賴杆饲料生产成本为500元每吨(自用),如果是加上包装袋200元每吨,共计700元每 吨(对外销售用)。含有12%真蛋白的生物饲料目前出售价格为2700元W上每吨,因此本产 品利润空间及让利空间巨大。目前牛羊生物饲料市场几乎为空白,本产品是高蛋白活性粗 饲料,几乎不需要添加蛋白饲料,只需添加能量饲料和预混料,可达60% W上的添加量,也 可W10%添加量用于单位动物,所W市场空间巨大,真正解决农区养殖业的优质牧草缺乏 的粗料瓶颈,促进中国反当动物的大规模兴起,及工厂化生产。
[0065] (4)生产周期短,经济效益高。一般白腐菌生长慢,同木霉等共发酵时间也长,很容 易染菌,所W白腐菌处理的賴杆无法产业化。本发明賴杆饲料,采用生长极快的脉抱霉作为 主要菌种,并接种量大,再加产木质素酶的米曲霉和木霉为辅助菌种,另外大接种量添加单 独预先培养的白腐菌,加上粗糖脉抱霉产漆酶和好食脉抱霉产儘酶的协同,及激活剂的促 进作用,木质素降解快速明显,除了制种时间多几天外,生产周期很短,一般一期发酵为2 天,二期发酵为1天,Ξ期发酵就是库存期(二到Ξ星期),实际上共为3天的生产期,销售得 当时,周转周期为二到四星期,资金周转快,加上产品成本低,售价高,经济效益极高。
[0066] (5)明显的生态和社会效益。本发明化废为宝,同时消除栏舍恶臭,有利于消除农 副业和养殖业的污染,增加养殖业和饲料业的收入,改善肉质,提高肉产量,降低粮食饲用, 解决Ξ农问题和民生问题,及食品安全和粮食安全问题,因此本发明是具有明显的生态和 社会意义,符合国家绿色发展方向的朝阳产业。
【具体实施方式】
[0067] 本发明所有菌种为普通常规的商品化菌株,可在中国各大微生物菌种保藏管理中 屯、或市场上购买到。
[0068] 下述实施案例中所用的菌种仅为举例说明,不是对本发明的限制,本发明保护范 围中的菌种都实现发明目的。
[0069] 实施例1
[0070] 白腐菌菌酶制剂预生产
[0071] (1)白腐菌培养基。
[0072] 斜面培养基和平板培养基:马铃馨200g,薦糖20g,琼脂20g,定容1L中,pH 5.0,110 。(:灭菌30min。接种37°C培养4天。
[0073] 种子液体培养基:K此P〇4 2g,MgS〇4 0.3g,CaCb 0.3g,蛋白腺5g,酵母浸膏3g,麦 芽汁或葡萄糖3g,酒石酸氨Ig,定容于IL中,其中FeS〇4 · 7H2〇、ZnS〇4、CuS〇4 · 5化0、 MnS04.4出0和CoCl2各0.001%(重量比),pH5.5。500mlΞ角瓶中力日100ml培养基,110°C灭菌 30min〇
[0074] 白腐菌固态发酵种子培养基:按重量计,切割、揉丝、粉碎后的玉米賴杆(20mmW 下)占培养基的80% (W干料计),教皮15%,酒石酸胺、硝酸氨、硫酸氨或氯化氨占0.3%, CaC〇3 占 1 %,K此P〇4 占 1 %,MgS〇4、Mg (N03 ) 2、或MgC 12 占 0.05 %,FeS〇4.7出0 0.0.01 %。ZnS〇4、 CuS〇4 · 5出0、MnS〇4.4此0、CoCl2、化Mo〇4各占0.001%,吐溫80占0.1%,襲芦醇(3,4-二甲氧 基苯甲醇,Verat巧1 alcohol)0.025%,草酸0.05%,培养基最终含水量为55%,用巧樣酸 调整到抑5.5。
[0075] (2)培养方法
[0076] 将一种典型白腐菌,即黄抱原毛平革菌(Phanerochaete chiTsosporium , CICC40719)在斜面培养基上划单菌落复壮,再挑选强壮的单菌落,各接种在新的白腐菌斜 面培养基35Γ生长,斜面培养基菌种中的抱子用无菌水洗下接种于摇瓶培养基中,装液量 200ml/LS角瓶,220r/min,37°C,培养4她,再各W0.1 % (V/V)接种量,混合转接到200L的种 子罐中,于37°C,200r/min通无菌空气培养4她,活菌总数为3X 107cfu/ml W上,再W4%接 种量(重量)转接到上述白腐菌固态发酵种子培养基(气相双动态固态发酵罐),充分揽拌 后,37°C,通气发酵12化,获得固态发酵白腐菌菌酶制剂。
[0077] 实施例2
[0078] 第一期玉米賴杆发酵
[0079] (1)脉抱霉等纤维降解菌种子培养基和生产培养基
[0080] 脉抱霉等斜面培养基和平板培养基:马铃馨200g,薦糖20g,琼脂20g,定容1L中,pH 5.0,110°C灭菌30min。接种32°C培养2天。
[0081 ] 脉抱霉等种子液体培养基:K出P〇4 2g,MgS化0.3g,化Cl2 0.3g,蛋白腺5g,酵母浸 膏3g,麦芽汁或红糖3g,硫酸氨或尿素5g,FeS〇4 · 7出0 0.005g,ZnS〇4 0.0014g,MnS〇4 · 4出0 0.0016g,CoCl20.002g,定容于 1L中,pH 5.〇D500mlS角瓶中加 100ml培养基,110°C灭菌 30min〇
[0082] 产航假丝酵母菌等斜面培养基和平板菌种培养基(100ml):葡萄糖2g,酵母浸出物 1邑,蛋白腺Ig,尿素 Ig,琼脂2g,pH值约6.0。
[0083] 产航假丝酵母液态培养基:成分同斜面培养基,不加琼脂。
[0084] 脉抱霉等固态发酵种子培养基:按重量计,切割、揉丝、粉碎后的玉米(20mmW下) 占培养基的86% (W干料计),教皮占10%,硝酸氨、硫酸氨或氯化氨占1%,尿素0.5%,碳酸 巧占1 %,憐酸二氨钟占0.5%,硫酸儀、硝酸儀、或氯化儀占0.05%,培养基最终含水量为 55%。
[0085] 玉米賴杆发酵培养基:按重量计,切割、揉丝、粉碎后的玉米賴杆(20mmW下)占培 养基的90% (W干料计),教皮2%,硝酸氨、硫酸氨或氯化氨占2%,尿素2.5%,碳酸巧占 2%,憐酸二氨钟占1%,硫酸儀、硝酸儀、或氯化儀占0.2%DFeS〇4.7出0,ZnS〇4 0.0014邑, 化504.5出0 0.0015邑,]\111504.4此0 0.0016邑,(:〇(:12,船]\1〇04各占0.001%,0.1%吐溫80,培养 基最终含水量为55%,用巧樣酸调整到抑5.5。
[0086] (2)培养方法
[0087] 将粗糖脉抱霉(Neurospora crassa,CGMCC3.1600)、好食脉抱霉(Neurospora sitopMla,CGMCC3.1618)、间型脉抱霉(Neurospora intermedia,CGMCC 3.591)、米曲霉 (Aspergillus oryzae var.effusus CGMCC 3.2825)、木霉(Trichoderma sp.CICC 40261) 分别在斜面培养基上划单菌落复壮,再分别挑选强壮的单菌落,各接种在新的脉抱菌等斜 面培养基35Γ生长,斜面培养基菌种中的抱子分别用无菌水洗下接种于摇瓶培养基中,装 液量200ml/LS角瓶,220r/min,35°C,培养36h,再各W0.3% (V/V)接种量(粗糖脉抱霉、好 食脉抱霉、间型脉抱霉、米曲霉、木霉比例为3:3:2:1:1),混合转接到20化的种子罐中,于35 °C,200r/min培养2地,活菌总数为1 X 107c化/mlW上。再W3%接种量(重量)转接到上述脉 抱霉等固态发酵种子培养基,充分揽拌后,35Γ,发酵4她,作为固态发酵生产种子。
[008引热带假丝酵母(Candida t;ropicalis,CGMCC 2.637),产航假丝酵母(Candida util is, CGMCC 2.1180)在上述酵母液态培养基上培养放大。
[0089] 脉抱霉等固态发酵生产混合种子W3%接种量(重量)接种到上述玉米賴杆发酵培 养基,另加0.3%上述酵母液,及5%上述自制白腐菌菌酶制剂,和0.03%的商品漆酶(苏柯 汉,酶活力:380LCU/g,下同),充分揽拌后,移入发酵室通气规模发酵(室内分层通气、散 热),35°C发酵4她,完成一期发酵。进入连续生产阶段,一期固态发酵接种生产种子为上次 一期賴杆预处理发酵后的固态菌剂,按7%接种量接种,另加7%新鲜的白腐菌菌酶制剂, 0.03%的商品漆酶,再充分揽拌后好氧发酵。
[0090] 实施例3
[0091] 第二期玉米賴杆发酵
[0092] (1)芽抱杆菌培养基
[0093] 芽抱杆菌斜面和平板菌种培养基:蛋白腺lOg,牛肉膏粉5g,氯化钢5g,琼脂15g,葡 萄糖20g,蒸馈水1000ml,最终抑7.0 ± 0.2。121°C灭菌20min.
[0094] 芽抱杆菌摇瓶种子培养基和种子罐培养基:牛肉膏5. Og/L,蛋白腺20.0 g/L,葡萄 糖5.0g/L,FeCl2·細2〇 0.07g/L,MnCl2*7H2〇 0.01g/L,MgS〇4.7H2〇 0.15g/L,pH 6.5- 7.0,110-12rC 灭菌 20min。
[OOM] (2)酿酒酵母培养基
[0096] 酵母菌斜面培养基和平板菌种培养基(100ml):葡萄糖2g,酵母浸出物Ig,蛋白腺 2邑,琼脂2邑,口巧直约6.0。
[0097] 摇瓶种子培养基和液态种子罐培养基:成分同斜面培养基,不加琼脂。
[0098] (3)二期玉米賴杆固态发酵培养基由一期发酵产物,加5%玉米賴杆粉组成,含水 量为50%。首次启动二期发酵要制作酿酒酵母菌和芽抱杆菌液体种子液,W0.5%接种量接 到一期賴杆发酵产物中。
[0099] (4)培养方法
[0100] 芽抱杆菌液体菌种培养:
[0101] 无菌条件下分别将4°C保存的芽抱杆菌菌种,即地衣芽抱杆菌(Bacillus licheniformis, CGMCC 1.813)、枯草芽抱杆菌(Bacillus subtil is, CGMCC 1.884)各接一 环至斜面培养基中,37°C培养24h复苏菌种。再在平板上划单菌落,挑取健壮种子,分别接种 到上述芽抱杆菌摇瓶种子培养基,装液量200ml/LS角瓶,220r/min,37°C,培养16h,再各W 0.1 %的接种量接种到同一 20化种子罐培养基混合扩大培养,220r/min,通气量为50L/min, 培养16h后制得复合芽抱杆菌液体种子,活菌总数为2X108c化/mlW上。
[0102] 酵母菌液体菌种培养:
[0103] 无菌条件下分别将4°C保存的酿酒酵母菌种(Saccharomyces cerevisiae,CGMCC 2.1527),接一环至斜面培养基中,32°C培养24h复苏菌种。再挑单菌落各在平板上划单菌 落,挑取健壮种子,分别接种到上述酵母菌摇瓶种子培养基,装液量200ml/LS角瓶,220r/ min,32°C,培养16h,再W各W〇. 2%的接种量接种20化种子罐培养基扩大培养,220r/min, 通气量为30L/min,培养24后制得酿酒酵母液体种子,活菌总数为2 X 108c化/ml W上。
[0104] 二期玉米賴杆固态发酵:
[0105] 上述一期玉米賴杆发酵活性产物通过输送带送到开放式大型揽拌罐上,添加5% 玉米賴杆碎粉组成二期发酵培养基,上述芽抱杆菌液体种子W0.5 %接种量,酿酒酵母菌液 W0.5%接种量,都接种到二期玉米賴杆发酵培养基中,充分揽拌,35Γ好氧发酵1她,基本 完成菌群演变,得到第一批二期玉米賴杆固态发酵产物。进入连续生产阶段,种子为上次第 二期玉米賴杆发酵的剩余产物(活性固态菌剂),按5%接种量,接种到下次二期玉米賴杆发 酵培养基中,运样循环接种利用。
[0106] 实施例4
[0107] 第Ξ期玉米賴杆固态发酵
[0108] (1)乳酸菌培养基
[0109] MRS斜面培养基(g/L):蛋白腺10,酵母粉5,牛肉膏5,葡萄糖20,巧樣酸二锭2,吐溫 80 1.0ml,乙酸钢25,K2HP04 2,MgS04·7出0 0.58,MnS04·4出0 0.25,琼脂20,pH7.0。
[0110] 摇瓶和种子罐乳酸菌种子液态培养基:大豆低聚糖2.25 %、葡萄糖2.00 %、蛋白腺 1.25 %、酵母粉1.25 %、番茄汁6.50 %、吐溫80.10 %、憐酸氨二钟0.20%。抑6.5,1L的Ξ角 瓶装液量200ml。
[0111] W上培养基配好后均在120°C条件下高压灭菌20min。
[0112] (2)Ξ期发酵培养基
[0113] 在二期玉米賴杆固态好氧发酵后的产物上,加15%教皮,充分混匀,组成Ξ期发酵 培养基,含水量为34%。首次启动Ξ期发酵要制作乳酸菌液体种子液,W0.5%接种量接到 Ξ期发酵培养基进行Ξ期发酵。
[0114] (3)培养方法
[0115] 乳酸菌液态种子培养:
[0116] 将植物乳杆菌化actobacillus planta;rum,CGMCC 1.557),保加利亚乳杆菌 (Lactobacillus bulga;ricus,CGMCC 1.1482),嗜酸乳杆菌(Xactobacillus acidophilus, CGMCC 1.2467),乳酸乳杆菌化actobacillus lactis,CGMCC 1.2467),干酪乳杆菌 (Lactobacillus casei,CGMCC 1.62)在MRS斜面培养基上划线活化,在37°C培养36h进行复 壮,并形成单菌落,再各挑取单菌落,分别接种到摇瓶乳酸菌种子培养基,通入氮气,37Γ静 置培养36h,定时取样,测定生物量。再各按0.1 %接种量接种到种子罐乳酸菌种子培养基, 通入氮气,混合静置培养4她,定时取样,测定生物量,活菌总数为5 X 108c化/ml W上。
[0117] 第Ξ期玉米賴杆固态发酵:
[0118] 在Ξ期玉米賴杆固态发酵培养基上,W0.5%接种量接种乳酸菌种子液到Ξ期发 酵培养基上,开放式大型揽拌罐中充分揽拌后,尽快装入单向膜厌氧袋,即进行Ξ期厌氧发 酵,含水量34%,产品保质期可达1到2年,保存二到Ξ个星期益生菌活菌数达到高峰,可达1 亿cfu/g固体。其中25°C放置二星期后产品经测定,结果如表一。
[0119] 进入连续发酵阶段,Ξ期发酵二个星期后,W此成品为种子,按3%接种量,接到上 述Ξ期玉米賴杆固态发酵培养基中,揽拌充分后,装入单向膜厌氧袋,常溫下保存,即进行 Ξ期厌氧发酵,得到产品。
[0120] 表一 Ξ步发酵前后玉米賴杆生物粗饲料主要成份测定
[0121]
[0122] 实施例5
[0123] 本发明生物饲料的饲用效果
[0124] 江苏省丹阳市访仙镇访东村羊场进行湖羊饲用试验,挑选体重和状况相近的4月 龄湖羊,随机分为试验组和对照组,每组各10头,公母各半并去势。试验期为60d,预饲期lOd 内进行体内外驱虫、健胃,预饲期与试验期管理相同,试验期开始清晨空腹开始称重,试验 期结束时清晨空腹称重。每只试验羊均为单栏饲喂,自由饮水,采食控制,全期精粗干料比 约为1:3,精料全期W日均0.4kg左右为标准,前期少后期多,适量变化,对照组精料A由玉 米、豆巧、教皮和预混料等组成,精料A价格2500元每吨,试验组精料B为精料A的15%豆巧被 15 %玉米代替,即精料B的能量更多些,蛋白少些,精料B价格为2350元每吨,对照组粗料为 玉米青胆賴杆(70%水份)价格为450元每吨,试验组粗料为本发明微生物粗饲料(35%水 份)价格为500元每吨,记录每只羊每天采食量,每天早晨清扫食槽,观察是否有剩料,记录 剩料量,做到不剩料,更不浪费料!试验结果如表二。
[0125] 表二本发明玉米賴杆生物饲料的湖羊饲喂效果
[0126]
[0127]从上表看出玉米黄賴杆生物饲料和玉米青胆賴杆按干料算平均日耗干粗料几乎 是一样的,平均日耗精料也很接近,但平均日增重还是玉米黄賴杆生物饲料高些(0.018kg/ 日?头)kg,可能因为木质素已大部分降解有关。总体上讲,玉米黄賴杆生物饲料组增重化g 的饲料成本只是玉米青胆賴杆组的62.38%,按饲料成本占养殖成本的65%算,玉米黄賴杆 生物饲料组养殖成本为12.82元每公斤重,按2015年下半年的低价20元每公斤羊来算,利润 率竟高达56.01%,而玉米青胆賴杆组(对照组)增重1kg的养殖成本为20.55元,在运样的价 格下开始亏本了。目前青胆是最好的反当动物粗料之一,而本微生物粗料经济效益明显好 于青胆,因此,在反当动物中有巨大饲用空间。
[012引除了反当动物,如果开始粉碎后賴杆粉在5mmW下,本生物饲料也可W10%左右的 添加量添加到中、大猪,尤其是怀孕母猪,也有明显的经济效益和养殖环境效果。
[0129] 实施例6
[0130] 其它按实施例1-4, W下变为在实施例2中加入15%上述自制白腐菌菌酶制剂,和 0.5%的商品漆酶,充分揽拌后,移入发酵室通气规模发酵完成一期发酵。再如同实施例3和 4,得到成品,25°C放置二星期后产品经测定,结果如表Ξ。
[0131] 表Ξ实施例6Ξ步发酵前后玉米賴杆生物粗饲料主要成份测定
[0132]
[0133] 实施例7
[0134] 其它按实施例1-4, W下变为在实施例2中加入1 %上述自制白腐菌菌酶制剂,和 0.01%的商品漆酶,充分揽拌后,移入发酵室通气规模发酵完成一期发酵。再如同实施例3 和4,得到成品,25°C放置二星期后产品经测定,结果如表四。
[0135] 表四实施例7Ξ步发酵前后玉米賴杆生物粗饲料主要成份测定
[0136]
[0137] 本发明并不局限于上述实施例,一般地在保护数据范围内变化,可W实现本发明 效果,在本发明公开的技术方案基础上,本领域的技术人员根据公开的技术内容,不需要创 造性的劳动就可W对其中的一些技术特征作出一些替换和变形,运些替换和变形均在本发 明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种高效玉米秸杆微生物饲料的集成化加工方法,其特征是以玉米秸杆和无机氮为 主要原料生产高蛋白低木质素微生物粗饲料,包括以下步骤集成: (1) 以玉米秸杆和限量无机氮源为主要原料,添加无机盐和激活剂,固态纯种发酵预先 培养白腐菌菌酶制剂,发酵至木质素酶积累高峰期备用; (2) 以玉米秸杆粉和无机氮源为主要原料,加入商品漆酶、无机盐、部分激活剂,再以1-15%(重量计,以下百分比同)接种量接入上述白腐菌菌酶制剂,及大接种量接入脉胞霉等木 质纤维素降解霉菌及假丝酵母,进行一期固态发酵; (3) -期玉米秸杆固态发酵产物上加入5-15%玉米秸杆粉,接入芽孢杆菌和酿酒酵母混 匀,进行二期好氧发酵; (4) 二期好氧发酵产物添加5-15%麸皮、米糠、白酒糟或醋糟等,再接入乳酸菌进行三期 厌氧发酵,即库存放置二星期后获得成品。2. 根据权利要求1所述的一种高效玉米秸杆微生物饲料的集成化加工方法,其特征是: 白腐菌固态纯种发酵培养基为:按重量计,切割、揉丝、粉碎后的玉米秸杆(20mm以下) 占培养基的70-90%(以干料计),麸皮、米糠、白酒糟或醋糟占10-30%,酒石酸胺、硝酸氨、硫 酸氨或氯化氨占0.03-1%,CaCO3占0.1-2%,KH2P〇4A〇.l-3%,MgS〇4、Mg(N0 3)2、SMgCl2A 0.01-l%,FeS〇4 · 7H20占 0· 0.01_0.05%,ZnS〇4、CuS〇4 · 5H20、MnS〇4 · 4H2〇、CoCl2、NaMo〇4各 占0·000001-0·01%,吐温80占0·01-1%,藜芦醇(3,4_二甲氧基苯甲醇,Veratryl alcohol) 占0.001-0.1%,草酸占0.001-0.1%,培养基最终含水量为45-65%,用柠檬酸调整到pH 5-6; 白腐菌液态菌种转接到上述白腐菌固态发酵种子培养基中(气相脉动双动态固态发酵 罐),充分搅拌后,30-40°C,发酵48-192h,获得固态纯种发酵白腐菌菌酶制剂。3. 根据权利要求1所述的一种高效玉米秸杆微生物饲料的集成化加工方法,其特征是: 脉孢霉等木质纤维降解霉菌固态发酵种子培养基:按重量计,切割、揉丝、粉碎后的玉 米秸杆(20mm以下)占培养基的70-95%(以干料计),麸皮、米糠、白酒糟或醋糟占5-30%,硝酸 氨、硫酸氨或氯化氨占〇. 1 -2%,尿素0.1 -2%,碳酸钙占0.1 -1%,磷酸二氢钾占0.1 -3%,硫酸 镁、硝酸镁、或氯化镁占0.01-1%,培养基最终含水量为53-65%,用柠檬酸调整到pH 5-6; 脉孢霉等木质纤维降解霉菌玉米秸杆一期发酵培养基:按重量计,切割、揉丝、粉碎后 的玉米秸杆(20mm以下)占培养基的90%以上(以干料计),麸皮、米糠、白酒糟或醋糟干料占 0-5%,硝酸氨、硫酸氨或氯化氨占0.5-5%,尿素0.5-5%,碳酸f丐0.1-5%,磷酸二氢钾占0.1-3%,硫酸镁、硝酸镁或氯化镁占0.01_1%^6304.7!1 20、211304、〇1304*5!120、]\111304.4!120、(:〇(:1 2 和NaMo〇4各占0.000001-0.01%,吐温80占0.05-0.5%,培养基最终含水量为45-65%,用柠檬 酸调整到pH 5-6; 脉孢霉等木质纤维降解霉菌经液态培养后,再以1-10%接种量(重量)转接到上述脉孢 霉等固态发酵种子培养基,充分搅拌后,25-38°C,通无菌空气发酵24-96h,作为固态发酵生 产种子,再以1_15%接种量(重量)接种到上述一期玉米猜杆发酵培养基,另加0.卜1%自发酵 的产朊假丝酵母液或热带假丝酵母液,再以1-15%接种量接入上述自制的白腐菌菌酶制剂, 及0.01-0.5%的商品漆酶,充分搅拌后,移入发酵室通气规模发酵(室内分层通气、散热), 25-38°C,发酵24-72h,完成一期发酵。4. 根据权利要求1所述的一种高效玉米秸杆微生物饲料的集成化加工方法,其特征是: 所述的纤维降解霉菌为:粗糙脉孢霉(Afewro1SjDara orassa),好食脉孢霉 ,间型脉抱霉(Afew_TO577〇ra ,降解木质素的米曲霉(d577e_r《i_/_/iAs oryzae)和木霉属(冲.)的任意一种或多种;白腐菌为黄胞原毛平革菌 cAixs6>5776>ri?);酵母菌为:热带假丝酵母(Ca/^?? ^ro/7ica_/i*s),产月元 假丝酵母(,酿酒酵母(的任意一种或多种; ,嗜酸乳杆菌acid(9/7Ai_/w*s),乳酸乳杆菌 如(^_^),干酪乳杆菌(/^(^(9如(^_/_/^/*5(^%_〇等的任意一种或多种;芽孢杆菌为:地衣芽孢 杆菌、枯草芽抱杆菌的任意一种或两种D
【文档编号】A23K10/14GK105918614SQ201610261795
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月25日
【发明人】陈华友, 吴邦国, 杨胜利, 谢永明
【申请人】陈华友
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