一种蛹虫草发酵饮料及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种蛹虫草发酵饮料及其制备方法，所述方法将枸杞混合物粉碎，加去离子水，煮沸浸提，过滤，收集滤液，获得多糖提取液；以多糖提取液为溶剂，添加葡萄糖、大豆分离蛋白、硫酸镁、磷酸氢二钾、维生素B1，pH 6?7，获得发酵培养基；将蛹虫草孢子的无菌水悬液接种至发酵培养基，在20?30℃发酵培养抽滤，收集滤液，加入赤藓糖醇，获得蛹虫草发酵饮料。本发明采取的工艺可一步发酵成型，培养基配方利于蛹虫草对各种营养成分的综合利用，可促进代谢产生风味物质及功效成分。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.16mg/mL以上，虫草酸含量为0.18mg/mL以上。
【专利说明】
一种蛹虫草发酵饮料及其制备方法
(一)
技术领域
[0001]本发明涉及一种发酵饮料，特别涉及一种蛹虫草发酵饮料及其制备方法。
(二)
【背景技术】
[0002]蛹虫草为子囊菌亚门，麦角菌目，麦角菌科、虫草属的模式种。学名为Cordycepsmi Ii tar is，又名北冬虫夏草、北蛹虫草、虫草等。中医认为，虫草入肺肾二经，既能补肺阴，又能补肾阳，主治肾虚，阳痿遗精，腰膝酸痛，病后虚弱，久咳虚弱，劳咳痰血，自汗盗汗等，是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的中药。
[0003]现代科学论证蛹虫草不仅具有特殊的营养价值，而且有明显的药用价值。其中尤以虫草酸、虫草素、虫草多糖、SOD等。
[0004]虫草多糖和SOD等多种生物活性物质的药用价值最为显著。虫草酸(甘露醇)可以显著地降低颅压，促进机体新陈代谢，因而使脑溢血和脑血栓病症得到缓解。虫草素是一种具有抗菌活性的核苷类物质，对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用。在DNA转录mRNA过程中使mRNA成熟障碍，抑制癌细胞的生长。并有降血糖的作用。虫草多糖是一种高度分枝的半乳甘露聚糖，它能促进淋巴细胞转化，提高血清IgG的抗体含量和机体的免疫功能，增强机体自身抗癌抑癌的能力。SOD(超氧化物歧化酶)可以消除机体内超氧自由基，具有抗衰老、抗癌抑癌的作用。
[0005]目前，报道的蛹虫草发酵型饮料，都是以普通微生物培养基进行发酵。如用黄豆粉、葡萄糖、蛋白胨、酵母膏等进行发酵，然后在发酵液中添加一些提取物进行复配，工艺环节较多，不利实际生产，而且口感、风味、外观等均存在一些不足。
[0006]因此，现有技术还有待于进一步发展。利用蛹虫草为菌种，对枸杞、红枣、茯苓提取液进行发酵，制备液体饮料，液体清澈、色泽橙黄、清香怡人、口感绝佳，是一款营养价值和保健功效倶佳的新型饮料，该工艺简单易行、安全环保，不产生“三废”。本发明采取的工艺，一步发酵成型，培养基配方利于蛹虫草对各种营养成分的综合利用，可促进代谢产生风味物质及功效成分。
(三)
【发明内容】
[0007]本发明目的是提供一种蛹虫草液体发酵饮料的制备方法，旨在弥补现有蛹虫草发酵饮料工艺存在的缺陷，进一步推动其产业化进程。
[0008]本发明采用的技术方案是:
[0009]本发明提供一种蛹虫草发酵饮料，所述发酵饮料按如下方法制备:(1)将枸杞混合物，粉碎(优选粉碎至20-40目)，加去离子水，煮沸浸提，浸提结束后，过滤，收集滤液，获得多糖提取液;所述枸杞混合物由如下质量配比原料组成:枸杞10-30份、去核红枣10-30份、茯苓1-5份；(2)以步骤(I)多糖提取液为溶剂，添加5-20g/L葡萄糖、l_5g/L大豆分离蛋白、0.l_2g/L硫酸镁、0.5-2g/L磷酸氢二钾、2-5mg/L维生素B1，pH 6-7，获得发酵培养基，115 °C高压灭菌30min;(3)将蛹虫草孢子的无菌水悬液接种至发酵培养基，在20-50°C发酵培养8-48h(优选20-45°C培养24-48h);接着升温至70-80°C (保持20-40min)使菌丝体自溶、活酶失效;然后抽滤，收集滤液，加入赤藓糖醇作为甜味剂，获得蛹虫草发酵饮料。
[0010]进一步，步骤(I)所述去离子水的体积用量以枸杞混合物总质量计为5?8ml/g。
[0011]进一步，步骤(I)所述枸杞混合物由如下质量配比的原料组成:枸杞15-25份、去核红枣15-25份、茯苓1.5-4.5份。
[0012]进一步，步骤(I)所述浸提条件为煮沸浸提20-60min。
[0013]进一步，步骤(2)所述溶剂是用去离子水将步骤(I)多糖提取液的多糖含量调整为5-20g/Lo
[0014]进一步，步骤(2)发酵培养基终浓度组成为:10-15g/L葡萄糖、2-4g/L大豆分离蛋白、0.3-1.5g/L硫酸镁、1-1.5g/L磷酸氢二钾、2-4mg//L维生素B1，溶剂为多糖提取液，pH
6.1-6.9ο
[0015]进一步，步骤(3)所述蛹虫草孢子的无菌水悬液OD6qq为1.0-1.6。
[0016]进一步，步骤(3)所述蛹虫草孢子的无菌水悬液接种量以发酵培养基总体积计，按体积浓度2 %~6%进行接种。
[0017]进一步，步骤(3)所述赤藓糖醇加入量以滤液体积计为5-15g/L。
[0018]进一步，步骤(3)所述蛹虫草孢子无菌水悬液制备方法为:将蛹虫草菌种接种至TOA斜面培养基培养，培养条件为20°C，避光培养5d，用无菌水洗下孢子，并用无菌水调整其OD60Q 值为 1.0-1.6。
[0019]与现有技术相比，本发明有益效果主要体现在:
[0020]本发明提供了一种利用蛹虫草为菌种进行液体发酵饮料的制备方法，对枸杞、红枣、茯苓提取液进行发酵，液体清澈、色泽橙黄、清香怡人、口感绝佳，是一款营养价值和保健功效倶佳的新型饮料，该工艺简单易行、安全环保，不产生“三废”。本发明采取的工艺可一步发酵成型，培养基配方利于蛹虫草对各种营养成分的综合利用，可促进代谢产生风味物质及功效成分。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.16mg/mL以上，虫草酸含量为
0.18mg/mL 以上。
(四)
【具体实施方式】
[0021]下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此:
[0022]本发明实施例所用蛹虫草孢子制备方法为:蛹虫草菌种(购自贵州益生原生物技术有限公司)采用PDA斜面培养基培养，培养条件为20 V，避光培养5d，用无菌水洗下孢子，并用无菌水调整其OD6qq值。
[0023]实施例1:
[0024](I)将30g枸杞、1g去核红枣、5g茯苓混合，并一起粉碎至20目；以枸杞、红枣和茯苓总质量计，加5ml/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为20min;提取后，用4层纱布过滤，收集滤液;斐林试剂滴定法测定多糖含量，并用去离子水调整为5g/L，获得多糖提取液 I OOOmL;
[0025](2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入15g//L的葡萄糖、4g/L的大豆分离蛋白、1.58/1的硫酸镁、1.58/1的磷酸氢二钾、411^/1的维生素81，？!1 6.1，115°C高压灭菌30min，获得发酵培养基100mL;
[0026](3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度6%的接种量，将60mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD6qq为1.0)接种至发酵培养基，在20°C发酵培养24h;接着升温至80°C，保持20min，使菌丝体自溶、活酶失效;然后抽滤，收集滤液100mU以滤液体积计加入终浓度为5g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，获得蛹虫草发酵饮料1000mL。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.164mg/mL，虫草酸含量为0.186mg/mL。
[0027]实施例2:
[0028](I)将15g枸紀、15g去核红率、4g茯苳混合，并一起粉碎至30目；以枸紀、去核红率和茯苓总质量计，加6ml/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为40min;提取后，用4层纱布过滤，收集滤液;斐林试剂滴定法测定滤液多糖含量，并用去离子水调整为10g/L，获得多糖提取液100mL;
[0029](2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入终浓度12g/L的葡萄糖、3g/L的大豆分离蛋白、lg/L的硫酸镁、lg/l的磷酸氢二钾、3mg/L的维生素B1，pH 6.5，获得发酵培养基 100mL; 115°C 高压灭菌 30min;
[0030](3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度6%的接种量，将60mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD6qq为1.5)接种至发酵培养基，在45 0C发酵培养8h，使菌丝自溶;接着升温至75 V，保持30min，使菌丝体自溶、活酶失效;然后固液分离，收集滤液100mL，以滤液体积计添加入终浓度为10g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，即得蛹虫草发酵饮料100mLt3SHPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.171mg/mL，虫草酸含量为0.197mg/mL。
[0031]实施例3:
[0032](I)将1g枸紀、30g去核红率、Ig茯苳混合，并一起粉碎至40目；以枸紀、去核红率和茯苓总质量计，加8ml/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为60min;提取后，用4层纱布过滤，收集滤液;斐林试剂滴定法测定滤液多糖含量，并用去离子水调整为20g/L，获得多糖提取液100mL;
[0033](2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入终浓度10g/L的葡萄糖、2g/L的大豆分离蛋白、0.3g/L的硫酸镁、lg/L的磷酸氢二钾、2mg/L的维生素B1，pH 6.9，获得发酵培养基lOOOmL，115°C高压灭菌30min;
[0034](3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度2%的接种量，将20mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD6qq为1.6)接种至发酵培养基，在30°C发酵培养48h，使菌丝自溶;接着升温至700C，保持40min，使菌丝体自溶、活酶失效;然后固液分离，收集滤液100mL，以滤液体积计添加入终浓度为15g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，即得蛹虫草发酵饮料。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.152mg/mL，虫草酸含量为0.182mg/mL。
[0035]对比例1:
[0036](I)将40g枸紀、50g去核红率、6g茯苳混合，并一起粉碎至10目；以枸紀、去核红率和茯苓总质量计，加10mL/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为70min;提取后，用4层纱布过滤，收集滤液;斐林试剂滴定法测定多糖含量，并用去离子水调整为25g/L，获得多糖提取液I OOOmL;
[0037](2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入25g//L的葡萄糖、6g//L的大豆分离蛋白、2.5g//L的硫酸镁、2.5g//L的磷酸氢二钾、6mg/L的维生素m，pH 5.5，115°C高压灭菌30min，获得发酵培养基100mL;
[0038](3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度1%的接种量，将1mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD6qq为1.8)接种至发酵培养基，在18°C发酵培养60h;接着升温至85°C，保持1min，使菌丝体自溶、活酶失效;然后抽滤，收集滤液100mU以滤液体积计加入终浓度为4g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，获得蛹虫草发酵饮料1000mL。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.085mg/mL，虫草酸含量为0.132mg/mL。
[0039]对比例2:
[°04°] (I)将88枸紀、8g去核红率、0.5g茯苳混合，并一起粉碎至60目；以枸紀、去核红率和茯苓总质量计，加4ml/g的去离子水，采用煮沸法进行提取，时间为1min;提取后，用4层纱布过滤，收集滤液;斐林试剂滴定法测定多糖含量，并用去离子水调整为25g/L，获得多糖提取液I OOOmL;
[0041 ] (2)以多糖提取液体积计，向多糖提取液中加入4g/L的葡萄糖、0.8g/L的大豆分离蛋白、0.08g//L的硫酸镁、0.4g/L的磷酸氢二钾、lmg/L的维生素B1，pH 7.5，115°C高压灭菌301^11，获得发酵培养基10001^;
[0042](3)以发酵培养基总体积计，按体积浓度7%的接种量，将70mL蛹虫草孢子的无菌水悬液(OD6qq为0.8)接种至发酵培养基，在32°C发酵培养18h;接着升温至65°C，保持1min，使菌丝体自溶、活酶失效;然后抽滤，收集滤液100mL，以滤液体积计加入终浓度为18g/L的赤藓糖醇，作为甜味剂调整口感，获得蛹虫草发酵饮料1000mL。经HPLC检测，饮料中虫草素含量可达0.103mg/mL，虫草酸含量为0.118mg/mL。利用蛹虫草为菌种发酵制备液体饮料方法，饮料液体清澈、色泽橙黄、清香怡人、口感绝佳，是一款营养价值和保健功效倶佳的新型饮料，该工艺简单易行、安全环保，不产生“三废”。本发明采取的工艺可一步发酵成型，培养基配方利于蛹虫草对各种营养成分的综合利用，可促进代谢产生风味物质及功效成分。
[0043]应当理解的是，本发明的应用不限于上述实例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应该属于本发明所附权利要求的保护范围。
【主权项】
1.一种蛹虫草发酵饮料，其特征在于所述发酵饮料按如下方法制备:(I)将枸杞混合物粉碎，加去离子水，煮沸浸提，浸提结束后，过滤，收集滤液，获得多糖提取液;所述枸杞混合物由如下质量配比原料组成:枸杞10-30份、去核红枣10-30份、茯苓1-5份；(2)以步骤(I)多糖提取液为溶剂，添加5-20g/L葡萄糖、l-5g/L大豆分离蛋白、0.1-2g/L硫酸镁、0.5-2g/L磷酸氢二钾、2-51^凡维生素81，？!1 6-7，获得发酵培养基；(3)将蛹虫草孢子的无菌水悬液接种至发酵培养基，在20-500C发酵培养8-48h ；接着升温至70-80 V，保持20_40min，使菌丝体自溶、活酶失效;然后抽滤，收集滤液，加入赤藓糖醇作为甜味剂，获得蛹虫草发酵饮料。2.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(I)所述去离子水的体积用量以枸f己混合物质量计为5-8ml/g。3.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(I)所述枸杞混合物由如下质量配比的原料组成:枸杞15-25份、去核红枣15-25份、茯苓1.5-4.5份。4.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(I)所述浸提条件为煮沸浸提20_60mino5.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(2)所述溶剂是用去离子水将步骤(I)多糖提取液的多糖含量调整为5_20g/L。6.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(2)发酵培养基终浓度组成为:10-15g/L葡萄糖、2-4g/L大豆分离蛋白、0.3-1.5g/L硫酸镁、1_1.5g/L磷酸氢二钾、2_4mg/L维生素B1，溶剂为多糖含量5-20g/L的多糖提取液，pH 6.1-6.9。7.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(3)所述蛹虫草孢子的无菌水悬液OD6QQ为 1.0-1.6。8.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(3)所述蛹虫草孢子的无菌水悬液接种量以发酵培养基总体积计，按体积浓度2 %~6%进行接种。9.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(3)所述赤藓糖醇加入量以滤液体积计为5_15g/L。10.如权利要求1所述蛹虫草发酵饮料，其特征在于步骤(3)所述蛹虫草孢子无菌水悬液制备方法为:将蛹虫草菌种接种至PDA斜面培养基培养，培养条件为20°C，避光培养5d，用无菌水洗下孢子，并用无菌水调整其OD6QQ值为1.0-1.6。
【文档编号】A23L33/185GK106036281SQ201610422433
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月15日
【发明人】杨善岩, 吴瑶瑶, 夏亚娟
【申请人】杭州彧弋科技有限公司